Nghiên cứu thành phần loài, phân bố và độc tính cấp của họ nấm amanitaceae r heim ex pouzar ở tây nguyên

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - TRẦN THỊ THU HIỀN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LOÀI, PHÂN BỐ VÀ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA HỌ NẤM AMANITACEAE R.HEIM EX POUZAR Ở TÂY NGUYÊN Chuyên ngành: Thực vật học Mã số: 42 01 11 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội, 2018 Cơng trình hồn thành tại: Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Người hướng dẫn khoa học 1: PGS.TS Trần Huy Thái Người hướng dẫn khoa học 2: PGS.TS Lê Bá Dũng Phản biện 1: … Phản biện 2: … Phản biện 3: … Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Học viện, họp Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam vào hồi … ’, ngày … tháng … năm 201… Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Học viện Khoa học Công nghệ - Thư viện Quốc gia Việt Nam Mở Đầu Tính cấp thiết đề tài Nấm sinh vật sống hoại sinh mơi trường sinh thái Nấm có khả tiết enzyme vào môi trường để phân giải phân tử phức tạp thành chất đơn giản, chúng có vai trị lớn việc thúc đẩy tốc độ chu trình tuần hồn vật chất tự nhiên, khoáng hoá hợp chất hữu cơ, làm mơi trường sinh thái tăng độ phì nhiêu cho đất thơng qua làm tăng suất trồng rừng Nấm lớn Việt Nam có tác giả nghiên cứu, có nghiên cứu chủ yếu tập trung khu vực đồng trung du Đối với khu vực Tây Nguyên chủ yếu tập trung nghiên cứu Nam Tây Nguyên khu vực cịn lại chưa có tác giả nghiên cứu Họ nấm Amanitaceae đóng vai trị quan trọng khu hệ nấm lớn nói chung, chúng có ý nghĩa lớn tính đa dạng đặc biệt độc tính chúng lồi nấm có hàm lượng độc tố cao dễ nhầm lẫn với số loài nấm ăn Với thói quen sử dụng nấm ngồi tự nhiên từ rừng làm thực phẩm phổ biến người dân địa phương nơi Và vùng có kinh tế cịn nhiều khó khăn, mức sống người dân cịn thấp đa số hộ nghèo sống phụ thuộc vào rừng chủ yếu Vì rừng nguồn cung cấp thức ăn chủ yếu cho sinh hoạt người dân sống gần rừng, nguồn thức ăn từ rừng nấm loại thực phẩm mà người dân cho đặc sản, nấm tự nhiên làm thực phẩm ngon thơm hàm lượng dinh dưỡng cao ăn ưa thích họ Bên cạnh mối đe doạ tính mạng sức khoẻ người dân đây, nhầm lẫn đáng tiếc nấm độc nấm ăn Trong tự nhiên có nhiều lồi nấm độc thuộc chi khác Amanita, Galerina, Lepiota, inobybe, Agaricus… chẳng hạn loài thuộc chi Amanita loài Amanita verna (nấm độc tán trắng), Amanita virosa (nấm độc hình nón), Amanita phalloides… lồi gây nên nhầm lẫn cho người dân sử dụng nấm tự nhiên làm thức ăn mà thực tế diễn nhiều trường hợp ngộ độc nấm gây chết người khơng hiểu biết nấm độc thời gian qua gây xôn xao dư luận nước ta Việc cung cấp kiến thức cho người dân am hiểu phân biệt nấm độc nấm ăn cần thiết cấp bách Vì lẽ đó, chúng tơi tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu thành phần loài, phân bố độc tính cấp họ nấm Amanitaceae R.Heim ex Pouzar Tây Nguyên” Mục tiêu đề tài - Xác định số đặc điểm sinh học, sinh thái loài nấm thuộc họ Amanitaceae phân bố khu vực Tây Nguyên - Xác định độc tính cấp lồi nấm độc thuộc chi Amanita Ý nghĩa khoa học - Nghiên cứu đặc điểm sinh học chi nấm Amanita - Góp phần bổ sung vào danh mục nấm lớn Tây Nguyên nói riêng Việt Nam nói chung, đồng thời làm sở cho hướng nghiên cứu khác sâu Ý nghĩa thực tiễn Nhận diện loài nấm độc tự nhiên hạn chế ngộ độc nấm độc Những điểm luận án Lần nghiên cứu họ nấm Amanitaceae, lập danh mục loài nấm thuộc họ Amanitaceae khu vực Tây Nguyên Định danh tên 23 loài số 33 loài kiểm tra định danh loài sinh học phân tử 16 loài thuộc họ Amanitaceae khu vực Tây Nguyên Ghi nhận bổ sung 15 loài vào danh mục nấm lớn Việt Nam 08 lồi lồi cho khoa học Xác định đặc điểm sinh học, sinh thái lồi nấm thuộc chi Amanita - Xây dựng phương trình hồi qui đa biến dự báo xuất loài nấm thuộc chi Amanita Tansoxuathien = C + a*l + b*m + c*h - d*t - Xác định độc tính cấp lồi Amanita abrupta, nghiên cứu gây chết động vật thí nghiệm theo đường uống với liều gây chết 50% động vật thí nghiệm (LD50) 4750 mg/kg thể trọng Bố cục luận án Luận án bao gồm 167 trang 12 bảng 49 hình, đồ phần phụ lục Luận án bao gồm phần: Mục lục, danh mục bảng, danh mục hình luận án, Danh mục ký hiệu viết tắt, danh mục biểu đồ Mở đầu (5 trang); Chương 1: Tổng quan tài liệu (28 trang); Chương 2: Đối tượng địa điểm, nội dung phương pháp nghiên cứu (12 trang); Chương 3: kết nghiên cứu (113 trang); Kết luận kiến nghị (2 trang); Danh mục cơng trình cơng bố tác giả có liên quan đến luận án (01 trang); Tài liệu tham khảo (7 trang); phụ lục CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hệ thống phân loại nấm 1.1.1 Lƣợc sử phân loại nấm 1.1.2 Nấm đảm hệ thống phân loại 1.1.3 Hệ thống nấm đảm theo Trịnh Tam Kiệt Ngành Basidiom cota R T Moore 1980 - Nấm đảm Họ Amanitaceae R.Heinn ex Puozar (1983):3 chi (+23 syns) Đặc điểm họ: Quả thể chất thịt, dễ thối nát Mũ nấm dạng dù, cuống nấm đính trung tâm, cuống nấm dễ tách rời mũ nấm Bào tầng dạng phóng xạ phiến nấm Phiến nấm tự Bào tử nhẵn bóng, kính hiển vi khơng màu, thành đám có màu phấn hồng Quả thể non có hai màng bao quanh, lớn lên cịn để lại vết tích gốc cuống * Chi Amanita Pers (1987): phân bố rộng Rất nhiều loài tạo rễ nấm, số loài sống hoại sinh Chi Amanita có đặc điểm gồm: - Có màu sắc đa dạng phong phú như: đỏ, cam, vàng, - Mũ nấm chất thịt, dạng ô dù - Phiến nấm lớn, màu trắng, vàng, - Cuống nấm chất thịt, đính trung tâm dễ tách khỏi mũ nấm - Bào tử khơng màu, hình cầu đến hình bầu dục, nhẵn bóng - Nấm mọc hoại sinh đất - Khi hình thành thể giai đoạn nấm non thường có bao chung bao riêng nối liền mép mũ cuống nấm Sau bị tách hình thành nên bao gốc vịng nấm – đặc điểm bật loài nấm thuộc chi Amanita * Chi Limacella Murrill (1911): gồm loài * Chi Catatrama Franco-Mol 1991gồm 02 loài Theo điều tra số tác giả Trịnh Tam Kiệt, Lê Bá Dũng, Ngô Anh, Lê Văn Liễu liệt kê 37( 33lồi có tên khoa học 04 lồi sp) lồi nấm thuộc họ Amanitaceae mơ tả chi tiết 12 lồi 1.1.4 Tình hình ngộ độc nấm họ Amanitaceae Nấm độc (Mycetism) để tác dụng độc hại từ việc ăn phải độc tố có nấm Các triệu chứng thay đổi từ rối loạn tiêu hóa gây chết người Những độc tố chứa chất trao đổi thứ cấp sinh đường sinh hóa riêng biệt tế bào nấm Ngộ độc nấm thường kết việc ăn nấm hoang dại sau xác định nhầm loài nấm hoang dại thành nấm ăn Ngay người hái nấm hoang dại có kinh nghiệm ghi nhận thấy ca ngộ độc ăn lồi nấm độc, lâm vào tình trạng nguy hiểm dù có chút sơ ý Việt Nam nước có độ đa dạng sinh học cao giới Cho tới năm gần có khoảng 3000 lồi nấm ghi nhận Việt Nam với khoảng 1800 lồi nấm lớn, có khoảng 50 lồi có chứa triệu chứng độc nói phần lớn lồi nấm độc nấm độc chết người, phần lớn vụ ngộ độc chết người lại liên quan đến nấm độc, nấm thuộc họ Amanitaceae nấm độc xanh đen (Amanita phalloides), nấm độc chết người trắng (Amanita virosa), nấm độc tán trắng “Nàng tiên giết người rừng” (Amanita verna) Các loài Amanita gây nhầm lẫn với loài nấm khác đặc biệt chứng non, thể dạng trứng bao bọc bao chung (volve) dễ nhầm lẫn với nấm rơm (Volvariella esculenta), nấm rơm trắng (Volvariella bombycina) hay loài nấm trứng (Bovista, Lycoperdon….) khác CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng, vật liệu địa điểm nghiên cứu 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu Các loài nấm thuộc họ Amanitaceae tự nhiên phân bố khu vực Tây Nguyên 2.1.2 Vật liệu nghiên cứu - Kính hiển vi Olympus (Nhật), kính lúp Olympus (Nhật), bảng so màu, dung dịch KOH… - Các dụng cụ: + Ngoài tự nhiên như: Đục, dao, túi ni lơng, máy ảnh… + Trong phịng thí nghiệm: Banh, dao lam, lamen, lam kính… + Kim uống có đầu tù, ống eppendof, nước cất vơ trùng, cân phân tích hóa chất cần thiết khác Động vật: chuột chủng dòng BALB/c khoẻ mạnh, nuôi khu nuôi động vật Viện Công nghệ sinh học thuộc viện Hàn lâm Khoa học công nghệ Việt Nam Chuột cho ăn thức ăn tiêu chuẩn nước uống tự Dụng cụ, hóa chất: kim uống có đầu tù, ống Eppendof, nước cất vơ trùng, hóa chất cần thiết khác Một số hóa chất thơng dụng dùng sinh học phân tử hãng Sigma, Merck, CTAB, Tris base, acid Boric , NaCl, dNTPs, EDTA, 6X orange loading dye solution, Taq Polymeraza, Ethanol, 2-propanol, Acetic acid glacial, Phenol, Chloroform, isoamyalcohol, Agarose, mồi ITS TT Danh sách mồi ITS (White et al 1989) Trình tự Nucelotid ITS1 Mồi TCCGTAGGTGAACCTGCGG ITS4 TCCTCCGCTTATTGATATGC 2.1.3 Địa điểm thu mẫu Khu vực Tây Nguyên (Vườn Quốc Gia Chư Yang Sin, Vườn Quốc Gia Yok Đôn, Khu Bảo tồn Thiên nhiên Ea Sô tỉnh Đăk