Giống lạc ĐM2 được tạo ra từ tổ hợp lai giữa 2 giống lạc TB25 và TN6 với sự trợ giúp chỉ thị phân tử. Kết quả khảo nghiệm DUS cho thấy giống ĐM2, trong vụ Xuân giống có thời gian sinh trưởng 115 - 121 ngày; dạng cây đứng, có số cành cấp I và khối lượng 100 hạt lớn. Năng suất vụ Xuân dao động từ 3,5 - 3,6 tấn/ha và trong vụ Thu Đông dao động từ 2,7 - 3,5 tấn/ha. Tỷ lệ hạt/quả cao trên 72%.
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 KẾT QUẢ CHỌN TẠO GIỐNG LẠC MỚI ĐM2 BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ Đồng hị Kim Cúc1, Nguyễn húy Ngoan, Phan hanh Phương1, Nguyễn hanh Loan1, Nguyễn Đức Cương1, Đặng hị Châu Anh1, Nguyễn Quang Huy2, Phạm Duy Trình2, Phạm Văn Linh2 TĨM TẮT Giống lạc ĐM2 tạo từ tổ hợp lai giống lạc TB25 TN6 với trợ giúp thị phân tử Kết khảo nghiệm DUS cho thấy giống ĐM2, vụ Xuân giống có thời gian sinh trưởng 115 - 121 ngày; dạng đứng, có số cành cấp I khối lượng 100 hạt lớn Năng suất vụ Xuân dao động từ 3,5 - 3,6 tấn/ha vụ hu Đông dao động từ 2,7 - 3,5 tấn/ha Tỷ lệ hạt/quả cao 72% Giống ĐM2 có khả chống chịu tốt với loại sâu bệnh hại héo xanh, đốm nâu, nhiễm nhẹ gỉ sắt, đặc biệt kháng bệnh đốm muộn (điểm 1), xác định thị phân tử đánh giá ngồi đồng ruộng Từ khóa: Giống lạc ĐM2, chọn tạo giống, bệnh đốm muộn, thị phân tử I ĐẶT VẤN ĐỀ Lạc (Arachis hypogaea L.) gieo trồng phổ biến 100 quốc gia với diện tích 22 triệu - lấy dầu quan trọng giới (FAOSTAT, 2015) Ở Việt Nam, lạc mặt hàng xuất quan trọng tỉnh phía Bắc sử dụng làm thực phẩm nhiều dạng khác Năm 2015, suất bình quân đạt 2,29 tấn/ha, sản lượng đạt 550 nghìn tấn, so với năm 2011, suất đạt 2,09 tấn/ha, sản lượng 468,7 nghìn (Phạm hị Mai ctv., 2017) Bệnh đốm muộn bệnh gây hại nghiêm trọng lạc toàn giới Tác nhân gây bệnh đốm muộn nấm Phaeoisariopsis personata (Berk & M.A Curtis van Arx) Bệnh gây hại cách giảm diện tích quang hợp hình thành vết bệnh, gây rụng Nấm bệnh sản sinh độc tố Cercosporin làm giảm hiệu lực hoạt động nhân tố gây nên tượng rụng lạc Tính tồn giới, mức độ giảm suất từ 10 - 50%, số thay đổi vùng mùa khác (Aquino V.M et al, 1993) Do cần lai tạo tuyển chọn giống lạc có khả kháng chống chịu với bệnh đốm muộn, suất cao, thích ứng rộng phù hợp vùng sinh thái cần thiết II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Giống lạc ĐM2 giống lạc lai tạo giống lạc TB25 (nguồn nhập nội) giống lạc TN6 (nguồn: Trung tâm Tài nguyên thực vật) - Giống đối chứng: Giống lạc L14 - Các thị phân tử liên kết gen kháng bệnh đốm muộn (GM2301; IPAHM103; Lec1; seq7G02; TC9F10 GM1760, IPAHM356) (Đồng hị Kim Cúc ctv., 2016) - Sử dụng nguồn vi khuẩn gây bệnh đốm muộn Viện Bảo vệ thực vật cung cấp 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp chọn tạo giống Sơ đồ chọn tạo giống lạc ĐM2 kháng bệnh đốm muộn nhờ thị phân tử Giống Lạc TB25 (RP*) Giống Lạc TN6 (DP*) - Phenotyping, - Genotyping - Phenotyping, - Genotyping Vụ Xuân 2011 F1 RP BC1F1 x RP - Phenotyping, Genotyping - Lập đồ BC2F1 BC2F2 BC2F3 - Khảo nghiệm tác giả, - Khảo nghiệm quốc gia, - Khảo nghiệm sản xuất BC2F4 - Xuân, hu Đông 2014 - Từ hu Đông 2015 - Xuân 2020 - Xuân & hu Đông 2019 - 2020 Ghi chú: RP: Recipient parent (giống nhận gen); DP: donor parent (giống cho gen kháng) Viện Di truyền Nông nghiệp; Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Bắc Trung Bộ Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 - Lai hữu tính chọn lọc cá thể - Phương pháp thị phân tử (tách chiết AND, Phương pháp PCR, điện di gel Agarose…) - Phương pháp lây bệnh nhân tạo đánh giá bệnh đốm muộn, đánh giá khả chịu hạn nhà lưới - Phương pháp thí nghiệm đồng ruộng: + Chỉ tiêu theo dõi: Đánh giá sinh trưởng, phát triển, bệnh hại theo QCVN 01-57: 2011/BNNPTNT + Phòng trừ sâu bệnh sử dụng thuốc bảo vệ thực vật theo hướng ngành bảo vệ thực vật (trừ thí nghiệm khảo nghiệm quy định khơng sử dụng thuốc bảo vệ thực vật) + hu hoạch: Khi có khoảng 80 - 85% số già (tầng gốc chuyển mầu vàng rụng, có gân điển hình giống, mặt vỏ chuyển mầu đen nhẵn, vỏ lụa có màu đặc trưng) hu hoạch riêng ô, phơi đến độ ẩm hạt đạt khoảng 12% 2.2.2 Phương pháp khảo nghiệm a) Khảo nghiệm DUS hí nghiệm thực theo quy phạm khảo nghiệm tính khác biệt, tính đồng tính ổn định giống lạc QCVN 01-57:2011/BNNPTNT Bộ Nông nghiệp PTNT ban hành b) Khảo nghiệm VCU heo Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 01-57: 2011/BNNPTNT c) Khảo nghiệm sản xuất heo (QCVN 01-57:2011/BNNPTNT) hí nghiệm bố trí diện tích 1000 m2/điểm, áp dụng quy trình tiên tiến thời vụ thích hợp địa phương nơi làm thí nghiệm Đối chứng so với giống trồng phổ biến địa phương giống lạc L14 2.2.3 Các tiêu theo dõi - Đặc điểm hình thái, sinh trưởng phát triển, mức độ nhiễm sâu bệnh giống lạc khảo nghiệm - Các yếu tố cấu thành suất suất giống lạc khảo nghiệm 2.2.4 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu xử lý thống kê theo chương trình Excel IRRISTAT 5.0 2.3 hời gian địa điểm nghiên cứu - Nghiên cứu thực từ vụ Xuân 2011 đến vụ hu Đông 2020 Cụ thể: + Từ vụ Xuân 2011 - hu Đông 2013: Đánh giá vật liệu, lai tạo, đánh giá kiểu gen, kiểu hình, lập đồ phân tử… + Khảo