Giới thiệu về melamine_word

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC ˜˜˜ TÊN ĐỀ TÀI Phân tích hàm lượng melamine sữa Giáo viên hướng dẫn: PHÙNG VÕ CẨM HỒNG Sinh viên thực hiện: PHẠM VĂN PHÁP TRƯƠNG THANH THAO NGUYỄN THỊ THẢO NHI ĐẶNG THỊ MỸ NGỌC VÕ THỊ ĐIỆP NGUYỄN MINH TRỌNG PHẠM CAO THĂNG LÊ NGỌC PHÚ I TỔNG QUAN VỀ MELAMINE Melamine gì? -Melamine hợp chất hữu ,màu trăng pha lê khó hịa tan nước Tên khoa học melamine 1,3,5-triazin 2,4,6 – triamine có cịn gọi cyanuramide hay cyanurotriamine với cấu trúc hóa học gồm nguyên tử hydro, nguyên tử carbon nguyên tử tritrogen Trọng lượng phân tử melamine 126, 66% nitrogen CTTQ: C6H6N6 Cơng thức cấu tạo: Sự đời phương pháp tổng hợp -Nhà hóa học người Đức Liebig người tổng hợp melamine vào năm 1834 Ban đầu, calcium cyanamide tiến hành biến đổi thành dicyandiamine, sau đốt nóng nhiệt độ tan chảy thành melamine Tuy nhiên ngày nhà máy sản xuất ure sử dụng ure phản ứng sau để tạo melamine Ure sử dụng công nghiệp để sản xuất melamine Phương trình hóa học sau: 6(NH2)2CO → C3H6N6 + 6NH3 + 3CO2 Trước hết, urê phân tách tạo axit cyanic (HNCO) (phản ứng cần nhiệt độ cao): (NH2)2CO → HCNO + NH3 Tiếp theo phản ứng polyme hóa axit cyanic tạo dioxit cácbon melamine (phản ứng tỏa nhiệt): 6HCNO → C3H6N6 + 3CO2 -Quy trình kết tinh rửa melamine tạo lượng lớn nước thải Thông thường nước thải thành dạng rắn ( có chứa đến 75% melamine) thuận tiện an tồn quản lí xử lí Tại melamine lại cho vào sữa: Ở Trung Quốc, nơi phát thấy gian dối melamin, người ta thêm nưóc vào sữa để tăng lượng sản phẩm Do pha lỗng nên sữa có hàm lượng protein thấp Các công ty thu mua sữa tươi thường kiểm tra hàm lượng protein cách xác định hàm lượng nitơ, để che giâu gian dối, người ta cho melamin vào sữa để tăng hàm lượng nitơ nguyên liệu 4 Độc tính melamine: -Bản thân melamine khơng có độc tính liều lượng thấp kết hợp với axit cyanuric tạo thành muối tinh thể sec đóng ống thận nhỏ gây bít tắt, sỏi thận, ảnh hưởng đến tạo nước tiểu gây suy thận, tử vong -Một số nghiên cứu động vật cho thấy melamine có khả gây ung thư -Melamine cịn có khả hủy hoại hệ thống miễn dịch người Hình 1.1: Melamine (màu xanh) dễ dàng kết hợp với axit cyanuric (màu đỏ) qua liên kết hydro tạo kiểu liên kết phân tử hình mái ngói, lắng đọng gây sỏi thận -Triệu chứng nhiễm độc melamine: bị kích thích da, mắt, tiểu máu, tiểu khó khơng tiểu được, có dấu hiệu nhiễm trùng tiểu (sốt, đau lưng, tiểu gắt, tiểu giắt), huyết áp tăng -Cách xử lí sữa bị nhiễm melamine: +Tiêu hủy sở xử lí chất thải nguy hại tài ngun mơi trường cấp phép +Xử lí cách sản xuất gạch khoảng 105USD/tấn (rẻ 70% so với đốt) +Chôn sữa bị nhiễm xuống đất số lượng khống chế để ngăn chặn nguy ô nhiễm đất Quy định sử dụng melamine: -Nồng dộ an toàn cho sữa thực phẩm: theo tiêu chuẩn an toàn thực phẩm hàm lượng melamine an toàn tối đa 0,15mg/kg với sữa nước dành cho trẻ em, 1mg/kg với sữa bột dành cho trẻ em 2,5mg/kg với thức ăn cho động vật thực phẩm khác Đó tiêu chuẩn Ủy ban