Chọn lọc và nuôi cấy một số chủng tảo dunaliella dọc bờ biển một số tỉnh miền trung nam bộ cho hàm lượng carotenoid cao

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VÕ HỒNG TRUNG CHỌN LỌC VÀ NUÔI CẤY MỘT SỐ CHỦNG TẢO DUNALIELLA DỌC BỜ BIỂN MỘT SỐ TỈNH MIỀN TRUNG – NAM BỘ CHO HÀM LƯỢNG CAROTENOID CAO Ngành: Sinh lý học Thực vật Mã số ngành: 62 42 30 05 Phản biện 1: PGS TS Trương Thị Đẹp Phản biện 2: TS Lê Thị Thúy Ái Phản biện 3: TS Đào Thanh Sơn Phản biện độc lập 1: TS Nguyễn Thị Thanh Xuân Phản biện độc lập 2: TS Lê Thị Thúy Ái NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS TS BÙI VĂN LỆ TS TRẦN NGỌC ĐỨC Tp Hồ Chí Minh – Năm 2017 LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn thật chân thành đến:  Giáo viên hướng dẫn – PGS TS Bùi Văn Lệ TS Trần Ngọc Đức Thầy tận tâm bảo, hướng dẫn, truyền đạt kinh nghiệm quý báu nghiên cứu sống tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án  Cố GS TS Mai Trần Ngọc Tiếng – Người sáng lập môn Sinh lý Thực vật truyền đạt kiến thức vơ bổ ích cho tơi làm hành trang bước vào đường nghiên cứu  PGS TS Bùi Trang Việt – Nguyên trưởng Bộ môn, Trưởng Chuyên ngành Sinh lý thực vật, tận tình truyền đạt tri thức khoa học quý báu, nhiệt tình cố vấn, dẫn lúc khó khăn suốt trình học tập nghiên cứu  PGS TS Võ Thị Bạch Mai tất quý Thầy tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức tạo niềm tin vững cho tơi tự tin bước vào q trình nghiên cứu hồn thành luận án  TS Nguyễn Thanh Hương Trưởng Bộ môn, Trưởng Chuyên ngành Sinh lý học thực vật, TS Lê Thị Trung, TS Đỗ Thường Kiệt, TS Nguyễn Thanh Hiền quý Thầy, Cô, Anh, Chị em sinh viên môn Sinh lý thực vật trường Đại học Khoa học Tự nhiên nhiệt tình giúp đỡ trang thiết bị thí nghiệm tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tiến hành thí nghiệm mơn  BGH Trường Đại học Nguyễn Tất Thành, GS TS Nguyễn Văn Thanh, Trưởng Khoa Dược, Trường Đại học Nguyễn Tất Thành tạo điều kiện thuận lợi cho công tác thực luận án  BGH Trường Đại học Quốc tế, Khoa Công nghệ Sinh học, Trường đại học Quốc tế, Đại học Quốc gia TPHCM tạo điều kiện thuận lợi cho làm nghiên cứu Khoa Phịng thí nghiệm Cơng nghệ Tảo  ThS Mai Thủy Trúc, CN Lưu Đức Phúc, CN Đoàn Thị Như Nguyện, CN Nguyễn Thị Lệ Sương, CN Nguyễn Cao Nguyễn em sinh viên Khoa Công nghệ Sinh học – Trường Đại học Quốc tế chia sẻ khó khăn giúp đỡ tơi nhiệt tình trình thực đề tài  ThS Hồ Thị Mỹ Linh – Phịng thí nghiệm Sinh lý thực vật trường Đại học Sư phạm, Thành phố Hồ Chí Minh, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi làm việc phịng thí nghiệm  Các Anh, Chị, Em Khoa Dược, Trường Đại học Nguyễn Tất Thành giúp đỡ, động viên chia sẻ kinh nghiệm q báu để tơi hồn thành tốt cơng việc  Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Cha, Mẹ, Anh, Chị, Em, Vợ gia đình Bạn bè ln theo sát, động viên, ủng hộ mặt, chỗ dựa cho tự tin học tập, thực đề tài sống Tp Hồ Chí Minh, tháng 12 năm 2017 Võ Hồng Trung MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 KHU VỰC NGHIÊN CỨU 1.2 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.3 CẤU TRÚC TẾ BÀO DUNALIELLA 1.4 SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA DUNALIELLA 1.5 CÁC CHẤT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC Ở VI TẢO 1.6 SINH TỔNG HỢP CAROTENOID Ở DUNALIELLA 1.7 CÁC ĐIỀU KIỆN ỨC CHẾ ẢNH HƯỞNG LÊN SỰ TỔNG HỢP CAROTENOID 12 1.8 MỐI QUAN HỆ GIỮA CON ĐƯỜNG TỔNG HỢP CAROTENOID VÀ LIPID .19 1.9 VAI TRÒ CỦA CAROTENOID 23 1.10 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ VI TẢO TRƯỚC ĐÂY 23 1.10.1 Các nghiên cứu vi tảo nước 23 1.10.2 Các nghiên cứu vi tảo Việt Nam 24 CHƯƠNG - VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP 27 2.1 PHƯƠNG PHÁP THU MẪU 27 2.1.1 Vị trí thu mẫu 27 2.1.2 Phương pháp thu mẫu 28 2.2 PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP 29 2.3 PHƯƠNG PHÁP CHỌN LỌC VÀ ĐỊNH DANH DUNALIELLA 31 2.3.1 Các chủng Dunaliella salina ngoại nhập 31 2.3.2 Chọn lọc chủng Dunaliella có khả tích lũy carotenoid 31 2.3.3 Xác định Dunaliella dựa hình thái, sinh lý sinh hóa 32 2.3.4 Xác định Dunaliella dựa đoạn ADN ITS 34 2.4 CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 35 2.4.1 Quan sát hình thái phát huỳnh quang tế bào 35 2.4.2 Xác định mật độ tế bào .35 2.4.3 Xác định tốc độ tăng trưởng đặc hiệu suất tế bào .35 i 2.4.4 Xác định hàm lượng carotenoid tổng diệp lục tố 35 2.4.5 Xác định khả chống oxy hóa 36 2.4.6 Xác định hàm lượng phenolic tổng 36 2.4.7 Xác định sinh khối tế bào 37 2.4.8 Đánh giá khả tích lũy lipid tế bào Dunaliella 37 2.5 PHƯƠNG PHÁP BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM 37 2.5.1 Chọn lọc môi trường tự nhiên bổ sung dinh dưỡng cho tăng trưởng Dunaliella 37 2.5.2 Nghiệm thức bổ sung dinh dưỡng cho môi trường MD4 nuôi Dunaliella 38 2.5.3 Khảo sát độ muối cường độ ánh sáng cho tăng