Cây quýt Đƣờng không hột , thực hiện trên nền thí nghiệm “Sự sinh trƣởng, đặc tính hình thái thực và sự ổn định đặc tính không hột quýt Đƣờng không hô ̣t ở giai đoạn cây 4 năm tuổi ta ̣i khu II, Đại học Cần Thơ, thành phố Cần Thơ”.
Hóa chất và du ̣ng cu ̣ thí nghiê ̣m: - Kính hiển vi
- GA3: sử dụng sản phẩm ProGibb Plant Growth Regulator Label/MSDS đƣợc sản xuất bởi công ty Valent (dạng viên sủi, trọng lƣợng 5 g; có chứa 1 g a.i).
- Acetocarmine 0,5 % không chứa sắt:
Phương pháp điều chế Acetocarmine 0,5% không chứ sắt: Đun sôi 100 ml dung di ̣ch 45% acetic acid (gồm 45 ml acetic acid đâ ̣m đă ̣c và 55 ml nƣớc cất). Thêm 0,5 g Carmine (C22H20O13) và tiếp tục vừa đun vừa khuấy đều khoảng 30-60 phút dƣới ngo ̣n lƣ̉a đèn cồn cho đến khi Carmine tan đều . Khi dung di ̣ch đã tan đều ta để dung di ̣ch nguô ̣i . Lọc sạch dung dịch bằng phểu thủy tinh và giấy lọc . Tồn trƣ̃ trong chai thủy tinh màu tối và đâ ̣y nắp cẩn thâ ̣n (Nguyễn Lộc Hiền, 2010).
2.2 PHƢƠNG PHÁP 2.2.1 Bố trí thí nghiê ̣m
Cánh bố trí thí nghi ệm: Thí nghiệm đƣợc bố trí theo thể thức khối hoàn toàn ngẫu nhiên với 4 nghiệm thức và 6 lần lă ̣p lại, mỗi lần lă ̣p lại tƣơng ứng với 1 cây. Đƣợc bố trí cụ thể nhƣ sau:
- Nghiệm thức 1: Phun nƣớc (đ/c) - Nghiệm thức 2: Phun GA3-5 ppm - Nghiệm thức 3: Phun GA3-10 ppm - Nghiệm thức 4: Phun GA3-20 ppm
19
2.2.2 Phƣơng pháp thực hiện
- Chọn cành: Chọn các cành tƣơng đối đồng đều; đƣờng kính cành khoảng 3 cm; chọn các cành phân bố trên đỉnh của tán cây (không bị che rợp); các nghiệm thức đƣợc bố trí theo nguyên tắc ngẫu nhiên.
- Cách pha hóa chất: hòa tan viên ProGibb 5 g (dạng viên sủi; có chứa 1 g a.i) vào 1000 ml nƣớc để đƣợc dung dịnh gốc 1.000 ppm. Từ dung dịch gốc 1.000 ppm, tiến hành pha loãng theo đúng nồng độ của từng nghiệm thức bố trí.
- Cách phun: Phun trực tiếp lên cành đã chọn (nghiệm thƣ́c) tƣơng ứng đã bố trí, phun theo hƣớng gió và đƣợc che chắn với các cành xung quanh, thời điểm phun là khi vừa xuất hiện nụ hoa.
- Thời gian phun: Phun lúc chiều mát.
2.2.3 Kỹ thuật canh tác
Kỹ thuật canh tác chính theo qui trình, chăm sóc và thu hoạch cây cam quýt ở các tỉnh phía Nam của Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2001), đƣợc nêu cụ thể trong tài liệu tiêu chuẩn ngành “Quy trình trồng, chăm sóc và thu hoạch cây có múi ở các tỉnh phía Nam” (10 TCN 481-2001).
2.2.4 Các chỉ tiêu theo dõi
Nhiê ̣t đô ̣ và ẩm đô ̣: Ghi nhận nhiê ̣t đô ̣ và ẩm đô ̣ mỗi ngày trong suốt thời gian 20 ngày, vào thời gian khoảng từ 13-14 giờ trong ngày . Vị trí đo trong tán cây tại một điểm cố định đa ̣i diê ̣n nhất trong vƣờn với khoảng cách đo trên mă ̣t đất tại hai vị trí 1,5 m.
Thời gian phá t triển của hoa:
- Thờ i gian hoa nở : Quan sát và ghi nhâ ̣n số ngày tƣ̀ khi phun đ ến khi hoa nở.
