khụ đinh lăng
Tiến hành sắc ký cỏc dung dịch chuẩn và cỏc dung dịch thử theo điều kiện sắc ký đó chọn. Kết quả cho thấy cỏc dung dịch thử đều cho thời gian lưu tương ứng với acid oleanolic (ở khoảng 28 phỳt) và tỏch riờng khỏi cỏc pic khỏc trờn sắc ký đồ.
Ngoài ra, đối với mẫu dược liệu đinh lăng, chỳng tụi tiến hành chia cỏc mẫu này thành 2 nhúm, nhúm 1 bao gồm 7 mẫu, nhúm 2 bao gồm 12 mẫu cũn lại. Chỳng tụi tiến hành xử lý mẫu và chạy sắc ký cỏc mẫu thuộc nhúm 1 trước. Từ kết quả chạy sắc ký 7 mẫu này, chỳng tụi cho rằng cú thể định tớnh đinh lăng bằng HPLC dựa vào pic của acid oleanolic và một số pic luụn cú mặt trong cỏc sắc ký đồ và thời gian lưu tương đối của cỏc pic này so với pic acid oleanolic (“pic đỏnh dấu”). Kết quả chỳng tụi đó lựa chọn được một cụm bao gồm 6 pic (trong đú cú pic acid oleanolic là “pic đỏnh dấu”) dựng để định tớnh mẫu dược liệu đinh lăng như được trỡnh bày ở hỡnh 3.18, phụ lục 1 vàbảng 3.13 dưới đõy.
58
(a)
(b)
Hỡnh 3.18 – Sắc ký đồ một số mẫu đinh lăng a) Mẫu thử 1 b) Mẫu thử 2
Bảng 3.13 – Thời gian lưu và thời gian lưu tương đối của cỏc pic lựa chọn
STT Thời gian lưu Thời gian lưu tương đối so
với pic acid oleanolic
1 17,5 0,61 2 18,5 0,65 3 20,5 0,72 4 21,5 0,75 5 28,6 (acid oleanolic) 1,00 6 31,0 1,08
Sau khi xỏc định được cụm 6 pic (bao gồm “pic đỏnh dấu”), chỳng tụi tiếp tục tiến hành phõn tớch 12 mẫu dược liệu đinh lăng cũn lại và xỏc định sự cú mặt của cụm 6 pic này trờn cỏc sắc ký đồ. Kết quả được trỡnh bày ở bảng 3.14.
59
Bảng 3.14 – Bảng định tớnh cỏc mẫu dược liệu đinh lăng dựa trờn thời gian lưu tương đối của cụm 6 pic so với pic acid oleanolic
Ký hiệu mẫu Thời gian lưu tương đối của cỏc pic so với pic acid oleanolic
0,61 0,65 0,72 0,75 1,00 1,08 1 + + + + + + 2 + + + + + + 3 + + + + + + 4 + + + + + + 5 + + + + + + 6 + + + + + + 7 + + + + + + 8 + + + + + + 9 + + + + + + 10 + + + + + + 11 + + + + + + 12 + + + + + + 13 + + + + + + 14 + + + + + + 15 + + + + + + 16 + + + + + + 17 + + + + + + 18 + + + + + + 19 + + + + + +
Kết quả thu được ở bảng 3.14 cho thấy cụm 6 pic trờn đều xuất hiện trong tất cả 19 mẫu dược liệu đinh lăng.
Khi so sỏnh với kết quả phõn tớch acid oleanolic trong dược liệu ngưu tất (Achyranthes bidentata), họ Rau giền (Amaranthaceae) ở tài liệu [4], với điều kiện sắc ký tương tự, kết quả thu được như sau:
60
(a)
(b)
(c)
Hỡnh 3.19 – Sắc ký đồ HPLC dược liệu ngưu tất. a) Mẫu thử 1
b) Mẫu thử 2
61
Kết quả cho thấy cụm 6 pic trờn sắc ký đồ của đinh lăng khụng xuất hiện trong cỏc sắc ký đồ của ngưu tất (hỡnh 3.19). Như vậy, cú thể thấy rằng cụm 6 pic này tương đối đặc trưng cho dược liệu đinh lăng, việc lựa chọn cụm 6 pic này để định tớnh cỏc mẫu dược liệu đinh lăng là hoàn toàn phự hợp.