trưởng Dunaliella 39 2.5.4 Đánh giá sơ hàm lượng carotenoid chủng Dunaliella salina 40 2.5.5 Chọn lọc chủng Dunaliella salina tích lũy carotenoid cao, đánh giá khả chống oxy hóa hàm lượng phenolic 40 2.5.6 Đo cường độ quang hợp hô hấp tế bào chủng Dunaliella salina 42 2.5.7 Ảnh hưởng ánh sáng xanh dương lên tăng trưởng Dunaliella salina 44 2.5.8 Ảnh hưởng ánh sáng UV 44 2.6 PHÂN TÍCH DỮ LIỆU 45 CHƯƠNG –KẾT QUẢ - THẢO LUẬN 46 3.1 KẾT QUẢ .46 3.1.1 Chọn lọc môi trường tự nhiên bổ sung dinh dưỡng cho tăng trưởng Dunaliella 46 3.1.2 Phân lập chọn lọc vi tảo lục Dunaliella 58 3.1.3 Xác định số chủng Dunaliella Việt Nam 59 3.1.4 Khảo sát độ muối ánh sáng cho tăng trưởng chủng Dunaliella salina 67 3.1.5 Đánh giá sơ hàm lượng carotenoid chủng Dunaliella salina 73 ii 3.1.6 Chọn lọc chủng Dunaliella salina tích lũy carotenoid cao .80 3.1.7 Khả chống oxy hóa hàm lượng phenolic tổng chủng Dunaliella salina 83 3.1.8 Cường độ quang hợp hô hấp tế bào chủng Dunaliella salina 86 3.1.9 Ảnh hưởng ánh sáng xanh dương lên tăng trưởng Dunaliella salina 89 3.1.10 Ảnh hưởng ánh sáng UV 95 3.2 THẢO LUẬN 106 3.2.1 Chọn lọc môi trường tự nhiên bổ sung dinh dưỡng cho tăng trưởng Dunaliella 106 3.2.2 Chọn lọc xác định chủng Dunaliella Việt Nam .112 3.2.3 Khảo sát độ muối ánh sáng cho tăng trưởng Dunaliella salina.117 3.2.4 Đánh giá sơ hàm lượng carotenoid chủng Dunaliella salina 120 3.2.5 Chọn lọc chủng Dunaliella salina tích lũy carotenoid cao .121 3.2.6 Khả chống oxy hóa hàm lượng phenolic tổng chủng Dunaliella salina 126 3.2.7 Cường độ quang hợp hô hấp tế bào chủng Dunaliella salina 127 3.2.8 Ảnh hưởng ánh sáng xanh dương lên tăng trưởng Dunaliella salina 130 3.2.9 Ảnh hưởng ánh sáng UV 132 CHƯƠNG – KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .139 4.1 KẾT LUẬN 139 4.2 KIẾN NGHỊ 140 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ 141 TÀI LIỆU THAM KHẢO 142 PHỤ LỤC iii DANH MỤC ẢNH Ảnh 2.1 Ván bọt có màu bề mặt đáy bùn ruộng muối 28 Ảnh 2.2 Hộp nhựa lưu trữ mẫu tảo thu thập vị trí thu mẫu 29 Ảnh 3.1 Các mẫu quét lưu trữ môi trường thạch 58 Ảnh 3.2 Tảo chủng khuẩn nuôi môi trường lỏng sau khoảng 20 ngày nuôi cạn kiệt dinh dưỡng 58 Ảnh 3.3 Hình thái kích thước tế bào Dunaliella thuộc hai nhóm .59 Ảnh 3.4 Hình thái tế bào 23 chủng Dunaliella phân lập chủng D salina ngoại nhập (CCAP19/18 bardawil DCCBC 15) phát quang lipid trước sau ức chế muối 3,5M NaCl 60 Ảnh 3.5 Kết ly trích ADN kiểm tra điện di gel agarose 64 Ảnh 3.6 Kết PCR gel agarose 23 chủng Dunaliella nội 65 Ảnh 3.7 Hình thái tế bào D salina trước sau ức chế, phát quang lipid sau 24 ngày ức chế kết hợp muối 4M NaCl ánh sáng 150 µmol photon/m2/s 74 Ảnh 3.8 Hình thái tế bào chủng D salina nội chủng ngoại nhập điều kiện ức chế khác .81 Ảnh 3.9 Hình thái tế bào chủng D salina cường độ ánh sáng xanh khác 90 Ảnh 3.10 Hình thái tế bào chủng D salina nuôi cường độ ánh sáng xanh thích hợp ức chế ánh sáng trắng 500 μmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV-5 W/m2 liên tục sau ngày nuôi cấy 96 iv DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Tế bào Dunaliella bardawil chụp kính hiển vi điện tử Hình 1.2 Đường cong tăng trưởng (sinh khối, Cx) vi tảo nuôi cấy mẻ thay đổi tốc độ tăng trưởng (µ) sáu giai đoạn tăng trưởng điển hình Hình 1.3 Sơ đồ sinh tổng hợp isoprenoid vi tảo Dunaliella salina 10 Hình 1.4 Các đường tổng hợp carotenoid sinh vật tự dưỡng tạo oxy 11 Hình 1.5 Đáp ứng tổng hợp glycerol điều kiện ức chế thẩm thấu 15 Hình 1.6 Chu trình glycerol Dunaliella .16 Hình 1.7 Các chế đáp ứng tế bào D salina ức chế mơi trường 18 Hình 1.8 Sơ đồ ảnh hưởng ức chế môi trường lên sản xuất lipid carotenoid .22 Hình 2.1 Địa điểm thu mẫu tỉnh dọc bờ biển Trung-Nam Bộ, Việt Nam .27 Hình 2.2 Mơ hình vợt lưới phiêu sinh vật .28 Hình 2.3 Các bước phân lập mẫu tảo chủng, khuẩn phương pháp quét mẫu môi trường thạch 30 Hình 2.4 Các bước chọn lọc chủng Dunaliella tích lũy carotenoid 31 Hình 2.5 Các giai đoạn thực thí nghiệm đánh giá ức chế muối chủng Dunaliella .32 Hình 2.6 Sơ đồ bước phân tích trình tự ADN chủng Dunaliella 34 Hình 2.7 Các giai đoạn thực thí nghiệm đánh giá sơ hàm lượng carotenoid chủng D salina 40 Hình 2.8 Các giai đoạn thực thí nghiệm chọn lọc D salina nội tích lũy carotenoid cao, đánh giá khả chống oxy hóa hàm lượng phenolic tổng .42 Hình 2.9 Các giai đoạn thực thí nghiệm ức chế ánh sáng UV-A D salina 45 Hình 3.1 Mật độ sinh khối tế bào D bardawil DCCBC 15 nuôi sáu môi trường khác .46 Hình 3.2 Tốc độ tăng trưởng D bardawil DCCBC 15 nuôi sáu môi trường khác .47 v Hình 3.3 Hàm lượng diệp lục tố a diệp lục tố tổng D bardawil DCCBC 15 nuôi sáu môi trường khác 49 Hình 3.4 Hàm lượng carotenoid D bardawil DCCBC 15 nuôi sáu môi trường khác .50 Hình 3.5 Khả chống oxy hóa D bardawil DCCBC 15 ni sáu mơi trường khác .50 Hình 3.6 Mật độ tế bào