Nghiên cứu tổng hợp muối canxihydroxycitrat từ axit hidroxycytric của vỏ quả bứa ở quảng ngãi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG NGUYỄN THANH HƢNG NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP MUỐI CANXI HYDROXYCITRAT TỪ AXIT HIDROXYCYTRIC CỦA VỎ QUẢ BỨA Ở QUẢNG NGÃI Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Mã số: 60 44 27 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS.TS Đào Hùng Cƣờng Đà Nẵng – Năm 2012 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Theo Tổ chức Y tế giới, dƣ cân béo phì đề tài mà ngành y quan tâm nƣớc phát triển phát triển Hội nghị quốc tế lần thứ VIII béo phì họp Paris ngày 01/09/1998 nhận định Bệnh béo phì trở thành đại dịch tồn cầu, vấn đề lớn đe dọa sức khoẻ cộng đồng Số liệu thống kê gần Tổ chức Y tế giới cho thấy số ngƣời béo phì gia tăng cách đáng báo động với 1,5 tỉ ngƣời tồn cầu Bệnh béo phì khơng ảnh hƣởng đến lao động, sinh hoạt, thẫm mỹ mà nguy hại định đến sức khoẻ Ngƣời trung niên lớn tuổi bị béo phì dễ mắc bệnh nhƣ: huyết áp cao, bệnh mạch vành, tiểu đƣờng, bệnh Gout, tai biến mạch não, sỏi túi mật vv… Cũng theo tài liệu điều tra Trung Quốc, số 153 bệnh nhân động mạch vành có 120 ca cân nặng tiêu chuẩn 10% chiếm tỉ lệ 78,4% 77 ca mắc bệnh béo phì chiếm tỉ lệ 50,3% Béo phì bệnh mỡ tích luỹ nhiều thể làm thay đổi chức sinh lý, sinh hoá thể Cây bứa, bứa tròn dài – tên khoa học Garcinia oblongifolia Champ Ex Benth, thuộc họ bứa chi bứa Đƣợc Antonie Laurent de Jusieu đƣa năm 1789, loại thực vật có hoa bao gồm khoảng 50 chi 1.200 loài thân gỗ hay bụi Cây mọc hoang rừng thứ sinh tỉnh từ Hà Tuyên, Vĩnh Phú, Quảng Nam, Đà Nẵng, Quảng Ngãi, Tây Nguyên đến Nam Bộ Trên giới việc nghiên cứu bứa có từ lâu, tính đến có hàng trăm cơng trình nghiên cứu bứa bao gồm: chiết tách, xác định thành phần hoá học hợp chất hữu cơ, ứng dụng công nghệ thực phẩm, công nghệ dƣợc phẩm, đặc biệt chế phẩm giảm béo HCA đƣợc chiết từ vỏ bứa có tác dụng ngăn chặn trình tích lũy mỡ, cải thiện bilance máu, kìm hãm q trình chuyển hóa lƣợng đƣờng thừa thể thành mỡ, giúp ngăn chặn trình béo phì Ngồi ra, HCA cịn cải thiện giảm loại mỡ xấu nhƣ: tryglixerit, CDL cholesterol, cholesterol toàn phần tăng HDL cholesterol loại mỡ có tác dụng bảo vệ tim mạch Bên cạnh đó, HCA làm tăng nồng độ serotonin có vai trị kiểm sốt thèm ăn, làm tăng trình tổ hợp glycogen tăng độ oxi hóa, đốt cháy mỡ thừa…Dạng lỏng tự HCA có xu hƣớng khơng ổn định, dễ bị lacton hóa nên việc tổng hợp muối từ HCA đƣợc nghiên cứu nhằm làm tăng ổn định hoạt tính sinh học HCA Lowenstein mơ tả muối HCA dựa kim loại kiềm, kiềm thổ nhƣ: kali, natri, canxi… Muối canxi (-)-hydroxycitrat có hoạt tính sinh học HCA Canxi loại khống chất quan trọng cần thiết cho phát triển vững xƣơng giúp làm giảm nguy loãng xƣơng Canxi giữ vai trị chất truyền dẫn thơng tin tham gia vào hầu hết hoạt động thể tế bào Nhƣ vậy, hiệu giảm cân muối