Nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá tác dụng ức chế enzyme α glucosidase của loài địa hoàng (rehmannia glutinosa)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Họ tên: Nguyễn Thị Dung TÊN ĐỀ TÀI LUẬN VĂN: “NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE CỦA LOÀI ĐỊA HOÀNG (REHMANNIA GLUTINOSA)" LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Họ tên: Nguyễn Thị Dung TÊN ĐỀ TÀI LUẬN VĂN: “NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE CỦA LỒI ĐỊA HỒNG (REHMANNIA GLUTINOSA)" Chun ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Vũ Kim Thƣ Hà Nội - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Thị Dung, Học viên cao học lớp CHE 2019B, Học viện Khoa học Cơng nghệ, chun ngành Hóa hữu cơ, mã số học viên 19803028 xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực dƣới hƣớng dẫn TS Vũ Kim Thƣ Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác đƣợc công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, đƣợc xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trƣớc pháp luật cam kết Hà Nội, ngày… tháng… năm 2021 Ngƣời viết cam đoan Nguyễn Thị Dung LỜI CẢM ƠN Luận văn đƣợc hoàn thành Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam khuôn khổ đề tài Khoa học Công nghệ cấp Bộ mã số B2020-MDA-09 Lời đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Vũ Kim Thƣ ngƣời tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Em xin đƣợc gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS Phan Văn Kiệm tồn thể cán phịng Nghiên cứu cấu trúc - Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam nhiệt tình bảo, tạo điều kiện giúp đỡ em thời gian nghiên cứu Em xin đƣợc gửi lời cảm ơn tới Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ tồn thể giảng viên khoa Hóa, giảng viên Học viện dạy dỗ bảo em suốt trình học tập Học viện Em xin đƣợc gửi lời cảm ơn tới Ban lãnh đạo Trung tâm Nghiên cứu chuyển giao Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi cho em có thời gian theo học khóa học Cuối cùng, em xin đƣợc gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ngƣời thân bên động viên, giúp đỡ em trình em học tập nghiên cứu Hà Nội, ngày … tháng 11 năm 2021 Học viên Nguyễn Thị Dung DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu 13 C-NMR DEPT DMSO H-NMR IC50 HMBC HR-ESIMS HSQC NOESY TLC TMS c.c D E M A W ARG3D3 ARG6D3 ARG6 ARG12C1 ARG7 Tiếng Anh Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer Dimethylsulfoxide Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Inhibitory concentratrion at 50% Heteronuclear multiple Bond Connectivity High Resolution Electronspray Ionization Mass Spectrum Heteronuclear Single- Quantum Coherence Nuclear Overhauser Enhancement Spectroscopy Thin layer chromatography Tetramethylsilane Chromatography column Dichloromethane Ethyl acetate Methanol Acetone Water Diễn giải Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C Phổ DEPT (CH3)2SO Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton Nồng độ ức chế 50% đối tƣợng thử nghiệm Phổ tƣơng tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết Phổ khối lƣợng phân giải cao phun mù điện tử Phổ tƣơng tác dị hạt nhân qua liên kết Phổ NOESY Sắc ký lớp mỏng Si(CH3)4 Cột sắc kí CH2Cl2 CH3COOC2H5 CH3OH (CH3)2CO H2O Hợp chất RG1 Hợp