liệu đến hàm lượng các hoạt chất sinh học hiện diện trong cây thuốc dòi
Mục đích
Xác định hàm lượng các hoạt chất sinh học trong các bộ phận của cây và đặc tính
nguyên liệu.
Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên 2 nhân tố và 3 lần lặp lại Nhân tố A: Bộ phận cây
A1: Lá già A2: Lá non A3: Thân
Nhân tố B: Đặc tính nguyên liệu
B1: Tươi B2: Khô
Tổng số đơn vị thí nghiệm: 332 = 18 đơn vị thí nghiệm.
Cách tiến hành
Thuốc dòi được rửa sạch, loại bỏ lá vàng sau đó chọn 1 tôm 5 lá được phân loại là lá non, các lá còn lại trên thân là lá già. Tiến hành khảo sát bộ phận cây và đặc tính nguyên liệu như bố trí thí nghiệm.
Lá non: màu xanh nhạt có pha màu ánh tím, chiều dài lá khoảng 4÷6,5cm, cấu trúc mềm và mỏng.
Lá già: có màu xanh đậm và ít ánh tím hơn, chiều dài lá khoảng 7÷8cm, cấu trúc cứng và dày hơn lá non.
Nguyên liệu
Lọc Rửa
Dịch trích Trích ly
SVTH: Huỳnh Thị Ngọc Nhẫn 23 Đối với từng hoạt chất khảo sát sử dụng loại dung môi trích ly khác nhau để được hiệu quả trích ly tối ưu.
- Polyphenol: Cân 1,5g nguyên liệu cắt nhỏ, cho vào ống tube 10mL, thêm 5mL dung dịch methanol 70% và ổn nhiệt ở 70oC trong 30 phút. Lắc đều trên máy vortex và tiếp tục trích ly trong vòng 10 phút sau đó tiến hành lọc. Tiếp tục lấy phần bã lọc trích lần 2 rồi gộp dịch chiết lại và đo thể tích rồi tiến hành phân tích.
- Tannin: Cân 3g nguyên liệu, cắt nhỏ cho vào bình tam giác 100mL. Bổ sung 30mL dung môi (ethanol/nước = 1:1) tiến hành ổn định nhiệt ở 80oC trong bể điều nhiệt 60 phút sau đó mang đi lọc. Phần bã tiếp tục đem trích lần 2 với 30mL dung môi, tiến hành lọc và gộp dịch chiết của 2 lần. Xác định thể tích và tiến hành phân tích.
- Anthocyanin: Cân 5g nguyên liệu, cắt nhỏ cho vào bình tam giác 100mL. Ngâm trong 50mL dung môi (etanol/nước = 1:1 có 1% HCl), thời gian 60 phút, lọc, xác định thể tích, sau đó đưa đi phân tích.
Chỉ tiêu theo dõi
- Hàm lượng polyphenol tổng (% chất khô). - Hàm lượng anthocyanin (% chất khô). - Hàm lượng tannin (% chất khô).