(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu ảnh hưởng của các elicitor, hệ thống LED cải tiến, môi trường hai lớp đến quá trình nhân giống, tạo củ và tích lũy saponin trong sâm ngọc linh (panax vietnamensis ha e

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC ELICITOR, HỆ THỐNG LED CẢI TIẾN, MƠI TRƯỜNG HAI LỚP ĐẾN Q TRÌNH NHÂN GIỐNG, TẠO CỦ VÀ TÍCH LŨY SAPONIN TRONG SÂM NGỌC LINH (PANAX VIETNAMENSIS HA ET GRUSHV.) IN VITRO Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Trịnh Thị Lan Anh Sinh viên thực MSSV: 1411100609 : Nguyễn Thị Kim Ngân Lớp: 14DSH04 TP Hồ Chí Minh, 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố hệ thống LED lên q trình nhân nhanh sinh khối, tích lũy saponin in vitro sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.)” cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn TS Trịnh Thị Lan Anh Những số liệu kết nghiên cứu đề tài trung thực chưa công bố hình thức khơng trùng lặp với đề tài khác Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực đề tài cảm ơn thơng tin trích dẫn đề tài ghi rõ nguồn gốc Tôi hoàn toàn chịu trách nhiệm trước nhà trường lời cam đoan Sinh viên thực Nguyễn Thị Kim Ngân ii LỜI CẢM ƠN Warren Buffett nói rằng: “Nếu muốn nhanh mình, muốn xa nhau” Câu nói thật khơng sai, suốt q trình hồn thành đề tài mình, em quan tâm chăm sóc dạy dỗ từ Cơ TS Trịnh Thị Lan Anh Em xin chân thành trân trọng cảm ơn ân cần dạy bảo yêu thương mà cô dành cho em, hệ sinh viên Cảm ơn khơng người giảng viên đầy tâm huyết cho em hành trang kiến thức vững vàng để vững bước đường nghiên cứu khoa học, mà cịn yêu thương em người thân gia đình, quan tâm, động viên, giúp đỡ em để em sống trọn vẹn với tuổi đôi mươi giảng đường đại học Em xin chân thành cảm ơn quý Thầy, Cơ, Anh Chị nhân viên phịng thí nghiệm Viện Khoa Học Ứng Dụng HUTECH, trường Đại học Công nghệ Thành Phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện hỗ trợ cho em suốt q trình hồn thành đề tài Có người nói: “Đời cho ta bao lần đôi mươi” Tuổi đôi mươi lứa tuổi đẹp người Tuổi đôi mươi em thật đẹp sinh viên ngành Công nghệ sinh học Viện Khoa học Ứng dụng HUTECH, trường Đại học Công nghệ HUTECH Trong suốt trình học tập rèn luyện giảng đường đại học dạy tận tình hỗ trợ nhiệt tình từ thầy cơ, em học tập cháy với lứa tuổi đơi mươi trog hoạt động Viện, Trường Em xin chân thành cảm ơn bạn Thảo em Hải hỗ trợ tận tình giúp đỡ em người thân gia đình Và để có thành cơng ngày hơm nay, có em ngày hơm khơng thể khơng nhắc đến tình u thương ủng hộ từ phía gia đình Gia đình hậu phương vững cho vượt qua khó khăn, thử thách sống tiếp thêm nghị lực cho Con cảm ơn Ông Bà ngoại, Ba Mẹ Cậu dạy dỗ, dìu dắt từ chập chững bước lớn khôn thành người, cho điều tốt Công ơn trời biển tình u thương vơ bờ bến gia đình quà lớn quý giá mà nhận Con xin biết ơn gia đình bên cạnh, ủng hộ động viên bước đường mà chọn iii Vì kiến thức thân cịn hạn chế, q trình thực tập, hồn thiện đề tài em khơng tránh khỏi sai sót, kính mong nhận ý kiến đóng góp từ q thầy TP Hồ Chí Minh, ngày 28 tháng 07 năm 2018 Sinh viên thực Nguyễn Thị Kim Ngân iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH MỤC HÌNH ẢNH ix DANH MỤC BẢNG xii MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Tầm quan trọng đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn 1.4 Lý chọn đề tài Tình hình nghiên cứu Mục đích nghiên cứu Tình hình nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Các kết đạt đề tài Kết cấu đề tài CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 10 1.1 Giới thiệu vi nhân giống elicitor 10 1.1.1 Khái niệm vi nhân giống 10 1.1.2 Các chất cảm