Phân lập hệ vi sinh đường ruột và nghiên cứu khả năng xử lý lục bình (eichhornia crassipes) kết hợp với hỗn hợp rau dư thừa từ ấu trùng ruồi lính đen (hermetia illucens) nghiên cứu khoa học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN ĐỀ TÀI: PHÂN LẬP HỆ VI SINH ĐƢỜNG RUỘT VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG XỬ LÝ LỤC BÌNH (Eichhornia crassipes) KẾT HỢP VỚI HỖN HỢP RAU DƢ THỪA TỪ ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN (Hermetia illucens) Mã số đề tài: 24 Bình Dƣơng, tháng 04/2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN TÊN ĐỀ TÀI: PHÂN LẬP HỆ VI SINH ĐƢỜNG RUỘT VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG XỬ LÝ LỤC BÌNH (Eichhornia crassipes) KẾT HỢP VỚI HỖN HỢP RAU DƢ THỪA TỪ ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN (Hermetia illucens) Mã số đề tài: 24 Chủ nhiệm đề tài: Nguyễn Thị Thanh Thảo Khoa: Công Nghệ Sinh Học Các thành viên: Phạm Kim Huyền Đặng Hồng Nhung Nguyễn Thanh Triều GVHD: TS Nguyễn Ngọc Bảo Châu TS Nguyễn Bảo Quốc Bình Dƣơng, tháng 04/2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: PHÂN LẬP HỆ VI SINH ĐƢỜNG RUỘT VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG XỬ LÝ LỤC BÌNH (Eichhornia crassipes) KẾT HỢP VỚI HỖN HỢP RAU DƢ THỪA TỪ ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN (Hermetia illucens) - Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Thanh Thảo - Lớp: DH14NN41 Khoa: Công Nghệ Sinh Học Năm thứ: 04 Số năm đào tạo: 2014 - 2018 - Người hướng dẫn: TS Nguyễn Ngọc Bảo Châu TS Nguyễn Bảo Quốc Mục tiêu đề tài: - Phân lập số chủng vi sinh vật đường ruột ấu trùng ruồi lính đen tiến hành định danh để nhận biết loài đặc điểm chúng - Nghiên cứu khả xử lý lục bình hỗn hợp rau dư thừa ấu trùng ruồi lính đen Tính sáng tạo: Việc phân lập hệ vi sinh vật đường ruột ấu trùng ruồi lính đen giúp khám phá thêm đa dạng hệ vi sinh vật ruột côn trùng, nhận biết chủng vi sinh có lợi hay có hại môi trường sống để phục vụ cho việc nghiên cứu giải pháp phòng trừ sinh học Bên cạnh đó, việc xử lý lục bình từ ấu trùng ruồi lính đen giải pháp nay, vừa tiêu thụ vừa cung cấp sản phẩm phụ phân hữu từ lục bình sau xử lý thu lượng nhộng ruồi lính đen với hàm lượng protein đáng kể Kết nghiên cứu: Chúng phân lập chủng vi khuẩn đường ruột TH1, TH2, TH3, TH4, TH5, TH6, TH7 Dựa vào kết thử nghiệm sinh hóa định danh kỹ thuật sinh học phân tử so sánh với trình tự ngân hàng gen NCBI phần mềm Blast, kết luận chủng có nguồn gốc mối liên hệ tương đồng với chủng Providencia stuartii, Klebsiella pneumonia, Serratia marcescens, Morganella morganii, Staphylococcus kloosii Nghiên cứu nhóm tác giả Hyunbum Jeon Soyoung Park, Jiyoung Choi cs (2012) phân lập từ ruột ấu trùng ruồi lính đen (Hermetia illucens) định danh dựa trình tự 16S rRNA tương đồng từ mẫu DNA ấu trùng ruồi lính đen cho ăn ba chế độ khác rác thải, thức ăn gia súc cơm Kết thấy 86,89% chủng vi khuẩn tìm thấy nhóm ăn rác thải thực phẩm tương đồng với Klebsiella pneumonia, Enterococus caccae, Klebsiella granulomata, xác định 12,84% lồi vi khuẩn nhóm ấu trùng ăn cơm tương ứng với Morganella morganii Và nhóm ấu trùng ăn thức ăn gia súc phân lập 9,48% chủng vi khuẩn có độ tương đồng với Providencia stuartii Như vậy, nghiên cứu mở hứa hẹn làm phong phú chủng vi sinh vật phân lập từ ruột trùng góp phần vào thử nghiệm phòng trừ vi khuẩn gây bệnh cho trồng vật ni Đã xây dựng quy trình xử lý lục bình hỗn hợp rau dư thừa ấu trùng ruồi lính đen cung cấp 6,42g ấu trùng tạo 99,55g phân hữu từ 200g lục bình (đã ủ với 1,25ml/0,5kg