Khối lượng tươi và khô của chồi đỉnh in vitro
Bảng 3.4. Khối lượng tươi và khô của chồi đỉnh tái sinh in vitro.
Mẫu Mẫu 1 Mẫu 2 Mẫu 3 Trung bình
Khối lượng tươi (gam) 0,0112 0,0277 0,0115 0,0168
Khối lượng khô (gam) 0,0018 0,0066 0,0024 0,0036
Xác định nồng độ và hàm lượng diệp lục a (Ca), diệp lục b (Cb), diệp lục tổng số (Ca + b), carotenoit tổng số (Cx+c)
Qua việc tiến hành đo sự hấp thụ của dịch chiết ở sóng 644,8 nm và 661,6 nm, chúng tôi thu được kết quả của nồng độ diệp lục a (Ca), diệp lục b (Cb), và diệp lục tổng số (Ca + b), carotenoit tổng số (Cx+c) ở bảng sau.
Bảng 3.5. Nồng độ và hàm lượng diệp lục a (Ca), diệp lục b (Cb) và diệp lục tổng số (Ca + b), carotenoit tổng số (Cx+c). Mẫu Nồng độ Hàm lượng In vitro Ca 2,67 320,40 Cb 1,46 175,20 Ca + b - 496,50 Cx+c 0,66 - Tự nhiên Ca 13,35 1602,00 Cb 6,14 736,80 Ca + b - 2339,10 Cx+c 3,97 -
Qua bảng 3.5 ta thấy hàm lượng diệp lục a, diệp lục b và hàm lượng diệp lục tổng số Ca + b của cây in vitro đều thấp hơn và thấp hơn rất nhiều so với
33
cây tự nhiên. Có thể mẫu in vitro có điều kiện ánh sáng chưa thực sự phù hợp, làm cho hàm lượng diệp lục trong lá thấp hơn.
34
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận
Từ kết quả thực nghiệm, chúng tôi có một số kết luận sau:
- Mẫu cây Xạ đen thực sinh được vô trùng tốt nhất trong chất khử trùng Javen nồng độ 10% với thời gian xử lí từ 10 đến 20 phút, đạt hiệu quả khử trùng lần lượt là 94%, 96%, 90%. Đây là thời gian có thể nói là hợp lý nhất cho quá trình khử trùng mẫu cây Xạ đen.
- Môi trường thích hợp để nhân nhanh chồi cây Xạ đen là môi trường MS cơ bản có bổ sung nồng độ BAP là 0,6 mg/l với hệ số nhân chồi là 5,0. Chiều cao của chồi cũng phát triển tốt nhất ở môi trường MS cơ bản có bổ sung nồng độ BAP là 0,6 mg/l khoảng từ 1,5 – 2,5 cm.
- Các chỉ tiêu sinh lí về nồng độ và hàm lượng diệp lục cũng như sắc tố carotenoit của chồi đỉnh tái sinh in vitro đều thấp hơn ở cây tự nhiên.
Kiến nghị
Cần nghiên cứu nồng độ các chất điều hoà sinh trưởng khác nhau để thích hợp cho sự nhân nhanh và ra rễ của cây Xạ đen.
35
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt
1. Bùi Bá Bổng (1995), Nhân giống cây bằng nuôi cấy mô, Sở khoa học công nghệ môi trường An Giang.
2. Trần Thị Dung (2003), Bài giảng nuôi cấy mô tế bào thực vật, Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM.
3. Dương Công Kiên (2002), Nuôi cấy mô thực vật, Nxb Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh.
4. Đỗ Tất Lợi (2004), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học.
5. Nguyễn Đức Lượng (2000), Công nghệ tế bào, Nxb Đại Học Quốc Gia TP. Hồ Chí Minh.
6. Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Phương pháp nghiên cứu sinh lý học thực vật, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội.
7. Trần Văn Minh (2004), Công nghệ sinh học – Giáo trình cao học – nghiên cứu sinh, Trường Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh.
8. Nguyễn Văn Uyển (1996), Những phương pháp công nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp tập 1, 2.
9. Bùi Trang Việt (2000), Sinh lý thực vật đại cương, Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh.
Tài liệu tiếng Anh
10. Huang HC, Shen CC, Chen CF, Wu YC, Ku YH (2000) Graduate Institute of Natural Products, Kaohsiung Medical College, Taiwan, ROC.Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 48(7): 1079-1080.
11. Murashige T., and Skoog F., (1962), “Development of MS medium”, Physiol. Plant, 15: 473 – 479.
36
12. Pham Hoang Ho (1999), Cay co Viet Nam (An Illustrated Flora of Vietnam). Youth Publishing House, II, p.153.
13. Thorpe, TA, (1980), Organogenesis in vitro: Structural, physiological and biochemical aspects, Int. Rev. Cytol. (Suppl.) , 11A:71–111.
Tài liệu internet
14. http://vmmu.edu.vn/thuochvqy/DuocPham.aspx?madp=9
15. http://www.ykhoa.net/yhoccotruyen/baiviet/29_042.htm
16.http://danso.giadinh.net.vn/y-te/dieu-tri-ung-thu-xa-den-chi-co-tac-
dung-ho-tro-40580.htm
37
PHỤ LỤC
Hình 1. Thao tác trong box cấy vô trùng
Hình 2. Kiểm tra mẫu cấy thường xuyên
Hình 3. Dịch chiết mẫu lá tự nhiên cây Xạ đen
Hình 4. Dịch chiết mẫu lá in vitro cây Xạ đen
38
DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN TÁC GIẢ
1. ThS La Việt Hồng, Trần Thị Thắm, Phạm Thị Tươi, Dương Thị Minh, Mai Thị Hồng (2014), “Quy trình khử trùng đơn giản mẫu cây Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.)Harms) in vitro”, (Kỷ yếu Hội Nghị Khoa Học Trẻ)