D bardawil DCCBC 15 13 nghiệm thức bổ sung dinh dưỡng khác .53 Hình 3.7 Tốc độ tăng trưởng trước (ngày 0-8) (a) sau (ngày 8-18) (b), suất tế bào (ngày 8-18) (c) D bardawil DCCBC 15 13 nghiệm thức bổ sung dinh dưỡng khác .54 Hình 3.8 Hàm lượng diệp lục tố tổng D bardawil DCCBC 13 nghiệm thức bổ sung dinh dưỡng khác 56 Hình 3.9 Hàm lượng carotenoid D bardawil DCCBC 15 13 nghiệm thức bổ sung dinh dưỡng khác 57 Hình 3.10 Đồ thị tăng trưởng Dunaliella xanh (D sp1), Dunaliella vàng (D sp2) chủng D salina ngoại nhập nuôi môi trường nước biển1,5M NaCl ức chế muối 3,5M NaCl sau 10 ngày nuôi cấy 61 Hình 3.11 Sự phát huỳnh quang lipid thể tích tế bào Dunaliella xanh (D sp1), Dunaliella vàng (D sp2) chủng D salina ngoại nhập nuôi môi trường 1,5M NaCl ức chế muối 3,5M NaCl sau 10 ngày ni cấy 63 Hình 3.12 Phân nhóm lồi chủng Dunaiella nội dựa trình tự ADN ITS 66 Hình 3.13 Tốc độ tăng trưởng suất tế bào D salina nuôi độ muối khác 67 Hình 3.14 Mật độ tế bào chủng D salina nuôi môi trường MD4 với độ muối 1M, 1,5M 2M NaCl 68 Hình 3.15 Tốc độ tăng trưởng suất tế bào D salina nuôi môi trường MD4 1,5M NaCl với cường độ ánh sáng khác 70 vi Hình 3.16 Mật độ tế bào chủng D salina nuôi môi trường MD4 1,5M NaCl với cường độ ánh sáng 50 µmol photon/m2/s, 100 µmol photon/m2/s 150 µmol photon/m2/s 71 Hình 3.17 Mật độ tế bào D salina nuôi cấy môi trường MD4 1,5M NaCl ức chế kết hợp muối 4M NaCl 150 µmol photon/m2/s liên tục 73 Hình 3.18 Hàm lượng carotenoid 16 chủng D salina nội, chủng chọn chủng ngoại nhập trước sau 24 ngày ức chế kết hợp muối 4M ánh sáng 150 µmol photon/m2/s liên tục 76 Hình 3.19 Khả chống oxy hóa 16 chủng D salina nội chủng ngoại nhập trước sau 24 ngày ức chế kết hợp muối 4M ánh sáng 150 µmol photon/m2/s liên tục 77 Hình 3.20 Hàm lượng phenolic tổng 16 chủng D salina nội chủng ngoại nhập trước sau 24 ngày ức chế kết hợp muối 4M ánh sáng 150 µmol photon/m2/s liên tục 78 Hình 3.21 Sự phát huỳnh quang lipid 16 chủng D salina nội chủng ngoại nhập sau 24 ngày ức chế kết hợp muối 4M ánh sáng 150 µmol photon/m2/s liên tục 79 Hình 3.22 Hàm lượng carotenoid chủng D salina điều kiện ức chế khác 82 Hình 3.23 Khả chống oxy hóa chủng D salina điều kiện ức chế khác 84 Hình 3.24 Hàm lượng phenolic tổng chủng D salina điều kiện ức chế khác 85 Hình 3.25 Cường độ quang hợp chủng D salina cường độ ánh sáng khác 87 Hình 3.26 Cường độ hơ hấp chủng D salina .88 Hình 3.27 Mật độ tế bào D salina A9, D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 cường độ ánh sáng xanh khác .91 vii Phụ lục B.17 Hàm lượng diệp lục tố chủng D salina điều kiện ức chế khác (tiếp theo) Hàm lượng diệp lục tố AS800 Chủng D salina A9 D salina A10 D salina E D salina G D salina J D salina N D salina O D salina P D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 dlt a/mL (μg/mL) dlt a/tb (pg/tb) 0,165 ± 0,010456a 0,070 ± 0,0001a 0,074 ± 0,00712a 0,093 ± 0,00512a 0,154 ± 0,00345a 0,119 ± 0,008234a 0,143 ± 0,004345a 0,207 ± 0,0116a 0,186 ± 0,02256ab 0,106 ± 0,003123ab 0,180 ± 0,0113a 0,099 ± 0,0001a 0,101 ± 0,0091a 0,115 ± 0,00712a 0,191 ± 0,0043a 0,168 ± 0,0123ab 0,165 ± 0,00523a 0,251 ± 0,0134a 0,149 ± 0,018123a 0,356 ± 0,0115a dlt tổng/mL (μg/mL) 0,193 ± 0,012234a 0,082 ± 0,0001a 0,084 ± 0,0141a 0,097 ± 0,01412a 0,185 ± 0,008234a 0,156 ± 0,021123ab 0,166 ± 0,0031-4a 0,262 ± 0,0344a 0,230 ± 0,04134ab 0,130 ± 0,00812a AS500 + 4M dlt tổng/tb (pg/tb) dlt a/mL (μg/mL) dlt a/tb (pg/tb) 0,210 ± 0,01312a 0,116 ± 0,0001a 0,116 ± 0,0191a 0,120 ± 0,0171a 0,230 ± 0,01012a 0,221 ± 0,03012ab 0,191 ± 0,0031a 0,318 ± 0,0422a 0,185 ± 0,0331ab 0,437 ± 0,0273a 0,280 ± 0,004345b 0,196 ± 0,01612c 0,255 ± 0,005234d 0,183 ± 0,0131b 0,248 ± 0,00723bc 0,227 ± 0,022123b 0,315 ± 0,00745b 0,218 ± 0,00712a 0,326 ± 0,0055c 0,170 ± 0,0211bc 0,345 ± 0,005234b 0,255 ± 0,02112b 0,324 ± 0,0071-4b 0,240 ± 0,0171b 0,372 ± 0,01134c 0,310 ± 0,0301-4cd 0,407 ± 0,0104b 0,301 ± 0,010123a 0,261 ± 0,00412b 0,362 ± 0,04434a Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 dlt tổng/mL (μg/mL) 0,317 ± 0,01023bc 0,249 ± 0,026123c 0,288 ± 0,015123bc 0,192 ± 0,0201ab 0,272 ± 0,011123abc 0,255 ± 0,030123bc 0,345 ± 0,0093b 0,245 ± 0,011123a 0,359 ± 0,0033b 0,220 ± 0,05312ab dlt tổng/tb (pg/tb) 0,389 ± 0,01212b 0,324 ± 0,03412c 0,366 ± 0,01912cd 0,252 ± 0,0261b 0,407 ± 0,01612c 0,347 ± 0,04112bc 0,447 ± 0,01212b 0,339 ± 0,01512a 0,287 ± 0,00212abc 0,467 ± 0,1122a Phụ lục B.18 Khả chống oxy hóa chủng D salina điều kiện ức chế khác Chủng I%/mL D salina A9 D salina A10 D salina E D salina G D salina J D salina N D salina O D salina P D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 20,414 ± 0,958123b 22,486 ± 1,831123ab 17,063 ± 1,311123a 28,702 ± 2,0053bc 18,647 ± 2,695123a 14,686 ± 2,62912a 26,569 ± 4,28823ab 18,221 ± 1,214123a 27,666 ± 4,3733a 13,102 ± 1,1671a N/P I%/tb (x10-6) 22,030 ± 1,034123b 26,876 ± 2,189123a 18,546 ± 1,425123a 22,192 ± 1,5513a 14,530 ± 2,100123a 23,815 ± 4,26312b 29,090 ± 4,69523ab 16,819 ± 1,121123a 33,602 ± 5,3113a 34,179 ± 3,0451a I%/dlt (I%/µg) 48,024 ± 2,25312a 67,915 ± 5,531123a 63,846 ± 4,90612a 63,881 ± 4,46312a 40,734 ± 5,8871a 96,941 ± 17,3521-4b 141,670 ± 22,8645b 51,118 ± 3,40612a 105,939 ± 16,744234a 125,518 ± 11,1844bc Khả chống oxy hóa (I%) Muối 4M I%/tb I%/dlt I%/mL -6 (x10 ) (I%/µg) 21,541 7,581 ± 11,040 ± 1a 1a 0,474 0,690 ± 1,3461a 61,690 ± 129,419 ± 256,155 ± 3d 3d 3,558 7,465 14,7766c 63,194 ± 77,698 ± 166,926 ± 7,0163bc 8,6273b 18,53434b 19,965 ± 22,349 ± 46,867 ± 1ab 1a 1,378 1,543 3,2351a 90,352 ± 229,065 ± 84,028 ± 3,0244d 7,66556c 2,8124d 13,426 ± 17,436 ± 41,275 ± 1a 1ab 1,289 1,674 3,9621a 196,659 ± 86,285 ± 119,288 ± 6,33145bc 2,7784d 3,844d 18,287 ± 25,051 ± 67,122 ± 1a 1a 0,852 1,168 3,12912a 40,104 ± 42,215 ± 113,882 ± 7,3252ab 7,7112a 20,80123a 23,148 ± 59,354 ± 51,487 ± 4,69312ab 12,03412ab 10,4391a Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 I%/mL 13,864 ± 0,71612ab 16,637 ± 0,97112a 11,298 ± 2,1731a 14,572 ± 1,94812a 20,619 ± 2,57123a 10,737 ± 0,6941a 14,425 ± 1,37812a 17,493 ± 0,56312a 28,142 ± 3,19034a 31,150 ± 0,4684b AS300 I%/tb (x10-6) 12,490 ± 0,64512a 18,835 ± 1,09912a 11,076 ± 2,1301a 16,072 ± 2,14912a 17,524 ± 2,18523a 10,035 ± 0,6481a 14,188 ± 1,35512a 13,702 ± 0,44112a 29,012 ± 3,28834a 36,792 ± 0,5534a I%/dlt (I%/µg) 53,043 ± 2,7391a 62,972 ± 3,6741a 59,421 ± 11,4271a 64,890 ± 8,6761a 69,811 ± 8,7041a 75,358 ± 4,8681ab 67,562 ± 6,4521a 60,781 ± 1,9561a 131,949 ± 14,9552a 85,976 ± 1,2921ab Phụ lục B.18 Khả chống oxy hóa chủng D salina điều kiện ức chế khác (tiếp theo) Chủng I%/mL D salina A9 D salina A10 D salina E D salina G D salina J D salina N D salina O D salina P D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 85,131 ± 0,32734e 86,356 ± 0,0824e 76,307 ± 1,2762c 85,866 ± 0,2954e 81,291 ± 2,701234d 69,281 ± 1,3151d 82,190 ± 0,86534d 80,215 ± 0,30823c 83,007 ± 0,40834c 83,824 ± 0,14234c AS500 I%/tb (x10-6) 77,392 ± 0,29734e 90,583 ± 0,0864c 81,178 ± 1,3582b 87,618 ± 0,3014d 86,174 ± 2,863234cd 69,051 ± 1,3101d 78,525 ± 0,82634c 97,823 ± 0,37523c 67,853 ± 0,33434b 147,924 ± 0,25034c I%/dlt (I%/µg) 403,425 ± 1,5493d 616,316 ± 0,5836e 544,598 ± 9,1085c 334,582 ± 1,1482bc 320,564 ± 10,65112d 594,585 ± 11,2846d 450,741 ± 4,7424d 291,950 ± 1,1201c 391,885 ± 1,9293c 301,918 ± 0,5101d Khả chống oxy hóa (I%) AS800 I%/tb I%/dlt I%/mL -6 (x10 ) (I%/µg) 36,333 ± 39,636 ± 188,518 ± 3,16234c 3,45034c 16,4071c 31,766 ± 45,165 ± 388,072 ± 23b 23b 1,348 1,917 16,4702d 19,208 ± 26,312 ± 227,434 ± 1,8471a 2,5301a 21,8651b 38,281 ± 47,260 ± 392,878 ± 34c 34b 2,812 3,471 28,8592c 34,788 ± 43,305 ± 188,107 ± 1,38834b 1,72834b 7,5041b 30,087 ± 42,576 ± 192,682 ± 23b 23c 0,839 1,187 5,3721c 38,885 ± 44,696 ± 233,811 ± 3,45934b 3,97634b 20,8001c 44,527 ± 170,059 ± 54,081 ± 0,3744b 1,4281b 0,4544b 247,624 ± 56,951 ± 45,805 ± 5b 5a 3,7961b 0,873 0,702 24,312 ± 81,949 ± 187,730 ± 1,69512ab 5,71412b 13,0891e Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 I%/mL 47,006 ± 1,96023d 42,359 ± 2,60412c 59,115 ± 0,2323b 54,870 ± 4,04023d 50,045 ± 1,46323c 48,257 ± 0,46423c 54,424 ± 2,78623c 42,538 ± 4,07312b 58,177 ± 2,1673b 33,333 ± 2,7051b AS500 + 4M I%/tb (x10-6) 57,795 ± 2,41023d 55,251 ± 3,39612b 75,147 ± 0,2953b 71,883 ± 5,29323c 75,067 ± 2,19423c 65,806 ± 0,63323d 70,375 ± 3,60323c 58,808 ± 5,63112b 46,542 ± 1,7341a 70,922 ± 5,7551b I%/dlt (I%/µg) 148,478 ± 2,9431b 170,377 ± 6,46712b 205,568 ± 0,7252b 293,650 ± 10,5513b 184,302 ± 3,99512b 189,583 ± 1,67112c 157,578 ± 5,51712b 173,381 ± 8,99112b 162,240 ± 5,57012a 151,789 ± 5,92912cd Phụ lục B.19 Hàm lượng phenolic tổng chủng D salina điều kiện ức chế khác N/P Chủng D salina CCAP 19/18 mg acid gallic/g dw 0,079 ± 0,0061a 0,105 ± 0,0061b 0,073 ± 0,0131a 0,118 ± 0,0141ab 0,098 ± 0,0141ab 0,075 ± 0,0141ab 0,115 ± 0,0021a 0,095 ± 0,0081a 0,129 ± 0,0181ab D bardawil DCCBC 15 0,087 ± 0,0011a D salina A9 D salina A10 D salina E D salina G D salina J D salina N D salina O D salina P Phenolic/tb Phenolic/µg dlt (x10-6) 0,086 ± 0,0071a 0,126 ± 0,00712ab 0,079 ± 0,0141a 0,091 ± 0,0111a 0,076 ± 0,0111a 0,122 ± 0,02312a 0,126 ± 0,00212a 0,088 ± 0,0071a 0,156 ± 0,0222b 0,187 ± 0,0151a 0,318 ± 0,017123ab 0,273 ± 0,05012a 0,262 ± 0,0311a 0,214 ± 0,0301a 0,497 ± 0,09534ab 0,615 ± 0,01145b 0,267 ± 0,0231a 0,493 ± 0,071234ab 0,227 ± 0,0033a 0,833 ± 0,0105bc Hàm lượng phenolic tổng Muối 4M mg acid Phenolic/tb gallic/g Phenolic/µg dlt (x10-6) dw 0,097 ± 0,066 ± 0,188 ± 123a 12a 0,005 0,01312a 0,007 0,050 ± 0,105 ± 0,208 ± 1a 12a 0,001 0,002 0,00412a 0,101 ± 0,124 ± 0,266 ± 0,009234a 0,01112ab 0,02312a 0,178 ± 0,076 ± 0,085 ± 1-4a 12a 0,003 0,003 0,0071a 0,070 ± 0,076 ± 0,192 ± 123a 1a 0,010 0,011 0,02712a 0,060 ± 0,078 ± 0,185 ± 0,00312a 0,00412a 0,01012a 0,109 ± 0,151 ± 0,249 ± 34a 2ab 0,014 0,019 0,03212a 0,088 ± 0,121 ± 0,324 ± 0,0181-4a 0,02412a 0,0652ab 0,073 ± 0,076 ± 0,206 ± 0,008123a 0,0081a 0,02312a 0,121 ± 0,0114a 0,309 ± 0,0293ab 0,268 ± 0,02512a Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 AS300 mg acid gallic/g dw 0,147 ± 0,01612b 0,151 ± 0,01112c 0,118 ± 0,0161ab 0,144 ± 0,01612ab 0,174 ± 0,02112c 0,134 ± 0,02112bc 0,129 ± 0,0151a 0,142 ± 0,01412ab 0,216 ± 0,01023c 0,297 ± 0,0243b Phenolic/tb Phenolic/µg dlt (x10-6) 0,132 ± 0,0141a 0,171 ± 0,01312bc 0,115 ± 0,0161ab 0,159 ± 0,01812ab 0,148 ± 0,01812b 0,126 ± 0,0191a 0,127 ± 0,0151a 0,111 ± 0,0111a 0,222 ± 0,0112bc 0,350 ± 0,0283b 0,561 ± 0,06012b 0,573 ± 0,04212bc 0,619 ± 0,08512b 0,643 ± 0,072123b 0,590 ± 0,07212b 0,943 ± 0,14623cd 0,606 ± 0,07012b 0,493 ± 0,0491bc 1,011 ± 0,0493c 0,819 ± 0,066123bc Phụ lục B.19 Hàm lượng phenolic tổng chủng D salina điều kiện ức chế khác (tiếp theo) AS500 Chủng D salina A9 D salina A10 D salina E D salina G D salina J D salina N D salina O D salina P D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 mg acid gallic/g dw 0,285 ± 0,00134d 0,190 ± 0,01212d 0,159 ± 0,0061b 0,218 ± 0,024123c 0,221 ± 0,025123c 0,147 ± 0,0101c 0,210 ± 0,016123bc 0,191 ± 0,00812b 0,309 ± 0,0214d 0,271 ± 0,026234b Phenolic/tb phenolic/µg dlt 0,259 ± 0,0012c 0,199 ± 0,01212c 0,170 ± 0,00712b 0,222 ± 0,02512b 0,234 ± 0,02612c 0,147 ± 0,0101a 0,201 ± 0,01512bc 0,233 ± 0,00912b 0,253 ± 0,0172c 0,479 ± 0,0463c 1,351 ± 0,00345d 1,356 ± 0,08245d 1,137 ± 0,0442-5c 0,848 ± 0,09412b 0,871 ± 0,098123c 1,262 ± 0,082345d 1,152 ± 0,0862-5c 0,695 ± 0,0281c 1,459 ± 0,0995d 0,977 ± 0,0941-4cd Hàm lượng phenolic tổng AS800 mg acid gallic/g Phenolic/tb Phenolic/µg dlt dw 1,091 ± 0,210 ± 0,229 ± 23c 12bc 0,0811c 0,016 0,017 0,191 ± 0,272 ± 2,333 ± 0,00912d 0,0122d 0,1074e 0,130 ± 0,179 ± 1,543 ± 1ab 1b 0,005 0,007 0,06223d 0,621 ± 0,503 ± 5,161 ± 6b 5d 0,015 0,012 0,1275c 0,199 ± 0,248 ± 1,076 ± 0,00523c 0,00712c 0,0281c 0,176 ± 0,250 ± 1,129 ± 12c 12b 0,012 0,017 0,0751cd 0,260 ± 0,299 ± 1,563 ± 0,00834c 0,00923d 0,0493d 0,301 ± 0,365 ± 1,148 ± 0,0194c 0,02434c 0,07412d 0,398 ± 2,154 ± 0,495 ± 4d 5e 0,022 0,1184e 0,027 0,143 ± 1,107 ± 0,483 ± 12a 5c 0,005 0,0351d 0,015 Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 AS500 + 4M mg acid gallic/g dw 0,156 ± 0,0071b 0,191 ± 0,005123d 0,234 ± 0,0173c 0,167 ± 0,01212bc 0,166 ± 0,00612bc 0,183 ± 0,01312c 0,200 ± 0,010123b 0,174 ± 0,00212b 0,207 ± 0,00523bc 0,157 ± 0,0031a Phenolic/tb Phenolic/µg dlt 0,192 ± 0,00912b 0,249 ± 0,007234d 0,298 ± 0,02245c 0,219 ± 0,016123c 0,249 ± 0,009234c 0,249 ± 0,017234b 0,258 ± 0,01234cd 0,241 ± 0,003234b 0,165 ± 0,0041b 0,334 ± 0,0065ab 0,494 ± 0,0231b 0,767 ± 0,021345c 0,815 ± 0,06045b 0,895 ± 0,0665b 0,610 ± 0,022123b 0,718 ± 0,0502-5bc 0,578 ± 0,02812b 0,710 ± 0,008234c 0,576 ± 0,01312b 0,716 ± 0,0122-5b Phụ lục B.20 Cường độ quang hợp thể tích chủng D salina cường độ ánh sáng khác Chủng Cường độ ánh sáng 50 µmol photon/m2/s 150 µmol photon/m2/s 300 µmol photon/m2/s 500 µmol photon/m2/s 800 µmol photon/m2/s Cường độ quang hợp (μmol O2/mL/phútx 10-3) D salina D salina D salina D salina D salina A9 A10 E G J N O P 14,850 ± 10,968 ± 8,335 ± 7,447 ± 26,106 ± 10,781 ± 14,092 ± 0,460 ± 5,613 ± 7,541 ± 0,1301e 0,3982d 0,2791c 0,0632c 0,6941f 0,2813d 0,3251e 0,0291a 0,0891b 0,0962c 16,400 ± 8,828 ± 17,991 ± 8,511 ± 29,972 ± 8,952 ± 16,699 ± 5,126 ± 11,729 ± 6,453 ± 0,1002e 0,3151c 0,3213f 0,0243c 0,0673g 0,0452c 0,1182e 0,3942a 0,0934d 0,0771b 18,371 ± 10,136 ± 16,963 ± 8,420 ± 26,132 ± 10,460 ± 17,862 ± 4,880 ± 11,238 ± 11,084 ± 0,0703e 0,66512c 0,1963d 0,1213b 0,2601f 0,2013c 0,0323de 0,1252a 0,04234c 0,0903c 18,803 ± 13,181 ± 14,520 ± 8,328 ± 28,221 ± 11,240 ± 19,145 ± 5,800 ± 10,496 ± 12,152 ± 0,01545g 0,1363e 0,4132f 0,2183b 0,0692h 0,1273cd 0,1474g 0,2042a 0,29023c 0,0574d 19,102 ± 8,800 ± 13,520 ± 6,666 ± 26,773 ± 6,201 ± 19,353 ± 7,267 ± 10,180 ± 12,177 ± 0,02245g 0,1051c 0,1712f 0,0431ab 0,09212h 0,1801a 0,0754g 0,1283b 0,3652d 0,0724e Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 D salina D salina D salina D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Phụ lục B.21 Cường độ quang hợp tế bào chủng D salina cường độ ánh sáng khác Chủng Cường độ quang hợp (pmol O2/tb/phút x 10-6) D salina D salina D salina D salina D salina D salina D salina A9 A10 E G J N O P 16,500 ± 17,883 ± 10,640 ± 11,116 ± 33,904 ± 13,420 ± 23,618 ± 0,636 ± 6,709 ± 17,009 ± 0,1441e 0,6492e 0,3561c 0,0942c 0,9021g 0,3493d 0,5451f 0,0411a 0,1061b 0,2172e 18,222 ± 14,393 ± 22,968 ± 12,703 ± 38,925 ± 11,144 ± 27,986 ± 7,087 ± 14,018 ± 14,555 ± 0,1122e 0,5141d 0,4103f 0,0363c 0,0873h 0,0562b 0,1972g 