Luận văn thạc sĩ nghiên cứu đặc điểm lâm học và nhân giống trà hoa vàng (camellia chrysantha (hu) tuyama) bằng phương pháp giâm hom​

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học riêng tơi, cơng trình đƣợc thực thời gian từ tháng đến tháng 10 năm 2016 Các số liệu, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Hà nội, ngày 29 tháng 10 năm 2016 Ngƣời viết cam đoan Phan Đặng Hoàng ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đƣợc luận văn này, tơi nhận đƣợc bảo, giúp đỡ tận tình TS Nguyễn Văn Việt TS Trần Việt Hà Cùng với giúp đỡ, động viên thầy giáo khoa Lâm học, Phịng đào tạo Sau đại học – Trƣờng Đại Học Lâm Nghiệp – Hà Nội, Hạt Kiểm lâm huyện Ba Chẽ, Trƣờng Cao Đẳng Nông lâm Đông bắc – Quảng ninh Nhân dịp cho phép tơi đƣợc bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Việt TS Trần Việt Hà, bảo, giúp đỡ tận tình thời gian qua Tơi xin chân thành cảm ơn đến lãnh đạo, cán Hạt Kiểm lâm huyện Ba chẽ, Trƣờng Cao Đẳng Nông lâm Đông bắc – Quảng ninh, tạo điều kiện giúp đỡ suốt q trình thực luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn gia đình bạn đồng nghiệp động viên, giúp đỡ trình thực luận văn! Hà nội, ngày 29 tháng 10 năm 2016 Ngƣời viết luận văn Phan Đặng Hoàng iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC .iii DANH MỤC VÀ CÁC KÍ HIỆU VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu Trà hoa vàng (Camellia chrysantha (Hu) Tuyama) .3 1.1.1 Hệ thống phân loại phân bố 1.1.2 Đặc điểm sinh học 1.1.3 Giá trị sử dụng 1.2 Tổng quan mã vạch ADN (DNA barcode) 1.2.1 Trên Thế Giới 1.2.2 Ở Việt Nam 1.3 Nghiên cứu đặc điểm lâm học loài 1.3.1.Trên giới 1.3.2 Ở nƣớc 12 1.4 Cơ sở khoa học nhân giống hom 14 1.4.1 Cơ sở phƣơng pháp giâm hom 15 1.4.2 Nhu cầu sinh lý cành cắt rời 16 1.5 ngh a nhân giống hom 16 1.6 Những nghiên cứu chi Camellia 17 1.6.1 Những nghiên cứu chi Camellia Thế Giới 17 1.6.2 Những nghiên cứu chi Camellia Việt Nam 19 Chƣơng MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 24 iv 2.2 Đối tƣợng nghiên cứu 24 2.3 Địa điểm nghiên cứu 24 2.4 Nội dung nghiên cứu 24 2.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 24 2.5.1 Nghiên cứu mã vạchADN (DNA barcode) cho Trà hoa vàng Ba Chẽ 24 2.5.2 Nghiên cứu số đặc điểm Lâm học Trà hoa vàng 26 2.5.3 Thí nghiệm giâm hom Trà hoa vàng 29 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 3.1 Kết xác định mã vạch AND (DNA barcode) 32 3.1.1 Tách chiết ADN khuyếch đại PCR (Polymerase Chain Reaction) 32 3.1.2 Phân tích trình tự nucleotide từ ba vùng ADN 33 3.2 Một số đặc điểm Lâm học Trà hoa Vàng 36 3.2.1 Đặc điểm hình thái loài Trà hoa vàng Ba chẽ 36 3.2.2 Đặc điểm sinh thái phân bố loài Trà hoa vàng Ba chẽ 39 3.2.3 Đặc điểm cấu trúc hoàn cảnh rừng nơi có lồi Trà hoa vàng phân bố tự nhiên 40 3.3 Nhân giống Trà hoa vàng Ba chẽ phƣơng pháp giâm hom 46 3.3.1 Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng đến khả sống khả rễ hom 46 3.3.4 Ảnh hƣởng giá thể ruột bầu đến hiệu giâm hom 53 3.3.5 Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả sống hom 54 KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 vi DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên 3.1 Đánh giá ba vùng ADN đề xuất 3.2 Kích thƣớc Trà hoa vàng Ba 3.3 Kết đo kích thƣớc Trà hoa 3.4 Đặc điểm vật hậu loài 3.5 Cấu trúc tổ thành OTC tính the 3.6 Mật độ tầng cao lâm phần vớ 3.7 Thành phần loài gỗ kèm với T 3.8 Thành phần loài bụi, thảm tƣơi n trạng thái rừng 3.9 Đặc điểm độ tàn che tầng 3.10 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐH 3.11 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐH 3.12 Ảnh hƣởng loại hom đến hiệu qu 3.13 Ảnh hƣởng giá thể ruột bầu đến 3.14 Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả nă vii DANH MỤC CÁC BIỂU STT Tên bi 3.1 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐH 3.2 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐH 3.3 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐH 3.4 Ảnh hƣởng nồng độ chất Đ 3.5 Ảnh hƣởng loại hom đến hiệu q 3.6 Ảnh hƣởng giá thể ruột bầu đến 3.7 Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả n viii DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hìn 1.1 Trà hoa vàng Ba chẽ 3.1 ADN tổng số từ 06 mẫu nghiên cứu 3.2 Sản phẩm PCR với vùng rbcL từ 06 3.3 3.4 3.5 So sánh trình tự nucleotide vùng mat Động Trà hoa vàng Ba Chẽ So sánh trình tự nucleotide vùng rbcL Động Trà hoa vàng Ba Chẽ So sánh trình tự nucleotide vùng ITS Động Trà hoa vàng Ba Chẽ 3.6 Cây Trà hoa vàng Ba chẽ 3.7 Cành mang nụ Trà hoa vàng 3.8 Quả Trà hoa vàng 3.9 Mặt trƣớc, mặt sau 3.10 Một số hình ảnh giâm hom Trà hoa v 3.11 Loại hom 3.12 Một số hình ảnh chăm sóc hom Trà h ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Trà hoa vàng thuộc chi trà (Camellia) chi thực vật có hoa họ Chè (Theaceae), giới Việt Nam có nhiều lồi thuộc chi Camellia có hoa đẹp với đủ màu sắc khác nhƣ trắng, đỏ, hồng nhiều màu sắc lạ mắt, độc đáo đƣợc lai tạo thu hút quan tâm nhiều nhà chơi cảnh có ngƣời chơi cảnh Việt Nam Trong số đó, lồi Trà hoa vàng loài phát Việt Nam Trung Quốc Cũng nhƣ nhiều loài khác chi Camellia, giá trị dễ nhận thấy Trà hoa vàng làm cảnh Màu vàng Trà hoa vàng đặc trƣng, Khó tạo đƣợc phƣơng pháp lai hữu tính (Trần Ninh – Hakoda Naotoshi, 2010) Trà hoa vàng cịn có giá trị kinh tế y dƣợc cao nhƣ: Sử dụng để lấy gỗ, làm trồng tầng dƣới đai rừng phòng hộ, hoa làm đồ uống cao cấp, có tác dụng phịng chống bệnh huyết áp, tim mạch, tiểu đƣờng, u bƣớu (Zhu Ji Yu et al…, 2006) Các nhà thực vật giới xem loài Trà hoa vàng nguồn gen quý cần đƣợc bảo vệ nghiêm ngặt (Trần Ninh cs, 2010)[25] Trong 10 năm qua, nhà khoa học phát Việt Nam có tới 24 loài Trà hoa vàng Tuy vậy, Trà hoa vàng bị đe dọa nghiêm trọng môi trƣờng sống bị thu hẹp nhƣ việc thu lƣợm giống thái dẫn đến suy giảm nhanh số lƣợng cá thể tự nhiên Theo quy hoạch tỉnh Quảng Ninh, Ba Chẽ ba vùng dƣợc liệu tỉnh Để chủ động cho hƣớng phát triển, huyện Ba Chẽ xây dựng quy hoạch vùng trồng dƣợc liệu ba nghìn ha, trà hoa vàng đƣợc trồng với tổng diện tích 500 địa bàn xã, thị trấn Đến nay, toàn huyện trồng đƣợc 100ha trà hoa vàng từ nguồn vốn doanh nghiệp hộ dân địa bàn Công ty cổ phần Phú Khang HT lập dự án trồng 250 trà hoa vàng tập trung xã Thanh Sơn, kết hợp chế biến dƣợc liệu chỗ phát triển du lịch sinh thái[57] Vì việc