Khảo sát ảnh hưởng của một số yếu tố môi trường đến sự phát triển của vi tảo biển (Thalassiosira sp.) trong điều kiện phòng thí nghiệm

Nghiên cứu thực hiện nhằm xác định ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng, độ mặn, nhiệt độ và việc có hoặc không bổ sung CO2 lên sự phát triển của vi tảo Thalassiosira sp. trong điều kiện phòng thí nghiệm để cải tiến và hoàn thiện quy trình nuôi sinh khối vi tảo Thalassiosira sp. quy mô lớn.

VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA VI TẢO BIỂN (Thalassiosira sp.) TRONG ĐIỀU KIỆN PHÒNG THÍ NGHIỆM Võ Trường Giang1, Hồ Hồng Nhung1, Nguyễn Thị Mai Anh1 Nguyễn Hữu Thanh1* TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm xác định ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng, độ mặn, nhiệt độ việc có khơng bổ sung CO2 lên phát triển vi tảo Thalassiosira sp điều kiện phòng thí nghiệm để cải tiến hồn thiện quy trình nuôi sinh khối vi tảo Thalassiosira sp quy mô lớn Nghiên cứu thu kết quả: Vi tảo Thalassiosira sp phát triển tốt môi trường dinh dưỡng F/2 đạt mật độ cao 105,83 ± 1,69 x 104 tế bào/ml vào ngày thứ chu kỳ nuôi với nhiệt độ 310C, độ mặn 20‰ khơng có bổ sung CO2 Từ khóa: độ mặn, nhiệt độ, Thalassiosira sp., tốc độ tăng trưởng, vi tảo I ĐẶT VẤN ĐỀ Vi tảo Thalassiosira sp thức ăn tươi sống phù hợp cho nhiều đối tượng thủy sản, đặc biệt ấu trùng tôm (Knuckey ctv., 1998; McCausland ctv., 1999; Mata ctv., 2010) Thalassiosira sp cịn chứa khống chất sắc tố chlorophyl β-carotene, sterol quan trọng ấu trùng loài giáp xác (Mata ctv.,2010; Aleikar Vásquez-Suárez ctv., 2013) Nhiều kết nghiên cứu cho thấy, sản xuất giống đối tượng thủy sản, vi tảo nói chung Thalassiosira sp nói riêng đóng vai trò quan trọng, định đến kết đợt sản xuất (McCausland ctv., 1996; Hemaiswarya ctv., 2010), thức ăn tươi sống thay cho giai đoạn phát triển động vật thân mềm, ấu trùng giáp xác ấu trùng số lồi cá Vì vậy, việc tối ưu hóa điều kiện ni cần thiết để xây dựng quy trình ni sinh khối đạt hiệu cao nhất, chủ động nguồn thức ăn tự nhiên cung cấp cho trình sản xuất giống Mục tiêu đề phải nghiên cứu xác định môi trường dinh dưỡng điều kiện sinh thái thích hợp cho phát triển vi tảo Thalassiosira sp., từ ứng dụng để ni thu sinh khối II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Loài vi tảo Thalassiosira sp phân lập biển Vũng Tàu, lưu giữ giống phòng Thức ăn tự nhiên - Trung tâm Quốc gia Giống hải sản Nam Bộ, điều kiện nhiệt độ 180C, cường độ ánh sáng 3.000 lux, độ ẩm 70% tủ nuôi MLR – 350H (Nhật) 2.2 Vật liệu nghiên cứu Tảo giống lấy pha tăng trường, mật độ ban đầu x 104 tế bào/ml Nước nuôi tảo qua hệ thống lọc, khử trùng tia UV chlorine, pH 7,8-8,0 Độ mặn tự nhiên dao động 30‰-32‰ Loài tảo Thalassiosira sp phân lập biển Vũng Tàu, trải qua thời gian lưu giữ nuôi cấy theo độ mặn tự nhiên nước biển Chọn 30‰ độ mặn thích hợp để khảo sát ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến tốc độ tăng trưởng Thalassiosira sp Tất thí nghiệm thực chai thủy tinh hình trụ, thể tích lít với lượng nước ni 600 ml; chế độ sục khí 24/24 qua màng lọc có kích thước lỗ 0,2 µm; điều kiện chiếu sáng 3.000 lux (FAO,1996), chu kỳ sáng tối 12:12 điều chỉnh đồng hồ tự ngắt Trung tâm Quốc gia Giống Hải sản Nam bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II *Email: thanhmarinefish@yahoo.com TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 13 - THÁNG 6/2019 57 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN II Chọn chu kì chiếu sáng 12/12 phù hợp Neubauer Haemocytometer kính hiển với chu kỳ ngày đêm tự nhiên, gần với điều kiện vi độ phóng đại 400 lần Cách sử dụng buồng sản xuất nuôi tảo ánh sáng mặt trời Thí đếm hồng cầu cơng thức tính mật độ tảo theo nghiệm kéo dài quần thể tảo hướng dẫn (Bastidas., 2013): hướng dẫn (Bastidas., 2013): nghiệm thức vào pha tàn Tổng số tế bào đếm 2.3 Phương pháp nghiên cứu Mật độ tảo = x 104 (tế bào⁄ml) hướng dẫn (Bastidas., 2013): Số ô vuông lớn 2.3.1 Thí nghiệm 1.1: Khảo sát tốc độ tăng trưởng Thalassiosira sp 2.4.2 môi trường Tổng tế tảo bào đếm Xác định tốc độ tăng trưởngsốcủa Mật độ tảo = x 104của (tế tảo bào⁄ml) 2.4.2 Xác định tốc độ tăng trưởng dinh dưỡng F/2 (Guilland ryther, 1962), Số ô vuông lớn độ tăng trưởng tính dựa theo cơng (Garcia ctv., 2012) Tốcđược độ tăng trưởng đượcthức tínhcủa dựa theo cơng Conway (Walne, 1966) Thí nghiệm đượcTốc tiến Xác định tốc độthức tăng trưởng củavàtảo (Garcia ctv., 2012) hành với đơn vị nuôi (22.4.2 môi trường dinh (LnNt - LnN0 ) Tốc độ tăng trưởng  Tốc độ tăng trưởng tính dựa theo cơng thứct (Garcia ctv., 2012) dưỡng x lần lặp), điều kiện nhiệt độ 28±1 C, nước nuôi độ mặn 30‰ qua xử lý Chọn mơi (LnN - LnN0 ) Trong Nt mậtTốc độ cuối, N0 làtrưởng mật độ ban độ tăng  đầu, tt khoảng thời gian (ngày) trường dinh dưỡng thích hợp để thực t 2.4.3 Quản lý yếu tố môi trường nghiên cứu Trong Nt mật độ cuối, N0 mật độ ban đầu, t khoảng thời gian (ngà 2.3.2 Thí nghiệm 1.2: Khảo sát tốc độCác tăng Nxác mật mật ban nhiệt kế rượu yếu tố môi Trong trường định độ hàngcuối, ngày.NNhiệt độ độ đo t Quản yếu tố môi trường trưởng Thalassiosira sp 2.4.3 độ mặnlý20, đầu, t khoảng thời gian (ngày) xácnuôi 10C) pH đo máy đo pH (Hanna pH Meter, độ xác 0,1) Độ m 25 30‰ Thí nghiệm bao gồm đơn vị Các yếu tố môi trường xáclýđịnh Nhiệt độ đo nhiệt k 2.4.3 Quản hàng yếu tốngày môi trường (3 độ mặn x lần lặp), sử dụng môi trường 0đo dinh bút (KoiMedic TC 9104, Trans Instruments – Singapore) xác C) pH đo (Hannađược pH Meter, độ xác 0,1 Cácbằng yếumáy tố đo mơipHtrường xác định dưỡng F/2, nhiệt độ 28±10C Chọn độ mặn Phương pháp xửngày lý số liệu hàng NhiệtTrans độ đoInstruments nhiệt –kếSingapore) rượu (độ đo2.4.4 thích hợp để tiến hành thí nghiệm 1.3.bút (KoiMedic TC 9104, xáctrực C) máyhành đothí pHnghiệm Tồn số liệuxử thu tiếp pH trongđược đo trình tiến 2.3.3 Thí nghiệm 1.3: Khảo tốc độCác tăng 2.4.4.sát Phương pháp lý số liệu (Hanna pH Meter, độ xác 0,1) Độ mặn trưởng Thalassiosira sp nhiệt độ: 28 liệu nghiệm xử phầnbút mềm(KoiMedic Microsoft Office Excel sử dụng phân T đo TC 9104, Trans Cácthísố liệu thulý trực tiếp trong q trình tiến2013 hànhvàthí nghiệm ± 1°C, 31 ± 1°C 34 ± 1°C kiểm soát Instruments – Singapore) Independent – Sample Test phần (SPSSmềm versionMicrosoft 19.0) để soOffice sánh sựExcel khác biệt mật tốc thíThí nghiệm xử lýTtrên 2013 độ sử dụng máy điều hòa, bể ổn liệu nhiệt nghiệm 2.4.4 Phương pháp xử lý số liệu nghiệm thức version thí 19.0) nghiệmđểmơi dinhkhác dưỡng tích đO bao gồm đơn vị nuôi (3 mức nhiệttăng độ trưởng x–3Sample lầngiữa Independent T Test (SPSS