0,5442a 0,1114cd 0,1731d 20,412 ± 16,527 ± 21,655 ± 12,567 ± 33,937 ± 13,020 ± 29,936 ± 6,747 ± 13,432 ± 25,002 ± 0,0783d 1,08412c 0,2503d 0,1813b 0,3381g 0,2503b 0,0533f 0,1732a 0,05034b 0,2033e 20,892 ± 21,490 ± 18,536 ± 12,430 ± 36,651 ± 13,992 ± 32,086 ± 8,018 ± 12,545 ± 27,410 ± 0,0174e 0,2213e 0,5272d 0,3263b 0,0892h 0,1583c 0,2464g 0,2812a 0,34723b 0,1284f 21,224 ± 14,347 ± 17,259 ± 9,950 ± 34,771 ± 7,719 ± 32,435 ± 10,047 ± 12,168 ± 27,466 ± 0,0244f 0,1711d 0,2192e 0,0641b 0,1202i 0,2241a 0,1254h 0,1783b 0,4362c 0,1634g Cường độ ánh sáng 50 µmol photon/m2/s 150 µmol photon/m2/s 300 µmol photon/m2/s 500 µmol photon/m2/s 800 µmol photon/m2/s D salina D salina Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Phụ lục B.22 Cường độ quang hợp diệp lục tố chủng D salina cường độ ánh sáng khác Chủng Cường độ quang hợp (μmol O2/μg dlt/phút x 10-3) D salina D salina D salina Cường độ ánh sáng A9 A10 E D salina D salina D salina D salina D salina D salina D bardawil G J N O P CCAP DCCBC 15 19/18 50 µmol photon/m2/s 150 µmol photon/m2/s 300 µmol photon/m2/s 500 µmol photon/m2/s 800 µmol photon/m2/s 56,913 ± 32,263 ± 40,561 ± 52,351 ± 98,983 ± 43,521 ± 30,712 ± 2,213 ± 24,454 ± 22,151 ± 0,4981e 1,1712c 1,3571d 0,4412e 2,6331f 1,1333d 0,7091c 0,1411a 0,3871b 0,2822b 62,853 ± 25,968 ± 87,555 ± 59,827 ± 113,640 ± 36,140 ± 36,392 ± 24,649 ± 51,097 ± 18,955 ± 0,3852e 0,9281b 1,5633f 0,1703e 0,2533g 0,1822c 0,2562c 1,8932b 0,4054d 0,2251a 70,408 ± 29,817 ± 82,551 ± 59,184 ± 99,078 ± 42,225 ± 38,928 ± 23,466 ± 48,959 ± 32,561 ± 0,2683f 1,9561b 0,9523g 0,8513e 0,9871h 0,8123c 0,0693c 0,6022a 0,18334d 0,2643b 72,062 ± 38,771 ± 70,660 ± 58,542 ± 107,002 ± 45,376 ± 41,723 ± 27,887 ± 45,728 ± 35,697 ± 0,0574f 0,3993bc 2,0092f 1,5353e 0,2602g 0,5133d 0,3204cd 0,9792a 1,26523d 0,1674b 73,208 ± 25,885 ± 65,794 ± 46,860 ± 101,512 ± 25,033 ± 42,178 ± 34,944 ± 44,351 ± 35,771 ± 0,0834f 0,3091a 0,8342e 0,3011d 0,35012g 0,7261a 0,1634c 0,6183b 1,5892cd 0,2134b Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Phụ lục B.23 Mật độ tế bào D salina cường độ ánh sáng xanh khác Chủng Ngày 12 14 17 20 23 26 ĐC 0,097 ± 0,0091a 0,490 ± 0,0352e 0,843 ± 0,02034b 1,237 ± 0,0417b 1,073 ± 0,0186c 0,987 ± 0,04756bc 0,937 ± 0,003345cd 0,953 ± 0,003456bc 0,930 ± 0,020345cd 0,857 ± 0,02434c 0,813 ± 0,0133b D salina A9 30 50 0,097 ± 0,097 ± 0,0091a 0,0091a 0,357 ± 0,453 ± 2bcd 0,022 0,0222de 0,863 ± 1,133 ± 3b 0,038 0,0333c* 1,293 ± 1,533 ± 0,04156b 0,0277c* 1,347 ± 1,537 ± 0,0156e* 0,0207f* 1,167 ± 1,427 ± 0,02045de* 0,01367f* 1,133 ± 1,407 ± 4ef* 0,052 0,03756gh* 1,183 ± 1,320 ± 45e* 0,017 0,021456f* 1,217 ± 1,347 ± 0,022456fgh* 0,030456h* 1,217 ± 1,283 ± 0,035456gh* 0,0074h* 1,207 ± 1,287 ± 456fg* 0,007 0,02945g* Mật độ tế bào (tb/mL x 106), Cường độ ánh sáng (µmol photon/m²/s) D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 100 ĐC 30 50 100 ĐC 30 50 0,097 ± 0,137 ± 0,137 ± 0,137 ± 0,137 ± 0,143 ± 0,143 ± 0,143 ± 0,0091a 0,0151a 0,0151a 0,0151a 0,0151a 0,0031a 0,0031a 0,0031a 0,250 ± 0,247 ± 0,353 ± 0,233 ± 0,447 ± 0,300 ± 0,370 ± 0,383 ± 2a 1a 2bc 1a 2cde 1ab 2bcd 0,015 0,009 0,023 0,003 0,019 0,006 0,010 0,0192bcd 0,930 ± 0,580 ± 0,620 ± 0,553 ± 1,093 ± 0,483 ± 0,567 ± 0,597 ± 34b 2a 3a 2a 3c* 2a 3a 0,010 0,025 0,029 0,022 0,047 0,030 0,033 0,0333a 1,243 ± 1,330 ± 1,360 ± 1,170 ± 0,767 ± 0,807 ± 1,850 ± 0,917 ± 0,0127b 0,0407b 0,0646bc 0,01545b 0,0424a 0,0474a 0,0239d* 0,02745a 1,217 ± 1,273 ± 1,500 ± 1,357 ± 1,813 ± 0,790 ± 0,853 ± 0,963 ± 0,0277d* 0,02267de 0,0266f* 0,0097e 0,04489g* 0,0454a 0,0034ab 0,0225bc* 1,113 ± 1,170 ± 1,450 ± 1,317 ± 1,680 ± 0,723 ± 0,843 ± 0,990 ± 0,0096cd 0,04056de 0,0386f* 0,02667ef 0,02578g* 0,05634a 0,0584ab 0,0155bc* 1,053 ± 1,123 ± 1,353 ± 1,297 ± 1,553 ± 0,693 ± 0,957 ± 0,887 ± 56de 45e 56g* 567fg* 67h* 34a 45cd* 0,015 0,027 0,023 0,009 0,056 0,043 0,023 0,0194bc* 1,050 ± 1,123 ± 1,197 ± 1,217 ± 1,457 ± 0,653 ± 1,013 ± 0,927 ± 56cd 45de 45e 56ef 56g* 34a 5bcd* 0,025 0,017 0,022 0,012 0,018 0,027 0,042 0,0264b* 1,020 ± 1,020 ± 1,153 ± 1,077 ± 1,303 ± 0,667 ± 1,000 ± 0,913 ± 0,042456cde 0,02534cde 0,0394efg 0,06234def 0,00345gh* 0,00934a 0,0315cde* 0,0124bc* 0,967 ± 0,927 ± 1,130 ± 1,030 ± 1,203 ± 0,573 ± 0,910 ± 0,850 ± 0,015345de* 0,0093cde 0,0214fg* 0,0233ef 0,02734gh* 0,00923a 0,03145cd* 0,0214c* 0,897 ± 0,957 ± 1,160 ± 1,047 ± 1,173 ± 0,483 ± 0,837 ± 0,810 ± 3bc 3cd 4ef* 34de 34fg* 2a 4b* 0,018 0,032 0,010 0,027 0,022 0,039 0,003 0,0154b* Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Dấu * khác biệt nghiệm thức so với đối chứng 100 0,143 ± 0,0031a 0,437 ± 0,0242cde 0,593 ± 0,0193a 0,837 ± 0,0594a 0,827 ± 0,0124a 0,747 ± 0,0204a 0,740 ± 0,0314ab 0,717 ± 0,02034a 0,760 ± 0,0174ab 0,713 ± 0,00934b* 0,583 ± 0,0323a Phụ lục B.24 Hàm lượng carotenoid D salina trước sau ức chế