- Thời gian hoa nở đến khi hoa tàn: Quan sát và ghi nhâ ̣n số ngày t ừ khi hoa nở đến khi nƣớm không còn khả năng nhận phấn (nƣớ m nhu ̣y có màu nâu).
Hình thái hoa : Tiến hành thu mỗi nghiệm thức 5 hoa mới nở từ những hoa đã đƣợc đánh dấu trƣớc, dùng để lấy các chỉ tiêu về đặc tính hình thái hoa.
Các chỉ tiêu hình thái gồm có:
- Số cánh
- Dài cánh hoa (mm) - Rộng cánh hoa (mm)
- Số chỉ nhi ̣
- Dài chỉ nhị (mm) - Dài bao phấn (mm) - Đƣờng kính noãn (mm)
20 - chiều cao noãn (mm)
- Dài vòi nhụy (mm) - Dày nƣớm (mm)
- Đƣờng kính nƣớm (mm)
Sƣ̣ hƣ̃u thu ̣ của ha ̣t phấn:
Trên mỗi hoa tách lấy 3 bao phấn (trên 5 hoa đã thu khảo sát hình thái hoa). Cho 3 bao phấn lên lame , nghiền nát bao phấn và nhỏ vƣ̀a đủ dung di ̣ ch thuốc nhuộm Acetocarmine lên mẫu vƣ̀a nghiền, trô ̣n đều, vớt bao phấn và đâ ̣y lamell la ̣i, để yên 5 phút, sau đó đem lame lên kính hiển vi và quan sát ở vâ ̣t kính 10X. Mỗi nghiê ̣m thƣ́c lâ ̣p la ̣i 5 lần.
Đếm số hạt phấn hƣ̃u thu ̣ (ăn hoàn toàn màu đỏ đâ ̣m ) của Acetocarmine và hạt phấn bất thụ (không ăn màu hoă ̣c ăn màu nha ̣t hoă ̣c ăn màu mô ̣t phần ) ngẫu nhiên trên 5 vùng khác nhau và tổng số hạt phấn trên 200 hạt phấn. Tính tỷ lệ phần trăm số hạt phấn ăn màu trên tổng số ha ̣t phấn đếm đƣợc.
Số lƣợng và kích thƣớc tiểu noãn: Giải phẫu bầu noãn cắt ngang củ a tƣ̀ng hoa thành nhƣ̃ng lát cắt mỏng (khoảng 0,2 mm), rƣ̉a bằng nƣớc cất 2-3 lần (trên 5 hoa đã thu khảo sát hình thái hoa). Để tất cả các lát cắt của bầu noãn lên lame và nhỏ một giọt nƣớc cất đậy lamell lại . Quan sát bằng kính hiển vi tất cả các lát cắt của mô ̣t bầu noãn trên lame , chọn lát cắt có tiểu noãn nhiều nhất, có kích thƣớc tiểu n oãn to nhất và đại diện nhất (lát cắt có đƣờng kính lớn nhất để ghi nhận số liệu).
Các chỉ tiêu theo dõi
- Tổng số tiểu noãn: Ghi nhâ ̣n số tiểu noãn trên 1 lát cắt ngang.
- Kích thƣớc tiểu noãn lớn nhất (µm): Ghi nhận kích thƣớc lớn nhất trong tƣ̀ng nghiê ̣m thƣ́c.
Tỷ lệ đậu trái: Ở các nghiệm thức xử lý GA3 khác nhau , đánh dấu ngẫu nhiên 30 hoa. Ghi nhâ ̣n số trái đâ ̣u hằng tuần và quy ra phần trăm đâ ̣u trái.
Số hột trên trái:
- Đếm số hột chắc, hô ̣t lép và số mài của 5 trái ngẫu nhiên đã đƣợc đánh dấu trƣớc ở tƣ̀ng nghiê ̣m thƣ́c (trái 3 tháng sau khi xủa lý).
- Tổng số tiểu noãn trên trái = số hô ̣t chắc + số hô ̣t lép + số mài.
2.2.5 Xử lý số liệu, thống kê
Xử lý số liệu bằng Microsoft Excel. Phân tích phƣơng sai bằng phần mềm SPSS. So sánh sự khác biệt giữa các nghiệm thức bằng phƣơng pháp kiểm định LSD ở mức ý nghĩa 5%.