canxi (-)-hydroxycitrat cịn giúp bổ sung lƣợng canxi cần thiết cho phát triển thể Ở Mỹ, Hydrotrim sản phẩm độc quyền đƣợc điều chế từ muối canxi HCA, có hiệu cao việc điều trị giảm cân đƣợc ngƣời tiêu dùng ƣa chuộng Với lý mà chọn đề tài: “ Nghiên cứu tổng hợp muối canxihydroxycitrat từ axit hidroxycytric vỏ bứa Quảng Ngãi ” Mục đích nghiên cứu - Khảo sát trình chiết tách axit hidroxycytric từ vỏ bứa - Xây dựng quy trình tổng hợp muối canxihydroxycitrat - Đóng góp thêm thơng tin, tƣ liệu khoa học bứa, tạo sở khoa học ban đầu cho nghiên cứu sâu ứng dụng axit hidroxycytric Đối tƣợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu 3.1 Đối tượng nghiên cứu: Vỏ bứa (Garcinia oblongifolia Champ Ex Benth.) xã Bình Hải Bình Hồ, huyện Bình Sơn, tỉnh Quảng Ngãi 3.2 Phạm vi nghiên cứu: - Chiết tách axit hidroxycytric phƣơng pháp chƣng ninh Kiểm tra sản phẩm chiết phƣơng pháp chuẩn độ axit-bazơ, phổ hồng ngoại (IR) phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) - Tổng hợp muối canxihydroxycitrat khảo sát ảnh hƣởng yếu tố: pH, thể tích thời gian tới hiệu suất q trình tổng hợp muối - Tinh chế muối kiểm tra sản phẩm muối tinh chế phƣơng pháp đo phổ IR, HPLC xác định hàm lƣợng canxi muối Phƣơng pháp nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lý thuyết: Phƣơng pháp nghiên cứu hợp chất thiên nhiên, tổng quan tài liệu đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hoá học, ứng dụng số loài thực vật thuộc họ bứa Clusiaceae 4.2 Phương pháp thực nghiệm: Phương pháp chiết tách: Phƣơng pháp chiết chƣng ninh sử dụng dung môi nƣớc cất Phương pháp phân tích cơng cụ: Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), phƣơng pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS), phƣơng pháp đo phổ hồng ngoại (IR) Ý nghĩa khoa học tính thực tiễn đề tài Từ nghiên cứu trên, đề tài thu đƣợc số kết với ý nghĩa nhƣ sau: - Xây dựng quy trình chiết tách axit hidroxycytric từ vỏ bứa khơ - Xây dựng quy trình tổng hợp muối canxihydroxycitrat từ axit hidroxycytric đƣợc chiết vỏ bứa - Cung cấp thông tin khoa học thành phần cấu tạo muối canxihydroxycitrat - Làm sở liệu để ứng dụng muối canxihydroxycitrat thực tế Cấu trúc luận văn Luận văn gồm phần mở đầu, kết luận, kiến nghị, tài liệu tham khảo Nội dung luận văn chia làm ba chƣơng nhƣ sau: Chƣơng 1: Tổng quan Chƣơng 2: Nguyên liệu phƣơng pháp nghiên cứu Chƣơng 3: Kết thảo luận CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 CÂY BỨA [3], [4], [5], [7] 1.1.1 Bộ chè Là lớn, bao gồm chủ yếu thân gỗ có quan hệ gần gũi với sổ sớm từ Bộ chè gồm 19 họ, nƣớc ta có họ có họ quan trọng họ Chè họ Măng cụt, phân biệt với chủ yếu nhƣ sau: - Cây khơng có nhựa mủ, mọc cách thƣờng thuộc Họ Chè - Cây có nhựa mủ màu vàng , mọc đối thƣờng thuộc Họ Măng cụt Họ Măng cụt gồm 14 chi 350 loài phân bố giới hạn nƣớc nhiệt đới ẩm; Việt Nam có chi: Calophyllum, Garcinia, Kayea, Mesua, Ochrocarpus khoảng 