Trichoderma tuần) 300g hỗn hợp rau dư thừa Kết tương tự với nghiên cứu Longyu Zheng cs (2012) Ông khảo sát tỉ lệ phối trộn rơm thức ăn thừa nhà hàng để ấu trùng ruồi lính đen xử lý 30% rơm: 70% thức ăn thừa nhà hàng cho kết tốt Đóng góp mặt kinh tế - xã hội, giáo dục đào tạo, an ninh, quốc phòng khả áp dụng đề tài: Qua nghiên cứu này, giúp nhận biết thêm số chủng vi sinh có ruột ấu trùng ruồi lính đen, hiểu rõ đặc điểm, khả công dụng chúng góp phần làm phong phú hệ vi sinh vật đường ruột trùng Việc sử dụng lục bình kết hợp với hỗn hợp rau dư thừa làm thức ăn cho ấu trùng ruồi lính đen vừa giải pháp để ngăn chặn phát triển mạnh lục bình, thu gom loại rau thừa gây ô nhiễm môi trường, nguồn nước, vừa cung cấp sản phẩm phụ sau xử lý phân hữu phục vụ ngành trồng trọt, đồng thời thu lại nguồn nhộng ruồi với lượng protein đáng kể, số nguồn thức ăn giàu dinh dưỡng cho vật nuôi Công bố khoa học sinh viên từ kết nghiên cứu đề tài: Tham gia báo cáo poster hội nghị quốc tế Đại học Nông Lâm st Indo – Asean Conference On Innovative Approaches In Appliess Sciences And Technologies Tên đề tài: Isolation midgut bacteria and researching ability of water hyacinths management (Eichhornia crassipes) combined with vegetables waste from larvae of the black soldier fly (Hermetia illucens) Ngày 16 tháng 04 năm 2018 Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nguyễn Thị Thanh Thảo Nhận xét ngƣời hƣớng dẫn đóng góp khoa học sinh viên thực đề tài (phần người hướng dẫn ghi) ………………………………… Xác nhận đơn vị (ký tên đóng dấu) Ngày 18 tháng 04 năm Ngƣời hƣớng dẫn (ký, họ tên) Nguyễn Ngọc bảo Châu BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I SƠ LƢỢC VỀ SINH VIÊN: Ảnh 4x6 Họ tên: Nguyễn Thị Thanh Thảo Sinh ngày: 04 tháng 12 năm 1996 Nơi sinh: Bình Định Lớp: DH14NN41 Khóa: 2014 - 2018 Khoa: Công Nghệ Sinh Học Địa liên hệ: nhà trọ Hoàng Yến – P Phú Lợi – Thủ Dầu Một – Bình Dương Điện thoại: 01642543349 Email: bamboo41296@gmail.com II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP (kê khai thành tích sinh viên từ năm thứ đến năm học): * Năm thứ 1: Ngành học: Công Nghệ Sinh Học Khoa: Công Nghệ Sinh Học Kết xếp loại học tập: 7.0 * Năm thứ 2: Ngành học: Công Nghệ Sinh Học Khoa: Công Nghệ Sinh Học Kết xếp loại học tập: 6.7 * Năm thứ 3: Ngành học: Nông nghiệp Khoa: Công Nghệ Sinh Học Kết xếp loại học tập: 6.77 * Năm thứ 4: Ngành học: Nông nghiệp Khoa: Công Nghệ Sinh Học Kết xếp loại học tập: 6.87 Xác nhận đơn vị (ký tên đóng dấu) Ngày 16 tháng 04 năm 2018 Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nguyễn Thị Thanh Thảo MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG i DANH MỤC HÌNH ii DANH MỤC BIỂU ĐỒ iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 RUỒI LÍNH ĐEN 1.1.1 Phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái ruồi lính đen qua giai đoạn 1.1.3 Ưu điểm ruồi lính đen 1.2 HỆ VI SINH VẬT ĐƢỜNG RUỘT CÔN TRÙNG 1.2.1 1.1.2 Sơ lƣợc hệ vi sinh vật đƣờng ruột Các nghiên cứu giới 11 1.2.3 Các nghiên cứu nước 12 1.3 LỤC BÌNH 12 1.3.1 Giới thiệu lục bình 12 1.3.2 Các giải pháp xử lý lục bình 13 1.4 TÌNH HÌNH RAU QUẢ DƢ THỪA 14 1.5 TRICHODERMA SP VÀ CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH Ủ VI SINH 15 1.5.1 Trichoderma sp 15 1.5.