21
CHƢƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 ĐIỀU KIỆN MÔI TRƢỜNG TỰ NHIÊN TRONG THỜI GIAN THÍ NGHIỆM
Điều kiện nhiệt độ và ẩm độ cao nhất trong ngày đƣợc ghi nhận từ ngày xử lý GA3 trên quýt Đƣờng không hột đƣợc trình bày trong Hình 3.1, nhiệt độ cao nhất trong ngày dao động từ 26,5-34,7oC, trung bình là 30,6o
C. Về độ ẩm cũng biến động từ 46,0-89,5%, trung bình là 67,8%. Độ ẩm và nhiệt độ có sự biến động mạnh trong thời gian thí nghiệm, nguyên nhân có thể do thí nghiệm đƣợc bố trí ở mùa mƣa nên nhiệt độ và ẩm độ bị ảnh hƣởng bởi các ngày mƣa nắng xen kẻ.
Hình 3.1 Nhiệt độ và độ ẩm trong ngày (thời điểm 13-14h) của môi trƣờng thí nghiệm sau khi xử lý GA3
Theo Trần Văn Hâu (2009), nhiệt độ cao (>35oC) và sự khô hạn dễ gây rụng trái non. Với nhiệt độ trung bình là 30,6oC và ẩm độ trung bình là 67,8% thí nghiêm xử lý GA3 trên quýt Đƣờng không hột không bị ảnh hƣởng.
3.2 CÁC ĐẶC TÍNH CỦA HOA NỞ QUÝT ĐƢỜNG KHÔNG HỘT SAU KHI XƢ̉ LÝ GA3
3.2.1 Đặc tính cánh hoa
Kết quả ghi nhận, về đặc tính cánh hoa quýt Đƣờng không hột sau khi xử lý GA3 ở các nồng độ đƣợc trình bày ở Bảng 3.1 có sự biến động. Cụ thể: số cánh hoa biến động từ 4,97-5,00 cánh, chiều dài cánh hoa nằm trong khoảng từ 12,0-12,6 mm, chiều rộng cách hoa dao động từ 4,54-4,61 mm và tỷ số chiều dài trên chiều rộng cánh hoa biến động từ 2,66-2,76 mm. Tuy nhiên, sự khác biệt của các nghiệm thức ở tất cả các chỉ tiêu số cánh hoa, chiều rộng
22
cánh hoa, chiều dài cánh hoa và tỷ số chiều cao/chiều rộng cánh hoa không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Bảng 3.1 Các đặc tính cánh hoa Quýt đƣờng không hột đƣợc xử lý với GA3 ở các nồng độ khác nhau Nồng độ Số cánh Chiều dài cánh (mm) Chiều rộng cánh (mm) Tỷ số chiều dài/ chiều rộng Phun nƣớc (Đ/C) 5,00 12,6 4,55 2,76 GA3-5 ppm 4,97 12,4 4,55 2,71 GA3-10 ppm 4,97 12,5 4,61 2,71 GA3-20 ppm 5,00 12,0 4,54 2,66 F ns ns ns ns CV(%) 0,95 3,23 4,85 5,18
đ/c: đối chứng; ns: khác biệt không có ý nghĩa qua phân tích thống kê
Nhƣ vậy, sau khi xử lý hoa quýt Đƣờng không hột với GA3 ở các nồng độ 5, 10 và 20 ppm tại thời điểm vừa xuất hiện nụ không làm thay đổi các đặc tính về cánh hoa của quýt Đƣờng không hột.
3.2.2 Đặc tính bộ phận đực
Kết quả trình bày trong Bảng 3.2, sau khi xử lý GA3 trên hoa quýt Đƣờng không hột với các nồng độ khác nhau có sự biến động các đặc tính về bộ phận đực. Số chỉ nhị biến động trong khoảng 18,7-19,0 nhị, tuy nhiênsố chỉ nhị ở tất cả các nghiệm thức khác biệt không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Chiều dài chỉ nhị nằm trong khoảng 5,64-5,86 mm. Và sự khác biệt của các nghiệm thức về chiều dài chỉ nhị không có ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Chiều dài bao phấn của hoa quýt đƣờng không hột sau khi xử lý GA3 với các nồng độ khác nhau có sự dao động từ 1,14-1,49 mm. Tuy nhiên, khác biệt không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Bảng 3.2 Số chỉ nhị, chiều dài chỉ nhị (mm), chiều dài bao phấn (mm) của hoa Quýt đƣờng không hột đƣợc xử lý với GA3
Nồng độ Số chỉ nhị Dài chỉ nhị Dài bao phấn
Phun nƣớc (đ/c) 18,9 5,64 1,14 GA3-5 ppm 19,0 5,86 1,25 GA3-10 ppm 18,7 5,80 1,19 GA3-20 ppm 18,8 5,79 1,49 F ns ns ns CV(%) 5,07 5,05 27,79
đ/c: đối chứng; ns: khác biệt không có ý nghĩa qua phân tích thống kê
Tóm lại, phun GA3 tại thời điểm vừa xuất hiện nụ với các nồng độ 5, 10 và 20 ppm. Không thay đổi các đặc tính bộ phận đực của hoa quýt Đƣờng không hột.