ứng – Elicitor 10 1.1.2.1 Than hoạt tính 11 1.1.2.2 Saccharose 12 1.1.2.3 Bạc nitrate 13 1.1.3 Phương pháp nuôi cấy lỏng lắc 13 1.1.4 Vai trò ánh sáng vi nhân giống 15 1.1.4.1 Vai trò ánh sáng trình quang hợp thực vật 15 v 1.1.4.2 Vai trò ánh sáng trình sinh trưởng phát triển thực vật 16 1.1.4.3 Vai trò ánh sáng nhân giống in vitro 18 1.1.4.4 Nguồn chiếu sáng nhân tạo sử dụng nuôi cấy in vitro 19 1.1.5 Đèn LED (Light Emitting Diode) 22 1.1.5.1 Giới thiệu đèn LED 22 1.1.5.2 Ưu, nhược điểm đèn LED 23 1.1.5.3 Một số thành tựu giới Việt Nam sử dụng nguồn sáng LED nuôi cấy in vitro 24 1.1.5.4 Hướng phát triển ứng dụng đèn LED nuôi cấy in vitro Việt Nam 27 1.1.6 Ánh sáng thực vật 28 1.1.6.1 Vai trò số phổ ánh sáng đơn sắc đến đời sống thực vật 28 1.1.6.2 Vai trị ánh sáng đến q trình tích lũy chất hữu thực vật 30 1.2 Phương pháp định tính định lượng saponin Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 33 1.2.1 Định tính saponin Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) phương pháp Sắc ký lớp mỏng 33 1.2.2 Định lượng saponin Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) phương pháp Sắc ký lỏng hiệu cao 34 1.3 Sơ lược Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 37 1.3.1 Giới thiệu sơ lược Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 37 1.3.2 Đặc điểm hình thái 38 1.3.3 Đặc điểm sinh trưởng phát triển 39 1.3.4 Đặc điểm phân bố 40 1.3.5 Nhân giống Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 40 1.3.5.1 Nhân giống từ hạt 40 1.3.5.2 Nhân giống in vitro 42 1.3.6 Thành phần hóa học tác dụng dược lý Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 42 1.3.6.1 Thành phần hóa học 42 1.3.6.2 Tác dụng dược lý 43 vi 1.3.7 Một số nghiên cứu nhân giống bảo tồn Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 45 1.3.7.1 Nghiên cứu nhân giống bảo tồn nguồn gene Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) giới 45 1.3.7.2 Nghiên cứu nhân giống bảo tồn nguồn gene Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) Việt Nam 46 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 50 2.1 Địa điểm thời gian tiến hành đề tài 50 2.1.1 Địa điểm 50 2.1.2 Thời gian 50 2.2 Vật liệu 50 2.2.1 Nguồn mẫu 50 2.2.2 Môi trường điều kiện nuôi cấy 50 2.2.3 Thiết bị dụng cụ 51 2.3 Phương pháp nghiên cứu 51 2.3.1 Thiết kế hệ thống chiếu sáng cải tiến đèn LED đơn 53 2.3.2 Thiết kế hệ thống chiếu sáng cải tiến đèn LED hỗn hợp 54 2.4 Bố trí thí nghiệm 55 2.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng than hoạt tính đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 55 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng saccharose đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 55 2.4.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO3) đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 56 2.4.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng LED đơn cải tiến đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 57 2.4.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng LED hỗn hợp với tỷ lệ 50:50 (đỏvàng; đỏ-xanh dương, vàng-xanh dương) đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 58 vii 2.4.6 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng nuôi cấy lỏng tĩnh lỏng lắc (giai đoạn cảm ứng) đến khả tăng trưởng Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) in vitro 59 2.4.7 Thí nghiệm 7: Khảo sát ảnh hưởng môi trường hai lớp (kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng môi trường nuôi cấy) đến khả tăng trưởng, tạo củ Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) in vitro 60 2.5 Hình thái giải phẫu củ Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) in vitro 62 2.6 Thu nhận hợp chất saponin triterpenoid từ sản phẩm q trình ni cấy in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) môi trường hai lớp 62 2.6.1 Định tính saponin triterpenoid phương pháp sắc ký lớp mỏng 62 2.6.2 Định lượng saponin triterpenoid phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chrotomatography – HPLC) 63 2.7 Chỉ tiêu theo dõi 64 2.8 Thống kê xử lý số liệu 64 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 65 3.