Lăk, Vườn Quốc Gia Bidoup Núi Bà tỉnh Lâm Đồng, Vườn Quốc Gia Chư Mom Ray tỉnh Kon Tum, Vườn Quốc Gia Kon Ka Kinh tỉnh Gia Lai) 2.2 Nội dung nghiên cứu - Điều tra thu thập mẫu nấm thuộc họ Amanataceae khu vực Tây Nguyên - Phân tích đăc điểm sinh học, sinh thái loài nấm thuộc họ Amanitaceae thu thập khu vực Tây Nguyên - Định danh tên loài mẫu nấm thu thập xây dựng danh lục loài nấm thuộc họ Amanataceae khu vực Tây Nguyên - Phân tích độc tính cấp loài nấm độc thuộc họ Amanataceae 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Phƣơng pháp thu thập mẫu nấm thực địa - Thu mẫu nấm độc thuộc họ Amanataceae theo tuyến xương cá sinh cảnh khác (rừng rộng, rừng kim, rừng hỗn giao ) khu vực Tây Nguyên - Thu mẫu: vào tháng mùa mưa (từ tháng đến tháng 11 năm) Khi thu mẫu dựa vào số đặc điểm họ nấm Amanitaceae để làm sở thu mẫu 2.3.2 Phƣơng pháp xử lý mẫu bảo quản mẫu vật Mẫu lấy bảo quản nơi thoáng mát Nếu giấy bọc bị bẩn hay ướt thay thế, mơ tả, ghi chép tiếp đặc điểm nấm vào phiếu điều tra: kích thước, hình dạng, màu sắc, đặc điểm mặt mũ, mép mũ, bào thể, bụi bào tử, cuống nấm, thịt nấm Những mẫu chưa phân tích đủ tiêu chuẩn cần tiến hành làm bách thảo nấm (bách thảo ngâm) 2.3.3 Phƣơng pháp phân tích mẫu 2.3.3.1 Phân tích đặc điểm hình thái ngồi 2.3.3.2 Phân tích đặc điểm hiển vi phịng thí nghiệm 2.3.4 Định danh 2.3.4.1 Định danh theo phƣơng pháp hình thái so sánh giải phẫu Dựa tư liệu tác giả Trịnh Tam Kiệt (2012,2013), Lê Bá Dũng (2003), Teng (1964), Singer R.(1986), Jiri Baier (1991), Denis R Benjamin (1995) 2.3.4.2 Định danh theo phƣơng pháp sinh học phân tử Trong số mẫu nấm thu thập có số lồi có đặc điểm hình thái gần tương đồng để phân biệt định danh lồi chúng tơi tiếp hành định danh phương sinh học phân tử để thể khác biệt lồi có hình thái tương đồng 2.3.5 Phƣơng pháp thử độc tính cấp độc tính cấp tiến hành theo phương pháp Dodehe Yeo cộng (2012), N’dia Kouadio Frédéri cộng (2013), Aristide Traore cộng (2014) 2.3.6 Phƣơng pháp xác định nhân tố sinh thái Phương pháp xác định nhân tố sinh thái (nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng, độ cao) sử dụng thiết bị Tiger Direct HMAMT-110 (USA), TigerDirect LMLX1010B (USA), GPS Garmine Trex Vista HCx (USA) 2.3.7 Phƣơng pháp phân tích mối tƣơng quang nhân tố sinh thái Phần mềm MS TAT 2009 Excel để xử lý thống kê Sử dụng phần mềm Statgraphic Centurion XV để thiết lập hàm hồi quy đa biến phân tích mối quan hệ mật độ, tần số xuất loài Nấm với nhân tố sinh thái CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Đặc điểm phân loại họ Amanitaceae R.Heinn ex Puozar (1983) Họ Amanitaceae R.Heinn ex Puozar (1983): gồm chi Đặc điểm họ: Quả thể chất thịt, dễ thối nát Mũ nấm dạng ô dù, cuống nấm đính trung tâm, cuống nấm dễ tách rời mũ nấm Bào tầng dạng phóng xạ phiến nấm Phiến nấm tự Bào tử nhẵn bóng, kính hiển vi khơng màu, thành đám có màu phấn hồng Quả thể non có hai màng bao quanh, lớn lên cịn để lại vết tích gốc cuống Đặc điểm chi Amanita Dill ex Boehm 1760 Bao gồm số loài nấm độc biết đến phân bố toàn giới Phần lớn vụ ngộ độc nấm ngộ độc nấm chi nấm Amanita Chi Amanita có đặc điểm gồm: - Có màu sắc đa dạng phong phú như: đỏ, cam, vàng, - Mũ nấm chất thịt, dạng ô dù - Cuống nấm chất thịt, đính trung tâm dễ tách khỏi mũ nấm - Bào tử khơng màu, hình cầu đến hình bầu dục, nhẵn bóng - Kích thước bào tử từ 5-7 x 10-12 µm - Nấm mọc hoại sinh đất - Lỗ nảy mầm lệch từ 20 - 300 - Khi hình thành thể giai đoạn nấm non thường có bao chung bao riêng nối liền mép mũ cuống nấm Sau bị tách hình thành nên bao gốc vịng nấm – đặc điểm bật loài nấm thuộc chi Amanita Chi Limacella Murrill 1911 có số lồi (03 loài) xuất vùng châu Chi Catatrama Franco-Mol 1991trên giới có 02 loài 3.2 Danh mục loài nấm thuộc họ Amanitaceae khu vực Tây Nguyên Đề tài điều tra, thu thập, mô tả, định danh lập danh mục 33 lồi thuộc chi Amanita, họ Amanitaceae trình bày bảng 3.1 Bảng 3.1: Danh mục loài nấm thuộc họ Amanitaceae khu vực Tâ Nguyên STT Tên loài RT Amanita abrupta Peck 1897 Amanita amanitoides Beeli Bas 1969 Amanita battarrae Boud Bon 1985 Amanita caesarea Gillet 1874 Amanita caesareoides Lj.N +++ Sinh cảnh RBT RHG X LK&L R + + RT X + + TC, CB Ghi ++ Ghi nhận Việt Nam Ghi nhận Việt Nam ++ +++ ++ +++ + ++ + ++ +++ Ghi nhận Việt Nam Ghi nhận Việt Nam 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Vassiljeva 1950 Amanita calyptroderma G.F Atk & V.G Ballen 1909 Amanita cokeri E.