3.2.3 Đặc tính bộ phận cái
Kích thƣớc của bầu noãn hoa quýt Đƣờng không hột sau khi xử lý GA3 với các nồng độ khác nhau, kết quả đƣợc trình bày trong Bảng 3.3 cho thấy có
23
sự biến động. Cụ thể: chiều cao bầu noãn biến động từ 2,16-2,24 mm. Tuy nhiên, kết quả ở tất cả các nghiệm thức về chiều cao bầu noãn khác biệt không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Về đƣờng kính bầu noãn đƣợc ghi nhận dao động 2,05-2,16 mm. Sự khác biệt về đƣờng kính bầu noãn của hoa quýt Đƣờng không hột ở tất cả các nghiệm thức không có ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Tƣơng tự, kết quả ghi nhận về tỷ số chiều cao/đƣờng kính bầu noãn biến động khoảng từ 1,03-1,06. Và khác biệt không ý nghĩa qua phân tích thống kê ở tất cả các nghiệm thức.
Bảng 3.3 Kích thƣớc bầu noãn (mm) và tỷ lệ chiều cao/ đƣờng kính bầu noãn của hoa Quýt đƣờng không hột đƣợc xử lý với GA3 với các nồng độ khác nhau
Nồng độ Chiều cao Đƣờng kính Tỷ số chiều cao/đƣờng kính Phun nƣớc (đ/c) 2,16 2,05 1,06 GA3-5 ppm 2,21 2,12 1,04 GA3-10 ppm 2,20 2,10 1,04 GA3-20 ppm 2,24 2,16 1,03 F ns ns ns CV(%) 7,19 6,15 2,41
đ/c: đối chứng; ns: khác biệt không có ý nghĩa qua phân tích thống kê
Tóm lại, các đặc tính về kích thƣớc bầu noãn không thay đổi sau khi xử lý GA3 với các nồng độ 5, 10 và 20 ppm trên hoa quýt Đƣờng không hột khi vừa xuất hiện nụ.
Đặc tính về vòi nhụy của hoa quýt Đƣờng không hột sau khi xử lý với GA3 với các nồng độ khác nhau đƣợc mô tả trong Bảng 3.4, chiều dài vòi nhụy dao động trong khoảng 5,52-5,79 mm, và sự khác biệt ở các nghiệm thức không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Tƣơng tự, chiều dày nƣớm nhụy biến động trong khoảng từ 1,66-1,78 mm, đƣờng kính nƣớm nhụy biến động trong khoảng 1,76-1,87 mm và tỷ số chiều dày/đƣờng kính nƣớm nhụy cũng biến động từ 0,89-0,98. Kết quả của các đặc tính về nƣớm nhụy ở các nghiệm thức phun GA3 và phun nƣớc (đ/c) khác biệt không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
24
Bảng 3.4 Dài vòi nhụy (mm), kích thƣớc nƣớm nhụy (mm) và tỷ lệ chiều dày/ đƣờng kính nƣớm nhụy của hoa Quýt đƣờng không hột đƣợc xử lý với GA3 với các nồng độ khác nhau
Nồng độ Dài vòi nhụy
Nƣớm nhụy
Chiều dày Đƣờng kính Tỷ số chiều dày/ đƣờng kính Phun nƣớc (đ/c) 5,79 1,68 1,76 0,96 GA3-5 ppm 5,70 1,73 1,84 0,95 GA3-10 ppm 5,75 1,78 1,82 0,98 GA3-20 ppm 5,52 1,66 1,87 0,89 F ns ns ns ns CV(%) 6,88 9,18 6,78 8,71
đ/c: đối chứng; ns: khác biệt không có ý nghĩa qua phân tích thống kê
Từ kết quả về các đặc tính của vòi nhụy và nƣớm nhụy cho thấy rằng: việc phun GA3 trên hoa quýt Đƣờng không hột lúc vừa xuất hiện nụ với các nồng độ 5, 10 và 20 ppm không làm thay đổi đặc tính về bầu noãn cũng nhƣ vòi nhụy và nƣớm nhụy.