nghiệm tác giả từ vụ Xuân 2014 - Xuân 2015 + Khảo nghiệm Quốc gia (DUS, VCU): Từ hu Đông 2015 - Xuân 2020 + Khảo nghiệm sản xuất: Từ Xuân 2019 - hu Đông 2020 - Địa điểm: + Khảo nghiệm tác giả An Khánh, Hoài Đức, Hà Nội + Khảo nghiệm Quốc gia (VCU, DUS) Trung tâm Khảo nghiệm Giống, sản phẩm trồng Quốc gia triển khai điểm mạng lưới khảo nghiệm Quốc gia tỉnh phía Bắc: Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nông Lâm nghiệp Tây Bắc - Sơn La; Trung tâm Nghiên cứu ứng dụng Chuyển giao công nghệ Nông Lâm nghiệp Bắc Giang; Trạm Khảo kiểm nghiệm Giống, sản phẩm trồng Từ Liêm Hà Nội; Trung tâm Nghiên cứu & Phát triển Đậu đỗ hanh Trì - Hà Nội; Trại Giống trồng Mai Nham - Vĩnh Phúc; Trung tâm Khảo nghiệm Giống trồng Hải Dương; Trung tâm Khuyến nơng tỉnh hái Bình; Trung tâm Nghiên cứu ứng dụng Khoa học kỹ thuật Giống trồng Nông nghiệp hanh Hóa Trạm Giống trồng Cơng nghệ cao - Nghệ An III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Các bước chọn tạo giống lạc ĐM2 a) Đánh giá nguồn vật liệu lai tạo (giống cho gen (TN6) giống nhận gen (TB25) giống tham gia nghiên cứu Kết đánh giá tính kháng bệnh đốm muộn (nguồn vật liệu khởi đầu cho việc tạo lai có khả kháng bệnh đốm muộn) tập đồn 64 giống lạc thu thập cho thấy giống lạc TB25 bị nhiễm bệnh nặng nhất, tỷ lệ bệnh từ 12,06 %; số bệnh từ 1,83 % Giống (TN6) nhiễm bệnh nhẹ, tỷ lệ bệnh có 1,62 %; số bệnh có 0,15 %.Giống lạc TB25 có khả năng suất cao (> 200 gcây) giống TN6 suất thấp (< 150 g/cây) Như giống TB25 chọn làm giống nhận gen cho thí nghiệm khác nhóm với giống cho gen TN6 (Bảng 1) Bảng Khả kháng bệnh đốm muộn giống lạc TB25 TN6 (Ruộng thí nghiệm An Khánh vụ Xuân 2012) Tỷ lệ bệnh (%) Chỉ số bệnh (%) Khả năng suất (g/cây) TB25 12,06 1,83 > 180 A.cardenasii (TN6) 1,62 0,15 < 150 Tên giống Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 TN6 TB25 Hình Giống lạc TN6 giống lạc TB25 b) Sàng lọc thị đa hình hai giống bố mẹ quần thể lập đồ TB25/TN6 Đề tài sử dụng 425 thị sàng lọc, đánh giá đa hình 02 giống bố mẹ TB25 &TN6, kết là, tổng số 425 thị sử dụng, có 60 thị đa hình Một vài hình ảnh minh họa: Hình Kết đánh giá đa hình hai giống lạc TB25 TN6 để sàng lọc thị đa hình Bảng Chỉ thị đa hình hai giống bố mẹ quần thể lập đồ Tên thị TT Tên thị TT Tên thị TT Tên thị TT TT Tên thị Seq13A7 11 Seq3E10 21 GM2301 31 TC9F04 41 TC1D12 51 IPAHM272 Seq 1B09 12 Seq8D09 22 GM1883 32 TC9F10 42 PM73 52 IPAHM531 Seq13E06 13 Seq10B01 23 GM2407 33 TC5A06 43 PM3 53 IPAHM176 Seq14C11 14 Seq14B04 24 GNB560 34 TC1A02 44 PM179 54 IPAHM282 