-J Gilbert & Kühner ex E.-J Gilbert 1940 Amanita concentrica T Oda, C Tanaka &Tsuda 2002 Amanita crocea Quél Singer 1951 Amanita eliae Quél 1872 Amanita excelsa Fr Bertill 1866 Amanita flavoconia G.F Atk 1902 Amanita fulva Fr 1815 Amanita hesleri Bas 1969 Amanita levistriata D.T Jenkins 1988 Amanita multisquamosa Peck 1901 Amanita pachycolea D.E Stuntz Amanita pantherina D.T Jenkins 1977 Amanita phalloides (Fr.) Secr 1833 Amanita pilosella Corner & Bas 1962 Amanita punctata D.A Reid 1980 Amanita similis Boedijn 1951 Amanita spreta Peck& acc 1887 Amanita sp.DL274 Amanita sp.DL89 Amanita sp.PR421 Amanita sp.DH048 Amanita sp.CD279 ++ +++ ++ + ++ + + +++ ++ Ghi nhận Việt Nam + ++ Ghi nhận Việt Nam ++ Ghi nhận Việt Nam +++ ++ + +++ ++ ++ +++ +++ + ++ + + +++ ++ Ghi nhận Việt Nam Ghi nhận Việt Nam Ghi nhận Việt Nam + ++ ++ Ghi nhận Việt Nam + ++ ++ +++ +++ + Ghi nhận Việt Nam + + + + + + ++ ++ +++ + +++ ++ + ++ +++ +++ ++ +++ ++ ++ + + + +++ + + + + + Ghi nhận Việt Nam Ghi nhận Việt Nam (V) VQG Chu Mon Ray (tỉnh Kon Tum) từ 14°18′ đến 14°38′ vĩ bắc, từ 107°29′ đến 107°47′ kinh đông (IV) VQG KonKa Kinh Tọa độ địa lý từ 14°09′ đến 14°30′ vĩ bắc ′ đến 108°28′ kinh đông (II) VQG Yok Don Từ 12°45′ đến 13°10′ vĩ bắc từ 107°29′30″ đến 107°48′30″ kinh đông (III) VQG Chu Yang Sin Từ 120°14′16″ đến 130°30′58″ vĩ bắc Từ 108°17′47″ đến 108°34′48″ kinh đông (VI) VQG Bidoup Núi Bà Từ 12°00'00" đến 12°30'00" vĩ độ Bắc Từ 108°35'00" đến 108°75'00" kinh độ Đông (I) Khu Bảo tồn Ea sô.Từ 12O53’18” đến 13O02’12” vĩ độ Bắc Từ 108O28’48” đến 108O43’54” kinh độ Đơng Bản đồ vị trí thu thập mẫu nấm thuộc họ Amanitaceae khu vực Tây Nguyên 3.3 Khóa phân loại đến loài Chi Amanita Cuống nấm hoàn chỉnh, có bao gốc dạng đế hoa Cuống nấm hồn chỉnh, có bao gốc khơng phải dạng đế hoa Cuống nấm có vịng dạng cổ áo 11 Cuống nấm có vịng khơng dạng cổ áo 12 Bao gốc dạng hình củ, cuống nấm có vịng 10 Bao gốc dạng hình củ, cuống nấm khơng có vịng Mũ nấm cuống nấm có màu vàng nghệ đậm ngả màu rỉ sắt, vòng nấm có dạng cổ áo đính 1/3 cuống nấm phía Kích thước bào tử 57 x 8-10 µm Amanita flavoconia Mũ nấm cuống nấm có màu trắng đục, bề mặt có vảy nhỏ gợn sóng, vịng nấm đính 1/3 cuống nấm gần gốc nấm, kích thước bào tử 68 x 8-10 µm Amanita concentrica Cuống nấm vảy Cuống nấm có vảy rõ ràng, bề mặt mũ nấm có mụn cóc có kích thước nhỏ cm Mũ nấm có mụn cóc kích thước nhỏ lơn cm Mũ nấm có hạt mụn cóc có kích thước lớn cm Mũ nấm màu nâu nhạt Kích thước bào tử nhỏ μm: Mụn cóc bề mặt mũ nấm thưa, tập trung nhiều trung tâm, Bào tử có hình elip kéo dài kích thước bào tử 5-6×7-9 μm, nội chất màu vàng, Amanita excelsa Kích thước bào tử lớn μm 10 Mũ nấm phẳng lõm hình long chảo Cuống nấm có vịng rõ ràng; Bào tử hình cầu kích thước 7-9 x 10-12 µm, nội chất hạt tinh dầu cộm Amanita pilosella Mũ nấm có màu da rám nắng, cuống nấm hình trụ màu trắng nhạt, hệ sợi suốt, khơng có vách ngăn Cuống nấm khơng có vịng rõ, bào tử có kích thước 5-8 x 9-12 µm, Amanita multisquamosa Mũ nấm có màu nâu đậm trung tâm Cuống nấm có vịng, bề mặt mũ nấm có chất nhày, bào tử có kích thước 6-8 x 8-10 µm, Amanita pantherina Mũ nấm dạng bán cầu lồi, có màu trắng, mép mũ có viền nếp gấp, Hệ sợi bắt màu vàng nhạt, có vách ngăn, bào tử có kích thước 6-8 x 9-12 µm, nội chất bào tử có nhiều hạt màu xanh Amanita hesleri Mũ nấm dạng ô dù, màu trắng, có vảy dạng mùn màu trắng; Cuống nấm màu trắng, có vịng nấm Hệ sợi suốt, khơng có vách ngăn, bào tử có kích thước - 10m đường kính, nội chất bào tử đồng màu xanh khơng có hạt Amanita cokeri 10 Mụn cóc bề mặt mũ nấm dày đặc, có nhiều loại đốm có màu sắc khác từ đốm trắng đến đốm đen, cuống nấm có vòng dạng cổ áo 11 rõ nét, Bào tử có kích thước 6-9 x 8-11 µm, bên có nhiều nội chất hạt hạt tinh dầu cộm Amanita sp.DL274 10 Mụn cóc bề mặt mũ nấm dày đặc đồng có màu trắng, cuống nấm phình to giữa, Bào tử có kích thước 7-9 x 8-12 µm, có nội chất hạt dầu Amanita abrupta 10 Mụn cóc thưa, khơng tập trung, bào tử dày hình cầu kích thước 6-8 x 911 µm, nội chất có hạt màu vàng đến xanh, mũ nấm có màu