45 loài 1.1.1.1 Họ Chè (Theaceae) Cây gỗ hay bụi, mọc cách, đơn nguyên khơng có kèm, thƣờng có tế bào phân nhánh Hoa lƣỡng tính, thƣờng mọc đơn độc Ðài gồm đài không nhau, tồn Tràng gồm 5- cánh rời Nhị nhiều Nhụy 3- noãn hợp thành bầu trên, số tƣơng ứng với số nỗn, có hay nhiều nỗn, đính nỗn trụ Quả có hay nhiều hạt, khơng có nội nhũ, phơi lớn Họ chè có 29 chi khoảng 550 loài, phân bố chủ yếu nƣớc nhiệt đới cận nhiệt đới hai bán cầu, đặc biệt Đông Đông Nam Á Ở Việt Nam có 11 chi với 100 lồi 1.1.1.2 Họ Măng cụt (Clusiaceae) Cây gỗ hay bụi, thƣờng xanh, có cành mọc ngang Trong nhiều phận có ống tiết nhựa mủ màu vàng hay vàng lục Lá mọc đối, khơng có kèm Hoa thƣờng lƣỡng tính, đơi đơn tính hay đa tính Ðài gồm 5- mảnh, tồn Tràng gồm 2- cánh hoa (có nhiều hơn) Nhị nhiều, tập hợp thành bó Nhụy gồm 3- ( có tới 15) noãn Quả mở vách hay mọng Hạt thƣờng nhiều, khơng có nội nhũ, có có áo hạt bao Họ măng cụt gồm 14 chi 350 loài phân bố giới hạn nƣớc nhiệt đới ẩm Ở Việt Nam có chi, 45 lồi 1.1.2 Bứa Hình 1.1 Quả, lá, hoa bứa Quảng Ngãi Tên khoa học: Garcinia oblongifolia Champ.ex Benth Thuộc họ măng cụt Clusiaceae Mô tả: Cây thân gỗ cao 10- 15m Cành nhánh dài mảnh mọc xoè ngang Vỏ màu xám tro Lá mọc đối, mép nguyên nhẵn bóng, có nhiều điểm mờ Hoa màu vàng có hoa đực hoa lƣỡng tính Hoa đực có đài, cánh hoa Hoa lƣỡng tính có đài, cánh hoa, nhiều nhị Bầu 610 Quả nang hình cầu có nhiều rãnh dọc Vỏ màu vàng ngồi, phía đỏ, vị chua, 6- 10 hạt, có nhiều múi mọng nƣớc ăn đƣợc (hình 1.1) Thành phần hố học: Trong chứa nhiều axit hữu cơ, vitamin C (100g có 61mg vitamin C), flavonozit Bộ phận dùng: Vỏ Cortex Garciniae Nơi sống thu hái: Cây mọc hoang rừng thứ sinh tỉnh từ Hà Tuyên, Vĩnh Phú đến Quảng Nam, Quảng Ngãi Thƣờng đƣợc trồng lấy tƣơi nấu canh chua Tính vị, cơng dụng: Vỏ có tính săn da đắng, mát, độc, có tác dụng tiêu viêm, hạ nhiệt, làm săn da, lành vết thƣơng Lá có vị chua, thƣờng đƣợc dùng nấu canh chua Hạt có áo hạt chua, ăn đƣợc, dùng nấu canh chua Vỏ thƣờng dùng trị: Loét dày, loét tá tràng, viêm dày ruột, tiêu hoá, viêm miệng, bệnh cặn răng, ho máu Dùng trị bỏng, mụn nhọt, eczema, dị ứng, mẩn ngứa, rút vết đạn đâm vào thịt Liều dùng 2030g dạng thuốc sắc; dùng giã vỏ tƣơi đắp Nhựa bứa dùng trị bỏng Đơn thuốc: -Viêm dày ruột, tiêu hoá: Vỏ Bứa sắc đặc cô đặc lấy 50%; hàng ngày uống 30ml -Bỏng: Nhựa bứa pha dầu làm thành cao lỏng, bôi ngày 1- lần 1.1.3 Phân loại bứa 1.1.3.1 Bứa Bứa mọi-Garcinia harmandii Pierre, thuộc họ bứa-Clusiaceae Mô tả: Cây gỗ cao 6- 10m, phân nhánh nhiều từ gốc, có vỏ vàng Lá thn, hình trứng ngƣợc hay hình giáo ngắn, có góc gốc, có mũi nhọn đầu, dài 4-10cm, rộng 15- 30mm, cuống ngắn (hình 1.2) Hoa vàng, hầu nhƣ khơng cuống; hoa đực xếp thành nhóm 3- 6, hoa đơn độc Quả có đƣờng kính 10- 20mm, màu tía, dẹp hạt Ra hoa tháng 2- 3, kết vào tháng Bộ phận dùng: Vỏ Cortex Garciniae Nơi sống thu hái: Sống phổ biến miền Nam