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng elicitor than hoạt tính đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 65 3.2 Thí nghiệm Ảnh hưởng elicitor saccharose đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 68 3.3 Thí nghiệm Ảnh hưởng elicitor AgNO3 đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 71 3.4 Thí nghiệm Ảnh hưởng ánh sáng LED đơn cải tiến đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 74 3.5 Thí nghiệm Ảnh hưởng ánh sáng LED hỗn hợp cải tiến đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 76 3.6 Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng nuôi cấy lỏng tĩnh lỏng lắc (giai đoạn cảm ứng) đến khả tăng trưởng Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 80 3.7 Thí nghiệm 7: Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường nuôi cấy (môi trường hai lớp) đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro tích lũy saponin Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 82 viii 3.8 Hình thái Giải phẫu củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) 88 3.9 Định tính saponin sắc ký lớp mỏng 90 3.10 Định lượng saponin củ sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) in vitro sau 16 tuần nuôi cấy phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 90 KẾT LUẠN VÀ KIẾN NGHỊ 92 TÀI LIỆU THAM KHẢO 94 PHỤ LỤC ix DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AC Than hoạt tính BA Benzyladenine BAP 6-Benzyl Amino Purin DNA Deoxyribonucleic Acid GA3 Acid gibberellic HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao HPTLC Sắc ký lớp mỏng cao áp IAA Acid b-Indolyacetic IBA Acid b-Indolybutyric IFR Cường độ ánh sáng đỏ xa IR Cường độ ánh sáng đỏ KH2PO4 Monopotassium phosphate KH&CN Khoa học công nghệ Kin Kinetin LED Light-Emmitting Diode MS Murashige Skoog, 1962 NAA Acid a-naphtaleneacetic NaClO Sodium hypocloride SH Schenk Hildebrandt (1972) TDZ Thidiazuron TLC Sắc ký lớp mỏng UFLC Sắc ký lỏng hiệu cao siêu nhanh WPM Woody Plant Medium 2,4-D 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid Error Mean Square 0.00015 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 0.0336 t Grouping Mean N A 1.33333 30 B 0.66333 30 C 0.43000 30 D 0.12667 30 SỐ CỦ Source Model Source NT ĐƯỜNG KÍNH CỦ Source Model Source NT CHIỀU DÀI CỦ Source Model Source NT NT B0 B3 B2 B1 Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 26.94444444 5.38888889 24.25 F 26.94444444 5.38888889 24.25 F 26.94444444 5.38888889 24.25 F 26.94444444 5.38888889 24.25 F 0.17466667 0.03493333 196.50 F 0.17466667 0.03493333 196.50 F Model 0.32910096 0.04701442 1367.69 F NT 0.32910096 0.04701442 1367.69 F Model 0.00943663 0.00134809 224.68 F NT 0.00943663 0.00134809 224.68 F Model 20.50000000 4.10000000 12.30 0.0002 Error 12 4.00000000 0.33333333 Corrected Total 17 24.50000000 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.836735 26.64694 0.577350 2.166667 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 20.50000000 4.10000000 12.30 0.0002 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.333333 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 