Bai giang cong nghe sinh hoc dong vat

• Công nghệ hỗ trợ sinh sản hay công nghệ sinh sản được hỗ trợ (ART - Assisted reproduction technology): hệ thống các quy trình kỹ thuật kết hợp với các phác đồ điều trị y học nhằm hỗ tr[r]

Chương Công nghệ hỗ trợ sinh sản

Chương Tế bào gốc nhân vơ tính động vật Chương Động vật chuyển gen

Chương Liệu pháp gen

1 Phan Kim Ngọc, Phạm Văn Phúc (2007) Công nghệ sinh học trên người động vật, Chi nhánh NXB Giáo dục, TP HCM

2 Nguyễn Mộng Hùng (2004) Công nghệ tế bào phôi động vật, NXB ĐHQG Hà Nội

3 Hoàng Kim Giao (2003) Công nghệ cấy truyền phôi gia súc, NXB KHKT, Hà Nội

4 Khuất Hữu Thanh (2010) Cơ sở công nghệ tế bào động vật và

1. Mở đầu

1. MỞ ĐẦU

1.1 Khái niệm

1. MỞ ĐẦU

1.1 Khái niệm

• Hiếm muộn, vô sinh, sinh sinh không bình thường: sai hỏng xảy giai đoạn q trình sinh sản, q trình sinh sản gặp khó khăn đình trệ

• Công nghệ hỗ trợ sinh sản hay công nghệ sinh sản hỗ trợ (ART - Assisted reproduction technology): hệ thống quy trình kỹ thuật kết hợp với phác đồ điều trị y học nhằm hỗ trợ suốt giai đoạn tiến trình sinh sản để cuối tạo cá thể

1. MỞ ĐẦU

1.2 Sơ lược lịch sử phát triển

• Từ kỷ 14, người Arap biết kích thích ngựa đực để lấy tinh trùng, sau đưa tinh trùng vào âm đạo ngựa mang thai sinh Từ khái niệm phương pháp truyền giống gián tiếp hình thành

• Năm 1763, Jacobi thụ tinh nhân tạo cho chó cá

• Năm 1780, Spallanzani: gieo tinh thành cơng cho 19 chó cái, có tới 15 thụ thai có mang từ tinh đơng lạnh

• Năm 1907: Ivanov phát triển phương pháp thụ tinh nhân tạo ngựa, bò, dê, cừu hồn chỉnh mơ hình âm đạo giả

• Năm 1959, thỏ thụ tinh ống nghiệm đời • Năm 1972, chuột đời tự phơi đơng lạnh

• Ngày 25/07/1978, bé gái (Louise Brown) đời thụ tinh ống nghiệm (Anh) Năm 1982, bé gái thứ hai (Amadine) đời Pháp

1. MỞ ĐẦU

1.2 Sơ lược lịch sử phát triển

• Trong năm 80 kỷ 20, kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm phát triển mạnh

• Năm 1984, phơi đơng lạnh rã đông để cấy vào tử cung, phát triển cho đời bé trai Zoe

Louise Brown Lesley John Brown, hai vợ chồng cố gắng thụ thai năm, khơng thành cơng ống dẫn trứng Lesley bị chặn Ngày 10 Tháng 11 năm 1977, Lesley Brown trải qua quy trình thụ tinh phát triển Patrick Steptoe Robert Geoffrey Edwards, năm 2010 ông trao Giải

Nobel Sinh lý Y khoa cho thành tựu Brown sinh vào lúc 11h47 đêm 25 tháng năm 1978 Bệnh viện Đa khoa Oldham, Oldham, sinh nhờ mổ lấy thai Cô bé sinh cân nặng 2,608 kg Bốn năm sau, em gái cô Natalie Brown, sinh nhờ thụ tinh ống nghiệm, trở thành em bé thứ bốn mươi giới sinh nhờ kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm

Louise Brown lúc nhỏ

Louise Brown khi trưởng thành 1. MỞ ĐẦU

1. Mở đầu

2. Kỹ thuật chuẩn bị giao tử

2 KỸ THUẬT CHUẨN BỊ GIAO TỬ

2.1 Chuẩn bị trứng

2.1.1 Cho trứng (oocyte donation) 2.1.2 Thu nhận đánh giá trứng

2.2 Chuẩn bị tinh trùng

2.2.1.Thu nhận tinh dịch

2.1.1 Cho trứng (oocyte donation)

2.1 Chuẩn bị trứng

Ở người:

- Được áp dụng cho trường hợp suy buồng trứng sớm, bất thường NST người mẹ, mãn kinh bệnh lý, buồng trứng đáp ứng với kích thích hay phụ nữ thất bại nhiều lần thụ tinh in vitro với trứng họ

- Kích thích buồng trứng hormon gây rụng trứng nhiều chọc hút qua siêu âm đầu dò âm đạo Số lượng trứng thu nhận nhờ kích thích, lần trung bình - 10 trứng

2.1.1 Cho trứng (oocyte donation)

2.1 Chuẩn bị trứng

Ở động vật:

- Thu nhận trứng (và tinh trùng) từ giống khác loài để thụ tinh ống nghiệm phương pháp lai tạo có hiệu cao

2.1.2 Thu nhận đánh giá trứng

2.1 Chuẩn bị trứng

- Thu nhận trứng: từ ống dẫn trứng sau rụng, từ nang trứng nội soi từ nang trứng, buồng trứng động vật vừa bị giết mổ - Ở động vật sống: cần kích

2.1.2 Thu nhận đánh giá trứng

2.1 Chuẩn bị trứng

- Phương pháp thu nhận trứng từ ống dẫn trứng:

Giải phẫu để lộ ống dẫn trứng, bơm dung dịch sinh lý để rửa ống dẫn trứng → tìm trứng dung dịch rửa phân loại trứng

Phải kích thích để trứng chín rụng đồng loạt hormone sinh dục -Các phương pháp thu trứng từ buồng trứng

+ Kỹ thuật nội soi – siêu âm: siêu âm tìm nang trứng hút trứng

+ Nội soi qua thành bụng giải phẫu để lộ buồng trứng, động

vật giết mổ phải thu nhân buống trứng sau giết mổ

+ Chọc hút: hút dịch + Rạch – múc

2.1.2 Thu nhận đánh giá trứng

2.1 Chuẩn bị trứng

Đánh giá trứng:

2 KỸ THUẬT CHUẨN BỊ GIAO TỬ

2.1 Chuẩn bị trứng

2.1.1 Cho trứng (oocyte donation) 2.1.2 Thu nhận đánh giá trứng

2.2 Chuẩn bị tinh trùng

2.2.1.Thu nhận tinh dịch

2.2.1.Thu nhận tinh dịch

2.2 Chuẩn bị tinh trùng

• Nguồn thu: tinh hồn, phó tinh hồn qua đường phóng tinh hay phẫu thuật trực tiếp

• Phương pháp:

- Kích thích dịng điện nhẹ - Kích thích tay kết hợp với giá nhảy

- Dùng âm đạo giả (phổ biến nhất)

• Thời điểm lấy tinh tốt nhất: sau thời điểm giao hợp xuất tinh 3-5 ngày

2.2.2 Đánh giá tinh dịch tinh trùng

2.2 Chuẩn bị tinh trùng

- Xác định thể tích tinh dịch: pipette hoặc syringe chia vạch.

1. Mở đầu

2. Kỹ thuật chuẩn bị giao tử

3. Kỹ thuật hỗ trợ thụ tinh

3 Kỹ thuật hỗ trợ thụ tinh

3.1 Thụ tinh nhân tạo (Artificial insemination – AI)

• Thụ tinh nhân tạo (hay còn gọi dẫn tinh nhân tạo): những kỹ thuật đưa tinh trùng vào quan sinh dục của cái

• Phân loại AI: dựa vào vị trí đưa tinh trùng

3.1 Thụ tinh nhân tạo (Artificial insemination – AI)

• Phân loại AI: dựa vào nguồn gốc tinh trùng

- Dẫn tinh nhân tạo với tinh trùng người chồng (Artificial

insemination with husband’s sperm - AIH): tinh trùng người chồng

- Dẫn tinh tinh trùng trị liệu (Therapeutic donor insemination

Thu trứng

Thu tinh dịch

Trứng

Tinh trùng

Thụ tinh

Hợp tử Phôi nang

Phôi tiếp tục phát triển TRONG ỐNG NGHIỆM 3.1 Thụ tinh nhân tạo (Artificial insemination – AI)

Quy trình thụ tinh nhân tạo bị Bị Elite

3.1 Thụ tinh nhân tạo (Artificial insemination – AI)

• Ưu điểm thụ tinh nhân tạo: - Cải tạo di truyền

- Phát huy tối đa hiệu sử dụng tinh trùng - Tinh trùng có thể bảo quản sử dụng lâu dài

- Giảm bệnh truyền nhiễm qua đường sinh dục - Hiệu kinh tế cao

• Hạn chế thụ tinh nhân tạo:

- Phải thực xác chu kỳ động dục động vật cái

- Phải tập huấn cho người thao tác

• Thụ tinh: kết hợp tinh trùng với trứng để tạo hợp tử Hợp tử phát triển thành phôi sau phát triển thành thể Q trình thường diễn trong cơ thể mẹ

• Thụ tinh in vitro: quá trình kết hợp trinh trùng và trứng để tạo hợp tử, thực bên ngoài cơ thể mẹ.

1. Mở đầu

2. Kỹ thuật chuẩn bị giao tử 3. Kỹ thuật hỗ trợ thụ tinh

4 Cấy chuyển phôi

4.1 Thu nhận phôi 4.2 Chuyển phôi

4 Cấy chuyển phơi

4.1 Thu nhận phơi

• Phương pháp phẫu thuật: thu nhận phôi sau mổ vật

hoặc giết vật, cắt lấy phận sinh dục bên để dội rửa lấy phôi phịng thí nghiệm

• Phương pháp khơng phẫu thuật:

- Sử dụng ống thông Foley cỡ 18-24 để lấy dung dịch từ tử cung - Dội rửa cung dịch tử cung

- Để lắng dung dịch dội rửa 20-30 phút, loại bỏ phần bên - Tách phôi vào đĩa petri

4 Cấy chuyển phơi

4.1 Chuyển phơi

• Mục đích: tăng khả sinh sản • Phương pháp:

- Phương pháp phẫu thuật

4 Cấy chuyển phôi

4.1 Chuyển phôi

Phương pháp không phẫu thuật:

-Phơi đưa vào cọng rơm có môi trường giữ phôi

-Lắp cọng rơm vào súng chuyển phôi

-Đưa súng chuyển phôi vào đến 2/3 sừng tử cung phía với buồng trứng mang thể vàng

-Đẩy từ từ phôi vào sừng tử cung

4 Cấy chuyển phôi

4.2 Các thao tác phôi 4.2.1 Chia tách phôi

-Tạo nhiều phôi từ phôi ban đầu, tạo dịng vơ tính - Có phương pháp: dùng kim dùng dao cắt

4.2.2 Sinh thiết phôi

-Rút ít tế bào từ phơi để làm xét nghiệm phôi 4.2.3. Chuyển ghép nhân

RobertGeoffrey GiảiNobel Sinh lý Y khoa mổ lấy thai