Việt Nam, Campuchia Nam Lào Ở nƣớc ta mọc hoang rừng độ cao thấp từ Khánh Hoà tới Đồng Nai, Tây Ninh Cơng dụng: Quả có nạc ngon, mùi thơm, vị ngọt, dùng ăn đƣợc Vỏ chát, đƣợc nhân dân Campuchia dùng ăn với trầu Ngƣời ta phối hợp với nhiều vị thuốc khác để trị ỉa chảy Hình 1.2 Cây bứa Quảng Ngãi 1.1.3.2 Bứa mủ vàng 3.7 KIỂM TRA CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRONG SẢN PHẨM MUỐI HCCa Kết kiểm tra tiêu vi sinh vật mẫu muối HCCa nhƣ sau: Bảng 3.10 Kết xác định số tiêu vi sinh muối canxihydroxycitrat TT Tên tiêu Đơn vị tính Phƣơng pháp thử Kết thử nghiệm Tổng vi khuẩn đếm kl/g TCVN 4884:2005 KPH đƣợc E coli kl/g FAO KPH Tổng bào tử nấm men - kl/g TCVN 4993-89 KPH mốc Ghi chú: - Kph: không phát Nhƣ vậy, kết phân tích cho thấy mẫu muối canxihydroxycitric thỏa mãn Tiêu chuẩn vi sinh cho phép thực phẩm Bộ Y tế KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Trong đề tài nghiên cứu thu đƣợc số kết nhƣ sau: 1/ Độ ẩm vỏ bứa khô: 8,37 %, Hàm lƣợng tro vỏ bứa khô:1,06 % Thành phần kim loại nặng gồm: Sn(0,0043mg/L), Pb(0,6715mg/L), Zn(5,3224mg/L), Cu(2,2675mg/L), Fe(26,512mg/L) 2/ Chứng minh đƣợc có mặt HCA vỏ bứa phƣơng pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Hàm lƣợng (-)-HCA tìm thấy vỏ bứa khơ (15,348%), axit thứ yếu axit citric (0,413%) Xác định đƣợc tổng lƣợng axit có mẫu chiết 16,06 (g/100g) 3/ Đã khảo sát xây dựng quy trình chuyển hố tạo muối canxi HCA chiết từ vỏ bứa khô Khối lƣợng muối HCCa dạng rắn tạo thành trung bình 16,698 g/100g mẫu, hiệu suất tạo muối vào khoảng 77,871% – 86,295% 4/ Đã kiểm tra sản phẩm muối HCCa tạo thành phổ hồng ngoại (IR), sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Hàm lƣợng muối HCCa sản phẩm chuyển hoá 93,589% ứng với thời gian lƣu 3,91 phút 5/ Kết xác định số tiêu vi sinh hàm lƣợng số kim loại nặng sản phẩm muối canxihydroxycitrat tổng hợp đƣợc nằm khoảng cho phép Kiến nghị 1/ (-)-HCA có tính chống béo phì hiệu đƣợc cung cấp chủ yếu dƣới dạng muối Vì vậy, nên tiếp tục nghiên cứu theo hƣớng điều chế ứng dụng muối (-)-HCA dạng muối kép để tăng hiệu sản xuất dƣợc liệu hay thực phẩm chức với mục đích giảm cân 2/ Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết tách (-)-HCA từ vỏ bứa theo quy mô công nghiệp để sản xuất thực phẩm giảm cân chứa (-)-HCA Việt Nam TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Nông nghiệp phát triển nông thôn (2003), Đồ hộp- phương pháp xác định hàm lượng axit tổng số axit bay hơi, Quyết định số 76/2003/QĐ-BNN [2] Bộ Y Tế (1998), Danh mục Tiêu chuẩn vệ sinh lương thực, thực phẩm, Quyết định số 867/1998/QĐ-BYT 3 Hoàng Minh Châu, Từ Văn Mặc, Từ Vọng Nghi (2002), Cơ sở Hố học phân tích, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội [4] Võ Văn Chi (1999), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học, Hà Nội [5] Lê Văn Đăng (2005), Chuyên đề số hợp chất thiên nhiên, Nhà xuất Đại học quốc gia thành