1.0271 t Grouping Mean N NT A 3.6667 30 C5 A B A 3.3333 30 C3 B B C 2.3333 30 C4 C D C 1.6667 30 C2 D C D C 1.3333 30 C1 D D 0.6667 30 C0 CHIỀU CAO CHỒI Source Model Source NT SỐ LÁ Source Model Source NT ĐƯỜNG KÍNH LÁ Source Model Source NT SỐ CỦ Source Model Source NT Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.00849828 0.00169966 223.31 F 0.00849828 0.00169966 223.31 F 6.00000000 3.00000000 9.00 0.0156 Error 2.00000000 0.33333333 Corrected Total 8.00000000 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.750000 24.74358 0.577350 2.333333 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 6.00000000 3.00000000 9.00 0.0156 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.333333 Critical Value of t 2.44691 Least Significant Difference 1.1535 t Grouping Mean N NT A 3.3333 30 C0 A B A 2.3333 30 C3 B B 1.3333 30 C1 DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.05457689 0.02728844 16373.1 F 0.05457689 0.02728844 16373.1 F 0.20769067 0.10384533 2168.46 F 0.20769067 0.10384533 2168.46 F Model 0.03023693 0.00755923 804.17 F NT 0.03023693 0.00755923 804.17 F 0.00641360 0.00160340 19.29 0.0001 Error 10 0.00083133 0.00008313 Corrected Total 14 0.00724493 R-Square Coeff Var Root MSE cm Mean 0.885253 2.449252 0.009118 0.372267 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.00641360 0.00160340 19.29 0.0001 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000083 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0166 t Grouping Mean N NT A 0.398333 30 D4 A B A 0.387667 30 D3 B B 0.376333 30 D1 C 0.358667 30 D0 D 0.340333 30 D2 Source Model DF TRỌNG LƯỢNG KHÔ Source NT Source Model CHIỀU CAO CHỒI A B Source NT B C D Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.00761867 0.00190467 16.47 0.0002 Error 10 0.00115667 0.00011567 Corrected Total 14 0.00877533 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.867000 D4 0.86819130 1.004500 0.010755 1.070667 0.802667 30 D3 Anova SS DF Mean Square F Value Pr > F B 0.00761867 0.00190467 16.47 0.0002 0.795333 30 D1 Alpha 0.05 0.784000 30 ofD0 Error Degrees Freedom 10 0.726333 30Square D2 Error Mean 0.000116 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0196 t Grouping Mean N NT A 1.100667 30 D4 A B A 1.086667 30 D3 B B 1.074667 30 D1 C 1.053333 30 D0 C C 1.038000 30 D2 DF SỐ CHỒI Source Model DF Source NT Sum of Mean Square F Value Pr > F 0.01062157 20.24 F 0.04248627 0.01062157 20.24 F 19.33333333 4.83333333 18.12 0.0001 Error 10 2.66666667 0.26666667 Corrected Total 14 22.00000000 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.878788 25.81989 0.516398 2.000000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 19.33333333 4.83333333 18.12 0.0001 2.65667 Alpha 30 D4 0.01 Error Degrees of Freedom 10 2.64567 Error Mean 30 SquareD3 0.266667 Critical Value of t 3.16927 2.59367 30 D1 Least Significant Difference 1.3363 t Grouping Mean N NT 2.53800 30 A D0 3.6667 30 D4 A 2.52733 30 B D2 A2.6667 30 D3 B B 2.0000 30 D1 B B C 1.3333 30 D0 C C 0.3333 30 D2 Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.00558627 0.00139657 21.71 F 0.00558627 0.00139657 21.71 F 1.76666667 5.30 0.0149 Error 10 3.33333333 0.33333333 Corrected Total 14 10.40000000 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.679487 32.07501 0.577350 1.800000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 7.06666667 1.76666667 5.30 0.0149 Alpha 0.05 MeanDegrees N of Freedom NT Error 10 0.380667 30 D4 Error Mean Square 0.333333 A Critical Value of t 2.22814 0.372333 30 Difference D3 Least Significant 1.0504 B t Grouping Mean N NT 0.358667 30A D1 2.6667 30 G4 