Seq7G02 15 GM1501 25 GNB686 35 TC4D09 45 PM188 55 IPAHM352 Seq17C09 16 GM633 26 GNB1062 36 TC4G02 46 Seq2H8 56 IPAHM356 Seq19A5 17 GM660 27 GNB38 37 TC3B04 47 IPAHM395 57 GM1878 Seq3F05 18 GM1760 28 TC5A06 38 TC3E05 48 IPAHM606 58 S09 Seq3A08 19 GM1979 29 TC1A08 39 TC7H11 49 IPAHM524 59 Lec1 10 Seq2A05 20 GM2009 30 TC4F12 40 TC9B07 50 IPAHM103 60 GM2689 TT Bảng Đánh giá mức độ kháng nhiễm bệnh đốm muộn quần thể F1, BC1F1 Cấp bệnh hế hệ Tổng số F1 22 12 BC1F1 96 18 30 32 11 TN6 30 22 TB25 30 16 14 Tên thị Để tiến hành đánh giá kiểu gen (genotyping) cá thể BC2F1, ADN hệ gen bố mẹ cá thể BC2F1 dùng làm ADN khuôn cho phản ứng PCR với 60 thị SSR cho đa hình hai giống bố mẹ TB25 TN6 Tiếp theo điện di sản phẩm PCR gel polyacrylamide, nhuộm sybersafe nhuộm bạc Cuối ghi nhận alen locut SSR bố mẹ cá thể BC1F2 Một số ảnh điện di kết phản ứng PCR với thị thể hình đến hình 5 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 Hình Sử dụng thị Seq13A7 phân tích cá thể quần thể BC2F1 gel polyacrylamide 6% (A.TB25, B.TN6, H.Cá thể dị hợp tử) Hình Sử dụng thị Seq7G02 phân tích cá thể quần thể BC2F1 gel polyacrylamide 6% (A.TB25, B.TN6, H.Cá thể dị hợp tử) Hình Sử dụng thị Seq3A08 phân tích cá thể quần thể BC2F1 gel polyacrylamide 6%(A.TB25, B.TN6, H.Cá thể dị hợp tử) Bảng Đặc điểm QTL quy định tính kháng bệnh đốm muộn quần thể BC2F1 từ tổ hợp lai TB25 TN6 Locut QTLs IP1 IP IP2 LN1 LN LN2 DS DS Chỉ thị SSR kề phía QTL PM179 GM633 GM2301 IPAHM103 IPAHM356 PM179 Lec1 Seq7G2 GM660 TC9F10 Vị trí NLK (cM) Nhìn tổng thể, QTL số chưa kiểm soát 50% biến động kiểu hình Ảnh hưởng QTL biến động kiểu hình cá thể quần thể từ 8,65% đến 25,26%, với mức độ ảnh hưởng chung khoảng 76,2% Đối với locut IP, chúng tơi tìm QTL IP1 với mức độ ảnh hưởng cao (25,26%) Ngoài ra, hai QTL LN1 IP2 nằm nhóm liên kết 6, có vị trí gần có thị PM179 liên quan tới hai QTL Như năm thị liên kết QTL bảng có giá trị thực tiễn cao áp dụng cho quy trình chọn giống nhờ thị phân tử QTL quy định tính kháng bệnh đốm muộn lạc LOD Ảnh hưởng cộng tính Phần trăm kiểu hình 6,8 - 14,5 5,16 0,46 25,26 7,6 - 11,0 3,18 -0,56 12,26 - 12,8 4,02 0,35 19,6 20,4 - 30,8 3,19 -0,24 10,43 5,1 - 7,5 2,82 -0,23 8,65 c) Phát triển đánh giá chọn lọc tổ hợp lai phục vụ cho công tác chọn giống Từ kết sàng lọc 96 cá thể BC2F1, kết chọn 60 cá thể mang gen kháng bệnh đốm muộn Phát triển 60 cá thể hệ BC2F1 thành 60 dòng BC2F2 hệ tiếp theo, chúng tơi chọn 17 dịng BC2F2 có tiềm năng suất > 20 g/cây, dạng hình đẹp, triển vọng heo kết bảng cho thấy: chọn dịng có