Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma tuý tổng hợp ma, mdma bằng phương pháp lc ms

BỘ CÔNG THƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN TRỌNG TUẤN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÂN TÍCH CHẤT MA T TỔNG HỢP MA, MDMA BẰNG PHƢƠNG PHÁP LC-MS/MS VÀ ỨNG DỤNG Chuyên ngành: HĨA PHÂN TÍCH Mã chun ngành: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2020 Cơng trình đƣợc hồn thành Trƣờng Đại học Cơng nghiệp TP Hồ Chí Minh Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Nguyễn Văn Trọng uận văn thạc s đƣợc ảo vệ Hội đồng chấm ảo vệ uận văn thạc s Trƣờng Đại học Cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh ngày tháng năm Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc s gồm: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ luận văn thạc sĩ) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƢỞNG KHOA BỘ CÔNG THƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Nguyễn Trọng Tuấn MSHV: 17112481 Ngày, tháng, năm sinh: 05-07-1987 Nơi sinh: Bình Phƣớc Chun ngành: Kỹ thuật phân tích Mã chuyên ngành: 60440118 I TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma t tổng hợp MA, MDMA mẫu máu ằng phƣơng pháp LC-MS/MS ứng dụng NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Khảo sát thơng số thiết ị phân tích C-MS MS, th m định phƣơng pháp phân tích hai hoạt chất Methamphetamin 3,4 methylenedioxymethamphetamine Xây dựng đƣợc quy trình phân tích Đánh giá đƣợc mức độ ngộ độc hai hoạt chất ma túy Methamphetamin 3,4 methylenedioxymethamphetamine mẫu máu theo nồng độ Phân tích kết thực nghiệm II NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: Theo QĐ số 1119 QĐ-ĐHCN ngày 14 06 2019 III NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: (Ghi theo Quyết định giao đề tài) IV NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Văn Trọng Tp Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 20 … NGƢỜI HƢỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO (Họ tên chữ ký) (Họ tên chữ ký) TRƢỞNG KHOA……… (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN uận văn thạc s với đề tài “Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma tuý tổng hợp MA, MDMA ằng phƣơng pháp C-MS/MS ứng dụng , thành trình cố gắng không ngừng ản thân đƣợc gi p đ , động viên khích lệ thầy, cô, ạn è đồng nghiệp ngƣời thân thời gian học tập, nghiên cứu vừa qua Tôi xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô giáo ộ môn, đặc iệt xin gửi lời cảm ơn chân thành đến giáo viên hƣớng dẫn TS Nguyễn Văn Trọng Thầy nhiệt tình hƣớng dẫn, gi p đ để tơi hồn thành nhiệm vụ cảm ơn chân thành hổ trợ TS ê Đình Vũ Bên cạnh đó, tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám đốc Trung tâm Pháp Y Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi, hỗ trợ trang thiết ị, hóa chất để tơi hồn thành tốt nghiên cứu Cuối tơi xin cảm ơn đến gia đình, ngƣời thân, đồng nghiệp, ạn è ên cạnh động viên gi p đ hoàn thành nghiên cứu Học viên Nguyễn Trọng Tuấn i TĨM TẮT Trong luận văn này, ch ng tơi tiến hành phân tích hàm lƣợng hoạt chất Methamphetamine 3,4 methylenedioxymethamphetamine mẫu máu ằng phƣơng pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ a tứ cực C-MS MS Để thực xây dựng quy trình phân tích dựa kỹ thuật xử lý mẫu SPE nội dung nghiên cứu đƣợc đo phổ ằng chế độ chọn lọc (MRM) Ngồi chúng tơi tiến hành th m định phƣơng pháp phân tích đƣa đƣợc thông số nhƣ sau: Giới hạn phát phƣơng pháp (MDL) giới hạn định lƣợng phƣơng pháp (MQL) Methamphetamine 3,4 methylenedioxymethamphetamine lần lƣợt 0.31 µg/L, 1.04 µg/L; 0.25 µg/L, 0.84 g ; Hiệu suất thu hồi phƣơng pháp Methamphetamine khoảng 84-93.8% 3,4 methylenedioxymethamphetamine khoảng 83.1-96.4 ; độ lặp lại phƣơng pháp ( RSD) nhỏ 11 Tất thông số thu đƣợc cho thấy phƣơng pháp đạt yêu cầu tài liệu hƣớng dẫn AOAC, ISO: 17025, để phân tích hai hoạt chất Methamphetamine 3,4 methylenedioxymethamphetamine mẫu máu cho ca giám định hóa pháp pháp y Kết đƣợc xem sở để xác định tình trạng ngộ độc hồn tồn áp dụng thực tế Từ Khóa: Ma t y đá, Methamphetamine, 3,4 methylenedioxymethamphetamine, LC-MS/MS ii ABSTRACT In this research, we conducted the analysis of the poisoning levels of two active substances, Methamphetamine and 3,4 Methylenedioxymethamphetamine on blood samples by liquid chromatography with three quadrupole mass spectrometry LCMS/MS To this, we develop an analytical procedure based on SPE sample processing technology and analysis using MRM selective mode In addition, we also validated the analytical method and gave the following parameters: Method detection limit (MDL) and method quantitative limit (MQL) for Methamphetamine and 3,4 methylenedioxymethamphetamine are respectively 0.31 µg/L, 1.04 µg/L; 0.25 µg/L, 0.84 µg/L; The recovery efficiency of the method for Methamphetamine is between 84-93.8% and 3,4 methylenedioxymethamphetamine in the range of 83.1-96.4%; method repeatability (% RSD) is less than 11% All parameters obtained indicate that this method meets the requirements of the documentation AOAC, ISO: 17025, for the analysis of two active ingredients, Methamphetamine and 3,4 methylenedioxymethamphetamine on the blood sample for any case in forensic examination The results are used as a basis for determining the status of poisoning and can be completely applied in practice Keywords: Methamphetamine; 3,4 methylenedioxymethamphetamine; LC-MS/MS iii LỜI CAM ĐOAN Tôi tên Nguyễn Trọng Tuấn học viên cao học chun ngành Hóa Phân tích, lớp CHHPT7B, Trƣờng Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh Tơi cam đoan kết nghiên cứu đƣợc trình ày luận văn cơng trình riêng tơi giảng viên hƣớng dẫn TS Nguyễn Văn Trọng, Khoa Cơng nghệ Hóa học, Trƣờng Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh Những kết nghiên cứu tác giả khác đƣợc sử dụng luận văn có trích dẫn đầy đủ Học viên Nguyễn Trọng Tuấn iv MỤC LỤC ỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii ABSTRACT iii ỜI CAM ĐOAN iv MỤC ỤC v DANH MỤC HÌNH ẢNH ix DANH MỤC BẢNG BIỂU xi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xiii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Cách tiếp cận phƣơng pháp nghiên cứu Ý ngh a thực tiễn đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung chất ma t y 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Các chất ma t y tổng hợp nhóm ATS 1.1.4 Các phƣơng pháp điều trị loạn thần ệnh nhân sử dụng ATS [6] 10 1.1.5 Tổng quan MA 12 1.1.6 Tổng quan MDMA 15 v 1.2 Các phƣơng pháp xác định MA MDMA 17 1.2.1 Phƣơng pháp phân tích miễn dịch học 17 1.2.2 Phƣơng pháp sắc ký khí GC MS 17 1.2.3 Phƣơng pháp sắc ký lỏng C-MS/MS 18 1.3 Cơ sở lý thuyết phƣơng pháp sắc ký lỏng 19 1.3.1 ịch sử phát triển phƣơng pháp sắc ký 19 1.3.2 Nguyên tắc trình sắc ký 20 1.3.3 Phân loại sắc ký 20 1.3.4 Hệ thống C-MS/MS 20 1.3.5 Các kỹ thuật chiết mẫu 26 1.3.6 Giới thiệu cột chiết pha rắn C18 30 1.4 Đánh giá quy trình phân tích 31 1.4.1 Độ xác 31 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM 37 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 37 2.2 Hóa chất, dụng cụ thiết ị nghiên cứu 37 2.2.1 Hóa chất chất chu n 37 2.2.2 Thiết ị, dụng cụ 39 2.3 mẫu ảo quản mẫu 42 2.4 Nội dung nghiên cứu 42 2.4.1 Khảo sát chƣơng trình dung môi 42 2.4.2 ựa chọn cột chiết 43 2.4.3 Quy trình phân tích mẫu 44 vi 2.5 Th m định phƣơng pháp phân tích 46 2.5.1 Khảo sát độ chọn lọc, độ đặc hiệu 46 2.5.2 Giới hạn phát phƣơng pháp (MD ), giới hạn định lƣợng phƣơng pháp (MQL) 47 2.5.3 Xác định độ lặp lại 48 2.5.4 Hiệu suất thu hồi 49 2.5.5 Phân tích mẫu 50 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN UẬN 51 3.1 Khảo sát chƣơng trình dung mơi 51 3.2 Độ chọn lọc, độ đặc hiệu 53 3.3 Khoảng tuyến tính, đƣờng chu n 56 3.3.1 Đƣờng chu n MA, MDMA mẫu máu (mẫu lank) 58 3.3.2 Xác định MD , MQ phƣơng pháp 60 3.3.3 Kết xác định độ lặp lại 62 3.3.4 Kết xác định hiệu suất thu hồi 64 3.4 Kết phân tích mẫu thực nghiệm 66 3.5 Thảo luận 68 3.5.1 Quy trình chiết mẫu 68 3.5.2 Phƣơng pháp phân tích LC-MS/MS 69 3.5.3 Phân tích mẫu thực tế 69 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 70 TÀI IỆU THAM KHẢO 73 PHỤ ỤC 75 vii 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 MA MDMA Phụ lục 2: Sắc ký đồ phân tích mẫu thực 87 Thiết lập chương trình gradient pha động Thiết bị ly tâm 88 Hệ thống MS/MS Hệ thống LC Agilent 1290 Phu lục 3: thiết ị phân tích 89 LÝ LỊCH TRÍCH NGANG CỦA HỌC VIÊN I Ý ỊCH SƠ ƢỢC: Họ tên: NGUYỄN TRỌNG TUẤN Giới tính: Nam Ngày, tháng, năm sinh: 05/07/1987 Nơi sinh: Bình Phƣớc Email: trongtuan8791@gmail.com Điện thoại: 0901323323 II QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO: III QUÁ TRÌNH CƠNG TÁC CHUN MƠN: Thời gian Nơi cơng tác Cơng việc đảm nhiệm 01-12/2009 đến Trung Tâm Pháp Y Tp HCM Kỹ Thuật Viên Giải Phẫu 2011 Bệnh 2011 đến Trung Tâm Pháp Y Tp HCM Kỹ sƣ Phòng Độc Chất Tp HCM, ngày tháng Năm 20 Ngƣời khai 90 ... phƣơng pháp C -MS/ MS ứng dụng đƣợc tiến hành nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu Xây dựng đƣợc phƣơng pháp phân tích MA, MDMA mẫu máu ằng phƣơng pháp LC- MS MS; ứng dụng để xác định chất MA, MDMA mẫu máu... ký) LỜI CẢM ƠN uận văn thạc s với đề tài ? ?Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma tuý tổng hợp MA, MDMA ằng phƣơng pháp C -MS/ MS ứng dụng , thành q trình cố gắng khơng ngừng ản thân đƣợc... tích chất ma tuý tổng hợp MA, MDMA mẫu máu ằng phƣơng pháp LC- MS/ MS ứng dụng NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Khảo sát thơng số thiết ị phân tích C -MS MS, th m định phƣơng pháp phân tích hai hoạt chất Methamphetamin