phố Hồ Chí Minh, thành phố Hồ Chí Minh [6] Đỗ Tất Lợi (2005), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học Hà Nội 7 Hồ Viết Quý (1998), Các phương pháp phân tích đại ứng dụng hố học, Nhà xuất Đại học quốc gia Hà Nội, Hà Nội [8] Đặng Quang Vinh (2007), Nghiên cứu chiết tách xác định axit hydroxy citric lá, vỏ bứa, Luận văn thạc sĩ khoa học hoá hữu cơ, Khoa hoá, Đại học Đà Nẵng Tiếng Anh 9 BhabaniS.Jena, Guddadarangavvanahally, Jayaprakasha, Kunnumpurath K Sakariah (2002), "Organic Acids from Leaves, Fruits, and Rinds of Garcinia cowa", Journal of Agricultural and Food chemistry, 50(12), 3431- 3434 [10] Gokaraju et al (2005), “New double salts of (-)-hydroxycitric acid and a process for preparing the same”, International Application Published under The Patent Cooperation Treaty (PCT), WO 2005/099679 A1 [11] Gokaraju et al (2007), “Triple mineral salts of (-)-hydroxycitric acid and processes for preparing the same”, United States Patent US 7,208,615 B2 12 Jayaprakasha, K Sakariah, K K (1998), “Determination of organic acids in Garcinia cambogia (Desr.) by HPLC”, Journal of Chromatography A, 806(2), 337-339 [13] Karanam Balasubramanyam, Bhaskaran Chandrasekhar, Candadai Seshadri Ramadoss, Pillarisetti Venkata Subba Rao (2000), “Soluble double metal salt of group ia and iia of (-) hydroxycitric acid, process of preparing the same and its use in beverages and other food products without effecting their flavor and properties”, United States Patent US 6,160,172 14 Lowenstein, J M (1971), “Effect of (-)-hydroxyxitrat on fatty acid synthesis by rat liver inViVo”, The Journal of Biological Chemistby, 246(3), 629-632 [15] Muhammed Majeed, Vladimir Badmaev, Ramaswamy Rajendran (2004), “Process for the production of potassium hydroxy citric acid, and compositions containing the potassium hydroxy citric acid”, United States Patent US 6,770,782 B1 [16] Samuel et al (2007), “Hydroxycitric acid complex metal salts, composition, and methods”, United States Patent US 7, 214,823 B2 [17] Shrivastava et al (2001), “Magnesium (-)hydroxycitrate, method of preparation, applications, and compositions in particular pharmaceutical containing same”, United States Patent US 6,221,901 B1 [18] Soni MG, Burdock GA, Preuss HG, Stohs SJ, Ohia SE, Bagchi D (2004), “Safety assessment of (-)-hydroxycitric acid and Super CitriMax, a novel calcium/potasium salt”, Food and Chemical Toxicology, 42(9), 1513-1529 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Nguyễn Thanh Hƣng MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANG MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH viii MỞ ĐẦU .1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu: 3.2 Phạm vi nghiên cứu: Phƣơng pháp nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lý thuyết: 4.2 Phƣơng pháp thực nghiệm: 5 Ý nghĩa khoa học tính thực tiễn đề tài Cấu trúc luận văn CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 CÂY BỨA 1.1.1 Bộ chè .6 1.1.1.1 Họ Chè (Theaceae) 1.1.1.2 Họ Măng cụt (Clusiaceae) 1.1.2 Bứa 1.1.3 Phân loại bứa 1.1.3.1 Bứa .9 1.1.3.2 Bứa mủ vàng 10 1.1.3.4 Garcinia cowa Roxb 13 1.1.3.5 Garcinia cambogia 14 1.1.3.6 Garcinia indica 15 1.1.3.7 Garcinia atro Viridis 16 1.1.3.8 Garcinia dulcis 17 1.1.3.9 Garcinia hombroniana .17 1.1.3.10 Garcinia echinocarpa .18 1.1.4 Dẫn xuất HCA 18 1.1.4.1 Hoá học (-)-HCA .19 1.1.4.2 Muối HCA .25 1.2 CÁC PHƢƠNG PHÁP KĨ THUẬT 31 1.2.1 Các phƣơng pháp phân huỷ mẫu phân tích 31 1.2.2 Phƣơng pháp trọng lƣợng .31 1.2.2.1 Xác định độ ẩm nguyên liệu .31 1.2.2.2 Xác định hàm lƣợng tro nguyên liệu 32 1.2.3 Phƣơng pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) 32 1.2.4 Phƣơng pháp chuẩn độ axit- bazơ 34 1.2.5 Phƣơng pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) 34 1.2.6 Phƣơng pháp chƣng ninh 36 1.2.7 Phƣơng pháp phân tích vi sinh vật 36 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 THIẾT BỊ - DỤNG CỤ - HÓA CHẤT 37 2.2 SƠ ĐỒ QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM 39 2.3 NGUYÊN LIỆU 39 2.3.1 Cây bứa 39 2.3.2 Thu nguyên liệu 40 2.3.3 Xử lý nguyên liệu 41 2.4 Xác định số tính chất vật lý .42 2.4.1 Xác định độ ẩm .42 2.4.2 Xác định hàm lƣợng tro 43 2.4.4 Chuẩn độ tổng lƣợng axit thu đƣợc phƣơng pháp chuẩn độ axit- bazơ 44 2.4.5 Chƣng ninh nồi áp suất để thu dịch chiết axit .44 2.4.6 Xác định hàm lƣợng HCA mẫu phƣơng pháp HPLC .46 2.4.7 Tổng hợp muối canxi hydroxycitrat HCA 48 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 MỘT SỐ TÍNH CHẤT VẬT LÝ CỦA NGUYÊN LIỆU 48 3.1.1 Độ ẩm nguyên liệu 48 3.1.2 Hàm lƣợng tro .49 3.1.3 Xác định thành phần kim loại phƣơng pháp AAS 49 3.1.4 Xác định tổng lƣợng axit mẫu chiết phƣơng pháp chuẩn độ 50 3.2 Xác định HCA mẫu chiết sắc ký lỏng cao áp (HPLC) 51 3.2.1 Kết xây dựng đƣờng chuẩn .52 3.2.2 Kết xác định axit hữu vỏ Bứa 52 3.3.TỔNG HỢP MUỐI CANXI CỦA HCA 56 3.3.1 Quy trình 56 3.3.2 Khảo sát ảnh hƣởng pH đến q trình chuyển hố tạo muối Canxi HCA 56 3.3.3 Khảo sát theo thể tích 58 3.3.4 Khảo sát theo thời gian 59 3.3.5 Kiểm tra sản phẩm muối HCCa phổ hồng ngoại (IR) 61 3.3.6 Kiểm tra sản phẩm muối HCCa sắc ký lỏng cao áp (HPLC) 64 3.5 Tinh chế muối 65 3.6 Kiểm tra hàm lƣợng canxi sản phẩm muối HCCa 71 3.7 Kiểm tra tiêu Vi sinh vật sản phẩm muối HCCa 71 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO 74 QUYẾT ĐỊNH GIAO ĐỀ TÀI LUẬN VĂN THẠC SĨ (BẢN SAO) PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS : Atomic Absorption Spectrometric HPLC : High Performance Liquid Chromatography IR : Infrared spectroscopy DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang 1.1 Mô tả đặc điểm HCA 20 3.1 Kết xác định độ ẩm vỏ bứa sấy khô 50 3.2 Kết xác định tỉ lệ tro vỏ bứa sấy khô 50 3.3 Kết xác định hàm lƣợng số kim loại vỏ 51 bứa 3.4 Kết xác định tổng lƣợng axit vỏ Bứa 52 3.5 