BÙI THU PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG THUỐC NANG CỨNG SNEDDS ROSUVASTATIN KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI THU PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG THUỐC NANG CỨNG SNEDDS ROSUVASTATIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2021 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI THU PHƯƠNG Mã sinh viên: 1601613 ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG THUỐC NANG CỨNG SNEDDS ROSUVASTATIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn : PGS TS Vũ Thị Thu Giang ThS Phan Thị Nghĩa Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế Viện Kiểm nghiệm thuốc TW HÀ NỘI – 2021 LỜI CẢM ƠN Với tất lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS.TS Vũ Thị Thu Giang ThS Phan Thị Nghĩa – người thầy, người chị tận tâm hướng dẫn, động viên, chia sẻ giúp đỡ em trình học tập, nghiên cứu hoàn thiện đề tài Em xin gửi lời cảm ơn trân trọng Bộ môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội Viện Kiểm nghiệm thuốc TW Trong suốt thời gian thực đề tài, em nhận hỗ trợ, quan tâm yêu quý từ thầy cô, anh/chị kỹ thuật viên bạn tham gia nghiên cứu Em xin cảm ơn PGS TS Nguyễn Đăng Hòa, Bộ Khoa học Công nghệ, Công ty Cổ phần Traphaco, chương trình “Nghiên cứu ứng dụng phát triển công nghệ tiên tiến phục vụ bảo vệ chăm sóc sức khỏe cộng đồng KC.10/16-20” hỗ trợ điều kiện tài kỹ thuật q trình em thực đề tài Xin gửi lời cảm ơn đặc biệt đến bạn Nguyễn Thị Hoa, Hoàng Kiều Yến, Phạm Thúy Hạnh – người giúp đỡ, động viên, chia sẻ để hoàn thiện đề tài Để có kiến thức quý báu trưởng thành ngày hôm nay, em xin cảm ơn Ban Giám hiệu nhà trường, thầy/cô, anh/chị bảo, dạy dỗ em suốt năm năm học Cuối lời cảm ơn sâu sắc tình yêu to lớn dành đến gia đình, bạn bè – người yêu thương, động viên tiếp thêm sức mạnh để em hoàn thiện đề tài Em xin lần cảm ơn tất cả! Hà Nội, ngày 06 tháng 06 năm 2021 Sinh viên Bùi Thu Phương MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ ROSUVASTATIN 1.1.1 Công thức cấu tạo tính chất hóa lý 1.1.2 Tác dụng dược lý dược động học 1.2 TỔNG QUAN VỀ SINH KHẢ DỤNG .4 1.2.1 Khái niệm sinh khả dụng 1.2.2 Đánh giá sinh khả dụng .4 1.2.3 Quy định đánh giá sinh khả dụng 1.2.4 Thẩm định phương pháp phân tích dịch sinh học: 1.2.5 Các nghiên cứu đánh giá sinh khả dụng chế phẩm chứa rosuvastatin công bố CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ 20 2.1.1 Ngun liệu, hóa chất, dung mơi 20 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị 20 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 21 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.2.1 Đánh giá chất lượng thuốc thử thuốc đối chiếu 22 2.2.2 Đánh giá sinh khả dụng in vitro 23 2.2.3 Đánh giá sinh khả dụng in vivo 23 2.2.4 Phương pháp phân tích 25 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .29 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG THUỐC THỬ, THUỐC ĐỐI CHIẾU 29 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG IN VITRO 30 3.2.1 Môi trường pH 1,2 30 3.2.2 Môi trường pH 4,5 31 3.2.3 Môi trường pH 6,8 32 3.3 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG IN VIVO 32 3.3.1 Kết xây dựng thẩm định phương pháp định lượng rosuvastatin huyết tương người 32 3.3.2 Kết đánh giá sinh khả dụng in vivo 40 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ASEAN Association of South East Asian Nations (Hiệp hội quốc gia Đông Nam Á) AUC Diện tích đường cong nồng độ - thời gian Cmax Nồng độ dược chất tối đa máu CV Coefficient of variation (Hệ số