luật quốc tế chất lượng an tồn thực phẩm LHQ (CAC) cơng bố ngày 5/7/2012 -Liều lượng melamine an toàn dung nạp cho người: chuyên gia an toàn thực phẩm giới thảo luận trí nồng độ melamine dung nạp ngày chấp nhận (TDI) 0,5mg/kg cân nặng Ở Mĩ, cục quản lí thực phẩm dược phẩm (FDI) đề nghị TDI 0,63mg/kg cân nặng Khái quát từ tiêu chuẩn có nghĩa 1kg cân nặng người hấp thụ 0,5mg melamine ngày II Phân tích melamine sắc ký lỏng hiệu cáo( HPLC) -Phương pháp sắc ký lỏng phương pháp phát vào năm 1903 Đây phương pháp vật lý để phân tách, phân ly, phân tích chất dựa vào phân bố khác chúng pha động pha tĩnh -Tại ta lại chọn phương pháp sắc ký lỏng để phân tích mealmine? +Vì sắc kí lỏng phương pháp thuận lợi để định lượng chất hỗn hợp chất tách khỏi chất khác Phương pháp sử dụng rộng rãi phân tích lương thực thực phẩm xác định hóa chất bị cấm, chất tồn dư kiểm sốt chất lượng, mang lại độ xác cao thời gian tiến hành ngắn thỏa mãn tiêu chí: •Khơng tốn lao động •Hiệu •Giá rẻ •Giới hạn phát thấp •Phương pháp đơn giản -Các phương pháp sắc ký dùng để phân tích melamine gồm: +Sắc kí khí ghép khối phổ (Gas chromatography-Mass Spectomatry, GC-MS): Là phương pháp xem dấu gạch nối hai kĩ thuật phân tích Là kết hợp hai kỹ thuật để tạo thành phương pháp phân tích hỗn hợp hóa chất +Sắc kí lỏng ghép khối phổ (LC-MS-MS): Đây phương pháp đáng tin cậy phân tích melamine nồng độ thấp lại yêu cầu thiết bị phân tích phức tạp +Sắc kí lỏng cao áp (HPLC): Được Horvath.C tạo năm 1967 với ưu điểm vượt trội áp suất cao, độ phân giải cao, vận tốc sắc ký nhanh… Cho nên phương pháp áp dụng nhiều lĩnh vực dược phẩm, sinh lý, hợp chất vô hữu cơ, loại dư lượng malamine HPLC dựa vào pha động (dạng lỏng) để phân tách phần trộn lẫn vào nhau, thành phần hịa tan vào dung mơi để thu nhiều cấu tử khác mà phương pháp phân tích khác khơng thực dễ dàng phân tích số lượng lớn chất hóa học trộn lẫn vào -Bình chứa dung mơi (được gọi pha động, vật chất bên di chuyển) +Bơm áp suất cao (hệ thống phân phối dung môi quản lý dung môi) sử dụng để tạo đo tốc độ dòng chảy xác định pha động, thường ml/phút +Dụng cụ tiêm mẫu (quản lý tiêm mẫu lấy mẫu tự động) đưa (tiêm) mẫu vào dịng pha động liên tục mang mẫu vào cột HPLC +Cột HPLC chứa vật liệu sắc ký cần thiết để thực việc tách Vật liệu gọi pha tĩnh giữ cố định phần cứng cột +Máy dò cần thiết để kiểm tra dải hợp chất tách biệt chúng rửa giải từ cột HPLC (hầu hết hợp chất khơng có màu, khơng thể nhìn thấy chúng mắt) +Máy tính ghi liệu điều khiển chung hệ thống.LC: *Tiến hành phân tích: -Chuẩn bị hóa chất mẫu phân tích: +Sữa bột sữa lỏng +Chất chuẩn: melamine(99%) +Dung môi; methanol +Dung môi rửa giải: Triflouroacetic methanol +Nước chuẩn bị cho việc chuẩn bị pha động pha loãng lọc hệ thống Q-Pod Millipore -Hệ thống sắc ký: Đầu dò UV, cột C18 (150mm x 3,2mm ID, kích thước hạt µm) -Một số số liệu cho việc định lượng: -Pha dung dịch: +Dung môi: Dung môi 50% melamine chuẩn bị cách pha thể tích methanol nước -Dung dịch chuẩn Melamine: +Cân xác 100 mg melamine vào bình định mức 100 mL, hòa tan với Methanol 50% cách rung bể rung siêu âm 30 phút Lên thể tích 100 mL thu dung dịch có nồng độ melamine 1000 µg/mL +Pha lỗng 5mL melamine (1000 µg/mL) 50 ml 50% methanol để nồng độ melamine 100 µg/mL +Pha lỗng tiếp 5mL melamine 100 µg/mL 50 ml methanol 50% để nồng độ melamine 10 µg/mL -Chuẩn bị mẫu: +Cho 10 ml (mẫu dạng lỏng) 1,0 g (mẫu khơ) vào bình định mức 100 ml Mẫu pha với 10 ml dung dịch melamine 1000 µg/mL, pha lỗng với 50 ml dung dịch methanol 50% rung siêu âm 30 phút Sau làm lạnh nhiệt độ phịng, lên thể tích 100 ml dung dịch methanol 50% thu dung dịch hỗn hợp với nồng độ melamine 100 µg/mL +Cho dung dịch mẫu thu vào ống li tâm ly tâm ( ≥ 3200 rpm) lấy phần dung dịch phía ống (5 ml) chuyển sang bình định mức 50ml, lên thể tích 50 ml dung dịch methanol 50% Mẫu lọc qua lọc 0.45 µm (Acrodisc, 25mm, màng Nylon) Nghiên cứu dịch lọc lọc hấp thụ melamine mức sau: 22% (cho 1ml ban đầu), 10% (2 mL), prime seal wash->start (thời gian tiến hành 2-5 phút)->halt>close->prime needle wash->start( 30-45s)->close->exit -Tiếp theo ta tiến hành mồi dung môi xylanh.: +Dung môi:Vào menu status->đặt kênh dung môi ta muốn mồi->direct functions->wet prime->enter( Ta tiến hành tương tự cho kênh tiếp theo) +Xylanh:Vào menu status->direct functions->purge injector->enter -Sau tiến hành bật xylanh ta tiến hành hoàn thành cho hệ thống cách cân hệ thống cân cột ( tốc độ dòng, áp suất hệ thống, thánh phần kênh dung môi, nhiệt độ cột) -Sau hoàn thành việc chuẩn bị ta hệ thống cân bằng( thời giân cân 30-60 phút) Trong chờ hệ thống cân ta đăng nhập phần mềm để kiểm tra kết nối hệ thống máy tính phần mềm Empower -Configure the system->nodes->chọn thiết bị->chuột phải->properties-> instrument( dịng YES ta tiến hành chạy mẫu, có dịng NO ta phải tiến hành khởi động lại phần mềm hệ thống) -Sau xác nhận hệ thống kết nối với phần mềm ta chuyển qua chờ Empower để tiến hành run samples để chạy mẫu->chọn nơi lữu trữ liệu III Kết luận -HPLC phương pháp vô hiệu với hiệu cao - Kết phân tích mẫu Melamine sở liệu giúp quan chức tiếp tục theo dõi, giám sát thời gian tới nhằm đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm cho người sử dụng -Kết phân tích mẫu Melamine sở liệu giúp quan chức tiếp tục theo dõi, giám sát thời gian tới nhằm đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm cho người sử dụng  ... nồng độ melamine 10 0 µg/mL +Pha lỗng tiếp 5mL melamine 10 0 µg/mL 50 ml methanol 50% để nồng độ melamine 10 µg/mL -Chuẩn bị mẫu: +Cho 10 ml (mẫu dạng lỏng) 1, 0 g (mẫu khơ) vào bình định mức 10 0 ml... 10 0 mg melamine vào bình định mức 10 0 mL, hòa tan với Methanol 50% cách rung bể rung siêu âm 30 phút Lên thể tích 10 0 mL thu dung dịch có nồng độ melamine 10 00 µg/mL +Pha lỗng 5mL melamine (10 00...I TỔNG QUAN VỀ MELAMINE Melamine gì? -Melamine hợp chất hữu ,màu trăng pha lê khó hịa tan nước Tên khoa học melamine 1, 3,5-triazin 2,4,6 – triamine có cịn gọi cyanuramide