tính kháng cao với bệnh đốm muộn A1, A7, B1, B11, C1, C4, G3 dòng G11 Các dòng chọn để phát triển cho hệ Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 BC2F3 tiếp tục trồng đánh giá hệ BC2F4 vụ Xuân - Hè 2014 Đơng Lao Hồi Đức - Hà Nội Kết thể bảng d) So sánh đánh giá dòng/giống lạc kháng bệnh đốm muộn triển vọng Với kết quả: dòng triển vọng từ quần thể lập đồ (TB25/TN6) (đặt tên từ CL4 - CL20) hệ Bảng Các yếu tố cấu thành suất suất dòng BC2F4 triển vọng vụ Hè hu 2014 Hoài Đức - Hà Nội NS LT NS TT nhân (tấn/ha) (tấn/ha) 4,28 3,41 25 4,14 3,31 13 13 4,40 3,52 23 19 3,15 2,52 CL12 32 23 4,48 3,58 CL14 33 25 3 4,14 3,31 CL19 27 19 3,18 2,54 CL20 24 15 3,89 3,11 TB25 (Đ/c 1) 21 14 4,26 3,41 L14 (Đ/c 2) 12 0 2,30 1,84 3,9 4,6 hế hệ lai BC2F4 TB25/ TN6 Số quả/cây Tổng số quả/cây nhân nhân nhân CL4 28 20 CL5 33 CL7 34 CL9 Tên dòng CV (%) LSD0,05 7,3 Kết quả: Có dịng CL7 CL12 có suất cá thể 48,9 49,7 g/cây, suất thực thu 3,52 3,58 tấn/ha, 02 dịng có suất cao khả kháng bệnh đốm muộn cao, vượt so với giống L14 (Đ/c) 1,68 - 1,74 tấn/ha Chúng đặt tên dòng CL12 ĐM2 CL7 ĐM4 02 dịng triển vọng đơng thời đưa vào hện thống khảo nghiệm Quốc gia Hình Hai dịng lạc triển vọng, kháng bệnh đốm muộn, suất cao từ tổ hợp TB25/TN6 - Đặc điểm: dịng CL7 (ĐM4) có dạng nửa đứng, màu xanh đậm, vỏ lụa màu hồng dịng CL12 (ĐM2) có dạng đứng, màu xanh vừa, vỏ lụa màu đỏ 3.2 Kết khảo nghiệm tác giả 3.2.1 Một số đặc điểm nông sinh học giống lạc ĐM2 Về kiểu hình, giống ĐM2 có kiểu hình dạng nửa đứng Kiểu phân cành liên tục, màu sắc thân có màu sắc xanh, màu sắc xanh đậm Dạng (tỉ lệ dài/rộng) đạt 2,01; eo trung bình Độ dày vỏ trung bình gân rõ Độ dài hạt đạt 11,1 mm, đường kính hạt đạt 6,2 mm, dạng hạt bầu dục; vỏ lụa trắng hồng Chiều cao đạt 51,4 cm; tổng số cành/cây đạt 6,1 cành Trong đó, số cành cấp đạt 4,9 cành, cánh cấp đạt 1,2 cành Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 Bảng Đặc điểm hình thái giống lạc ĐM2 (Vụ Xuân 2015, Lạng Giang - Bắc Giang) Đặc điểm Dạng Màu sắc thân Màu sắc Eo Vỏ L14 (Đ/c) Đứng Xanh Xanh đậm T.bình-sâu Trung bình ĐM2 Nửa đứng Xanh Xanh đậm Nông Mỏng Đặc điểm Hình dạng hạt Màu sắc vỏ lụa Chiều cao cây(cm) Tổng số cành/cây Số cành cấp L14 (Đ/c) Bầu dục Hồng nhạt 41,5 5,6 4,2 ĐM2 Bầu dục Trắng hồng 44,8 6,1 4,9 Hình hân, lá, hạt giống lạc ĐM2 với đối chứng L14 3.2.2 Mức độ nhiễm sâu bệnh giống lạc ĐM2 Qua bảng cho thấy mức độ nhiễm sâu bệnh hại giống khảo nghiệm ĐM2 giống đối chứng L14 tương đương nhau, riêng bệnh đốm muộn giống lạc ĐM2 chống chịu tốt (điểm 1) Bảng Mức