sotrường sánh biệtPhân mật Các số liệu thu trực tiếp lặp), sử dụng môi trường dinh dưỡng F/2, độ Way ANOVA nghiệm phép thử thức Duncan (SPSSthíversion 19.0)môi để so sánh sựdinh khácdưỡng biệt mật độ tăng trưởng nghiệm trường Phân mặn 20‰ Chọn nhiệt độ thích hợp để tiến trình tiến hành thí nghiệm Tồn số liệu thí được(SPSS xử trênthíphần mềm Microsoft Way ANOVA vàtrưởng phépnghiệm thử Duncan version 19.0) đểmặn, so sánh tốc độ tăng nghiệm thứclýtrong nghiệm độ nhiệt độ, khác khơngbiệt hoặcvề có hành thí nghiệm 1.4 Office Excel 2013 sử dụng phân tích tốc độ trưởng 2.3.4 Thí nghiệm 1.4: Khảo sáttăng tốctrộn độ tăng pha khí CO nghiệm thức thí nghiệm độ mặn, nhiệt độ, khơng Independent – Sample T Test (SPSS version trưởng Thalassiosira sp.pha trộn hai khí điều kiện QUẢ19.0) III CO KẾT VÀ THẢO để soLUẬN sánh khác biệt mật độ tốc khơng có pha trộn CO2 (đảm bảo ổn định độ tăng trưởng KẾT VÀ THẢO LUẬN 3.1 Mơi trường dinh dưỡng thích hợp nghiệm thức pH khoảng 7,5-8,0) ThíIII nghiệm baoQUẢ gồm thí nghiệm mơi trường dinh dưỡng Phân tích đơn vị ni (2 nghiệm thức sử dinh dưỡng thích hợp 3.1.x lần Mơilặp), trường Thí nghiệm bố tríANOVA điều kiệnvàphịng nghiệm, nhiệt(SPSS độ ổn định 28  10C; One-Way phépthíthử Duncan dụng mơi trường dinh dưỡng F/2, độ mặn 20‰, Thí nghiệm bố4 trí19.0) điềuđểkiện phịng nghiệm, nhiệt độ ổn định 28 so sánh sựthíđược khác biệtbày vềở mật độ tảo ban đầu 5version x 10 tb/ml; độ mặn 30‰ Số liệu trình Hình Bảng nhiệt độ 31°C độ4 tb/ml; tốc độ độmặn tăng30‰ trưởng thức độpháp tảo ban x 10 Sốgiữa liệu đượcnghiệm trình bày Hình Bả củađầu (Zhang Pha trộn CO2 theo phương thí nghiệm độ mặn, nhiệt độ, không ctv.,2001) Theo dõi pH máy đo pH có pha trộn khí CO (HANNA - HI 8424, pH meter; độ xác 0,1) Kết luận ảnh hưởng việc bổ sung CO2 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN lên phát triển Thalassiosira sp 3.1 Mơi trường dinh dưỡng thích hợp 2.4 Phương pháp thu thập xử lý số liệu Thí nghiệm bố trí điều kiện phịng thí nghiệm, nhiệt độ ổn định 28 ± 10C; mật độ 2.4.1 Xác định mật độ tảo Mật độ tảo xác định buồng đếm tảo ban đầu x 10 tb/ml; độ mặn 30‰ Số liệu trình bày Hình Bảng 58 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 13 - THÁNG 6/2019 1: Đườngcong congtăng tăng trưởng trưởng sp ởsp mơi HìnhHình 1: Đường củaThalassiosira Thalassiosira mơ 3.1 Mơi trường dinh dưỡng thích hợp Thí nghiệm bố trí điều kiện phịng thí nghiệm, nhiệt độ ổn định 28  10C; mật VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II độ tảo ban đầu x 104 tb/ml; độ mặn 30‰ Số liệu trình bày Hình Bảng Hình 1:Hình Đường1:cong tăng trưởng Thalassiosira môi trường Đường cong tăng trưởng sp Thalassiosira sp dinh dưỡng môi khác trường dinh dưỡng khác nha Vi tảo Thassiosira sp có tăng trưởng cao (Bảng 1) Từ ngày nuôi thứ trở đi, phát triển mơi trường F/2 Conway (Hình mơi trường F/2 có mật độ cao Conway 1) Trong ngày nuôi đầu tiên, tốc độ tăng 3Sau ngày nuôi tảo đạt mật độ cực đại 37,59 x trưởng quần thể đồng Tuy nhiên, 104 tb/ml 24,86 x 104 tb/ml môi tốc độ tăng trưởng môi trường khác trường F/2 Conway, tương ứng với tốc độ (P0,05) ngày thứkhác 3, mật nghiệm đầu sựngày khácthứ biệt thứcở25‰ Pha cânthức bằngbắt kéo dàicóđến tảo nghiệm thức bắtTừ đầu có biệtđộ tảo quần thểđều bắt đạt đầumật suy độ giảm (P