Kết xác định axit hữu vỏ Bứa 55 HPLC 3.6 3.7 Kết khảo sát phụ thuộc khối lƣợng muối thu đƣợc vào pH Kết khảo sát phụ thuộc khối lƣợng muối thu 58 60 đƣợc vào thể tích axit 3.8 Kết khảo sát phụ thuộc khối lƣợng muối thu 61 đƣợc vào thời gian khuấy trộn 3.9 Kết diện tích pic phổ HPLC sản phẩm muối 71 HCCa 3.10 Kết hàm lƣợng canxi muối HCCa AAS 71 3.11 Kết xác định số tiêu vi sinh muối 72 canxi hydroxycitrat DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu hình Tên hình Trang 1.1 Quả, lá, hoa bứa Quảng Ngãi 1.2 Cây bứa Quảng Ngãi 1.3 Hoa, lá, bứa mủ vàng 1.4 Cây bứa nhà Quảng Ngãi 10 1.5 Quả tai chua Quảng Ngãi 12 1.6 Lá, Garcinia cambogia 13 1.7 Cây, Garcinia Indica Kokam 14 1.8 Hoa, lá, Garcinia atroViridis 15 1.9 Quả Garcinia dulcis 16 1.10 Quả Garcinia hombroniana 16 1.11 Lá, hoa Garcinia echinocarpa 17 1.12 Cấu trúc đồng phân axit hiđroxi xitric 19 1.13 Cấu trúc axit hiđroxi xitric lacton 19 1.14 Cấu thức thông thƣờng muối kim loại 25 1.15 Công thức thông thƣờng muối cặp kim loại nhóm IA 26 IIA 1.16 Cơng thức thơng thƣờng muối cặp kim loại nhóm II 27 1.17 Cơng thức thông thƣờng muối ba kim loại 28 2.1 Tủ sấy lị nung 38 2.2 Hố chất CaCl2 NaOH 38 2.3 Cây bứa Quảng Ngãi 40 2.4 Quả bứa Quảng Ngãi 41 2.5 Vỏ bứa làm 42 2.6 Mẫu vỏ bứa khô cắt nhỏ 42 2.7 Mẫu vỏ bứa khô dạng bột mịn 42 2.8 Dịch chiết chƣa tẩy màu 46 2.9 Dịch chiết tẩy màu 46 2.10 Dịch chiết sau cô đặc 46 2.11 Kết tủa pectin 46 2.12 Lọ chất chuẩn 48 2.13 Muối HCCa tạo thành 49 2.14 Muối HCCa sấy khô 49 3.1 Đƣờng chuẩn HCA 53 3.2 Đƣờng chuẩn axit citric 54 3.3 Sắc kí đồ mẫu axit HCA chuẩn 55 3.4 Sắc kí đồ mẫu vỏ Bứa khơ nƣớc 56 3.5 Muối HCCa tạo thành 57 3.6 Muối HCCa sấy khô 57 3.7 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc khối lƣợng 59 muối thu đƣợc vào pH 3.8 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc khối lƣợng 60 muối thu đƣợc vào thể tích axit 3.9 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc khối lƣợng 62 muối thu đƣợc vào thời gian khuấy trộn 3.10 Máy đo phổ hồng ngoại (IR) 62 3.11 Phổ IR HCCa chuẩn 63 3.12 Phổ IR muối HCCa 64 3.13 Phổ HPLC (-)-HCCa chuẩn 65 3.14 Sắc kí đồ muối HCCa 66 3.15 Máy HPLC (D-7000) 67 3.16 Sắc kí đồ muối HCCa tinh chế lần 68 3.17 Sắc kí đồ muối HCCa tinh chế lần 69 3.18 Sắc kí đồ muối HCCa tinh chế lần 70 ... “ Nghiên cứu tổng hợp muối canxihydroxycitrat từ axit hidroxycytric vỏ bứa Quảng Ngãi ” Mục đích nghiên cứu - Khảo sát trình chiết tách axit hidroxycytric từ vỏ bứa - Xây dựng quy trình tổng hợp. .. tài Từ nghiên cứu trên, đề tài thu đƣợc số kết với ý nghĩa nhƣ sau: - Xây dựng quy trình chiết tách axit hidroxycytric từ vỏ bứa khơ - Xây dựng quy trình tổng hợp muối canxihydroxycitrat từ axit. .. thứ sinh tỉnh từ Hà Tuyên, Vĩnh Phú, Quảng Nam, Đà Nẵng, Quảng Ngãi, Tây Nguyên đến Nam Bộ Trên giới việc nghiên cứu bứa có từ lâu, tính đến có hàng trăm cơng trình nghiên cứu bứa bao gồm: chiết