nghiên cứu phƣơng pháp nhân giống, chăm sóc để bảo tồn phát triển loài Trà hoa vàng việc làm cần thiết Tuy nhiên nghiên cứu lồi Trà hoa vàng cịn hạn chế Trong số loài Trà hoa vàng q tỉnh Quảng Ninh lồi Trà hoa vàng Camellia chrysantha loài trà quý cần đƣợc quan tâm, bảo tồn phát triển Từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu đặc điểm Lâm học nhân giống Trà hoa vàng (Camellia chrysantha (Hu) Tuyama) phương pháp giâm hom Nhằm phục vụ công tác bảo tồn phát triển dƣợc liệu quý Phụ biểu 01 Điều tra tầng cao OTC1 TT 10 11 12 13 Loài Chân chim Thẩu tấu Mán đỉa Thành ngạnh Lim xanh Thị rừng Trám Xoan ta Ngát Dẻ Đa Đuôi lƣơn Dè TT 10 11 12 13 Loài Trám Ngát Mán đỉa Chân chim Thành ngạnh Lim xanh Thị rừng Xoan ta Sảng nhung Dẻ Đa Thẩu tấu Dè Phụ biểu 03 Điều tra tầng cao OTC TT Loài Lim xanh Thẩu tấu Dè Xoan ta Mán đỉa Ngát Kháo Trám Sảng nhung 10 Thị rừng 11 Dẻ 12 Đa 13 Chẹo 14 Thành ngạnh 15 Chân chim Phụ biểu 04 Điều tra tầng cao OTC TT Lồi Thị rừng Dẻ Cơm Máu chó Lim xanh Thẩu tấu Táu duối Chân chim Thành ngạnh 10 Ngát 11 Đa 12 Kháo 13 Xoan ta 14 Trám 15 Chẹo 16 Mán đỉa Phụ biểu 05 Điều tra tầng cao OTC TT Loài Ngát Đa Thẩu tấu Kháo Xoan ta Chân chim Thành ngạnh Lim xanh Thị rừng 10 Máu chó 11 Dẻ 12 Táu duối 13 Trám 14 Chẹo 15 Hóc quang Mán đỉa Phụ biểu 06 Điều tra tầng cao OTC TT Loài Máu chó Xoan ta Chân chim Thành ngạnh Lim xanh Thị rừng Dẻ Táu duối Ngát 10 Trám 11 Chẹo 12 Mán đỉa 13 Đa 14 Kháo 15 Thẩu tấu Phụ biểu 07 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến tỷ lệ hom sống ABT Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50ppm 100ppm 150ppm 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (40,6)> Fcrit Vậy số hom rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50ppm 100ppm 150ppm 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (40,6)> Fcrit Vậy số hom rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN IBA Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50ppm 100ppm 150ppm 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (22,24)> Fcrit Vậy số hom rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50ppm 100ppm 150ppm 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (2,84)> Fcrit Vậy chiều dài rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN NAA Anova: Single Factor Số hom rễ SUMMARY Groups 50ppm 100ppm 150ppm 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (26,64)> Fcrit Vậy số hom rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN Anova: Single Factor chiều dài rễ SUMMARY Groups 50ppm 100ppm 150ppm 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (1,36)< Fcrit Vậy chiều dài rễ cơng thức thí nghiệm không phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN Phụ biểu 08 Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả rễ Anova: Single Factor SUMMARY Groups ABT 50ppm ABT 100ppm ABT 150ppm ABT 200ppm IBA 50ppm IBA 100ppm IBA 150ppm IBA 200ppm NAA 50ppm NAA 100ppm NAA 150ppm NAA 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (44,52)> Fcrit Vậy số rễ TB/hom cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN Anova: Single Factor SUMMARY Groups ABT 50ppm ABT 100ppm ABT 