C A 0.342667 30A D0 2.3333 30 G3 D A 0.327667 30B D2 A 1.6667 30 G0 B A DF Source NT t Grouping A B A B C D C D NT DF ĐƯỜNG KÍNH TÁN LÁ CHÉT SỐ CỦ N Squares 7.06666667 10 B B ĐƯỜNG KÍNH CỦ Source Model Source NT A 1.6667 B 0.6667 30 G1 30 G2 Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 18.48 0.0001 0.00473173 0.00118293 Error 10 0.00064000 0.00006400 Corrected Total 14 0.00537173 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.880858 1.045934 0.008000 0.764867 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.00473173 0.00118293 18.48 0.0001 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000064 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0146 DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.00597760 0.00149440 20.72 F NT 0.00597760 0.00149440 20.72 F Model 0.17753233 0.05917744 2070.35 F NT 0.17753233 0.05917744 2070.35 F 1.016333 G0 330 0.40021433 0.13340478 952.32 F 0.40021433 0.13340478 952.32 F 11.33333333 3.77777778 11.33 0.0030 Error 2.66666667 0.33333333 Corrected Total 11 14.00000000 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.809524 28.86751 0.577350 2.000000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 11.33333333 3.77777778 11.33 0.0030 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.333333 Critical Value of t 2.30600 Least Significant Difference 1.0871 t Grouping Mean N NT A 3.3333 30 A B A 2.3333 30 B B C 1.6667 30 C C 0.6667 30 G0 G3 G1 Sum of DF Squares Mean Square F Value Pr > F 1.94590000 0.64863333 276.01 F NT 1.94590000 0.64863333 276.01 F 8.66666667 2.88888889 11.56 0.0028 Error 2.00000000 0.25000000 0.759333 Corrected30 Total G0 11 10.66666667 0.433333 G3 Var R-Square 30 Coeff Root MSE Mean 21.42857 0.500000 2.333333 C 0.812500 G1 Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.412667 DF 30 8.66666667 2.88888889 11.56 0.0028 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.25 Critical Value of t 2.30600 Least Significant Difference 0.9414 t Grouping Mean N NT A 3.6667 30 G2 B 2.3333 30 G0 B C B 2.0000 30 G3 C C 1.3333 30 G1 ĐƯỜNG KÍNH TÁN LÁ CHÉT Source Model Source Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 1.20740000 0.40246667 335.39 F DF 12 NT SỐ CỦ Source Model Source NT ĐƯỜNG KÍNH CỦ Source Model Source NT CHIỀU DÀI CỦ 1.20740000 0.40246667 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.0012 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 0.0949 t Grouping Mean N A 1.87667 30 B 1.41000 30 C 1.20667 30 D 1.02667 30 335.39 F 6.91666667 2.30555556 9.22 0.0056 Error 2.00000000 0.25000000 Corrected Total 11 8.91666667 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.775701 35.29412 0.500000 1.416667 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 6.91666667 2.30555556 9.22 0.0056 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.25 Critical Value of t 2.30600 Least Significant Difference 0.9414 t Grouping Mean N NT A 2.3333 30 G0 A A 30 G2 2.0000 B 0.6667 30 G1 B B 30 G3 0.6667 DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.00101825 0.00033942 9.15 0.0058 Error 0.00029667 0.00003708 Corrected Total 11 0.00131492 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.774384 3.478120 0.006090 0.175083 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.00101825 0.00033942 9.15 0.0058 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.000037 Critical Value of t 2.30600 Least Significant Difference 0.0115 t Grouping Mean N NT A 0.187667 30 G2 A B A 0.178667 30 G0 B B C 0.171333 30 G3 C C 0.162667 30 G1 DF Sum of DF Squares Mean Square F Value Pr > F 0.00129892 0.00043297 8.07 0.0084 Error 