... một kỹthuật đầy triển vọng đối
với cây chuyểngenởthực vật.
Quá trình chuyểngen được thực hiện qua các bước sau :
- Xác định gen liên quan đến tính trạng cần quan tâm.
- Phân lập gen ... Những gen được tạo đưa vào (gen chuyển) có thể
được phân lập từ những loài thựcvật có quan hệ họ hàng hoặc từ
những loài khác biệt hoàn toàn. Thựcvật tạo ra được gọi là thựcvậtchuyểngen ... (ultrasonic), chuyểngen qua ống phấn
(pollen tube) Đến nay, nhờ cải tiến các vector chuyểngen nên kỹ
thuật chuyển bằng A. tumefaciens đã thành công cả ở cây ngũ cốc
đặc biệt là lúa. Kỹthuật này trở...
... gen
thực vật, tần số tạo biến dị soma cao
chuyển genở cây ngô
chuyển genở cây ngô
Chuyển gen gián tiếp
Chuyển gen gián tiếp
Chuyển gen trực tiếp
Chuyển gen trực tiếp
Các phương pháp chuyển ... VIR: hinh thành khối u ởthựcvật
+ vùng chứa gen mà hoá cho việc sao chép plasmid
và chuyển nạp
Các phương pháp
Các phương pháp
Chuyển genởthựcvật
Chuyển genởthựcvật
và ứng dụng
và ... mảnh lá.
chuyển genởthựcvật
chuyển genởthực vật
Hệ thống
Hệ thống
nuôi cấy
nuôi cấy và
tái sinh
tái sinh
in vitro
in vitro
Vectơ chuyển gen
Vectơ chuyển gen
Phương pháp chuyển...
... tèt nghiÖp
MỞ ĐẦU
Hiện nay, trên thế giới việc chuyểngen vào thựcvật đã trở thành kỹthuật
thông dụng trong cải tạo giống cây trồng. Đã có hơn 50 loại gen được chuyển vào
thực vật và có khoảng ... phân tích phân tử cây chuyểngen chỉ dừng lại
bằng sử dụng kỹthuật PCR. Lai Southern là kỹthuật quan trọng, có giá trị khẳng
định sự có mặt của gen chuyển. Ngoài ra, với kỹthuật này mới có thể ... mang genchuyển và thử nghiệm thành công các kỹ
thuật chuyển gen: gián tiếp thông qua vi khuẩn Agrobacterium
tumefaciens, trực tiếp bằng súng bắn gen. Đến nay, nhiều dòng lúa
chuyển gen Xa21,...
... dòng
Plasmid hỗ
trợ gây độc
Nguồn gốc
loại vật chủ
mở rộng
Dòng
vật chủ
Plasmid
hỗ trợ
chuyển gen
Marker
chọn
lọc
của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos /ocs
Vị trí
tạo dòng và chú ... tạo
dòng
(trung
gian)
Plasmid vir
vật chủ liên
hợp
Vùng
tương
đồng
Ori
Plasmid
hỗ trợ
chuyển
gen
Marker
chọn
lọc của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos /
ocs
Vị trí tạo dòng và ... J60-o#"#$&
&
a* [(
J& J*)
11
Công nghệ chuyểngenởThực vật
I. Khái niệm chung
...
... plasmid nên hệ chuyểngen này được gọi là
hệ trans.
Phần 2. CHUYỂNGENỞTHỰCVẬT BẬC CAO
Chương 1. MỞ ĐẦU
1.1. Genom ởthựcvật bậc cao
1.1.1. Đặc điểm bộ máy di truyền tế bào thực vật
Các tính ... ởthựcvật bậc cao. Tế bào thựcvật bậc cao chứa 1 lượng DNA lớn gấp nhiều lần ở vi khuẩn
và nhiều trường hợp còn gấp bội so với lượng DNA ở tế bào người.
DNA thựcvật khác với DNA vi sinh vật, ... trình chuyểngen ngoại lai. Sự tồn tại song song hai plasmid này đã tương tác
lẫn nhau trong việc chuyểngen vào tế bào thực vật. Như vậy, gen ngoại lai và vùng DNA giúp quá
trình chuyển gen...
