Nghiên cứu đa dạng di truyền của tập đoàn giống mướp hương (luffa cylindrical) bằng chỉ thị rapd

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết trình bày luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan rằng, thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Huế, ngày 20 tháng 07 năm 2015 Học viên thực Trần Thị Bảo Ngà ii LỜI CẢM ƠN Trước hết, xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới TS Trương Thị Hồng Hải, người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, hỡ trợ tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn đến TS Nguyễn Thị Thu Thủy thầy cô cán khoa Nông Học – Trường Đại học Nông Lâm Huế, Viện Nghiên Cứu Rau Quả Hà Nội dạy dỗ tạo điều kiện thuận lợi cho trình học tập nghiên cứu Nhân dịp này, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến bạn Phạm Thanh Bình – người bạn đồng hành tơi vui buồn suốt năm học thời gian thực đề tài em sinh viên, tập thể lớp cao học Khoa học trồng 19A, anh chị em nhà khách trường Cuối xin thành kính ghi ơn Cha Mẹ sinh thành, dưỡng dục nên người Con xin cảm ơn gia đình chổ dựa vững cho bước qua lúc khó khăn Huế, ngày 20 tháng năm 2015 Trần Thị Bảo Ngà iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH .vii MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.4 Những điểm đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược mướp hương 1.1.1 Nguồn gốc phân loại mướp hương 1.1.2 Đặc điểm thực vật học mướp hương 1.1.3 Yêu cầu điều kiện sinh thái 1.1.4 Giá trị mướp hương 1.2 Nghiên cứu quan hệ di truyền thực vật 1.2.1 Giới thiệu thông tin di truyền, đa dạng di truyền thị 1.2.2 Kỹ thuật RFLP 14 1.2.3 Kỹ thuật AFLP 15 1.2.4 Kỹ thuật SSR 16 1.2.5 Kỹ thuật RAPD 17 1.2.6 Sử dụng kỹ thuật RAPD để nghiên cứu quan hệ di truyền thực vật 21 Chương MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 25 2.1.1 Mục tiêu tổng quát 25 2.1.2 Mục tiêu cụ thể 25 2.2 Nội dung nghiên cứu 25 2.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 25 2.3.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.3.2 Hóa chất thiết bị 28 2.3.3 Phạm vi nghiên cứu 29 iv 2.4 Phương pháp nghiên cứu 29 2.4.1 Đánh giá đặc điểm hình thái tập đồn giống mướp hương 29 2.4.2 Đánh giá đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương 31 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 Đánh giá đặc điểm nơng học tập đồn giống mướp hương 34 3.1.1 Một số đặc điểm hình thái tập đoàn mướp hương 34 3.1.2 Thời gian sinh trưởng tập đoàn giống mướp 36 3.1.3 Khả sinh trưởng phát triển tập đoàn giống mướp hương 38 3.1.4 Một số tiêu phẩm chất tập đoàn mướp hương 40 3.1.5 Năng suất yếu tố cấu thành suất 41 3.1.6 Tình hình sâu bệnh gây hại mướp hương 41 3.2 Đánh giá đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương thị RAPD 44 3.2.1 Kết tách chiết DNA tổng số 44 3.2.2 Khảo sát tính đa hình DNA kỹ thuật RAPD số giống mướp hương đại diện 44 3.2.3 Phân tích đa hình DNA kỹ thuật RAPD tập đoàn giống mướp hương 46 3.2.4 Đánh giá đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương 63 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 68 KẾT LUẬN 68 ĐỀ NGHỊ 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT AFLP : Amplified Fragment Length Polymorphism cs : Cộng CTAB : Cetyl threemethy ammonium bromide DNA : Deoxyribonucleic acid dNTP : Deoxy nucleotide triphosphates EDTA : Ethylenediaminetetraacetic acid PCR : Polymerase Chain Reaction PIC : Polymorphism Information Content RAPD : Random Amplified Polymorphic DNA RE : Restriction enzyme RFLP : Restriction Fragment Length Polymorphism RNA : Ribonucleic acid SSR : Simple Sequence Repeats STS : Sequence- tagged site TBE : Tris-borate-EDTA vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần dinh dưỡng 100g phần ăn số loại rau họ bầu bí Bảng 1.2 So sánh đánh giá đặc điểm số loại thị ứng dụng nghiên cứu đa dạng di truyền thực vật 13 Bảng 2.1 Danh sách tập đoàn giống mướp hương nghiên cứu 26 Bảng 2.2 Bộ mồi RAPD biểu đa hình 27 Bảng 2.3 Chu trình nhiệt phản ứng RAPD 32 Bảng 2.4 Thành phần phản ứng RAPD 32 Bảng 3.1 Phân nhóm số đặc điểm hình thái tập đồn mướp hương 35 Bảng 3.2 Thời gian qua giai đoạn sinh trưởng tập đoàn mướp hương 37 Bảng 3.3 Khả sinh trưởng, phát triển tập đoàn mướp hương 39 Bảng 3.4 Phân nhóm số tính trạng chất lượng tập đoàn mướp hương 40 Bảng 3.5 Năng suất yếu tố cấu thành suất 42 Bảng 3.6 Tỷ lệ bị sâu bệnh gây hại tập đoàn 43 Bảng 3.7 Tổng số băng DNA khuếch đại 48 giống mướp hương phân tích với 11 mồi RAPD 48 Bảng 3.8 Tỷ lệ đa hình tập đồn giống mướp hương với thị RAPD 50 Bảng 3.9 Bảng hệ số tương đồng di truyền 48 giống mướp hương nghiên cứu 65 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Sự bắt cặp khuếch đại phản ứng RAPD 19 Hình 3.1 Hình ảnh điện di DNA tổng số số mẫu giống mướp hương 44 Hình 3.2 Kết điện di số mồi RAPD biểu đa hình khảo sát từ giống mướp hương (B3, B10, B1 B2) 45 Hình 3.3 Kết điện di số mồi RAPD biểu đa hình khảo sát từ giống mướp hương (B3, B10, B30, ĐP, B1, B2 A1) 46 Hình 3.4 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR tập đoàn giống mướp hương sử dụng mồi UBC#301 51 Hình 3.5 Hình ảnh điện di sản phẩm phẩm PCR tập đoàn giống mướp hương sử dụng mồi UBC#312 53 Hình 3.6 Hình ảnh điện di sản phẩm phẩm PCR số giống mướp hương sử dụng mồi UBC#322 54 Hình 3.7 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR tập đoàn giống mướp hương sử dụng mồi UBC#337 56 Hình 3.8 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR tập đoàn giống mướp hương sử dụng mồi UBC#350 58 Hình 3.9 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR số giống mướp hương sử dụng mồi UBC#353 59 Hình 3.10 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR số giống mướp hương sử dụng mồi UBC#357 60 Hình 3.11 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR số giống mướp hương sử dụng mồi UBC#368 60 Hình 3.12 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR số giống mướp hương sử dụng mồi UBC#381 62 Hình 3.13 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR số giống mướp hương sử dụng mồi