L ời cam đ oan
3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của của đề tài
2.3.1. Phương pháp lai hữu tín h lai trở lại giữa giống cho và nhận QTL/gen
Phương pháp lai hữu tính đối với các giống lúa cho và nhận QTL/gen tăng số hạt trên bông. Kết hợp với phương pháp lai trở lại để chọn lọc và làm thuần nhanh những dòng mang QTL/gen tăng số hạt trên bông và nền gen tối đa của giống nhận gen.
KD18 được chọn làm cây mẹ và KC25 được chọn làm cây bốđể lai tạo con lai F1, sử dụng phương pháp lai hữu tính (thụ phấn bằng tay). Hoa lúa chưa tung phấn của cây KD18 được khử đực bằng cách cắt bỏ 6 nhị trong mỗi hoa, sau đó lấy hạt phấn của cây KC25 thụ phấn cho cây KD18, sau 30 ngày thu hạt lai F1.
Các hạt lai F1được trồng đến khi được 20 ngày tuổi thì tiến hành tách chiết ADN, kiểm tra sự có mặt của gen tăng số hạt trên bông bằng chỉ thị phân tử. Chọn lọc các cá thể dị hợp tử mang QTL/gen tăng số hạt trên bông để lai trở lại với giống KD18 (làm bố) tạo quần thể BC1F1. Các cá thể BC1F1được trồng, tách chiết ADN, kiểm tra sự có mặt của gen tăng số hạt trên bông và chọn lọc nền gen của cây mẹ
bằng chỉ thị phân tử. Chọn những cá thể mang gen tăng số hạt trên bông và có nền di truyền lớn nhất của giống KD18 để lai trở lại với dòng nhận gen tạo BC2F1.
Tiếp tục các công việc như từ thế hệ BC1F1 đến thế hệ BC3F1 có thể lai thêm 1 thế hệ nữa hoặc cho tự thụđể chọn cá thể đồng hợp tử mang QTL/gen tăng số hạt trên bông, chọn được dòng mang QTL/gen tăng số hạt trên bông và mang phần trăm lớn nhất nền gen của cây mẹ.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 28
Hình 2.1: Các bước thí nghiệm trong chọn tạo giống lúa tăng số hạt trên bông bằng phương pháp sử dụng chỉ thị phân tử và lai trở lại
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 29