... gien
Antibiotic or
herbicide
resistance gene
Promoter
Bt gene
Termination
sequence
Valued Gateway Customer
Producing Transgenic Plants
PP s dng súng bn gien
(“Gene gun” method)
DN A
TB TV
Source: ... chuyển gien’ (Transgenic) dùng để chỉ việc đưa gien
vào 1 đối tượng SV nào đó bằng KT ADN tai tổ hợp. Gien được
chuyển từ các loài khác hay trong cùng 1 loài.
•
Từ đồng nghĩa (Synonym):
Genetically ... Transgenic Plants
Gien là 1 đoạn ADN mã hóa 1 loại protein chuyen biệt
biểu hiện 1 tính trạng.
mRNA protein trait
transcription
translation
expression
Cây trồng chuyển gien là gì ?
•
Thuật...
... tắc sinh học của kỹthuậtchuyểngen
2. Các bước trong kỹthuậtchuyểngen
3. Một số phương pháp chuyểngenởthựcvật
3.1. Các phương pháp chuyểngen gián tiếp
3.1.1. Chuyểngen gián tiếp nhờ ... số phương pháp chuyểngenởthực vật
Có hai hình thứcchuyểngen chủ yếu là chuyểngen trực tiếp và
chuyển gen gián tiếp.
3.1. Các phương pháp chuyểngen gián tiếp
3.1.1. Chuyểngen gián tiếp ... kỹthuật tạo giống
truyền thống.
Kỹ thuậtchuyển gen, ghép gen là kỹthuật đưa một gen lạ (một đoạn
ADN, ARN) vào tế bào vật chủ làm cho gen lạ tồn tại ở các plasmid trong tế
Thủy Hồng
2
Kỹ...
... âm) để
chuyển genởthựcvật là phương pháp hiệu quả và phổ biến nhất hiện nay
nhờ vào khả năng gắn gen ngoại lai vào hệ genthựcvật một cách chính xác
và ổn định.
Sự chuyểngenởthựcvật dùng ... những giới hạn của kỹthuật tạo giống
truyền thống.
Kỹ thuậtchuyển gen, ghép gen là kỹthuật đưa một gen lạ (một đoạn
ADN, ARN) vào tế bào vật chủ làm cho gen lạ tồn tại ở các plasmid trong ... sinh học của kỹthuậtchuyểngen Error: Reference
source not found
2. Các bước trong kỹthuậtchuyểngen Error: Reference source not
found
3. Một số phương pháp chuyểngenởthựcvật . Error:...
... truyền cho động vậtchuyểngen bằng sự chuyển gen. Chuột
chuyển gen mang gen recombinase có thể được lai với các dòng chứa vùng DNA tiếp giáp với trình
tự LoxP.
Một cách lý tưởng, các gen recombinase ... nhị
thể cùng với T-DNA của A.rhizogenes vào genome thựcvật (Shalin, 1986;
Simpson, 1986). Các gen này khi chuyển vào genome thựcvật được định vị ở
giữa các trình tự biên của vector nhị thể. ... các vị trí giống như LoxP hoặc FRT trong genome động vật.
2. Các vector sử dụng để chuyểngenởthựcvật
2.1. Các vector biến nạp vào tế bào thựcvật sử dụng Agrobacterium
2.1.1. Sự gây ra...
... bao gồm cả vi sinh vật. Thuật ngữ GMP (genetically modified plant)-
thực vật biến đổi gen và GMA (genetically modified animal)- động vật biến đổi
gen cũng được sử dụng.
Trong thực tế, các đoạn ... triển của công nghệ chuyểngen vào thựcvật bắt nguồn
từ những thành công của công nghệ chuyểngen vào động vật. Kể từ năm
1984, là lúc người ta bắt đầu tạo được cây trồng chuyểngen và đến nay đã ... sử dụng để chuyểngenởthựcvật
2.1. Các vector biến nạp vào tế bào thựcvật sử dụng Agrobacterium
2.1.1. Sự gây ra các khối u do Agrobacterium
Agrobacterium tumefaciens và A. rhizogenes là hai...
