Bài viết bàn về việc bổ sung sorbic acid 2% giúp làm giảm > 14 lần số lượng tổng vi sinh vật hiếu khí và làm tăng hiệu lực diệt sâu khoang của NPV trong điều kiện phòng thí nghiệm và thử nghiệm trên cây đậu trồng trong chậu sau 3 tháng bảo quản. Chế phẩm NPV + sorbisc acid 2% không gây độc cho cây đậu. Mời các bạn cùng tham khảo!
KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA NỒNG ĐỘ SORBIC ĐẾN HIỆU LỰC DIỆT SÂU CỦA SPODOPTERA LITURA NUCLEOPOLYHEDROSIS Nguyễn Thị Hai, Huỳnh Nhi, Lê Đình Bảo Viện Khoa học Ứng dụng HUTECH, trường Đại học Cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh TÓM TẮT Sâu khoang sâu hại nhiều loài trồng lại mẫn cảm NPV (Nucleopolyhedrosis virus) Độc lực NPV bị giảm sau thời gian bảo quản Việc bổ sung sorbic acid 2% giúp làm giảm > 14 lần số lượng tổng vi sinh vật hiếu khí làm tăng hiệu lực diệt sâu khoang NPV điều kiện phịng thí nghiệm thử nghiệm đậu trồng chậu sau tháng bảo quản Chế phẩm NPV + sorbisc acid 2% khơng gây độc cho đậu Từ khóa: Sâu khoang (Spodoptera litura), NPV (Nucleopolyhedrosis virus), độc lực virus, sorbic acid, hiệu lực diệt sâu, tổng vi sinh vật hiếu khí ĐẶT VẤN ĐỀ Việc sản xuất NPV thể sâu hại biện pháp áp dụng rộng rãi [1] Tuy nhiên, hạn chế biện pháp tạp nhiễm vi sinh vật từ thể sâu chết Các vi sinh vật tạp nhiễm ảnh hưởng đến bền vững hiệu lực trừ sâu chế phẩm NPV nên hiệu lực diệt sâu virus bị giảm sau thời gian bảo quản [2] Các tác giả đề nghị sử dụng phương pháp li tâm bổ sung hóa chất để giảm vi sinh vật tạp nhiễm giảm mùi hôi chế phẩm [3] Tuy nhiên, việc li tâm tỏ có hiệu việc loại bỏ vi sinh vật NPV làm dịch gốc (giống) sản xuất chế phẩm, việc li tâm thường tốn thời gian công lao động dẫn đến tăng giá thành sản phẩm [3] Vì vậy, việc tìm kiếm chất bổ sung để hạn chế lây nhiễm vi sinh vật vào chế phẩm NPV strong trình bảo quản cần thiết Sorbic acid acid yếu, thuộc nhóm acid hữu cơ, thường sử dụng để hạn chế phát triển vi sinh vật bảo quản thực phẩm [4] Lasa et al, 2008 [2] cho biết, bổ sung sorbic acid vào NPV Spodoptera exigua, kéo dài thời gian bảo quản đến 18 tháng Bài báo trình kết khảo sát ảnh hưởng acid boric đến hiệu lực diệt sâu khoang Spodoptera litura NPV sau trình bảo quản VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu SLNPV phân lập định danh [5] sản xuất phịng thí nghiệm Hutech Sâu khoang bắt đồng ni phịng thí nghiệm thức ăn nhân tạo Sorbic acid xuất xứ Trung Quốc 694 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Đánh giá ảnh hưởng sorbic acid đến hiệu lực diệt sâu khoang NPV điều kiện phịng thí nghiệm Thu nhận 100 sâu chết NPV, cho vào 100ml nước cất, tiến hành đồng sâu chết thành dịch huyền phù virus thơ để làm thí nghiệm Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên gồm cơng thức: CT1: NPV 2x109 PIB/ml CT2: NPV 2x109 PIB/ml + Sorbic acid 1% CT3: NPV 2x109 PIB/ml+ Sorbic acid 2% CT4: NPV 2x109 PIB/ml + Sorbic acid 3% Sau bảo quản nhiệt độ 40C Đánh giá hiệu lực diệt sâu: Bắt sâu ngồi đồng ni sâu hóa nhộng, vũ hóa, đẻ trứng nở sâu đầu tuổi tiến hành thí nghiệm Lây nhiễm thầu dầu theo phương pháp nhúng (leaf dip) Lacey (2012) [6] với nồng độ 2x106 PIB/ml Thí nghiệm lặp lại lần, lần thử nghiệm 20 sâu 2.2.2 Định lượng tổng vi sinh vật hiếu khí Chế phẩm bảo quản nhiệt độ 40C Sau tháng, tiến hành định lượng theo TCVN 7923:2008 2.2.3 Đánh giá ảnh hưởng acid boric đến hiệu lực diệt sâu khoang NPV đậu trồng chậu Chuẩn bị chế phẩm: Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên gồm cơng thức: CT1: NPV 2x109 PIB/ml, glycerol 10% CT2: NPV 2x109 PIB/ml, glycerol 10%, Sorbic acid 1% CT3: NPV 2x109 PIB/ml, glycerol 10% , Sorbic acid 2% Rồi bảo quản 40C, vịng tháng, sau lấy để làm thí nghiệm Thử nghiệm trừ sâu đậu: Trồng đậu đen chậu bắt đầu có hoa tiến hành thả sâu tuổi 1, chậu thả 12 sâu, sau ngày, tiến hành điều tra mật độ sâu đầu tuổi có chậu tiến hành phun chế phẩm Sau xử lý 3,5 ngày tiến hành điều tra lại mật độ sâu có chậu 2.2.3 Dựa thí nghiệm 2.2.2, tiến hành đánh giá ảnh hưởng thuốc đối đậu Thời điểm quan sát 1, 3, ngày sau xử lý Cần đánh giá ảnh hưởng thuốc (nếu có) đến sinh trưởng phát triển trồng theo thang thang cấp ngành nông nghiệp [7] KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hƣởng acid boric đến hiệu lực diệt sâu khoang (Spodoptera litura) điều kiện phịng thí nghiệm NPV sau bảo quản tháng Kết nghiên cứu cho thấy, việc bổ sung acid sorbic từ – 2% không làm giảm hiệu lực trừ sâu NPV tất ngày sau lây nhiễm Tuy nhiên, tăng nồng độ lên 3% có xu hướng làm giảm hiệu lực trừ sâu NPV Nguyên nhân nồng độ bổ sung 3%, acid boric tan kém, thay đổi nhẹ pH chế phẩm làm giảm khả ăn sâu Như vậy, xét mặt hiệu lực trừ sâu, việc bổ sung sorbic 695 acid với nồng độ từ 1đến 2% không làm giảm hiệu lực diệt sâu khoang NPV Kết trùng với nghiên cứu Lasa et al (2015) tác giả chọn sorbic 1,5% để bổ sung vào NPV sâu xanh da láng Spodoptera exigua Bảng 3.1 Ảnh hưởng nồng độ sorbic acid đến hiệu lực NPV sau tháng bảo quản Hiệu lực diệt sâu ngày sau nhiễm Công thức ngày NPV (đối chứng) 45.00c 78.33b 93.33ns NPV + Sorbic 1% 60.00b 80.00ab 91.67ns NPV + Sorbic 2% 68.33a 86.67a 93.33ns NPV + Sorbic 3% 50.00c 65.00c 81.67ns CV (%) 3.2 Ảnh hƣởng việc bổ sung acid sorbic đến phát triển vi sinh vật chế phẩm Số liệu bảng 3.2 cho thấy, hiệu lực diệt sâu NPV công thức không thay đổi tổng vi sinh vật hiếu khí chế phẩm giảm đáng kể sau tháng bảo quản Tổng vi sinh vật hiếu khí cơng thức đối chứng (khơng có sobic acid) cao hẳn so với cơng thức có bổ sung sorbic acid Tổng vi sinh vật hiếu công thức không bổ sung sorbic acid lên đến 2,42 x 109 CFU/ml Trong đó, bổ sung sorbic acid với nồng độ 1%, 2% 3%, lượng vi sinh vật hiếu khí cịn tương ứng 1,71 x 109 , 1,72 x 108 2,40 x 108 CFU/ml, sai khác rõ so với đối chứng Số liệu bảng 3.2 cho thấy, tổng vi sinh vật hiếu khí thấp cơng thức có bổ sung acid boric 2% với lượng vi sinh vật hiếu khí giảm >14 lần so với khơng bổ sung Đánh gía cảm quan cho thấy, công thức bổ sung không bổ sung acid sorbic, chế phẩm có mùi nặng, cơng thức bổ sung 1% 3% có mùi đỡ cơng thức đối chứng công thức bổ sung acid sorbic 2% Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ sorbic acid đến tổng vi sinh vật hiếu khí Cảm quan mùi Cơng thức Tổng vi sinh vật hiếu khí (CFU/ml) NPV (đối chứng) 2,42 x 109 a +++ NPV + Sorbic 1% 1,71 x 109 b ++ NPV + Sorbic 2% 1,72 x 108 d + NPV + Sorbic 3% 2,40 x 108c +++ CV (%) Ghi chú: +++: Rất hôi; ++: Hôi vừa: +: Hơi Như vậy, việc bổ sung acid sorbic 2% giúp làm giảm lây nhiễm vi sinh vật nhờ làm giảm mùi sản phẩm NPV 696 3.3 Ảnh hƣởng sorbic acid đến hiệu lực diệt sâu chế phẩm NPV đậu trồng chậu Bảng 3.3 Hiệu lực diệt sâu chế phẩm sau tháng bảo quản Hiệu lực diệt sâu thời gian (%) CT 3NSP 5NSP 7NSP Đối chứng phun nước lã - - - NPV 20,40 NS 53,78 B 73,98 B NPV + sorbic acid 1% 17,22 NS NPV + sorbic acid 2% 30,83 NS 61,20 AB 76,24 A 83,95 AB 96,09 A CV (%) Ghi chú: NSP: ngày sau phun Số liệu bảng 3.3 cho thấy, ngày sau phun, hiệu lực trừ sâu khoang chế phẩm NPV đạt thấp, biến động từ 17,22 đến 30,83% Đến ngày sau phun, hiệu lực trừ sâu NPV