NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ SUY GIẢM SINH DỤC ĐỰC CỦA VIÊN HOÀN CỨNG TD0014 TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI MAI PHƯƠNG THANH NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ SUY GIẢM SINH DỤC ĐỰC CỦA VIÊN HOÀN CỨNG TD0014 TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC HÀ NỘI – 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI MAI PHƯƠNG THANH NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ SUY GIẢM SINH DỤC ĐỰC CỦA VIÊN HOÀN CỨNG TD0014 TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Dược lý độc chất Mã số: 62720120 LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS Phạm Thị Vân Anh PGS.TS Nguyễn Trọng Thông HÀ NỘI – 2019 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, nỗ lực thân, nhận nhiều giúp đỡ từ phía thầy cơ, gia đình bạn bè Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin trân trọng gửi lời cảm ơn chân thành tới: PGS.TS Phạm Thị Vân Anh, Trưởng Bộ môn Dược lý, Giám đốc Trung tâm Dược lý lâm sàng, Đại học Y Hà Nội, PGS.TS Nguyễn Trọng Thông, Nguyên Trưởng Bộ môn Dược lý, Nguyên Phụ trách Trung tâm Dược lý lâm sàng, Đại học Y Hà Nội, người thầy trực tiếp hướng dẫn, tận tình dạy bảo, giúp đỡ truyền kinh nghiệm q báu cho tơi suốt q trình thực luận án Sự nhiệt huyết, quan tâm, động viên thầy cô động lực, hành trang giúp bước tiếp đường tương lai PGS.TS Vũ Thị Ngọc Thanh, Nguyên Phó Trưởng Bộ môn Dược lý, Đại học Y Hà Nội, PGS.TS Nguyễn Trần Thị Giáng Hương, Nguyên Trưởng phòng Quản lý Đào tạo Đại học, Nguyên Phó Trưởng Bộ môn Dược lý, Đại học Y Hà Nội, tận tình dạy dỗ, bảo, tạo điều kiện quan tâm đến công việc, sống từ ngày đầu môn TS Trần Thanh Tùng, Phó Trưởng Bộ mơn Dược lý, Đại học Y Hà Nội, tận tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Các thầy cô giáo, anh chị em cán giảng dạy kỹ thuật viên Bộ môn Y sinh học – Di truyền, Đại học Y Hà Nội; Bộ môn Mô phôi, Đại học Y Hà Nội; Bộ môn Sinh lý học, Học viện Quân Y, tạo điều kiện thuận lợi nhiệt tình giúp đỡ tơi q trình thực nghiên cứu Bộ môn Các thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên, y công anh chị em học viên Sau Đại học Bộ môn Dược lý, Đại học Y Hà Nội, hỗ trợ, tin tưởng, ủng hộ, nhiệt tình giúp đỡ tơi không thời gian thực luận án mà cịn cơng việc sống hàng ngày Ban Giám hiệu, Phòng Quản lý Đào tạo Sau Đại học, Đại học Y Hà Nội, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập thực luận án Cuối cùng, xin cảm ơn bày tỏ lịng kính u tới bố mẹ, người thân gia đình, bạn bè ln động viên, cổ vũ, khuyến khích, tiếp thêm nghị lực để vững bước đường học vấn LỜI CAM ĐOAN Tơi Mai Phương Thanh, nghiên cứu sinh khóa 35, Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Dược lý Độc chất, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS.TS Phạm Thị Vân Anh PGS.TS Nguyễn Trọng Thông Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 08 tháng 10 năm 2019 Người viết cam đoan Mai Phương Thanh DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ALT Alanin aminotransferase AR Androgen receptor AST Aspartat aminotransferase cAMP Cyclic adenosine monophosphate CASA Computer assisted sperm analysis (phân tích tinh trùng máy tính) cGMP Cyclic guanosine 5'-monophosphate CYP Cytochrom P DHEA Dehydroepiandrosteron DHEA-S Dehydroepiandrosteron sulfat DHT Dihydrotestosteron DNA Deoxyribonucleic acid eNOS Endothelial nitric oxide synthase (nitric