... VITRO
CÂY KHOAI TÂY PHụC Vụ
CHọN TạO GIốNG MớI BằNG KỹTHUậTCHUYểNGEN V DUNG HợP Tế BO TRầN
Study on Potato In - vitro Regeneration System for
Gene Transfering and Protoplast Fusion
inh Trng ... pháp
hiện đại trên đối tợng cây khoai tây, nh:
các kỹthuật chọn lọc bằng chỉ thị phân tử,
nuôi cây đỉnh sinh trởng (meristerm),
chuyển gen, dung hợp tế bo trần
(protoplast) nhằm tạo ra những ...
1. ĐặT VấN Đề
Khoai tây l một trong bốn cây lơng
thực quan trọng, đợc xếp sau lúa, ngô v
khoai lang ở nớc ta. Khoai tây vừa l cây
lơng thựcthực phẩm, vừa l cây rau có giá
trị xuất khẩu.
Các...
... các tế bào con.
2. Ðộng vật (Thực vật) chuyển gen
Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen là động vật (thực vật) có gen ngoại lai
(gen chuyển) xen vào trong DNA genome của nó.
Gen ngoại lai này phải được ...
3. Gen chuyển
Genchuyển (transgene) là gen ngoại lai được chuyển từ một cơ thể
sang một cơ thể mới bằng kỹthuật di truyền.
Các genchuyển được sử dụng để tạo động vật, thựcvậtchuyểngen ... trong việc tạo ra nhiều
thực vật, động vậtchuyển gen. Ở động vật, không chỉ đối với động vật mô hình
(chuột), vật nuôi (bò, lợn, dê, cừu, thỏ, gà, cá ) mà cả những loài động vật
khác như khỉ, muỗi...
... Agrobacterium kể trên.
1.4 Kỹthuật đĩa lá (Leaf disk technique)
Để thực hiện việc chuyểngen nhờ vi khuẩn người ta sử
dụng kỹthuật đĩa lá. Tạo các đĩa lá của thựcvật cần chuyểngen
sau đó xử lý các ... bảo quản
ở 4oC.
5.Gieo hạt tạo cây và xác định sự có mặt của gen ngoại
lai.
2.2 Chuyểngen trực tiếp bằng phương pháp điện di
Nguyên tắc: Phương pháp chuyểngen trực tiếp vào mô thựcvật
bằng ...
vết thương đồng thời chúng cũng hoạt hóa các genở vùng vir
của plasmid hoạt động.
acetosyringone
Quy trình chuyểngen vào thựcvật bằng kỹthuật đĩa lá nhờ vi khuẩn
A.tumefaciens
...
... sinh vậtchuyểngen chung và động vậtchuyểngen nói riêng, nhiều quốc gia
trên thế giới đã chú trọng đầu tư nghiên cứu và phát triển sinh vậtchuyển gen.
1. Trong nghiên cứu cơ bản
Chuyển gen ... chuyểngen mang một gen ung thư đã hoạt hoá (v-H-ras, c-H-ras) hoặc một gen
ức chế khối u bất hoạt (p53).
-Chuột chuyểngen với gen sửa đổi DNA đã bất hoạt (XPA).
Tuy nhiên, động vậtchuyểngen ... Bên cạnh các gen hormone sinh trưởng, một số các gen khác cũng đã được
chuyển vào cừu như gen mã hoá yếu tố đông máu IX , gen α1-antitripsin, gen cysE, gen cysK.
2. 5. Dê chuyển gen
Một thử...
... dõi genchuyểnở các lá hình thành
sau đó hoặc các thế hệ sau.
3. Kỹthuật sử dụng súng bắn gen
Đây là phương pháp phổ biến được áp dụng thành công để chuyểngen trực
tiếp vào thực vật. Nguyên ... tạo ra nhiều loại súng bắn gen mới, hiện đại
(Sautter, 1991; Finter ở đại học Ohio của Mỹ). Những năm gần đây, ở Việt Nam
Kỹ thuậtchuyểngen trực tiếp
o 0 o
1. Kỹthuật biến nạp qua protoplast
Phương ... kháng rầy, chống nấm bạc lá lúa thu được nhiều dòng
lúa chuyểngen có nhiều đặc tính tốt.
chuyểngen bằng sung bắn gen
4. Kỹthuậtchuyểngen bằng vi tiêm (microinjection)
Phương pháp này sử...