độ nhiễm sâu bệnh hại giống lạc ĐM2 TT Tên giống Gỉ sắt (1-9) Đốm nâu (1-9) L14 ĐM 1-3 1-3 1-3 1-3 L14 ĐM -3 1-3 1-3 1-3 Đốm Héo hối đen muộn xanh cổ rễ (1-9) (1-9) (1-9) Vụ hu Đông 2014 1-3 1 1 Vụ Xuân 2015 1-3 1 1 hối thân trắng (1- 3) hối Chịu hạn (1-3) (1-5) 1 1 1-2 1-2 1 1 1-2 1-2 3.2.3 Các yếu tố cấu thành suất suất giống lạc ĐM2 Bảng 10 Các yếu tố cấu thành suất suất giống lạc ĐM2 Kết theo dõi yếu tố cấu thành suất suất giống lạc ĐM2 trình bày bảng 10 Vụ hu Vụ Xuân Đông 2014 2015 L14 ĐM L14 ĐM Tổng số quả/cây(quả) 16,6 21,1 17,6 22,1 Số chắc/cây(quả) 10,6 17,2 10,4 16,7 Tỷ lệ (%) 63,8 81,5 59,1 75,5 Tỷ lệ hạt (%) 16,5 5,3 18,2 5,7 Tỷ lệ hạt (%) 84,5 29,4 81,8 28,8 Tỷ lệ hạt (%) 65,3 65,5 Khối lượng 100 hạt (g) 64,78 81,6 64,78 81,6 Tỷ lệ hạt (%) 72,02 73,27 71,7 72,6 Năng suất cá thể (g) 13,7 17,58 13,7 17,8 Năng suất TT (tấn/ha) 3,16 3,57 2,96 3,6 Kết bảng 10 cho thấy, vụ hu Đông năm 2014 Xuân 2015 Lạng Giang - Bắc Giang tiêu tổng số quả/cây; số chắc/cây; tỷ lệ chắc; khối lượng 100 (gr); suất cá thể (gr) giống khảo nghiệm ĐM2 vượt trội so với giống đối chứng L14 Năng suất thực thu giống lạc ĐM2 đạt 3,57 tấn/ha vụ hu Đông đạt 3,6 tấn/ha vụ Xuân vượt đối chứng vụ hu Đông 2014 khoảng 12,9 % vụ Xuân 2015 21,6% Chỉ tiêu Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 3.3 Khảo nghiệm DUS 3.3.1 Tính khác biệt Giống ĐM2 khác biệt so với giống TB25 phổ biến Có khác biệt rõ trình bày bảng 11 Bảng 11 Tính trạng ĐM2 so với giống tương tự TB25 Giống Giống K.cách Năm đăng tương tối thiểu/ ký tự LSD0.05 2015 8,72 20,79 4,45 2016 5,17 11,81 5,05 Tính trạng 12.1 Quả hạt (Quả/cây) 3.3.2 Tính đồng Số khác dạng tổng số quan sát là: 0/200 (2015), 0/200 (2016) không vượt số khác dạng tối đa cho phép (3/200 cây) nên giống đăng ký có tính đồng 3.3.3 Tính ổn định Giống qua hai vụ khảo nghiệm nên kết đánh giá giống có tính ổn định ngày; vụ Hè hu 120 ngày, tương đương giống đối chứng L14 Chiều cao dao động từ 41,3 - 68,9 cm, Số cành cấp từ 5,2 - 6,8 cành Tính ngủ nghỉ hạt ngắn Bảng 12 Đặc điểm sinh trưởng phát triển giống lạc ĐM2 (Taị điểm khảo nghiệm Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia) Ngày Ngày Chiều Số TGST mọc hoa cao cành (ngày) (ngày) (ngày) (cm) cấp Vụ Xuân 2015 ĐM2 48 112 41,3 5,2 L14 48 115 35,9 4,3 Vụ Xuân 2019 ĐM2 38 121 59,7 5,2 L14 38 121 60,8 4,3 Vụ Hè hu 2019 ĐM2 40 120 68,9 6,8 L14 40 120 51,9 7,9 Vụ Xuân 2020 ĐM2 44 121 52,8 5,3 L14 43 119 51,4 5,6 Tên giống Tính ngủ nghỉ hạt Không Không Không Không Không Không 3.4 Khảo nghiệm VCU Giống lạc ĐM2 khảo