oxide synthase nội mơ) FSH Follicle-stimulating hormone (Hormon kích thích nang trứng) GABA Gamma-aminobutyric GHS Globally Harmonised System (Hệ thống Hịa hợp Tồn cầu) GnRH Gonadotropin-releasing hormone (Hormon giải phóng gonadotropin) hCG Human chorionic gonadotropin HDL High density lipoprotein (Lipoprotein tỷ trọng cao) HE Hematoxyline-eosin ICP Intracarvenous pressure (Áp lực thể hang) IPSS International Prostate Symptom Score (Thang điểm quốc tế triệu chứng tuyến tiền liệt) LD50 Lethal dose 50% (Liều gây chết 50%) LDL Low density lipoprotein (Lipoprotein tỷ trọng thấp) LH Luteinizing hormone (Hormon tạo hoàng thể) MAP Mean arterial pressure (Huyết áp động mạch trung bình) mRNA Messenger RNA (RNA thông tin) NANC Non-adrenergic non-cholinergic NO Nitric oxide NOS Nitric oxide synthase nNOS Neuronal nitric oxide synthase (nitric oxide synthase thần kinh) NVP Natri valproat NYHA New York Heart Association (Hiệp hội Tim mạch New York) OECD Organization for Economic Co-operation and Development (Tổ chức Hợp tác Phát triển Kinh tế) PDE Phosphodiesterase PLC Phospholipase C PSA Prostate-Specific Antigen (Kháng nguyên đặc hiệu tuyến tiền liệt) SGSS Suy giảm sinh sản SHBG Sex hormone-binding globulin (Globulin gắn với hormon sinh dục) SOD Superoxide dismutase TG Triglycerid TGF-1 Transforming growth factor-1 TRT Testosterone replacement therapy (Liệu pháp thay testosteron) WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế Thế giới) YHCT Y học cổ truyền MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Tổng quan suy sinh dục nam theo y học đại 1.1.1.Định nghĩa nguyên nhân 1.1.2.Các thuốc điều trị suy sinh dục nam 1.2.Tổng quan dược liệu điều trị suy sinh dục nam 23 1.2.1.Nguyên nhân chế bệnh sinh suy sinh dục nam theo y học cổ truyền 23 1.2.2.Các dược liệu điều trị suy sinh dục nam 24 1.3.Các mơ hình thực nghiệm nghiên cứu tác dụng hỗ trợ điều trị suy giảm chức sinh dục nam 28 1.3.1.Mơ hình đánh giá hoạt tính androgen thực nghiệm 28 1.3.2.Mơ hình nghiên cứu chức cương dương thực nghiệm 30 1.3.3.Mơ hình nghiên cứu hành vi tình dục thực nghiệm 33 1.3.4.Mơ hình gây suy giảm sinh sản thực nghiệm 35 1.4.Tổng quan viên hoàn cứng TD0014 38 1.4.1.Thành phần 38 1.4.2.Tác dụng 38 1.4.3.Giới thiệu dược liệu thành phần viên hoàn cứng TD0014 39 1.4.4.Một số nghiên cứu tác dụng sinh sản số dược liệu thành phần viên hoàn cứng TD0014 39 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 47 2.1.Nguyên liệu nghiên cứu 47 2.2.Đối tượng nghiên cứu 50 2.3.Phương pháp nghiên cứu 50 2.3.1.Nghiên cứu độc tính TD0014 động vật thực nghiệm 50 2.3.2.Nghiên cứu hoạt tính androgen TD0014 động vật thực nghiệm 52 2.3.3.Nghiên cứu ảnh hưởng TD0014 áp lực thể hang (intracarvenous pressure - ICP) chuột cống đực trắng 54 2.3.4.Nghiên cứu ảnh hưởng TD0014 chuột cống trắng bị gây suy giảm chức sinh sản natri valproat 56 2.4.Xử lý số liệu 58 2.5.Địa điểm nghiên cứu 58 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .59 3.1.Nghiên cứu độc tính TD0014 thực nghiệm 59 3.1.1.Độc tính cấp TD0014 theo đường uống chuột nhắt trắng 59 3.1.2.Độc tính bán trường diễn TD0014 chuột cống trắng 59 3.2.Nghiên cứu hoạt tính androgen TD0014 động vật thực nghiệm 68 3.2.1.Hoạt tính androgen TD0014 chuột cống đực non thiến 68 3.2.2.Hoạt tính androgen TD0014 chuột cống đực non cai sữa 69 3.3.Nghiên cứu ảnh hưởng TD0014 áp lực thể hang chuột cống đực trưởng thành 71 3.4.Nghiên cứu ảnh hưởng TD0014 chuột cống trắng bị gây suy giảm sinh sản natri valproat 74 3.4.1.Tác dụng bảo vệ TD0014 chuột cống đực bị gây suy giảm sinh sản natri valproat 74 3.4.2.Tác dụng phục hồi TD0014 chuột cống đực bị gây suy giảm sinh sản natri valproat 88 Chương 4: BÀN LUẬN 102 4.1.