0.00042933 0.00005367 Corrected Total 11 0.00172825 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.751579 2.112690 0.007326 0.346750 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.00129892 0.00043297 8.07 0.0084 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.000054 Critical Value of t 2.30600 Least Significant Difference 0.0138 t Grouping Mean N NT A 0.360333 30 G2 A B A 0.352000 30 G0 B B C 0.342000 30 G3 C C 0.332667 30 G1 Thí nghiệm Ảnh hưởng nuôi cấy lỏng tĩnh lỏng lắc (giai đoạn cảm ứng) đến khả tăng trưởng Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) TRỌNG LƯỢNG TƯƠI Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.13590150 0.13590150 695.15 F 0.13590150 695.15 F 0.07752067 0.07752067 180.42 0.0002 Error 0.00171867 0.00042967 Corrected Total 0.07923933 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.978310 2.840804 0.020728 0.729667 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.07752067 0.07752067 180.42 0.0002 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.00043 Critical Value of t 4.60409 Least Significant Difference 0.0779 t Grouping Mean N NT A 0.84333 30 L2 B 0.61600 30 L0 Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 24.00000000 24.00000000 72.00 0.0011 Mean N NT Error 1.33333333 0.33333333 1.50100 Corrected30 Total L2 25.33333333 1.20000 L0 Var R-Square30 Coeff Root MSE Mean 0.947368 15.74592 0.577350 3.666667 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 24.00000000 24.00000000 72.00 DF Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.333333 Critical Value of t 2.77645 Least Significant Difference 1.3088 t Grouping Mean N NT A 5.6667 30 L2 B 1.6667 30 L0 Thí nghiệm Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường nuôi cấy đến khả tăng trưởng, tạo củ in vitro Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) TRỌNG LƯỢNG TƯƠI Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 2.17956267 0.31136610 294.20 F NT 2.17956267 0.31136610 294.20 F 2.58838196 0.36976885 358.85 F F 14.50000000 2.07142857 5.52 0.0023 Error 16 6.00000000 0.37500000 Corrected Total 23 20.50000000 R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.707317 27.21655 0.612372 2.250000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 14.50000000 2.07142857 5.52 0.0023 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 16 Error Mean Square 0.375 Critical Value of t 2.11991 Least Significant Difference 1.06 t Grouping Mean N NT A 3.6667 30 E8 A B A 2.6667 30 E6 B A B A 2.6667 30 E7 B B C 2.3333 30 E5 B C B C 2.3333 30 E3 B C B C D 2.0000 30 E4 C D C D 1.3333 30 E2 D D 1.0000 30 E1 DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 3.02018333 0.43145476 122.25 F 3.02018333 0.43145476 122.25 F 5.52 0.0023 0.37500000 15 Source NT R-Square Coeff Var Root MSE Mean 0.707317 27.21655 0.612372 2.250000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 14.50000000 2.07142857 5.52 0.0023 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 16 Error Mean Square 0.375 Critical Value of t 2.11991 Least Significant Difference 1.06 t Grouping Mean N NT A 3.6667 30 E8 A B A 2.6667 30 E6 B A B A 2.6667 30 E7 B B C 2.3333 30 E5 B C B C 2.3333 30 E3 B C B C D 2.0000 30 E4 C D C D 1.3333 30 E2 D D 1.0000 30 E1 ĐƯỜNG KÍNH TÁN LÁ CHÉT Source Model Source NT SỐ CỦ Source Model Source NT Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.70942917 0.10134702 22.82 F 0.70942917 0.10134702 22.82 F 0.01561462 0.00223066 23.92 F 0.01561462 0.00223066 23.92 F 0.00852429 0.00121776 75.33 F 0.00852429 0.00121776 75.33 F 0.01242933 0.00177562 43.00 F 0.01242933 0.00177562 43.00