Tóm lại, hoa quýt Đƣờng không hột khi đƣợc xử lý GA3 với các nồng độ 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm lúc hoa vừa xuất hiện nụ không làm thay đổi các đặc tính hình thái.
3.3 THỜI GIAN PHÁT TRIỂN CỦA HOA QUÝT ĐƢỜNG
KHÔNG HỘT SAU KHI XỬ LÝ GA3
Thời gian từ khi xuất hiện nụ đến hoa nở và thời gian từ hoa nở đến tàn sau khi xử lý GA3 với các nồng đô khác nhau đƣợc trình bày trong Bảng 3.5 có sự biến động. Cụ thể: thời gian từ khi xuất hiện nụ đến nở của các nghiệm thức phun GA3 với các nồng độ 5, 10 và 20 ppm là 11,0 ngày và 10,8 ngày ở nghiệm thức phun nƣớc (đ/c). Thời gian từ khi xuất hiện đến nở của hoa quýt Đƣờng không hột ở tất cả các nghiệm thức khác biệt không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Tƣơng tự, thời gian từ khi hoa nở đến hoa tàn dao động từ 1,86-2 ngày. Cụ thể ở nghiệm thức phun nƣớc (đ/c) là 1,86 ngày, nghiệm thức phun 5 ppm là 1,99 ngày, ở nghiệm thức 10 ppm là 2 ngày và 1,98 ngày ở nghiệm thức phun 20 ppm. Sự khác biệt về thời gian từ khi hoa nở đến tàn ở tất cả các nghiệm thức không ý nghĩa qua phân tích thống kê.
25
Bảng 3.5 Thời gian từ khi xuất hiện nụ hoa đến hoa nở và từ khi hoa nở đến hoa tàn của hoa quýt Đƣờng sau khi xử lý GA3 với các nồng độ khác nhau
Nồng độ Thời gian từ khi xuất hiện nụ hoa đến nở
Thời gian từ khi hoa nở đến hoa tàn Phun nƣớc (đ/c) 10,8 1,86 GA3-5 ppm 11,0 1,99 GA3-10 ppm 11,0 2,00 GA3-20 ppm 11,0 1,98 F ns ns CV(%) 3,52 10,5
đ/c: đối chứng; ns: khác biệt không có ý nghĩa qua phân tích thống kê
Tóm lại, không có sự thay đổi về thời gian từ khi xuất hiện nụ hoa đến nở và thời gian từ khi nở đến tàn khi xử lý GA3 với các nồng độ 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm trên hoa quýt Đƣờng không hột.
3.4 SỰ HỮU THỤ HẠT PHẤN CỦA QUÝT ĐƢỜNG KHÔNG HỘT SAU KHI XỬ LÝ GA3
Tỷ lệ (%) hạt phất hữu thụ ở Hình 3.2 (hạt phấn ăn màu Acetocarmine, Hình 3.3) của quýt Đƣờng không hột sau khi xử lý GA3 có sự biến động trong khoảng từ 90,4-92,9%. Cụ thể là, tỷ lệ hạt phấn hữu thụ cao nhất ở nghiệm thức phun nƣớc (đ/c) là 92,9% so với nghiệm thức có phun GA3 với các nồng độ 5, 10 và 20 ppm lần lƣợt là 90,4; 91,8 và 92,1%. Tuy nhiên, sự khác biệt về tỷ lệ hạt phấn hữu thụ của tất cả các nghiệm thức không có ý nghĩa qua phân tích thống kê.
Hình 3.2 Tỷ lệ (%) hạt phấn hữu thụ của hoa quýt Đƣờng không hột sau khi xử lý GA3, với các nồng độ khác nhau
26
Hình 3.3 Sƣ̣ ăn màu Acetocarmine của ha ̣t phấn quýt Đƣờng không hô ̣t sau khi xƣ̉ lý GA3 với các nồng độ khác nhau
v: Hạt phấn ăn màu đỏ đậm Acetocarmine