ánh sáng trắng 500 µmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV W/m2 liên tục Cường độ ánh sáng (µmol photo/m2/s) Chủng D salina A9 D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Hàm lượng carotenoid (Car) Ngày - trước ức chế Ngày - sau ức chế ngày Ngày 12 - sau ức chế ngày µg/mL pg/tb Car/dlt µg/mL pg/tb Car/dlt µg/mL pg/tb Car/dlt PAR - 500 2,402 ± 0,0802a 1,024 ± 0,0401a 4,970 ± 0,1661a 11,353 ± 0,34923b 5,264 ± 0,1631b 24,165 ± 0,7431b 25,544 ± 0,9922c 12,413 ± 0,60312c 57,908 ± 2,2481c PAR - 500 + UV - 5W/m2 2,402 ± 0,0802a 1,024 ± 0,0401a 4,970 ± 0,1661a 14,427 ± 0,3583b 7,249 ± 0,16123b* 30,194 ± 0,74812b 25,864 ± 0,3512c 14,213 ± 0,2612c 58,258 ± 0,7901c PAR - 500 6,342 ± 0,1313a 3,338 ± 0,0743a 13,966 ± 0,2892a 20,542 ± 1,3884b 8,311 ± 0,6043b 51,512 ± 3,4813b 40,950 ± 0,3363c 15,434 ± 0,1402c 68,051 ± 0,55812c PAR - 500 + UV - 5W/m2 6,342 ± 0,1313a 3,338 ± 0,0743a 13,966 ± 0,2892a 25,927 ± 0,7035b* 11,307 ± 0,3344b* 63,157 ± 1,7134b* 46,931 ± 0,5424c* 22,287 ± 0,4203c* 84,871 ± 0,9792c PAR - 500 1,764 ± 0,0381a 2,137 ± 0,0872a 4,695 ± 0,1021a 7,749 ± 0,3501b 6,032 ± 0,35212b 32,604 ± 1,47312b 11,113 ± 0,5211c 9,298 ± 0,5231c 59,116 ± 2,7701c PAR - 500 + UV - 5W/m2 1,764 ± 0,0381a 2,137 ± 0,0872a 4,695 ± 0,1021a 8,589 ± 0,66412b 7,540 ± 0,61723b 39,642 ± 3,0662b 9,610 ± 1,3191b 12,200 ± 1,95112b 72,620 ± 9,96912c Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Dấu * khác biệt nghiệm thức so với đối chứng Phụ lục B.25 Hàm lượng diệp lục tố D salina trước sau ức chế ánh sáng trắng 500 µmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV W/m2 liên tục Chủng D salina A9 D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Cường độ ánh sáng (µmol photo/m2/s) PAR - 500 PAR - 500 + UV - 5W/m2 PAR - 500 PAR - 500 + UV - 5W/m2 PAR - 500 PAR - 500 + UV - 5W/m2 dlt a (µg/mL) 0,407 ± 0,0062b 0,407 ± 0,0062b 0,389 ± 0,0042b 0,389 ± 0,0042ab 0,289 ± 0,0071c 0,289 ± 0,0071c Ngày - trước ức chế dlt a dlt tổng (pg/tb) (µg/mL) 0,173 ± 0,483 ± 0,0031a 0,0102b 0,173 ± 0,483 ± 0,0031a 0,0102b 0,205 ± 0,454 ± 0,0022c 0,0072b 0,205 ± 0,454 ± 0,0022b 0,0072a 0,350 ± 0,376 ± 0,0083c 0,0141c 0,350 ± 0,376 ± 0,0083b 0,0141c dlt tổng (pg/tb) 0,206 ± 0,0051a 0,206 ± 0,0051a 0,239 ± 0,0041b 0,239 ± 0,0041b 0,455 ± 0,0242b 0,455 ± 0,0242b Hàm lượng diệp lục tố Ngày - sau ức chế ngày dlt a dlt a dlt tổng dlt tổng (µg/mL) (pg/tb) (µg/mL) (pg/tb) 0,409 ± 0,189 ± 0,470 ± 0,218 ± 0,0063b 0,0032b 0,0103ab 0,0043a 0,412 ± 0,207 ± 0,478 ± 0,240 ± 0,0043b 0,0022b 0,0033ab 0,0023b 0,337 ± 0,136 ± 0,399 ± 0,161 ± 0,0042a 0,0011a 0,0072a 0,0031a 0,346 ± 0,151 ± 0,411 ± 0,179 ± 0,0142a 0,0061a 0,0202a 0,00912a 0,202 ± 0,157 ± 0,238 ± 0,185 ± 0,0071b 0,0061b 0,0091b 0,00712a 0,179 ± 0,157 ± 0,217 ± 0,190 ± 0,0081b 0,0071a 0,0051b 0,0042a Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Dấu * khác biệt nghiệm thức so với đối chứng Ngày 12 - sau ức chế ngày dlt a dlt a dlt tổng dlt tổng (µg/mL) (pg/tb) (µg/mL) (pg/tb) 0,370 ± 0,179 ± 0,441 ± 0,214 ± 0,0043a 0,00223ab 0,0033a 0,0042a 0,365 ± 0,201 ± 0,444 ± 0,244 ± 0,0073a 0,0043b 0,0093a 0,00623b 0,431 ± 0,162 ± 0,602 ± 0,227 ± 0,0084c 0,0032b 0,0124c 0,00523b 0,399 ± 0,189 ± 0,553 ± 0,263 ± 0,01034b 0,0053b* 0,0184b 0,0103b 0,140 ± 0,117 ± 0,188 ± 0,157 ± 0,0062a 0,0051a 0,0102a 0,0061a 0,101 ± 0,127 ± 0,132 ± 0,167 ± 0,0071a* 0,0091a 0,0111a* 0,0161a Phụ lục B.26 Tỷ lệ diệp lục tố a/diệp lục tố b D salina trước sau ức chế ánh sáng trắng 500 µmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV W/m2 liên tục Chủng D salina A9 D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Cường độ ánh sáng PAR - 500 PAR - 500 + UV - 5W/m2 PAR - 500 PAR - 500 + UV - 5W/m2 PAR - 500 PAR - 500 + UV - 5W/m2 Tỷ lệ diệp lục tố a/diệp lục tố b (dlta/dltb) Ngày - trước ức chế 5,294 ± 0,080a Ngày - sau ức chế ngày 6,665 ± 0,100b Ngày 12 - sau ức chế ngày 5,179 ± 0,055a 5,294 ± 0,080b 6,221 ± 0,059c 4,626 ± 0,095a 6,009 ± 0,055c 5,478 ± 0,058b 2,515 ± 0,047a 6,009 ± 0,055c 5,316 ± 0,211b 2,589 ± 0,066a 3,334 ± 0,077a 5,610 ± 0,208b 2,935 ± 0,128a 3,334 ± 0,077a 4,751 ± 0,208b 3,231 ± 0,225a Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Phụ lục B.27 Khả chống oxy hóa D salina trước sau ức chế ánh sáng trắng 500 µmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV W/m2 liên tục Khả chống oxy hóa (I%) Chủng D salina A9 D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Cường độ ánh sáng (µmol photo/m2/s) Ngày - trước ức chế Ngày - sau ức chế ngày Ngày 12 - sau ức chế ngày I%/mL I%/tb (x 10-6) I%/dlt (I%/µg) I%/mL I%/tb (x 10-6) I%/dlt (I%/µg) I%/mL I%/tb (x 10-6) I%/dlt (I%/µg) PAR - 500 5,293 ± 0,8931a 2,256 ± 0,3811a 10,951 ± 1,8481a 26,879 ± 1,9121b 12,463 ± 0,8861b 57,213 ± 4,0691b 38,089 ± 0,8572c 18,490 ± 0,4162c 86,345 ± 1,94223c PAR - 500 + UV - 5W/m2 5,293 ± 0,8931a 2,256 ± 0,3811a 10,951 ± 1,8481a 29,769 ± 0,8761b 14,959 ± 0,4401b 62,302 ± 1,8331b 34,408 ± 1,6112b 18,906 ± 0,8852c 77,506 ± 3,62812c PAR - 500 13,029 ± 0,7522a 6,858 ± 0,3962a 28,692 ± 1,6572a 32,659 ± 0,8141b 13,204 ± 0,3291b 81,897 ± 2,04212c 38,306 ± 0,6932c 14,437 ± 0,2611b 63,658 ± 1,1521b PAR - 500 + UV - 5W/m2 13,029 ± 0,7522a 6,858 ± 0,3962a 28,692 ± 1,6572a 57,406 ± 0,3132c* 25,032 ± 0,1362b* 139,842 ± 0,7623c* 50,851 ± 1,4393b* 24,138 ± 0,6833b* 91,960 ± 2,60323b* PAR - 500 3,855 ± 0,8741a 4,663 ± 1,05712a 10,258 ± 2,3251a 24,639 ± 2,2471b 19,149 ± 1,74612b 103,669 ± 9,45423b 18,995 ± 1,3851b 15,873 ± 1,15712b 101,042 ± 7,3683b PAR - 500 + UV - 5W/m2 3,855 ± 0,8741a 4,663 ± 1,05712a 10,258 ± 2,3251a 30,202 ± 3,7611c 26,493 ± 3,2992b 139,395 ± 17,3573b 20,222 ± 0,6171b 25,489 ± 0,7783b* 152,816 ± 4,6624b* Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Dấu * khác biệt nghiệm thức so với đối chứng Phụ lục B.28 Hàm lượng phenolic tổng D salina trước sau ức chế ánh sáng trắng 500 µmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV W/m2 liên tục Cường độ ánh sáng (µmol photo/m2/s) Chủng D salina A9 D salina CCAP 19/18 D bardawil DCCBC 15 Hàm lượng phenolic Ngày - trước ức chế mg Acid Phenolic/tb Phenolic/dlt gallic/g dW (x10-6) Ngày - sau ức chế ngày Ngày 12 - sau ức chế ngày mg Acid gallic/g dW Phenolic/tb (x10-6) Phenolic/dlt mg Acid gallic/g dW Phenolic/tb Phenolic/dlt (x10-6) PAR - 500 0,048 ± 0,0051a 0,021 ± 0,0021a 0,100 ± 0,0101a 0,152 ± 0,00523b 0,071 ± 0,0021b 0,324 ± 0,0111b 0,237 ± 0,0042c 0,115 ± 0,0021c 0,538 ± 0,0101c PAR - 500 + UV - 5W/m2 0,048 ± 0,0051a 0,021 ± 0,0021a 0,100 ± 0,0101a 0,159 ± 0,0053b 0,080 ± 0,0031b 0,333 ± 0,01112b 0,204 ± 0,0012c 0,112 ± 0,0001c 0,459 ± 0,0011c PAR - 500 0,092 ± 0,0042a 0,049 ± 0,0022a 0,203 ± 0,0092a 0,213 ± 0,0124b 0,086 ± 0,0051b 0,535 ± 0,03034b 0,290 ± 0,0223c 0,109 ± 0,0081b 0,482 ± 0,0371b PAR - 500 + UV - 5W/m2 0,092 ± 0,0042a 0,049 ± 0,0022a 0,203 ± 0,0092a 0,264 ± 0,0165b* 0,115 ± 0,0072b* 0,642 ± 0,0394b 0,425 ± 0,0014c* 0,202 ± 0,0013c* 0,769 ± 0,0032c* PAR - 500 0,048 ± 0,0001a 0,058 ± 0,0003a 0,128 ± 0,0011a 0,109 ± 0,00312b 0,085 ± 0,0021b 0,460 ± 0,011123b 0,133 ± 0,0061c 0,111 ± 0,0051c 0,707 ± 0,0302c PAR - 500 + UV - 5W/m2 0,048 ± 0,0001a 0,058 ± 0,0003a 0,128 ± 0,0011a 0,102 ± 0,0111b 0,090 ± 0,01012b 0,472 ± 0,05223b 0,134 ± 0,0051c 0,168 ± 0,0072c 1,010 ± 0,0393c* Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Dấu * khác biệt nghiệm thức so với đối chứng Phụ lục B.29 Sự phát huỳnh quang lipid D salina trước sau ức chế ánh sáng trắng 500 µmol photon/m2/s riêng rẽ kết hợp UV W/m2 liên tục Sự phát huỳnh quang lipid Cường độ ánh Chủng sáng (µmol Ngày - trước ức chế Ngày - sau ức chế ngày photo/m2/s) Lipid/mL (x104) Lipid/tb (x10-3) D salina PAR - 500 0,431 ± 0,0061a 1,837 ± 0,0271a 0,892 ± 0,0131a 0,848 ± 0,0171b 3,932 ± 0,081b 1,805 ± 0,0371b A9 PAR - 500 + UV - 5W/m2 0,431 ± 0,0061a 1,837 ± 0,0271a 0,892 ± 0,0131a 0,776 ± 0,0261b 3,899 ± 0,1311b PAR - 500 0,487 ± 0,0142a 2,561 ± 0,0742a 1,072 ± 0,0312a 0,736 ± 0,0231b 19/18 PAR - 500 + UV - 5W/m2 0,487 ± 0,0142a 2,561 ± 0,0742a 1,072 ± 0,0312a D bardawil PAR - 500 0,715 ± 0,0033a 8,651 ± 0,0383a DCCBC 15 PAR - 500 + UV - 5W/m2 0,715 ± 0,0033a 8,651 ± 0,0383a D salina CCAP Lipid/dlt Lipid/mL (x104) (x104) Lipid/tb (x10-3) Ngày 12 - sau ức chế ngày Lipid/tb (x10-3) Lipid/dlt (x104) 1,143 ± 0,0192c 5,547 ± 0,0902c 2,591 ± 0,0421c 1,624 ± 0,0551b 0,926 ± 0,0191c* 5,088 ± 0,10412c 2,086 ± 0,0431c 2,977 ± 0,0951b 1,846 ± 0,0591b 1,103 ± 0,0202c 4,156 ± 0,0741c 1,833 ± 0,0331b 0,894 ± 0,05012b 3,899 ± 0,2171b 2,178 ± 0,1211b 1,115 ± 0,0172c 5,294 ± 0,08312c 2,017 ± 0,0321b 1,903 ± 0,0083a 1,226 ± 0,0813b 9,526 ± 0,6282a 5,157 ± 0,3402b 1,255 ± 0,0742b 10,487 ± 0,6193a 6,675 ± 0,3942c 1,903 ± 0,0083a 1,134 ± 0,07623b 9,947 ± 0,6652a 5,234 ± 0,3502b 1,433 ± 0,0173c* 18,068 ± 0,2094b* 10,832 ± 0,1253c* Các số trung bình hàng với mẫu tự chữ khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với mẫu tự số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Dấu * khác biệt nghiệm thức so với đối chứng Lipid/dlt Lipid/mL (x104) (x104) ... định chủng vi tảo có dinh dưỡng khả tích lũy carotenoid cao điều kiện mơi trường khác lớn Chúng chọn đề tài ? ?Chọn lọc nuôi cấy số chủng tảo Dunaliella dọc bờ biển số tỉnh miền Trung - Nam Bộ cho. .. cho hàm lượng carotenoid cao? ?? nhằm chọn lọc chủng Dunaliella có khả tổng hợp carotenoid cao điều kiện nuôi cấy khác làm sở cho nghiên cứu khai thác ứng dụng sau Mục đích nghiên cứu - Chọn lọc. .. trường lỏng Nuôi cấy cạn kiệt dinh dưỡng Chủng tảo khơng tích carotenoid Chủng tảo ni mơi trường lỏng Chủng tảo tích carotenoid Hình 2.4 Các bước chọn lọc chủng Dunaliella tích lũy carotenoid 31