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình ủ vi sinh 17 PHẦN II: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 19 2.1 VẬT LIỆU 20 2.2 THIẾT BỊ, DỤNG CỤ VÀ MÔI TRƢỜNG 20 2.2.1 Thiết bị 20 2.3.2 Dụng cụ 20 2.3.3 Môi trường – Hóa chất 21 2.3.4 Thuốc thử 21 2.4.1 Phương pháp thu nhận xử lý mẫu 22 2.4.2 Tiến hành phân lập vi khuẩn đường ruột 23 2.4.3 Phương pháp hỗ trợ định danh chủng vi khuẩn đường ruột ruồi lính đen kỹ thuật sinh hóa 25 2.4.4 Phương pháp hỗ trợ định danh vi khuẩn đường ruột ruồi lính đen có khả đối kháng nấm bệnh trồng kỹ thuật sinh học phân tử 30 2.4.5 Chuẩn bị nguyên liệu, xác định tỷ lệ phối trộn lục bình với hỗn hợp rau dư thừa, tiến hành xử lý hỗn hợp ấu trùng ruồi lính đen theo dõi tiêu sau thí nghiệm 32 PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 3.1 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VI KHUẨN 39 3.2 KẾT QUẢ HỖ TRỢ ĐỊNH DANH SƠ BỘ CÁC CHỦNG VI KHUẨN ĐƢỜNG RUỘT CỦA ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN BẰNG KỸ THUẬT SINH HÓA 44 3.3 KẾT QUẢ HỖ TRỢ ĐỊNH DANH SƠ BỘ CÁC CHỦNG VI KHUẨN ĐƢỜNG RUỘT CỦA ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ 44 3.4 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH TỶ LỆ PHỐI TRỘN TỐI ƢU CHO QUÁ TRÌNH XỬ LÝ GIỮA LỤC BÌNH VÀ RAU DƢ THỪA 56 3.4.1 Sự phù hợp môi trƣờng hỗn hợp số lƣợng ấu trùng ruồi lính đen 56 3.4.2 Nhiệt độ thời gian ấu trùng xử lý hỗn hợp 58 3.4.3 Sự sụt giảm khối lượng hỗn hợp 59 3.4.4 Kích thước khối lượng ấu trùng 60 3.5 QUY TRÌNH XỬ LÝ LỤC BÌNH VÀ HỖN HỢP RAU DƢ THỪA 63 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65 4.1 KẾT LUẬN 66 4.2 ĐỀ NGHỊ 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 67 Phụ lục 6: Hình ảnh nhộng sau kết thúc thí nghiệm xử lý lục bình hỗn hợp rau dƣ thừa nghiệm thức NT1 SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO NT2 NT3 SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO NT4 NT5 SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 7: Kết xử lý thống kê giảm số lƣợng TB nhộng sau thí nghiệm *Giá trị trung bình +độ lệch chuẩn SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 8: Kết xử lý thống kê tăng chiều dài TB nhộng sau thí nghiệm SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO *Giá trị trung bình +độ lệch chuẩn SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 9: Kết xử lý thống kê tăng khối lƣợng TB nhộng sau thí nghiệm SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO *Giá trị trung bình +độ lệch chuẩn SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 10: Kết xử lý thống kê sụt giảm khối lƣợng TB hỗn hợp sau thí nghiệm SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO *Giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 11: Kết xử lý thống kê hàm lƣợng cacbon tổng số TOC (%) sau thí nghiệm SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 12: Kết xử lý thống kê hàm lƣợng Nitơ (%) sau thí nghiệm SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO Phụ lục 13: Kết xử lý thống kê tỷ lệ C/N (%) sau thí nghiệm SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO SVTH: NGUYỄN THỊ THANH THẢO ... chợ Từ luận trên, thực đề tài “PHÂN LẬP HỆ VI SINH ĐƯỜNG RUỘT VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG XỬ LÝ LỤC BÌNH (Eichhornia crassipes) KẾT HỢP VỚI HỖN HỢP RAU DƯ THỪA TỪ ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN (Hermetia illucens). .. đề tài: PHÂN LẬP HỆ VI SINH ĐƢỜNG RUỘT VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG XỬ LÝ LỤC BÌNH (Eichhornia crassipes) KẾT HỢP VỚI HỖN HỢP RAU DƢ THỪA TỪ ẤU TRÙNG RUỒI LÍNH ĐEN (Hermetia illucens) - Sinh vi? ?n thực... Phân lập số chủng vi sinh vật đường ruột ấu trùng ruồi lính đen Nghiên cứu khả xử lý lục bình hỗn hợp rau dư thừa ấu trùng ruồi lính đen Trang PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Trang 1.1 RUỒI LÍNH ĐEN