Pha dung dịch meloxicam chuẩn 100 ppm
Cân chính xác 0,05 g meloxicam cho vào becher 50 mL, thêm 30 mL dung dịch NaOH 1 N. Dùng đũa thủy tinh khuấy nhẹ. Sau đó chuyển toàn bộ
dung dịch vào bình định mức 500 mL. Định mức tới vạch bằng dung dịch NaOH 1 N, được dung dịch meloxicam chuẩn 100 ppm. Dung dịch này được bảo quản trong tối ở 4°C.
Pha dung dịch NaOH 1 N
Cân chính xác 20 g NaOH khan cho vào becher 100 mL, thêm 40 mL
nước cất, dùng đũa thủy tinh khuấy nhẹ. Sau đó chuyển toàn bộ dung dịch vào bình định mức 500 mL. Định mức tới vạch bằng nước cất.
3.2.3.1 Xác định bước sóng cực đại
Dùng pipet hút chính xác 15 mL dung dịch meloxicam chuẩn 100 ppm cho vào bình định mức 50 mL. Định mức tới vạch với nước cất, ta thu được dung dịch meloxicam có nồng độ 30 ppm.
STT Tên thí nghiệm Mục đích
1 Khảo sát λmax Tìm λmax
2 Lập đường chuẩn Tìm khoảng tuyến tính
3 Khảo sát giới hạn phát hiện, giới hạn đo
Tìm giới hạn phát hiện, giới hạn đo
4 Định lượng mẫu Xác định hàm lượng meloxicam
5 Khảo sát độ đúng Tìm độ đúng của phương pháp
Phạm Thị Phương Thảo Chương 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
18
Tiến hành quét phổ dung dịch đã pha trong vùng từ 250-450 nm với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N, xác định bước sóng hấp thụ cực đại của
meloxicam (λmax).
Quét phổ các dung dịch meloxicam với các nồng độ khác nhau
Tiến hành pha dãy chuẩn meloxicam có nồng độ như bảng sau: Bảng 3.3: Dãy nồng độ meloxicam Bình Dung dịch meloxicam 100 ppm (mL) Nước cất C (ppm) 1 2,5 5 2 5 10 3 7,5 15 4 10 20 5 12,5 25 6 15 Định mức tới vạch (50 mL) 30 Tiến hành quét phổ dãy các dung dịch trên trong vùng từ 250-450 nm với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N, nhằm kiểm tra mức độ ổn định của phổ
hấp thụ dung dịch meloxicam ở các nồng độ khác nhau.
3.2.3.2 Khảo sát giới hạn phát hiện, giới hạn đo
Tiến hành pha dãy các dung dịch meloxicam như bảng sau: Bảng 3.4: Dãy nồng độ giới hạn phát hiện, giới hạn đo Bình Dung dịch meloxicam 100 ppm (mL) Nước cất (mL) C (ppm) 1 0,5 1 2 1,5 3 3 3 6 4 6 12 5 9 18 6 12 24 7 15 30 8 18 36 9 21 42 10 24 48 11 27 54 12 30 Định mức tới vạch (50 mL) 60 Tiến hành đo độ hấp thụ của dãy các dung dịch meloxicam ở λmax khảo sát với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N.
Phạm Thị Phương Thảo Chương 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.3.3 Thiết lập đường chuẩn
Tiến hành pha dãy chuẩn meloxicam có nồng độ như bảng sau: Bảng 3.5: Dãy đường chuẩn meloxicam
Bình Dung dịch meloxicam 100 ppm (mL) Nước cất Cmeloxicam (ppm) 1 2,5 5 2 5 10 3 7,5 15 4 10 20 5 12,5 25 6 15 Định mức tới vạch (50 mL) 30 Tiến hành đo độ hấp thụ của dãy các dung dịch meloxicam ở λmax khảo sát với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N.