biến thiên) EMA European Medicines Agency (Cơ quan dược phẩm Châu Âu) FDA Food and Drug Administration (Cơ quan quản lý thuốc thực phẩm Hoa Kỳ) HDL-C High Density Liporotein-Cholesterol (Cholesterol tỷ trọng cao) HMG-CoA 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzym A HPLC High Performance Liquid Chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) HQC High quanlity control (Mẫu kiểm chứng nồng độ cao) IS Chất chuẩn nội LC-MS/MS Liquid chromatography - Mass spectrometry/ Mass spectrometry (Sắc ký lỏng – khối phổ) LLOQ Lower limit of quantification (Giới hạn định lượng dưới) LQC Low quanlity control (Mẫu kiểm chứng nồng độ thấp) MQC Middle quanlity control (Mẫu kiểm chứng nồng độ trung bình) NTN Người tình nguyện T Thuốc thử TB Trung bình Tmax Thời gian đạt nồng độ dược chất tối đa máu R Thuốc đối chiếu RC Rosuvastatin calci SNEDDS Self - nanoemulsifying Drug Delivery Systems (Hệ nano tự nhũ hóa) WHO World Health Organization (Tổ chức y tế giới) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 - Tóm tắt số nghiên cứu đánh giá sinh khả dụng chế phẩm chứa rosuvastatin 10 Bảng 2.1 - Các chất chuẩn sử dụng 20 Bảng 2.2 - Các lô huyết tương trắng sử dụng 20 Bảng 2.3 - Các thiết bị dùng thẩm định phương pháp phân tích 20 Bảng 2.4 - Trình tự dùng thuốc theo giai đoạn 24 Bảng 2.5 - Điều kiện sắc ký 26 Bảng 2.6 - Điều kiện khối phổ 26 Bảng 2.7 - Cách chuẩn bị đường chuẩn huyết tương 27 Bảng 3.1 - Kết độ đồng đơn vị liều 29 Bảng 3.2 - Kết so sánh độ hoà tan môi trường pH 1,2 30 Bảng 3.3 - Kết so sánh độ hồ tan mơi trường pH 4,5 31 Bảng 3.4 - Kết so sánh độ hồ tan mơi trường pH 6,8 32 Bảng 3.5 - Ảnh hưởng mẫu trắng thời điểm trùng Rt RC IS 34 Bảng 3.6 - Kết khảo sát đường chuẩn 35 Bảng 3.7 - Đáp ứng pic mẫu LLOQ mẫu Zero Rt RC 36 Bảng 3.8 - Độ đúng, độ xác mẫu LLOQ 37 Bảng 3.9 – Kết khảo sát độ đúng, độ xác ngày (ng/mL) 38 Bảng 3.10 – Kết khảo sát độ xác khác ngày (ngày 19, 21, 22/12/2020) 39 Bảng 3.11 – Kết đánh giá độ nhiễm chéo 39 Bảng 3.12 – Trình tự uống thuốc người tình nguyện 40 Bảng 3.13 – Nồng độ rosuvastatin huyết tương sau uống thuốc thử (ng/mL) 42 Bảng 3.14 – Nồng độ rosuvastatin huyết tương sau uống thuốc đối chiếu (ng/mL) 44 Bảng 3.15 – Dược động học cá thể RC sau uống thuốc thử 47 Bảng 3.16 - Dược động học cá thể RC sau uống thuốc đối chiếu 48 Bảng 3.17 – Thống kê mô tả số thông số dược động học RC 49 Bảng 3.18 - Kết phân tích phương sai với biến phụ thuộc ln[Cmax] 50 Bảng 3.19 - Kết phân tích phương sai với biến phụ thuộc ln[AUClast] 50 Bảng 3.20 - Kết phân tích phương sai với biến phụ thuộc ln[AUCinf] 51 Bảng 3.21 – So sánh giá trị Tmax RC 52 PHỤ LỤC Thống kê nhân học 24 NTN Chiều cao Cân nặng BMI (m) (kg) (kg/m2) 24 1,59 56,9 22,5 Nữ R02 25 1,62 59,8 22,7 Nam R03 23 1,68 65,3 23,1 Nam R04 19 1,67 77,9 27,9 Nam R05 24 1,52 48,9 21,1 Nữ R06 21 1,65 52,1 19,1 Nam R07 26 1,53 54,2 23,1 Nam R08 24 1,47 49,4 22,8 Nữ R09 21 1,70 52,2 18,0 Nam 10 R10 24 1,72 65,0 21,9 Nam 11 R11 22 1,67 57,0 20,4 Nam 12 R12 21 1,59 50,6 20,0 Nam 13 R13 23 1,51 50,9 22,3 Nữ 14 R14 19 1,62 53,2 20,2 Nam 15 R15 21 1,71 57,9 19,8 Nam 16 R16 21 1,53 45,1 19,2 Nữ 17 R17 19 1,76 62,2 20,0 Nam 18 R18 22 1,67 60,3 21,6 Nam 19 R19 24 1,61 59,8 23,0 Nữ 20 R20 22 1,77 74,8 23,8 Nam 21 R21 24 1,61 62,9 24,2 Nam 22 R22 21 1,69 57,2 20,0 Nam 23 R23 21 1,67 56,9 20,4 Nam 24 R24 23 1,56 48,0 19,7 Nữ TB 22,3 1,63 57,4 21,5 SD 1,9 0,08 8,0 2,1 Nam: 17 Giá trị nhỏ 19,0 1,47 45,1 18,0 Nữ: Giá trị lớn 26,0 1,77 77,9 27,9 STT Mã NTN Tuổi R01 Giới tính PHỤ LỤC Các thơng số khám xét nghiệm lâm sàng 24 NTN Mã NTN R01 R02 R03 R04 R05 R06 R07 R08 R09 R10 R11 R12 Huyết áp (mmHg) 105/60 105/60 120/70 120/70 105/60 110/60 115/60 95/60 120/70 115/60 120/80 110/70 Nhịp tim (lần/phút) 72 68 74 72 68 68 70 66 76 72 76 70 Nhịp thở (lần/phút) 18 17 18 18 18 17 17 17 17 18 17 17 Thân nhiệt (oC) 36,5 36,7 36,8 36,6 36,5 36,9 36,5 36,5 36,6 36,8 36,7 36,7 WBC (G/L) 5,9 6,7 4,3 8,4 5,9 5,9 4,9 7,6 6,4 6,6 5,4 5,4 RBC (T/L) 5,48 5,13 5,56 5,29 4,59 5,77 4,95 4,25 5,15 5,38 5,24 4,81 Hb (g/dL) 133 155 167 155 137 155 152 135 153 141 157 150 HCT (L/L) 0,414 0,451 0,468 0,463 0,415 0,456 0,459 0,399 0,449 0,439 0,470 0,439 PLT (G/L) 311 221 205 242 361 227 297 337 319 267 261 333 AST (U/L) 17,2 22,2 40,3 29,8 17,7 18,2 28,6 27,6 35,7 26,0 24,1 16,8 ALT (U/L) 12,0 22,6 56,5 28,5 9,8 8,9 35,0 15,2 21,9 51,6 27,5 7,2 Ure (mmol/L) 4,5 4,5 4,0 5,4 4,4 4,6 4,2 4,4 4,4 3,9 3,1 3,6 Creatinin ( mol/L) 65 92 96 87 67 89 90 65 95 97 79 84 Chỉ số Glucose (mmol/L) 4,26 4,74 4,42 4,17 4,35 4,27 4,50 3,84 5,16 4,47 4,37 3,97 HbsAg (-) - - - - - - - - - - - - HIV (-) - - - - - - - - - - - - HCV Ab (-) - - - - - - - - - - - - R13 R14 R15 R16 R17 R18 R19 R20 R21 R22 R23 R24 Huyết áp (mmHg) 105/60 105/60 115/60 95/60 130/70 120/70 100/60 110/60 110/60 115/60 100/60 100/70 Nhịp tim (lần/phút) 64 68 78 72 74 72 66 70 74 70 70 68 Nhịp thở (lần/phút) 18 18 17 18 18 18 17 18 18 18 18 17 Thân nhiệt (oC) 36,5 36,3 36,9 36,2 36,5 36,4 36,3 36,5 36,5 36,6 36,8 36,6 WBC (G/L) 5,9 5,8 5,4 4,8 6,8 6,4 5,0 6,6 5,5 5,7 7,4 6,1 RBC (T/L) 4,35 5,40 5,35 3,93 4,95 5,41 4,57 5,26 5,83 5,58 5,12 4,04 Hb (g/dL) 135 148 161 114 144 162 131 161 163 164 151 130 HCT (L/L) 0,412 0,450 0,462 0,335 0,456 0,482 0,402 0,495 0,463 0,501 0,438 0,381 PLT (G/L) 246 248 192 298 187 198 368 239 283 299 292 205 AST (U/L) 18,9 23,7 23,0 23,1 22,1 13,8 23,2 19,6 28,2 23,2 21,0 26,6 Mã NTN Chỉ số ALT (U/L) 8,9 8,7 13,0 9,1 8,5 11,7 15,2 16,0 42,1 9,3 18,3 22,7 Ure (mmol/L) 4,8 2,9 3,0 4,6 3,8 3,9 4,1 3,6 4,0 3,4 5,1 4,2 Creatinin ( mol/L) 65 80 87 68 90 80 65 96 81 100 86 63 Glucose (mmol/L) 4,61 4,50 4,18 4,15 4,13 4,61 4,17 4,13 4,25 4,31 4,46 5,01 HbsAg (-) - - - - - - - - - - - - HIV (-) - - - - - - - - - - - - HCV Ab (-) - - - - - - - - - - - - PHỤ LỤC Đường cong biểu diễn nồng độ RC theo thời gian NTN Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit Thang số học Thang logarit BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI THU PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG THUỐC NANG CỨNG SNEDDS ROSUVASTATIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2021 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI THU PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG THUỐC NANG CỨNG SNEDDS ROSUVASTATIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2021 ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI THU PHƯƠNG Mã sinh viên: 1601613 ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG THU? ??C NANG CỨNG SNEDDS ROSUVASTATIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn : PGS TS Vũ Thị Thu Giang ThS... tiêu chuẩn sở thu? ??c thử 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG IN VITRO Chỉ tiêu sinh khả dụng in vitro tiêu quan trọng đánh giá sinh khả dụng Đối với thu? ??c giải phóng tức thì, đánh giá độ hịa tan... 21 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.2.1 Đánh giá chất lượng thu? ??c thử thu? ??c đối chiếu 22 2.2.2 Đánh giá sinh khả dụng in vitro 23 2.2.3 Đánh giá sinh khả dụng in vivo