Độc tính TD0014 động vật thực nghiệm 102 4.1.1.Độc tính cấp 102 4.1.2.Độc tính bán trường diễn 104 4.2.Hoạt tính androgen tác dụng chức cương dương TD0014 động vật thực nghiệm 115 4.2.1.Hoạt tính androgen TD0014 động vật thực nghiệm 115 4.2.2.Ảnh hưởng TD0014 áp lực thể hang động vật thực nghiệm 126 4.3.Ảnh hưởng TD0014 chức sinh sản chuột cống đực bị gây suy giảm sinh sản natri valproat 134 4.3.1.Ảnh hưởng natri valproat đến quan sinh dục đực 136 4.3.2.Tác dụng bảo vệ TD0014 chuột cống đực bị gây suy giảm sinh sản natri valproat 139 4.3.3.Tác dụng phục hồi TD0014 chuột cống đực bị gây suy giảm sinh sản natri valproat 142 KẾT LUẬN .151 KIẾN NGHỊ 153 CÁC BÀI BÁO ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Các nguyên nhân thường gặp gây suy giảm chức sinh dục nam .4 Bảng 1.2 So sánh dạng chế phẩm testosteron 12 Bảng 1.3 Theo dõi điều trị với liệu pháp thay testosteron 16 Bảng 1.4 Đặc điểm số thuốc ức chế PDE5 19 Bảng 1.5 Tác dụng số dược liệu, chiết xuất từ dược liệu phối hợp số dược liệu điều trị suy giảm chức sinh dục nam 26 Bảng 2.1 Thành phần viên hoàn cứng TD0014 47 Bảng 3.1 Mối tương quan liều dùng TD0014 tỷ lệ chuột chết 59 Bảng 3.2 Ảnh hưởng TD0014 đến số lượng hồng cầu máu chuột cống 60 Bảng 3.3 Ảnh hưởng TD0014 đến hemoglobin hematocrit máu chuột cống 61 Bảng 3.4 Ảnh hưởng TD0014 đến thể tích trung bình hồng cầu máu chuột cống 62 Bảng 3.5 Ảnh hưởng TD0014 đến số lượng bạch cầu máu chuột cống 62 Bảng 3.6 Ảnh hưởng TD0014 đến công thức bạch cầu máu chuột cống 63 Bảng 3.7 Ảnh hưởng TD0014 đến số lượng tiểu cầu máu chuột cống 63 Bảng 3.8 Ảnh hưởng TD0014 đến hoạt độ transaminase máu chuột cống 64 Bảng 3.9 Ảnh hưởng TD0014 đến nồng độ bilirubin máu chuột cống 65 Bảng 3.10 Ảnh hưởng TD0014 đến hàm lượng albumin máu chuột cống 65 Bảng 3.11 Ảnh hưởng TD0014 đến nồng độ cholesterol máu chuột cống 66 Bảng 3.12 Ảnh hưởng TD0014 đến hàm lượng creatinin máu chuột cống 66 Bảng 3.13 Kết vi thể gan, thận chuột cống sau 90 ngày uống TD0014 67 Bảng 3.14 Ảnh hưởng TD0014 lên trọng lượng quan sinh dục phụ 68 Bảng 3.15 Ảnh hưởng TD0014 lên nồng độ testosteron 69 Bảng 3.16 Ảnh hưởng TD0014 lên trọng lượng quan sinh dục 69 Bảng 3.17 Ảnh hưởng TD0014 lên nồng độ testosteron 70 Bảng 3.18 Ảnh hưởng TD0014 đến thời gian đạt đến ICP đỉnh 71 Bảng 3.19 Ảnh hưởng TD0014 đến thời gian đáp ứng với kích thích 72 Bảng 3.20 Ảnh hưởng TD0014 đến huyết áp động mạch trung bình sau kích thích điện lên dây thần kinh hang 73 ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI MAI PHƯƠNG THANH NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ SUY GIẢM SINH DỤC ĐỰC CỦA VIÊN HOÀN CỨNG TD0014 TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành:... v? ?y, để cung cấp chứng khoa học tính an tồn hiệu nhằm ứng dụng sản phẩm TD0014 điều trị suy sinh dục nam giới, đề tài ? ?Nghiên cứu độc tính tác dụng điều trị suy giảm sinh dục đực viên hoàn cứng. .. trị [45] 1.3.4 Mơ hình g? ?y suy giảm sinh sản thực nghiệm Các phương pháp sử dụng để g? ?y suy giảm sinh sản động vật thực nghiệm bao gồm: suy giảm sinh sản tuổi, suy giảm sinh sản stress, suy giảm