nâu xám nhạt Amanita sp DL89 11 Mũ nấm dạng chng, màu xám tro đến xám nâu, cuống nấm trịn dài, vịng nấm màu trắng, dạng vành khăn Kích thước bào tử 6-8 x 8-10 µm Hệ sợi khơng có vách ngăn Amanita Phalloides 11 Bề mặt mũ nấm nhẵn bóng, mũ nấm màu vàng cam 14 11 Bề mặt mũ nấm khơng nhẵn bóng 13 12 Quả thể dạng hình nón 16 12 Quả thể dạng hình chuông 17 12 Qủa thể dạng ô dù 18 13 Mũ nấm dạng dù, bề mặt mũ nấm có nhiều mụn nhỏ li ti màu trắng, bào tử hình elip chứa hạt tinh dầu, 4-6 x 8-10 µm Bào tầng màu hồng phấnVịng mọc sát mũ nấm, hệ sợi khơng có vách ngăn ngang (4-6µm đường kính) Amanita Sp.1 13 Bào tầng màu trắng kem 15 14 Mũ nấm dạng ô dù, màu vàng nghệ, vàng đỉnh mũ nấm Bào tử màu vàng, khơng có nội chất, kích thước 5-7 x 9-12 µm, hệ sợi khơng có vách ngăn ngang Amanita cacsarea 14 Mũ nấm có dạng dù, màu vàng nghệ trung tâm mũ; cuống nấm màu vàng nhạt màu trắng kem; Bào tử có nội chất hạt màu vàng, kích thước 5-7 x 8-10 µm; hệ sợi có vách ngăn ngang Amanita Levistriata 15 Mũ nấm dạng ô dù, màu trắng kem, bề mặt mũ nấm có nhiều mụn nhỏ li ti màu nâu, trung tâm mũ có màu vàng nâu, có vịng xịe từ ¼ cuống nấm từ xuống, bào tần dạng phiến tự do, phiến nấm dài ngắn khơng đồng đều, xếp sít nhau, màu trắng kem; hệ sợi khơng có vách ngăn ngang, bào tử hình elip, 6-7 x 10-13 µm Amanita sp.2 15 Mũ nấm dạng ô dù, có màu xám đậm trung tâm mũ, từ trung tâm rìa mép có đốm khơng liên tục màu xám, cuống nấm có vịng màu trắng 12 kem, bào tầng dạng phiến màu trắng kem, vòng mọc 1/2 cuống nấm, bào tử dạng elip, kích thước 5-7 x 9-12 µm Amanita Sp CĐ 279 15 Mũ nấm dạng ô dù, có màu trứng trắng đến màu hồng nhạt, bào tử hình elip có chứa nội chất dạng hạt màu xanh, kích thước 5,4-7 x 9-11µm, hệ sợi có vách ngăn ngang Amanita Eliae 16 Mũ nấm có màu phân biệt: Vịng ngồi màu nâu đậm có vân, vịng màu trắng sữa khơng vân, bào tử hình elip, có chứa nội chất dạng hạt tinh dầu màu vàng, kích thước 8,2-10,5 x 6-8µm, hệ sợi suốt, có vách ngăn, kích thước 3-4 µm Amanita fulva 16 Mũ nấm đồng màu 19 17 Mũ nấm màu nâu vàng, cuống nấm sần sùi có nhiều vảy nhỏ, bào tử dạng e lip có chứa nội chất, Kích thước bào tử 6-8 x 9-12µm Amanita Sp.DH048 17 Bào tử hình cầu 21 18 Rìa mũ nấm có nếp vân dạng tia phóng xạ 22 18 Rìa mũ nấm khơng có nếp vân dạng tia phóng xạ 23 19 Mũ nấm màu nâu nhạt, bào tử hình cầu màu xanh, có nhiều nội chất hạt tinh dầu Kích thước bào tử 5,5-7 x 8-9µm Amanita Calyptroderma 19 Bào tử hình elip 20 20 Mũ nấm màu vàng mật ong nhạt, bào tử hình elip, có chứa nội chất dạng hạt tinh dầu màu xanh nhạt, kích thước 6,5-7,5 x 10-12,8µmAmanita sp.DL 127 20 Mũ nấm màu trắng đục, sần sùi, rìa mép nấm có khía xếp khít Bào tử dạng elip, kích thước 7-9x 10-12µm, có chứa nội chất dạng hạt tinh dầu, Amanita Sp.DL 001 21 Mũ nấm màu đỏ son, trơn nhẵn, cuống nấm màu vàng cháy, rìa mép nấm có khía sâu Bào tử dạng cầu, có nội chất hạt tinh dầu, kích thước 6-7 x 8-9µm, hệ sợi suốt (3-4 µm), có vách ngăn Amanita Caesareoides 21 Mũ nấm màu trắng đục trung tâm màu nâu, mép nấm có nếp gấp rõ ràng, bào tử hình cầu, 7,5-8x 9-10µm, khơng nội chất, hệ sợi khơng có vách ngăn màu vàng nhạt Amanita Punctata 22 Mũ nấm màu trắng đục, trung tâm màu vàng nhạt, lõm trung tâm,bào tử hình cầu, nhẵn, khơng nội chất (đường kính 8-12 µm) hệ sợi có vách ngăn, phân nhánh (2,2-4 µm) 13 Amanita Sp.PR 421 22 Bào tử hình elip 24 23 Mũ nấm có màu nâu, có vảy màu trắng, cuống nấm có màu trắng đến nâu; bào tử hình oval hình trứng (6-8 x 8-10µm)có chứa nội chất hạt dầu màu xanh, hệ sợi phân nhánh có vách ngăn (3-4 µm) Amanita Pachycolea 23 Bào tử hình elip 26 24 Mũ nấm có màu vàng, trung tâm màu vàng đậm, cuống nấm màu vàng rơm có rãnh sâu, sần sùi, bào tử hình elip, có chứa nội chất dạng hạt tinh dầu màu nâu, kích thước 6-8 x 10-12µm, hệ sợi khơng có vách ngăn, kích thước 5-6 µm Amanita Similis 24 Hệ sợi có nhánh 25 25 Mũ nấm màu nâu xám, trung tâm màu nâu xám đậm, bào tử hình elip, có nội chất màu vàng nhạt, kích thước 5-7x 10-12µm, hệ sợi có nhánh Amanita Battarrae 25 Mũ nấm màu kem, trung tâm màu nâu nhạt, bào tử hình elip, có nhiều nội chất hạt tinh dầu, kích thước 6-8 x 8-10µm, hệ sợi màu vàng nhạt, có vách ngăn, có nhánh (4-6 µm) Amanita Spreta 26 Mũ nấm có màu vàng, trung tâm