UBC#386 63 Hình 3.14 Phân nhóm di truyền 48 giống mướp hương dựa vào thị RAPD 67 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mướp hương (Lufa cylindrica) hay gọi mướp ngọt, mướp gối, mướp ta, loại rau ăn sử dụng phổ biến nước châu Á Việt Nam, có giá trị dinh dưỡng giá trị y học cao Quả mướp hương chứa hàm lượng cao chất khoáng (Mg, Ca, Na, Fe, Cu, ) (Dairo et al., 2007) [38], có vị mát, mùi thơm dễ chịu nên nhiều người ưa thích dùng chế biến thành nhiều ăn như: nấu canh, luộc, xào Bên cạnh giá trị dinh dưỡng, mướp cịn có giá trị y học cao, tất phân như: thân, lá, hạt dùng làm thuốc nam chữa bệnh như: đau lưng, ho, viêm mũi, Trong mướp hương có nhiều vitamin tốt cho sức khỏe người như: Vitamin B giúp ngăn ngừa lão hóa, vitamin C làm trắng da, Mướp hương có nguồn gốc từ vùng nhiệt đới [47], có thời gian sinh trưởng ngắn, khả sinh trưởng hoa đậu tốt mùa nóng, góp phần phát triển sản xuất rau trái vụ Vì mướp hương ngày ý phát triển, đáp ứng nhu cầu tiêu thụ nước mà xuất khẩu, lợi nhuận cao đối tượng nghiên cứu di truyền, y học, công nghệ sinh học sinh học phân tử Tuy nhiên chúng loài thực vật lưỡng bội với nhiễm sắc thể 26 (n = 13) giao phấn (Bal et al., 2004) [35], hoa đơn tính đồng chu, thụ phấn chủ yếu nhờ côn trùng [5], nên giống mướp hương, đặc biệt giống mướp hương địa phương có mùi thơm nếp bị thối hóa dần, giống có thơm mùi nếp dần nguy bị xói mịn nguồn gen mướp hương cao nhiều giống mướp hương bị dần thị hố Như vậy, việc sưu tập nghiên cứu giống mướp hương để bảo tồn nguồn gen mướp hương cần thiết Để khai thác sử dụng cách có hiệu nguồn gen quý này, chọn giống cần phải có hiểu biết mức độ đa dạng di truyền giống Hiện nay, với phát triển mạnh mẽ công nghệ sinh học mang lại nhiều thành tựu to lớn nông nghiệp Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sinh học chọn giống trồng nhiều nhà khoa học quan tâm Bằng đường tạo nhiều giống trồng lúa, ngô, đậu tương, bắp cải, khoai tây Trong đó, việc sử dụng thị phân tử khác RAPD, SSR, STS, AFLP,… nghiên cứu phát triển trở thành cơng cụ mạnh mẽ để phân tích đa dạng di truyền xác định mối quan hệ giống trồng, vật ni Trong đó, thị RAPD (Random Amplified Polymorphism DNA) (Williams et al., 1990; Welsh & McClelland, 1990) [73] [74] loại thị sử dụng phổ biến, kỹ thuật đơn giản, tiện lợi có hiệu việc phân tích đa dạng di truyền RAPD phương pháp nhanh để phát đa hình kỹ thuật khơng địi hỏi việc phân lập đọc trình tự, phát nhiều locus lúc nên RAPD kỹ thuật có triển vọng phân tích đa dạng di truyền Bên cạnh cơng tác thu thập bảo tồn giống mướp hương, việc đánh giá đa dạng di truyền bước nghiên cứu quan trọng định tới thành công việc phục tráng lai tạo giống Vì vậy, để nâng cao hiệu công tác chọn giống mướp nói chung mướp lai nói riêng, ngồi việc sử dụng phương pháp truyền thống việc kết hợp với sử dụng thị phân tử chọn giống u cầu cấp thiết Trên sở chúng tơi tiến hành “Nghiên cứu đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương (Luffa cylindrical) thị RAPD” nhằm mục đích xác lập đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương làm sở cho cơng tác bảo tồn, trì khai thác tập đồn giống mướp hương phục vụ cơng tác lai tạo giống Mục đích đề tài Đánh giá tính đa dạng di truyền làm sở cho cơng tác bảo tồn, trì khai thác tập đồn giống mướp hương phục vụ công tác lai tạo giống Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài * Ý nghĩa khoa học - Cung cấp thêm nhiều liệu, thông tin di truyền tập đoàn giống mướp hương - Hiểu biết đa dạng di truyền nguồn gen mướp hương tạo sở lý luận cho việc chọn lọc, phục tráng để nâng cao tiềm di truyền giống mướp hương - Phát sai khác di truyền tập đoàn mướp hương, đặc biệt giống mướp hương có triển vọng, có ý nghĩa quan trọng việc xác định cặp lai thích hợp *Ý nghĩa thực tiễn Nghiên cứu đa dạng di truyền thông qua thị phân tử góp phần nâng cao hiệu cơng tác bảo tồn chọn giống mướp hương có khả sinh trưởng phát triển tốt, cho suất cao, phẩm chất tốt, phù hợp với cấu sản xuất nông nghiệp Việt Nam Những điểm đề tài - Đánh giá mức độ đa dạng di truyền tập đoàn mướp hương - Tuyển chọn giống mướp hương triển vọng phục vụ công tác lai tạo giống mướp hương có khả sinh trưởng phát triển tốt, cho suất cao, phẩm chất tốt Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược mướp hương 1.1.1 Nguồn gốc phân loại mướp hương Cây mướp (Luffa cylindrical L.), thuộc họ bầu bí (Cucurbitaceae) Trong họ Bầu Bí (Cucurbitaceae) có chi thực vật Chi Mướp (Luffa) thuộc tơng Sicyoea, gồm có lồi: lồi địa phương thuộc vùng nhiệt đới khu vực Châu Âu, Châu Á Châu Phi loài địa phương thuộc vùng nhiệt đới khu vực Châu Mỹ Caribe Các chi cổ sơ tập trung đông Hymalaya, Đông Đông Nam Á [6] Hai loài mướp chủ yếu chi Luffa mướp hương (Luffa cylindrica) mướp khía (Luffa acutangula) thuộc nhóm lồi địa phương vùng nhiệt đới khu vực Châu Âu, Châu Á Châu Phi [48] Ngồi cịn có lồi hoang dã L graveolen L echinata Chúng loài thực vật lưỡng bội với nhiễm sắc thể 26 (n = 13) giao phấn [34] Mướp hương có tên khoa học Luffa cylindrical hay Luffa aegyptiaca Chúng thường mọc hoang dại vùng từ Miến Điện đến Philipin, từ phía Nam đến Đơng Bắc nước Úc đảo Tahiti Thái Bình Dương Ngày nay, mướp hương trồng nhiều vùng nhiệt đới dễ trồng tự nhiên không cần bàn tay người Mướp hương loại rau trồng vườn nhà Những vùng trồng mướp hương vùng trồng rau quan trọng Một nguồn tin khác khẳng định mướp hương (Luffa cylindrical) trồng cổ xưa vùng nhiệt đới Á châu có khả hóa Ấn Độ Nó xuất Trung Quốc vào khoảng 600 năm trước công nguyên Ngày mướp hương trồng tự mọc cách tự nhiên vùng nhiệt đới giới [47] Tại Việt Nam, mướp hương loại rau dễ trồng, quen thuộc với người dân Việt Nam Cây mướp trồng nơi từ Bắc đến Nam, giàn mướp hình ảnh quen thuộc nhiều hộ gia đình Có thể trồng gốc mướp bờ ao, làm giàn phía mặt ao, tiết kiệm đất, sai đẹp [6] Theo hệ thống phân loại lồi, lồi mướp hương cịn chia nhóm [48]: Nhóm mướp hương var aegyptiaca: trồng rộng rãi với cách trồng khác nhằm sản xuất rau ăn đọt, ăn sản xuất đồ xốp Nhóm mướp hương var leiocarpa: hoang dại xuất từ Miến Điện đến Philipin, đến Đông Bắc Châu Úc đảo Tahiti 1.1.2 Đặc điểm thực vật học mướp hương Thân: Tương tự loài khác họ bầu bí, mướp leo thân thảo với tua không ngắn 15 cm không dễ bị đứt đơi Thân có góc cạnh, màu lục nhạt, có nhiều tua cuốn, phân cành mạnh Thân mướp bị dài m bám 77 STT Chỉ tiêu 32 B14 33 B15 34 B16 35 B17 36 B18 37 B19 38 B21 39 B22 40 B23 41 Hình dạng Tiết diện cuống thân hoa, cuống Màu sắc Hình dạng Xanh trung bình Xanh đậm Thận Răng cưa Trung bình Góc cạnh Trịn Trịn Răng cưa Khơng có Góc cạnh Trịn Xanh đậm Xanh trung bình Xanh đậm Trịn Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn Thận Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn Trịn Răng cưa Trung bình Góc cạnh Trịn Trịn Răng cưa Khơng có Góc cạnh Trịn Mép Xẻ thùy Trịn Răng cưa Khơng có Góc cạnh Trịn Thận Răng cưa Khơng có Góc cạnh Trịn Trịn Răng cưa Trung bình Góc cạnh Trịn B24 Xanh đậm Xanh trung bình Xanh trung bình Xanh trung bình Xanh đậm Trịn Răng cưa Khơng có Góc cạnh Trịn 42 B25 Xanh đậm Trịn Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 43 B26 Xanh đậm Thận Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 44 B27 Xanh đậm Trịn Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 45 B28 Xanh đậm Trịn Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 46 B29 Xanh đậm Trịn Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 47 B30 Xanh Trịn Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 48 ĐP Xanh đậm Thận Răng cưa Nơng Góc cạnh Trịn 78 Phụ lục Một số đặc điểm hình thái tập đoàn giống mướp hương Chỉ Núm Rốn STT tiêu quả Nhọn Nhọn Nhọn Nhọn Nhọn Tròn Nhọn Nhọn Nhọn Tròn Nhọn Nhọn Nhọn Tròn Nhọn Nhọn Nhọn Nhọn Nhọn Trịn Nhọn Hình dạng Màu sắc Màu sọc Độ cong Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Elip Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Elip dài Elip Thuôn nhỏ Elip Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Elip dài Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Elip dài Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Thuôn nhỏ Elip Xanh Xanh Xanh Xanh nhạt Xanh nhạt Xanh Xanh nhạt Xanh Xanh nhạt Xanh nhạt Xanh nhạt Xanh nhạt Xanh đậm Xanh nhạt Xanh đậm Xanh nhạt Xanh nhạt Xanh đậm Xanh đậm Xanh nhạt Xanh Xanh đậm Xanh đậm Xanh đậm Xanh đậm Xanh Xanh đậm Xanh nhạt Xanh đậm Xanh nhạt Xanh Xanh Xanh Xanh đậm Xanh Xanh đậm Xanh Xanh đậm Xanh đậm Xanh đậm Xanh Xanh Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong Cong vừa Cong vừa Cong Cong Cong Cong Cong Cong nhiều Cong Cong 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A10 A11 A12 A13 A15 A16 A17 A18 A19 A20 A29 A30 B1 B2 Nhọn Nhọn Nhọn Nhọn Nhọn Tròn Tròn Tròn Nhọn Tròn Nhọn Tròn Tròn Tròn Nhọn Nhọn Tròn Tròn Nhọn Tròn Tròn 22 B3 Nhọn Nhọn Elip Xanh Xanh 23 B4 Tròn Nhọn Elip dài Xanh Xanh 24 25 26 27 28 B5 B6 B7 B8 B9 Tròn Tròn Tròn Tròn Nhọn 29 B10 Trịn Trịn 30 31 B12 Trịn Trịn Thn nhỏ Xanh đậm Xanh đậm B13 Nhọn Nhọn Elip Xanh nhạt Xanh nhạt Nhọn Thn nhỏ Xanh Xanh Trịn Elip Xanh nhạt Xanh Trịn Thn nhỏ Xanh nhạt Xanh nhạt Nhọn Elip dài Xanh đậm Xanh đậm Nhọn Thuôn nhỏ Xanh nhạt Xanh nhạt Elip dài Xanh Xanh Chiều X  SD dài (cm) 35,2 ± 4,3 27,2 ± 1,9 31,8 ± 1,9 33,2 ± 3,7 29,2 ± 3,8 25,4 ± 1,8 30,7 ± 4,7 27,6 ± 2,1 37,2 ± 7,7 40,4 ± 4,1 30,8 ± 3,5 34,6 ± 2,9 34,6 ± 4,5 32,8 ± 7,0 39,6 ± 3,2 35.4 ± 6.8 33.2 ± 2.5 35.6 ± 2.7 31.6 ± 2.4 37,8 ± 4,1 39,4 ± 3,1 Chiều rộng (cm) X  SD 12 ± 2,1 12,2 ± 12 14,9 ± 1,4 14,7 ± 1,9 14,6 ± 1,7 15,7 ± 1,6 16,3 ± 1,8 14,7 ± 1,7 14,4 ± 1,3 15,6 ± 0,8 13,7 ± 1,6 14,9 ± 1,1 17,1 ± 2,4 16,8 ±3,0 13,9 ± 0,7 13.7 ± 1.8 16.5 ± 1.1 13.7 ± 2.5 11.9 ± 0.7 15 ± 1,2 15,7 ± 1,0 35,4 ± 3,1 13,6 ± 0,9 41 ± 7,0 14,7 ± 2,6 30,4 ± 2,1 45,3 ± 7,5 33,4 ± 2,3 29,4 ± 3,4 37 ± 3,5 15,4 ± 1,1 14,9 ± 1,9 14 ± 0,7 13,5 ± 1,0 14,3 ± 1,0 33,8 ± 4,8 14,6 ± 2,0 32,7 ± 4,0 15,3 ± 28,1 ± 5,0 14,4 ± 2,2 79 Chỉ Núm Rốn STT tiêu quả Hình dạng Màu sắc Màu sọc 32 33 B14 Nhọn Tròn B15 Tròn Tròn 34 B16 Trịn Nhọn Thn nhỏ Xanh Xanh 35 B17 Nhọn Nhọn Thn nhỏ Xanh Xanh 36 B18 Trịn Nhọn Thn nhỏ Xanh nhạt Xanh nhạt 37 B19 Tròn Tròn 38 39 40 41 42 43 44 B21 B22 B23 B24 B25 B26 B27 45 B28 Nhọn Nhọn 46 47 48 B29 Nhọn Trịn Thn nhỏ Xanh đậm Xanh đậm B30 Trịn Nhọn Elip dài Xanh nhạt Xanh đậm ĐP Tròn Nhọn Elip dài Xanh nhạt Xanh Nhọn Tròn Nhọn Tròn Tròn Trịn Trịn Nhọn Nhọn Nhọn Trịn Trịn Trịn Trịn Thn nhỏ Xanh nhạt Xanh nhạt Thuôn nhỏ Xanh đậm Xanh đậm Elip Xanh đậm Xanh đậm Thuôn nhỏ Xanh Elip Xanh đậm Thuôn nhỏ Xanh Thuôn nhỏ Xanh Elip dài Xanh Thuôn nhỏ Xanh Elip dài Xanh nhạt Elip Xanh nhạt Xanh nhạt Xanh đậm Xanh Xanh đậm Xanh đậm Xanh Xanh nhạt Xanh Độ cong Chiều X  SD Chiều rộng (cm) X  SD dài (cm) Cong 43,6 ± 3,2 16,4 ± 1,5 Cong 30,6 ± 3,5 15,3 ± 1,3 Cong 39,6 ± 3,7 16,4 ± 2,3 vừa Cong 30,2 ± 9,6 15,4 ± 2,1 vừa Cong 31,8 ± 1,9 15,2 ± 1,6 Cong 44 ± 2,5 16,2 ± 0,9 vừa Cong 32,7 ± 3,4 15,6 ± 2,3 Cong 31,7 ± 1,5 13 ± 0,7 Cong 34,8 ± 3,7 14,4 ± 1,1 Cong 32,1 ± 1,9 12,9 ± 0,9 Cong 29 ± 6,3 14,2 ± 2,4 Cong 35,6 ± 2,7 13,7 ± 2,5 Cong 28 ± 1,6 14,3 ± 1,7 Cong 35.4 ± 9.3 15.5 ± 1.1 vừa Cong 37.6 ± 7.5 16.6 ± 1.5 Cong 30.1 ± 5.2 17.6 ± 0.9 Cong 41.3 ± 6.1 16 ± 1.6 80 Phụ lục Một số tính trạng chất lượng tập đồn giống mướp hương A1 Độ Đặc Độ Thơm ruột chưa nấu Đặc Thơm A2 Đặc Khơng thơm Không thơm Dẻo 4,8 A3 Đặc Không thơm Khơng thơm Dẻo 4,2 A4 Đặc Thơm Không thơm Dẻo 4.0 A5 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4.2 A6 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 4.5 A7 Đặc Thơm Thơm Dẻo 4.3 A10 Đặc Thơm Khơng thơm Dẻo 3,9 A11 Xốp Không thơm Không thơm Dẻo 4,0 10 A12 Xốp Không thơm Không thơm Dẻo 5,0 11 A13 Đặc Thơm Không thơm Dẻo 5,2 12 A15 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4,2 13 A16 Xốp Thơm Thơm Dẻo 4,2 14 A17 Đặc Thơm Thơm Dẻo 4,1 15 A18 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4,2 16 A19 Đặc Thơm Thơm Dẻo 4,1 17 A20 Đặc Thơm Khơng thơm Dẻo 4,2 18 A29 Xốp Thơm Không thơm Dẻo 3,6 19 A30 Đặc Không thơm Khơng thơm Dẻo 3,9 20 B1 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 5,2 21 B2 Xốp Thơm Thơm