3.2.3.4 Định luợng mẫu
Tiến hành định lượng với 4 mẫu thuốc meloxicam 7,5 mg. Bảng 3.6: Mẫu meloxicam 7,5 mg
Nhãn hiệu Công ty Hàm lượng
Mebilax 7,5 Dược Hậu Giang
Meloxicam 7,5 mg Centerpharco
Meloxicam Stada Stada
Eurocam Eurolife Healthcare
7,5 mg/viên
Pha dung dịch mẫu thử
Cân 20 viên meloxicam 7,5 mg, tính khối lượng trung bình cho mỗi viên, dùng cối sứ nghiền thành bột mịn. Cân lượng bột tương đương với khối lượng một viên cho vào becher 50 mL, thêm 20 mL dung dịch NaOH 1 N, dùng đũa
thủy tinh khuấy nhẹ. Sau đó, chuyển toàn bộ dung dịch sang bình định mức
100 mL, định mức tới vạch bằng dung dịch NaOH 1 N. Lắc đều, lọc qua giấy lọc khô, bỏ 20 mL dịch lọc đầu.
Hút chính xác 10 mL dịch lọc cho vào bình định mức 50 mL, định mức tới vạch bằng nước cất.
Tiến hành định lượng dung dịch mẫu thử bằng đường chuẩn đã thiết lập với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N. Thực hiện trên 3 mẫu, mỗi mẫu đo 3
Phạm Thị Phương Thảo Chương 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
20
3.2.3.5 Khảo sát độ đúng
Chuẩn bị mẫu thử và mẫu chuẩn
Mẫu thử: Cân 20 viên meloxicam 7,5 mg, tính khối lượng trung bình cho mỗi viên, dùng cối sứ nghiền thành bột mịn. Cân lượng bột tương đương
với khối lượng một viên, cho vào becher 50 ml thêm 20 ml NaOH 1 N, dùng
đũa thủy tinh khuấy nhẹ. Sau đó chuyển toàn bộ dung dịch sang bình định mức 100 mL, định mức tới vạch bằng dung dịch NaOH 1 N. Lắc đều, lọc qua giấy lọc khô, bỏ 20 mL dịch lọc đầu.
Mẫu chuẩn: Hút chính xác 37,5 mL dung dịch meloxicam 100 ppm cho vào bình định mức 50 mL, định mức tới vạch bằng dung dịch NaOH 1 N,
được dung dịch meloxicam chuẩn có nồng độ 75 ppm.
Pha mẫu thử thêm chuẩn
Pha dãy dung dịch gồm 1 mẫu thử không thêm chuẩn và các mẫu thử được thêm lượng chất chuẩn tương ứng 80%, 100%, 120% lượng chất cần xác
định đã có trong mẫu thử theo bảng sau: Bảng 3.7: Pha mẫu thử thêm chuẩn
Mẫu Dung dịch mẫu thử (mL) Dung dịch mẫu chuẩn (mL) Nước cất Thử 10 0 Thêm chuẩn 80% 10 8 Thêm chuẩn 100% 10 10 Thêm chuẩn 120% 10 12 Định mức đến vạch (100 mL)
Tiến hành đo độ hấp thụ của dãy các dung dịch meloxicam ở λmax khảo sát với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N. Mỗi mẫu được đo 3 lần, lấy kết quả trung bình.
3.2.3.6 Khảo sát độ lặp lại
Pha dung dịch mẫu thử
Cân 20 viên meloxicam 7,5 mg, tính khối lượng trung bình cho mỗi viên, dùng cối sứ nghiền thành bột mịn. Cân lượng bột tương đương với khối lượng một viên cho vào becher 50 mL, thêm 20 mL dung dịch NaOH 1 N, dùng đũa
thủy tinh khuấy nhẹ. Sau đó, chuyển toàn bộ dung dịch sang bình định mức
100 mL, định mức tới vạch bằng dung dịch NaOH 1 N. Lắc đều, lọc qua giấy lọc khô, bỏ 20 mL dịch lọc đầu.
Phạm Thị Phương Thảo Chương 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Hút chính xác 10 mL dịch lọc cho vào bình định mức 50 mL, định mức tới vạch bằng nước cất.
Tiến hành định lượng dung dịch mẫu thử bằng đường chuẩn đã thiết lập với mẫu trắng là dung dịch NaOH 1 N. Thực hiện trên 6 mẫu, mỗi mẫu đo 3
lần, lấy kết quả trung bình.