màu vàng cam nhạt lề, cuống nấm màu vàng cháy, có vảy phấn màu vàng, Bào tử dạng elip, kích thước 7,5- x 8-10 µm, có chứa nội chất dạng hạt tinh dầu, hệ sợi có vách ngănAmanita Crocea 26 Hệ sợi không phân nhánh 27 27 Mũ nấm có hình dù, phẳng lõm trung tâm, có màu trắng đến màu vàng kem, bào tử có kích thước 2,3 – 3,5 x 4- 6µm, có nội chất, hệ sợi không phân nhánh Amanita Sp.DL019 27 Mũ nấm có màu vàng kem, trung tâm lõm màu tối hơn, cuống nấm màu kem Bào tử dạng elip, kích thước 5-7x 9-11µm, có chứa nội chất dạng hạt tinh dầu, hệ sợi suốt, khơng phân nhánh(4-6 µm) Amanita amanitoides 3.4 Mơ tả chi tiết lồi nấm thuộc chi Amanita thu đƣợc Tâ Nguyên 3.5 Ảnh hƣởng nhân tố sinh thái đến phân bố chi nấm Amanita 3.5.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phân bố loài nấm thuộc chi Amanita 14 Từ kết bảng biểu đồ ta nhận thấy nhiệt độ nhân tố sinh thái ảnh hưởng rõ đến xuất loài nấm thuộc chi Amanita Ở ngưỡng nhiệt độ 19-22 0C có tần số xuất lồi nấm chiếm ưu thế, chiếm 68% so với ngưỡng nhiệt độ lại chiếm 24% ngưỡng nhiệt độ nhỏ 19 0C 8% ngưỡng nhiệt độ lớn 22 0C khoảng nhiệt độ nghiên cứu 3.5.2 Ảnh hƣởng độ ẩm đến phân bố loài nấm thuộc chi Amanita Qua kết bảng 3.3, biểu đồ phân bố tỉ lệ phần trăm loài nấm thuộc chi Amanita chúng tơi nhận định vai trị của độ ẩm tác động rõ nét đến xuất loài nấm thuộc chi Amanita cụ thể độ ẩm 85-90% chiếm tỉ lệ 78% số loài nấm xuất hiện, độ ẩm thích hợp cho sinh trưởng phát triển loài nấm thuộc chi Amanita ngưỡng độ ẩm nghiên cứu Còn độ ẩm lớn 90% nhỏ 85% chiếm tỉ lệ 5%, 17% số loài nấm xuất điều giải thích điều kiện độ ẩm nhỏ 90% thường kèm 15 với nhiệt độ môi trường lớn 22 0C điều kiện điều kiện tối ưu cho sinh trưởng phát triển loài nấm chi Amanita Đối với độ ẩm cao lớn 90% môi trường ẩm ướt, dẫn đến lượng nước chất nhiều, điều kiện không thuận lợi cho phản ứng phân huỷ sinh trưởng hệ sợi nấm Với hai khoảng độ ẩm nhỏ 85% lớn 90% không thuận lợi cho loài nấm chi Amanita dẫn đến tần suất bắt gặp mơi trường Điều có nghĩa khu vực Tây Nguyên độ ẩm khơng khí từ 85-90% độ ẩm thích hợp cho loài nấm thuộc chi Amanita 3.4.3 Ảnh hưởng độ cao đến phân bố loài nấm thuộc chi Amanita Từ kết nghiên cứu bảng 3.4 biểu đồ ảnh hưởng độ cao đến xuất loài nấm thuộc chi Amanita ta nhận thấy rằng, khoảng độ cao nghiên cứu từ 200 đến lớn 1100m so với mặt nước biển tần số xuất lồi nấm thuộc chi Amanita có xu hướng giảm dần theo độ cao Nấm xuất nhiều độ cao từ 500 đến 800m chiếm 74%, tiếp 17% độ cao 200 đến 500m, tần số xuất nấm giảm dần nhanh độ cao 800-1100m 7% 2% độ cao lớn 1100m Điều lý giải lên cao 800m nước tăng cao, lượng ơxy thấp dẫn đến độ ẩm khơng khí tăng cao đến 95-100% Với điều kiện khơng phù hợp cho hệ sợi thể nấm chi Amanita phát triển Từ kết độ cao từ 500-800 m độ cao phù hợp cho loài nấm thuộc chi Amanita sinh trưởng phát triển 3.5.4 Ảnh hưởng ánh sáng đến phân bố loài nấm thuộc chi Amanita 16 Từ kết nghiên cứu bảng 3.5 biểu đồ thấy rõ ánh sáng ảnh hưởng rõ đến xuất thể loài nấm thuộc chi Amanita Các loài nấm chi Amanitaở khu vực Tây Nguyên xuất chủ yếu cường độ ánh sáng nhỏ 8000 -10000lux chiếm tỉ lệ 66% so với 22% cường độ ánh sáng nhỏ 8000 lux 6% ánh sáng lớn 10000 lux ngưỡng ánh sáng nghiên cứu Sự hình thành thể lồi nấm thuộc chi Amanita tốt cường độ ánh sáng từ 8000-10000 lux kết nghiên cứu phù hợp với thực tế điều tra loài nấm xuất kiểu rừng kim rừng thưa, sau mưa trời nắng trở lại lồi nấm thuộc chi chi Amanita xuất nhiều 3.5.5 Ảnh hưởng sinh cảnh đến phân bố loài nấm thuộc chi Amanita 17 Từ kết nghiên cứu bảng 3.6 biểu đồ thấy rõ sinh cảnh có ảnh hưởng đến xuất thể loài nấm thuộc chi Amanita Các loài nấm chi Amanita khu vực Tây Nguyên xuất chủ yếu sinh cảnh rừng thông, rừng hỗn giao thảm cỏ bui chủ yếu so với kiểu rừng điều tra 3.5.6 Mơ hình hồi qu đa biến dự báo tần số xuất mật độ loài nấm liên quan tới nhân tố sinh thái nhiệt độ, độ ẩm, độ cao cƣờng độ chiếu sáng Vấn đề đặt nghiên cứu mối quan hệ tần số xuất loài nấm thuộc chi Amanita với nhân tố sinh thái, để tìm tổ hợp sinh thái nhân tố sinh thái quan trọng, phục vụ cho việc xác định vùng phân bố, cảnh báo, bảo vệ kỹ thuật liên quan Với số liệu điều tra 99 điểm tổng hợp liệu Excel, sử dụng phần mềm Statgraphic Centurion XV để