Dẻo 4,3 22 B3 Xốp Thơm Thơm Dẻo 5,2 23 B4 Xốp Không thơm Khơng thơm Dẻo 4,4 24 B5 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 3,5 25 B6 Đặc Thơm Không thơm Dẻo 3,8 26 B7 Đặc Thơm Khơng thơm Dẻo 4,4 27 B8 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4,2 28 B9 Đặc Thơm Thơm Dẻo 3,6 29 B10 Đặc Thơm Thơm Dẻo 3,7 30 B12 Đặc Thơm Không thơm Dẻo 4,9 31 B13 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 3,8 32 B14 Đặc Thơm Không thơm Dẻo 4,2 STT KH giống Độ Thơm nấu chín Khơng thơm Độ Dẻo Dẻo Độ Brix 4,0 81 33 B15 Độ Đặc Độ Thơm ruột chưa nấu Đặc Thơm 34 B16 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4,5 35 B17 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4,2 36 B18 Xốp Thơm Khơng thơm Dẻo 5,4 37 B19 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 4,4 38 B21 Xốp Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 4,2 39 B22 Đặc Thơm Thơm Dẻo 4,3 40 B23 Xốp Không thơm Không thơm Dẻo 3,9 41 B24 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 5,6 42 B25 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 4,1 43 B26 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 4,1 44 B27 Đặc Thơm Khơng thơm Dẻo 3,4 45 B28 Đặc Khơng thơm Khơng thơm Dẻo 3,9 46 B29 Đặc Không thơm Không thơm Dẻo 5,1 47 B30 Đặc Thơm Thơm Dẻo 3,8 48 ĐP Đặc Thơm Thơm Dẻo 4,1 STT KH giống Độ Thơm nấu chín Thơm Độ Dẻo Dẻo Độ Brix 3,9 82 Phụ lục Bảng mã hóa liệu đánh giá đa dạng di truyền tập đoàn mướp hương A1 1 0 0 1 0 1 1 0 0 0 1 0 1 1 1 1 0 A2 0 0 1 1 0 0 1 0 0 0 1 0 1 1 1 0 0 A3 0 0 1 1 1 1 0 0 1 1 1 1 0 1 1 1 A4 0 1 1 1 0 0 1 1 1 1 0 0 1 1 1 1 A5 1 0 1 1 0 1 1 1 0 0 0 1 1 1 0 A6 1 0 1 1 0 1 0 1 0 0 0 1 1 1 1 0 A7 1 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 0 A10 A11 A12 A13 A15 A16 A17 A18 A19 1 0 1 0 1 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 1 1 0 0 1 1 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 0 1 1 1 1 0 1 1 1 1 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 1 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 1 1 1 0 1 1 0 1 0 1 0 0 0 1 1 1 1 1 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 83 A1 0 0 0 0 0 0 0 1 0 A2 0 0 0 0 0 0 0 0 1 A3 1 0 0 1 1 1 1 A4 1 0 0 0 1 1 0 1 0 A5 1 0 0 0 1 1 1 0 A6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 A7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 A10 A11 A12 A13 A15 A16 A17 A18 A19 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 0 1 1 0 1 1 1 1 1 0 0 0 1 1 0 1 1 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 84 A20 A29 A30 B1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 1 1 0 1 1 0 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 1 0 1 0 1 0 1 B2 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 1 0 0 1 1 0 1 B3 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 B4 0 0 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 1 0 0 0 B5 0 1 1 1 0 0 1 1 1 0 1 0 0 1 0 1 B6 0 0 1 1 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 1 B7 1 0 0 1 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 