Chuẩn bị bột dược liệu
- Xác định độ ẩm của dược liệu:
Làm nhỏ dược liệu để xác định độ ẩm. Bật máy đo độ ẩm, điều chỉnh nhiệt độ 110˚C. Đổ khoảng 1g dược liệu vào đĩa cân, trải đều dược liệu khắp đĩa, đậy nắp đĩa cân và chờ máy tự động hiện kết quả trên màn hình. Tiến hành đo 3 mẫu lấy kết quả trung bình.
- Độ ẩm của dược liệu: 9,21%. Phương pháp và dung môi chiết
- Chiết theo phương pháp ngâm lạnh, 24h rút dịch chiết một lần. - Dung môi chiết: Ethanol 70˚.
Dụng cụ chiết
Bình gạn 500ml có khóa kín, rửa sạch, sấy khô. Chiết xuất cao lỏng toàn phần
Lắp bình gạn lên giá, lót 1 lớp bông mỏng ở đáy bình.
Cân chính xác khoảng 100,0 gam bột dược liệu khô vào cốc có mỏ, làm ẩm bằng dung môi, ủ trong 30 phút.
Cho bột dược liệu đã làm ẩm vào bình gạn, đổ dung môi ngập, mở khóa, rút lấy 15ml dịch chiết, sau đó đổ trở lại bình gạn, thêm dung môi ngập dươc liệu 3cm, đậy nút kín, ngâm lạnh.
Sau 24h, rút dịch chiết thu được dịch chiết 1 lần. Chiết nhiều lần đến khi dịch chiết không còn màu, gộp dịch chiết lại, cất thu hồi dung môi thu được cao lỏng cồn, thêm nước cất thu được cao lỏng 1:1, đun nóng đến khi tan hết, để tủ lạnh 24h, lọc bỏ tủa, ly tâm để được dịch trong. Dùng dịch này để chiết các phân đoạn.
Chiết các phân đoạn
Chiết lần lượt với các dung môi n-hexan, chloroform, ethyl acetat có độ phân cực tăng dần.
Chiết với n-hexan:
Cho dịch chiết trên vào bình gạn, thêm n-hexan với lượng xấp xỉ 2/3 dịch chiết, lắc kỹ, để phân lớp gạn lấy lớp n-hexan, thêm tiếp n-hexan, chiết nhiều lần đến khi lớp n-hexan không còn màu, gộp dich chiết n-hexan, thu hồi dung môi đến khối
lượng không đổi, thu được cắn, sấy khô cắn ở 60˚C, cân cắn, tính hàm lượng so với dược liệu khô.
Phần dịch chiết còn lại dùng để chiết tiếp các phân đoạn sau.
Chiết phân đoạn chloroform và ethyl acetat tiến hành tương tự như chiết phân đoạn n-hexan, thu được các cắn tương ứng.
Các cắn được ký hiệu là : - H: Cắn chiết từ n-hexan - C: Cắn chiết từ chloroform - E: Cắn chiết từ ethyl acetat Quá trình chiết được tóm tắt ở hình 3.4.
Quá trình chiết được lặp lại 3 lần, lấy kết quả trung bình.
Hàm lượng chất trong các phân đoạn được tính theo công thức sau:
F= a.100/(m.(100-x)) .100% Trong đó: a: Khối lượng cắn (g)
m: Khối lượng dược liệu ban đầu (g) x: Độ ẩm của dược liệu(%)
F: Hàm lượng chất (%)
Hiệu suất cắn 3 phân đoạn so với bột lá cây hồng xiêm được trình bày ở bảng 3.2. Bảng 3.2. Hàm lượng cắn 3 phân đoạn chiết xuất từ lá cây hồng xiêm.
STT Phân đoạn m(g) x(%) mcắn(g) Hàm lượng(%)
1 n-Hexan 1,0546 1,16
2 Chloroform 100,1054 9,21 2,4937 2,75
Hình 3.4. Sơ đồ chiết xuất cắn các phân đoạn từ lá cây hồng xiêm.
Dược liệu
Ethanol 70˚, Lọc Dịch chiết ethanol 70˚
Cao lỏng nước
Dịch chiết n-Hexan Dịch chiết nước
n-Hexan thu hồi
Cloroform thu hồi
Dịch chiết nước Dịch chiết cloroform
Cloroform
Dịch chiết nước Dịch chiết ethyl acetat
Ethyl acetat
Cắn C
Nước cất 60˚C Ethanol thu hồi
Ethyl acetat thu hồi
Cắn E
Dịch chiết nước
n-Hexan