150ppm ABT 200ppm IBA 50ppm IBA 100ppm IBA 150ppm IBA 200ppm NAA 50ppm NAA 100ppm NAA 150ppm NAA 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (10,30)> Fcrit Vậy chiều dài rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại nồng độ chất ĐHST sử dụng CTTN Anova: Single Factor Số hom sống SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ABT 50ppm ABT 100ppm ABT 150ppm ABT 200ppm IBA 50ppm IBA 100ppm IBA 150ppm IBA 200ppm NAA 50ppm NAA 100ppm NAA 150ppm NAA 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (10,38)> Fcrit Vậy tỷ lệ hom sống cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại loại nồng độ chất ĐHST khác Anova: Single Factor SUMMARY Groups ABT 50ppm ABT 100ppm ABT 150ppm ABT 200ppm IBA 50ppm IBA 100ppm IBA 150ppm IBA 200ppm NAA 50ppm NAA 100ppm NAA 150ppm NAA 200ppm ĐC ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (14,20)> Fcrit Vậy tỷ lệ hom rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại loại nồng độ chất ĐHST khác Phụ biểu 09 Cơng thức thí nghiệm ảnh hƣởng loại hom đến khả sống hom Anova: Single Factor SUMMARY Groups Hom loại Hom loại ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (12,25)> Fcrit Vậy số hom sống cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại hom đem dâm Anova: Single Factor SUMMARY Groups Hom loại Hom loại Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (18)> Fcrit Vậy số hom rễ cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại hom đem dâm Phụ biểu 10 Ảnh hƣởng giá thể đến kết giâm hom cho loài Trà hoa vàng Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50% đất tầng B + 50% trấu hun Bầu đất tầng B ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (12,25)> Fcrit Vậy số hom sống cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại giá thể để giâm hom Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50% đất tầng B + 50% trấu hun Bầu đất tầng B Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (57,1)> Fcrit Vậy số hom rễ công thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại giá thể để dâm hom Anova: Single Factor SUMMARY Groups 50% đất tầng B + 50% trấu hun Bầu đất tầng B ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (26,84)> Fcrit Vậy số rễ /hom cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại giá thể để dâm hom Phụ biểu 11 Ảnh hƣởng ánh sáng đến tỷ lệ sống hom Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 CT4 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total F tính (10,38)> Fcrit Vậy tỷ lệ sống cơng thức thí nghiệm có phụ thuộc vào loại cơng thức che sáng khác ... pháp nghiên cứu 24 2.5.1 Nghiên cứu mã vạchADN (DNA barcode) cho Trà hoa vàng Ba Chẽ 24 2.5.2 Nghiên cứu số đặc điểm Lâm học Trà hoa vàng 26 2.5.3 Thí nghiệm giâm hom Trà hoa vàng. .. mã vạch; - Nghiên cứu số đặc điểm lâm học Trà hoa vàng (C chrysantha) : Xác định phân bố, đặc điểm sinh trƣởng, đặc điểm sinh học, sinh thái học; - Nghiên cứu kỹ thuật giâm hom Trà hoa vàng: Ảnh... 3.2 Một số đặc điểm Lâm học Trà hoa Vàng 36 3.2.1 Đặc điểm hình thái lồi Trà hoa vàng Ba chẽ 36 3.2.2 Đặc điểm sinh thái phân bố loài Trà hoa vàng Ba chẽ 39 3.2.3 Đặc điểm cấu trúc