chất RG2 Hợp chất RG3 Hợp chất RG4 Hợp chất RG5 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Trang thiết bị thí nghiệm 11 Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất RG1 hợp chất so sánh 24 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất RG2 hợp chất so sánh 28 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR hợp chất RG3 hợp chất tham khảo 35 Bảng 3.4 Số liệu phổ NMR hợp chất RG4 chất so sánh 41 Bảng 3.5 Số liệu phổ NMR hợp chất RG5 hợp chất tham khảo 46 Bảng 3.6 Tác động ức chế -glucosidase mẫu nghiên cứu 48 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Một số hình ảnh loài Địa hoàng Hình 3.1 Cấu trúc hóa học hợp chất RG1 hợp chất so sánh 18 Hình 3.2 Phổ HR-ESI-MS hợp chất RG1 18 Hình 3.3 Phổ 1H-NMR hợp chất RG1 19 Hình 3.4 Phổ 13C-NMR hợp chất RG1 20 Hình 3.5 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG1 20 Hình 3.6 Phổ HMBC hợp chất RG1 21 Hình 3.7 Phổ HSQC hợp chất RG1 21 Hình 3.8 Phổ NOESY hợp chất RG1 23 Hình 3.9 Phổ CD hợp chất RG1 23 Hình 3.10 Cấu trúc hợp chất RG2 hợp chất so sánh 25 Hình 3.11 Phổ HR-ESI-MS hợp chất RG2 26 Hình 3.12 Phổ 1H-NMR hợp chất RG2 26 Hình 3.13 Phổ 13C-NMR hợp chất RG2 27 Hình 3.14 Phổ HSQC hợp chất RG2 28 Hình 3.15 Phổ NOESY hợp chất RG2 30 Hình 3.16 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG2 30 Hình 3.17 Phổ HMBC hợp chất RG2 31 Hình 3.18 Phổ CD hợp chất RG2 32 Hình 3.19 Cấu trúc hóa học hợp chất RG3 32 Hình 3.20 Phổ 1H-NMR hợp chất RG3 33 Hình 3.21 Phổ 13C-NMR hợp chất RG3 33 Hình 3.22 Phổ HSQC hợp chất RG3 34 Hình 3.23 Phổ HMBC hợp chất RG3 35 Hình 3.24 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG3 37 Hình 3.25 Cấu trúc hóa học hợp chất RG4 37 Hình 3.26 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG4 38 Hình 3.27 Phổ 1H-NMR hợp chất RG4 38 Hình 3.28 Phổ 13C-NMR hợp chất RG4 39 Hình 3.29 Phổ HMBC hợp chất RG4 40 Hình 3.30 Phổ HSQC hợp chất RG4 40 Hình 3.31 Cấu trúc hóa học hợp chất RG5 43 Hình 3.32 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG5 43 Hình 3.33 Phổ 1H-NMR hợp chất RG5 44 Hình 3.34 Phổ 13C-NMR hợp chất RG5 44 Hình 3.35 Phổ HMBC hợp chất RG5 45 Hình 3.36 Phổ HSQC hợp chất RG5 48 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 THƠNG TIN VỀ LỒI ĐỊA HOÀNG (REHMANNIA GLUTINOSA) Ở VIỆT NAM 1.1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.2 Tác dụng chữa bệnh dân gian 1.2 MỘT SỐ CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGỒI NƢỚC 1.2.1 Một số nghiên cứu nƣớc 1.2.2 Một số nghiên cứu giới 1.3 TÁC DỤNG HẠ ĐƢỜNG HUYẾT CỦA LOÀI ĐỊA HOÀNG CHƢƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 MẪU NGHIÊN CỨU 11 2.2 NGUYÊN VẬT LIỆU 11 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.3.1 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 11 2.3.2 Sắc ký cột (CC) 12 2.4 PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT 12 2.4.1 Độ quay cực ([]D) 12 2.4.2 Phổ khối lƣợng phân giải cao HR-ESI-MS 12 2.4.3 Phổ cộng hƣởng từ nhân (NMR) 12 2.5 THỰC NGHIỆM 13 2.6 THƠNG SỐ VẬT LÍ VÀ DỮ KIỆN PHỔ CỦA CÁC HỢP CHẤT 15 2.6.1 Hợp chất RG1 (hợp chất mới) 15 2.6.2 Hợp chất RG2 (hợp chất mới) 15 2.6.3 Hợp chất RG3 16 2.6.4 Hợp chất RG4 16 2.6.5 Hợp chất RG5 16 2.7 PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYM αGLUCOSIDASE 16 2.7.1 Vật liệu 