cơng thức có bổ sung sorbic acid tăng so với không bổ sung Trong đó, hiệu lực diệt sâu NPV cơng thức bổ sung sorbic acid 2% đạt cao có ý nghĩa so với cơng thức khơng bổ sung, cịn hiệu lực trừ sâu NPV công thức bổ sung 1% cao công thức không bổ sung sai khác khơng có ý nghĩa thống kê Ở ngày sau phun, hiệu lực diệt sâu công thức tăng so với thời điểm ngày sau phun Trong đó, hiệu lực diệt sâu công thức bổ sung sorbic acid 2% đạt đến 96%, cao có ý nghĩa so với công thức không bổ sung sorbic acid (công thức không bổ sung đạt 73,98%) Tương tự ngày sau phun, hiệu lực diệt sâu công thức bổ sung sorbic acid 1% giúp tăng 10% hiệu lực diệt sâu NPV so với công thức không bổ sung sorbic acid sai khác ý nghĩa thống kê Như vậy, đậu trồng chậu, chế phẩm NPV có bổ sung acid sorbic 2% giúp trì hiệu lực trừ sâu khoang NPV 3.4 Độc tính thuốc đậu Kết theo dõi độ độc chế phẩm đậu trồng chậu thời gian từ 1- ngày sau phun cho thấy việc phun chế phẩm NPV công thức không gây độc đới với trồng Cấp độ độc chế phẩm đến đậu cấp (cây chưa có biểu ngộ độc) theo thang đánh giá cấp ngành nông nghiệp Như vậy, việc bổ sung sorbic acid không gây ngộ độc cho đậu Bảng 3.4 Độ độc thuốc đậu Cấp độc tính ngày điều tra CT 1NSP 3NSP 7NSP Đối chứng phun nước lã 1 NPV 1 NPV + sorbic acid 1% 1 NPV + sorbic acid 2% 1 697 KẾT LUẬN Trong điều kiện phòng thí nghiệm, bổ sung sorbic acid nồng độ từ 1-3% không làm giảm hiệu lực trừ sâu khoang NPV sau tháng bảo quản Bổ sung sorbic acid 2% cho hiệu tốt nhất, giúp làm giảm lượng vi sinh vật hiếu khí 14 lần so với khơng bổ sung Bổ sung sorbic acid 2% giúp trì hiệu lực diệt sâu khoang NPV đậu sau thời gian bảo quản mà không gây độc cho TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Lacey Lawrence, 2017 Microbial Control of Insect and Mite Pests 1st Edition Academic Press, pp 462 [2] Lasa R., T Williams, and P Caballero (2008) Insecticidal Properties and Microbial Contaminants in a Spodoptera exigua Multiple Nucleopolyhedrovirus (Baculoviridae) Formulation Stored at Different Temperatures Journal of Economic Entomology 101 (1), 4249 https://doi.org/10.1603/0022-0493(2008)101[42:IPAMCI]2.0.CO;2 [3] Grzywacz D., D McKinley, K A Jones, G Moawad (1997) Microbial Contamination inSpodoptera littoralisNuclear Polyhedrosis Virus Produced in Insects in Egypt Journal of Invertebrate Pathology, 69(2), 151-156, https://doi.org/10.1006/jipa.1996.4630 [4] Van Beilen J W A., Teixeira de Mattos M J., Hellingwerf K J and Brul (2014) Distinct Effects of Sorbic Acid and Acetic Acid on the Electrophysiology and Metabolism of Bacillus subtilis Appl Environ Microbiol 80(19): 5918–5926 [5] Nguyễn Thị Hai Nguyễn Hoài Hương (2015) Phân lập, đinh danh virus gây chết sau khoang Spodoptera litura (Fabr.) hiệu lực chúng Tạp chí Bảo vệ Thực vật, số năm 2015, trang 1623 [6] Lacey (2012) Manual of Techniques in Invertebrate Pathology, 2nd Edition Academic Press, pp 504 [7] TCCS 70:2013/BVTV 698 ... (2015) tác giả chọn sorbic 1,5% để bổ sung vào NPV sâu xanh da láng Spodoptera exigua Bảng 3.1 Ảnh hưởng nồng độ sorbic acid đến hiệu lực NPV sau tháng bảo quản Hiệu lực diệt sâu ngày sau nhiễm... mùi sản phẩm NPV 696 3.3 Ảnh hƣởng sorbic acid đến hiệu lực diệt sâu chế phẩm NPV đậu trồng chậu Bảng 3.3 Hiệu lực diệt sâu chế phẩm sau tháng bảo quản Hiệu lực diệt sâu thời gian (%) CT 3NSP... đổi nhẹ pH chế phẩm làm giảm khả ăn sâu Như vậy, xét mặt hiệu lực trừ sâu, việc bổ sung sorbic 695 acid với nồng độ từ 1đến 2% không làm giảm hiệu lực diệt sâu khoang NPV Kết trùng với nghiên