thiết lập hàm hồi quy đa biến phân tích mối quan hệ , tần số xuất loài Nấm với nhân tố sinh thái Với dung lượng mẫu 99 điểm cho lồi nâm, phân tích hồi quy với 05 nhân tố sinh thái quan trọng, biến chưa thỏa mãn điều kiện quan hệ với tần số xuất loài nấm loại trừ mức P > 0,05 Việc dị tìm quan hệ từ hàm đơn giản đến phức tạp, từ biến đơn đến tổ hợp biến đổi biến số Kết xây dựng hàm hồi quy đa biến cho loài nấm sau: Bảng 3.7 giá trị phương trình hồi qui đa biến Tham số Giá trị Sai số T P-value a -1.98314 6.81899 -0.290825 0.7718 18 Anhsang Doam Docao Nhietdo 0.00207615 0.000191312 10.8521 0.283289 0.0470994 6.01471 0.00764196 0.00112211 6.81033 -0.298556 0.134036 -2.22744 0.0000 0.0000 0.0000 0.0281 Với 05 biến nhân tố sinh thái dị tìm, cho thấy 04 nhân tố ảnh hưởng quan trọng đến tần số xuất phân bố loài nấm thể qua phương trình sau: Tansoxuathien = C + a*l + b*m + c*h - d*t (C, a,b,d số) Với n = 99 tất biến số kiểm tra tiêu chuẩn t với điều kiện P < 0,05; từ phát nhân tố ánh sáng (l), độ ẩm khơng khí (m), độ cao so với mặt nước biển (h) nhiệt độ khơng khí (t) có ảnh hưởng rõ rệt đến tần số xuất loài nấm Đồng thời với R2 = 72.7894% với P < 0,05 cho thấy quan hệ , tần số xuất loài nấm với 04 nhân tố sinh thái chặt chẽ, tác động qua lại lẫn sau: Tần số xuất tỉ lệ nghịch với nhiệt độ, điều cho thấy nhiệt độ tăng làm giảm tần số xuất loài nấm Ngoài tần số xuất loài nấm tỷ lệ thuận với độ ẩm, cường độ ánh sáng độ cao so với mặt nước biển, điều có nghĩa lên cao nhiệt độ khơng khí giảm, độ ẩm khơng khí tăng lên tần số xuất loài nấm tăng Mơ hình hồi quy giúp cho việc hiểu biết yêu cầu sinh thái ban đầu loài nấm Đây sở để giúp cho việc phát khu vực phân bố loài, sở cho việc gây trồng phát triển lồi nấm nói 3.6 Kết độc tính cấp lồi Amanita abrupta 3.6.1 Kết độc tính cấp nấm Amanita abrupta theo đƣờng uống Với bố trí thí nghiệm chúng tơi thu kết độc tính cấp theo đường uống mẫu Nấm trình bày bảng 3.8 Bảng 3.8 Số lƣợng chuột chết, biểu bên chuột uống mẫu Nấm Lô Mẫu số chuột số chuột Biểu bên ngồi (mg/kgP) chết chết vịng trong sau 0-72 vòng 72 72 giờ (con) 19 3500 0 4000 4500 (sau ngày uống) 5000 (sau ngày uống) (sau ngày uống) 5500 6000 10 20 Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 đến 72 cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, giảm ăn uống Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 đến 72 cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, giảm ăn uống Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 đến 72 cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, giảm ăn uống, có mắt bị lồi Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 đến 72 cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, giảm ăn uống, có mắt bị lồi Những khơng ăn uống dẫn đến thể suy nhược gầy yếu chết Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 đến 72 giờ cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, không ăn uống, mắt bị lồi Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, khơng ăn uống, mắt bị lồi Liều (mg/k gP) 3500 7000 Sau uống chuột di chuyển ăn uống bình thường, nhiên sau 24 cho uống chuột có tượng thần kinh tăng động, khơng ăn uống, mắt bị lồi 10 Bảng 3.9 Tổng hợp liệu thu đƣợc Số chuột N a b chết (mg) 72 (con) 10 10 500 4000 4500 5000 5500 6000 10 10 10 10 10 Σa×b/N 500 500 500 500 a×b 0 1500 2500 3500 4500 Liều 7000mg gây chết 100% động vật thí nghiệm Tuy nhiên liều 6000mg liều thấp gây chết 100% động vật thí nghiệm mức liều làm sở tính tốn liều gây chết 50% động vật thí nghiệm Do đó, việc tổng hợp liệu bảng phải bỏ qua liều 7000mg N (số động vật lô): 10 (con/lô) a: Khoảng liều liên tiếp là: 500 mg b: Tỷ lệ tử vong trung bình hai nhóm liên tiếp Từ kết bảng 3.9 chúng tơi tính tốn xác định LD50 (liều gây chết 50% động vật thí nghiệm) Giá trị LD50 mẫu nấm là: LD50 = LD100 - Σa×b/N LD50 = 6000 – 1250 LD50 = 4750 Kết thí nghiệm cho thấy: mẫu Nấm nghiên cứu gây chết động vật thí nghiệm theo đường uống thí nghiệm với liều gây chết 50% động vật thí nghiệm (LD50) = 4750 mg/kg 21 a×b/ N (mg) 50 150 250 350 450 1250 Qua kết nghiên cứu độc tính lồi Amanita abrupta, chúng tơi thu liều gây chết 50% chuột thí nghiệm 4750mg/kg KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua trình điều tra thành phần lồi nấm thuộc họ Amanitaceae khu vực Tây Nguyên gồm có 01 chi Amanita, thu thập 913 mẫu định danh phương pháp truyền thống hình thái so sánh giải phẫu có hỗ trợ phương pháp sinh học phân tử xác định tên lồi chúng tơi xác định 33 lồi, xác định tên khoa học 23 loài 10 loài xác định chi Trong số 23 loài xác định tên khoa học có 15 lồi ghi nhận cho Việt Nam bổ sung vào danh mục nấm lớn Việt Nam gồm A abrupta, A amanitoides, A battarrae, A caesareoides, A calyptroderma, A concentrica, A crocea, A flavoconia, A hesleri, A levistriata, A multisquamosa, A pachycolea , A pantherina, A pilosella, A Similis Trong 10 loài xác định tới chi có lồi giải trình tự gen chưa xác đinh tên khoa học gồm A sp.DL274, A sp DL89, A sp.PR421, A sp.DH048, A sp.CD279, A sp.DL001, A sp.DL127, A sp.DL019 lồi cho khoa học Xác định nhân tố sinh thái loài nấm thuộc chi Amanita điều kiện nhiệt độ từ 19-22 0C, độ ẩm thích hợp 85-90% độ cao từ 500 đến 800m cường độ chiếu sáng 8000 -10000lux nhân tố phù hợp cho chi nấm Amanita xuất Xây dựng phương trình hồi qui đa biến dự báo xuất loài nấm thuộc chi Amanita Tansoxuathien = C + a*l + b*m + c*h - d*t Xác định độc tính cấp lồi Amanita abrupta, nghiên cứu gây chết động vật thí nghiệm theo đường uống với liều gây chết 50% động vật thí nghiệm (LD50) 4750 mg/kg thể trọng Kiến nghị - Mỡ rộng địa bàng nghiên cứu nước đa dạng họ nấm Amanitaceae - Cần sâu phân tích, nghiên cứu hoạt chất có nấm để sử dụng lĩnh vực y học - Bảo vệ môi trường sống hệ nấm, bảo vệ rừng 22 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Trần Thị Thu Hiền, Nguyễn Phương Đại Nguyên, Lê Bá Dũng, Trần Huy Thái, Thái Văn Tài, Kết nghiên cứu thành phần loài nấm độc khu bảo tồn Nam Kar Tỉnh Đăk Lăk, Báo cáo khoa học sinh thái tài nguyên sinh vật hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ 6, 2015,11241129 Trần Thị Thu Hiền, Nguyễn Phương Đại Nguyên, Kết thành phần loài chi nấm độc Amanita phân bố Thành phố Buôn Ma Thuột tỉnh Đăk Lăk, Báo cáo khoa học nghiên cứu giảng dạy sinh học Việt Nam, Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ hai, 2016, 573-580 Trần Thị Thu Hiền, Nguyễn Phương Đại Nguyên, Trần Thị Ngọc Thiện , Ghi nhận loài thuộc chi Nấm độc Amanita Pers 1797 bổ sung vào danh mục loài Nấm độc họ Amanitaceae phân bố vườn quốc gia Chư Yang Sin tỉnh ĐăkLăk, Báo cáo khoa học hội nghị toàn quốc lần thứ hai hệ thống bảo tàng thiên nhiên Việt Nam, 2016, 446-45 Trần Thị Thu Hiền, Nguyễn Phương Đại Nguyên, Ghi nhận loài thuộc chi Amanita Dill Ex Boehm 1760 bổ sung vào danh mục nấm lớn Việt Nam, Báo cáo khoa học sinh thái tài nguyên sinh vật hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ 7, 2017, 297-302 Trần Thị Thu Hiền, Trần Huy Thái, Lê Bá Dũng, Nguyễn Phương Đại Nguyên, Đa dạng thành phần loài chi Amanita Vườn Quốc Gia Kon Ka Kinh, Tỉnh Gia Lai- Việt Nam, Báo cáo khoa học sinh thái tài nguyên sinh vật hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ 7, 2017, 702- 709 23 Trần Thị Thu Hiền, Trần Thị Kim Thi, Lê Bá Dũng, Trần Huy Thái, Ghi nhận loài thuộc chi Amanita Dill Ex Boehm 1760 bổ sung vào danh mục nấm lớn Việt Nam, Tạp chí khoa học trường Đại học Tây Nguyên Số 27, 2017, 36-40 Trần Thị Thu Hiền, Trần Thị Kim Thi, Đa dạng chi Nấm Amanita Dill Ex Boehm 1760 vườn quốc gia Chư Yang Sin tỉnh Đăk Lăk, Tạp chí khoa học trường Đại học Tây Nguyên, 2018.(Chấp nhận đăng) Tran Thi Thu Hien, Tran D Khanh, Nguyen.P.D Nguyen, species diversity of the genus amanita dill ex boehm (1760) in chu yang sin national park, Đaklak, Viet Nam, Journal of scientific and Engineering research, (Chấp nhận đăng) 24 ... thành phần lồi, phân bố độc tính cấp họ nấm Amanitaceae R. Heim ex Pouzar Tây Nguyên? ?? Mục tiêu đề tài - Xác định số đặc điểm sinh học, sinh thái loài nấm thuộc họ Amanitaceae phân bố khu vực Tây. .. đầu loài nấm Đây sở để giúp cho việc phát khu vực phân bố loài, sở cho việc gây trồng phát triển lồi nấm nói 3.6 Kết độc tính cấp lồi Amanita abrupta 3.6.1 Kết độc tính cấp nấm Amanita abrupta theo... vực Tây Nguyên - Xác định độc tính cấp loài nấm độc thuộc chi Amanita Ý nghĩa khoa học - Nghiên cứu đặc điểm sinh học chi nấm Amanita - Góp phần bổ sung vào danh mục nấm lớn Tây Nguyên nói riêng