16 2.7.2 Phƣơng pháp 16 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG1 18 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG2 25 3.3 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG3 32 3.4 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG4 37 3.5 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG5 43 3.6 TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE 48 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC 56 Bài báo Phytochemistry Letters, 43, 208-211, 2021 56 KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC MẪU THỰC VẬT 60 Phụ lục 1.1-1.22: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG1 61 Phụ lục 2.1-2.19: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG2 72 Phụ lục 3.1-3.16: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG3 82 Phụ lục 4.1-4.16: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG4 90 Phụ lục 5.1-5.18: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG5 98 92 Phụ lục phổ 4.5 Phổ 13C-NMR hợp chất RG4 Phụ lục phổ 4.6 Phổ 13C-NMR giãn hợp chất RG4 93 Phụ lục phổ 4.7 Phổ 13C-NMR giãn hợp chất RG4 Phụ lục phổ 4.8 Phổ HMBC hợp chất RG4 94 Phụ lục phổ 4.9 Phổ HMBC giãn hợp chất RG4 Phụ lục phổ 4.10 Phổ HMBC giãn hợp chất RG4 95 Phụ lục phổ 4.11 Phổ HMBC giãn hợp chất RG4 Phụ lục phổ 4.12 Phổ HMBC giãn hợp chất RG4 96 Phụ lục phổ 4.13 Phổ HMBC giãn hợp chất RG4 Phụ lục phổ 4.14 Phổ HSQC hợp chất RG4 97 Phụ lục phổ 4.15 Phổ HSQC giãn hợp chất RG4 Phụ lục phổ 4.16 Phổ HSQC giãn hợp chất RG4 98 Phụ lục 5.1-5.18: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG5 Phụ lục phổ 5.1 Phổ 1H-NMR hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.2 Phổ 1H-NMR giãn hợp chất RG5 99 Phụ lục phổ 5.3 Phổ 1H-NMR giãn hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.4 Phổ 1H-NMR giãn hợp chất RG5 100 Phụ lục phổ 5.5 Phổ 13C-NMR hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.6 Phổ 13C-NMR giãn hợp chất RG5 101 Phụ lục phổ 5.7 Phổ 13C-NMR giãn hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.8 Phổ 13C-NMR giãn hợp chất RG5 102 Phụ lục phổ 5.9 Phổ HMBC hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.10 Phổ HMBC giãn hợp chất RG5 103 Phụ lục phổ 5.11 Phổ HMBC giãn hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.12 Phổ HMBC giãn hợp chất RG5 104 Phụ lục phổ 5.13 Phổ HMBC giãn hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.14 Phổ HMBC giãn hợp chất RG5 105 Phụ lục phổ 5.15 Phổ HSQC hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.16 Phổ HSQC giãn hợp chất RG5 106 Phụ lục phổ 5.17 Phổ HSQC giãn hợp chất RG5 Phụ lục phổ 5.18 Phổ HSQC giãn hợp chất RG5 ... là: "Nghiên cứu thành phần hóa học đánh giá tác dụng ức chế enzyme ? ?glucosidase lồi Địa hồng (Rehmannia glutinosa)"  Mục đích nghiên cứu: - Phân lập số hợp chất từ rễ củ loài Địa hoàng (Rehmannia. .. chất từ loài Địa hoàng (Rehmannia glutinosa) - Đánh giá tác dụng ức chế enzyme α- glucosidase loài Địa hoàng (Rehmannia glutinosa) CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 THÔNG TIN VỀ LOÀI ĐỊA HOÀNG (REHMANNIA. .. (Rehmannia glutinosa) - Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập đƣợc - Đánh giá tác dụng ức chế enzyme α- glucosidase hợp chất phân lập đƣợc từ loài Địa hoàng (Rehmannia glutinosa)  Đối tƣợng nghiên