B8 1 0 0 0 1 1 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 B9 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 0 0 0 B10 B12 B13 B14 0 0 1 1 1 0 0 1 0 0 1 0 0 1 1 1 1 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 0 1 1 1 1 0 0 0 1 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 1 0 1 0 1 0 1 1 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 85 A20 A29 A30 B1 0 1 0 1 1 0 1 1 0 0 1 1 1 1 1 0 1 0 1 1 0 0 1 1 1 1 0 0 1 0 0 1 B2 1 1 1 1 1 1 0 B3 0 0 0 1 1 1 1 B4 0 1 0 1 1 0 1 0 B5 1 1 1 1 1 1 0 B6 0 0 1 1 0 0 0 B7 0 0 0 1 1 1 0 B8 0 0 1 1 1 0 0 B9 0 0 1 1 1 1 0 0 B10 B12 B13 B14 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 1 1 0 1 0 0 0 1 1 1 0 1 1 1 0 0 0 0 1 0 86 B15 B16 B17 B18 B19 B21 B22 B23 B24 B25 B26 B27 B28 B29 B30 ĐP 1 0 0 1 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 1 1 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 1 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 0 0 1 1 1 0 1 1 1 1 1 1 0 0 1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 1 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 1 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 1 0 1 1 1 1 1 1 1 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 1 1 0 1 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 1 1 0 1 1 1 1 1 0 0 1 1 0 1 0 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 1 1 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 1 1 1 1 0 1 1 1 0 87 B15 B16 B17 B18 B19 B21 B22 B23 B24 B25 B26 B27 B28 B29 B30 ĐP 0 0 1 0 0 1 0 1 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 1 1 0 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 1 0 1 1 0 1 1 1 0 1 1 0 1 1 1 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 1 0 0 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 1 1 0 0 1 0 1 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 88 PHỤ LỤC HÌNH ẢNH Ủ hạt giống Cây phân cành Ra hoa Giai đoạn mọc Cây thật Ra hoa đực Quả thu hoạch 89 Lá màu xanh đậm Lá màu xanh trung bình Lá hình trịn Lá hình thận Núm trịn Quả hình elip Lá màu xanh nhạt Núm nhọn Rốn trịn Quả hình elip dài Rốn nhọn Quả hình thn dài 90 Màu sắc vỏ quả: xanh đậm, xanh, xanh nhạt Sọc màu xanh đậm Sọc màu xanh Sọc màu xanh nhạt Giống A19: Núm nhọn, rốn nhọn, dạng thuôn nhỏ, vỏ xanh nhạt, gân màu xanh 91 Cây bị bệnh thối gốc Sâu ăn Chuẩn bị cocktail Cây bị sâu xám ăn Sâu vẽ bùa Thực điện di ... Tên giống Mướp Thơm dài Mướp hương Mướp hương dạng Mướp hương Mướp Thơm Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương dạng Mướp hương dạng Mướp hương dạng Mướp hương. .. Tên giống Mướp Thơm Mướp hương dạng Mướp Tràng Định Mướp hương Mướp hương Mướp hương dạng Mướp hương Mướp hương Mướp Thơm Mướp Thơm Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương Mướp hương. .. sở chúng tơi tiến hành ? ?Nghiên cứu đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương (Luffa cylindrical) thị RAPD? ?? nhằm mục đích xác lập đa dạng di truyền tập đoàn giống mướp hương làm sở cho cơng tác