kiểm nghiệm mạng lưới khảo nghiệm Quốc gia qua vụ: Vụ Xuân 2015, Xuân 2019, Hè thu 2019 vụ Xuân 2020 Kết đánh sau: Nguồn: Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia 3.4.1 Đặc điểm sinh trưởng phát triển giống lạc ĐM2 Kết cho thấy giống lạc ĐM2 có thời gian sinh trưởng vụ Xuân dao động từ 112 - 121 3.4.2 Mức độ nhiễm sâu bệnh Kết đánh giá tình hình nhiễm sâu bệnh giống lạc ĐM2 điều kiện đồng ruộng thể bảng 13 Không Không Bảng 13 Mức độ nhiễm sâu bệnh khả chống chịu giống ĐM2 Tên giống Gỉ sắt (1-9) Đốm nâu (1-9) Đốm đen (1-9) Héo xanh hối đen hối trắng (1-3) cổ rễ (1-3) thân (1-3) Vụ Xuân 2015 1 1 1 Vụ Xuân 2019 1 1 1 Vụ Hè hu 2019 1 1 1 Vụ Xuân 2020 1 1 1 hối (1-3) Chịu hạn (1-5) ĐM2 L14 1-3 1-3 1-3 1-3 1-3 1-3 1 1 ĐM2 L14 1-3 1-3 1-3 1-3 1 1-2 1-2 ĐM2 L14 1 1 1 2 ĐM2 L14 1-5 1-5 1-3 1-3 1-3 1 1-2 1-2 Ghi chú: Đánh giá mức độ nhiễm sâu bệnh đồng ruộng có sử dụng thuốc BVTV Nguồn: Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 Kết cho thấy giống lạc ĐM2 chống chịu tốt loại sâu bệnh hại như: Héo xanh, thối trắng thân, thối đen cổ rễ (điểm 1), nhiễm nhẹ gỉ sắt, đốm nâu, đốm đen, thối (điểm 1) tương đương so với đối chứng L14 3.4.3 Các yếu tố cấu thành suất giống lạc ĐM2 Đánh giá yếu tố cấu thành suất giống lạc ĐM2 thể bảng 14 Bảng 14 Các yếu tố cấu thành suất giống ĐM2 Số quả/ Số chắc/cây Tỷ lệ hạt (%) ĐM2 11,0 8,8 6,2 L14 (Đ/c) 12,5 9,5 14,4 Tên giống ĐM2 L14 (Đ/c) 15,8 15,2 13,8 13,2 ĐM2 L14 (Đ/c) 14,6 14,3 13,1 12,9 ĐM2 L14 (Đ/c) 13,3 12,4 11,5 10,3 ĐM2 L14 (Đ/c) 13,6 13,6 11,8 11,4 Tỷ lệ KL100 hạt (g) (%) Vụ Xuân 2015 38,4 181 0,1 Vụ Xuân 2019 10,6 26,0 8,1 1,2 Vụ Hè hu 2019 1,6 26,7 3,0 0,0 Vụ Xuân 2020 9,3 18,1 13,7 0,1 Trung bình vụ 6,9 27,3 9,8 0,6 KL100 hạt (g) Độ đồng hạt (điểm) Tỷ lệ hạt/ (%) 60 70,8 163 64 73,0 192 185 67,8 67,4 5 73,2 70,9 193 186 68,0 67,2 5 73,6 70,6 191 185 69 66 5 72,4 69,3 189 179 66,2 66,1 3-5 72,5 70,9 Nguồn: Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia Kết bảng 14 cho thấy: - Giống lạc ĐM2 có số quả/ trung bình đạt 13,6 quả, số chắc/cây đạt 11,8 cao so với đối chứng 0,2 - 1,2 chắc/cây Tỷ lệ hạt cao trung bình 27,3%, giống đối chứng L14 tỷ lệ hạt 0,6% - Khối lượng 100 trung bình đạt 189 g, cao giống đối chứng L14 (179,0 g) - Khối lượng 100 hạt trung bình đạt 66,2 g, tương đương giống đối chứng L14 (66,1 g) - Độ đồng hạt giống lạc ĐM2 tương đương với đối chứng L14 (điểm -5) - Tỷ lệ hạt /quả giống lạc ĐM2 trung bình cao, đạt 72,5%, k hi giống đối chứng L14 đạt 70,9% 3.4.4 Năng suất thực thu giống lạc ĐM2 điểm khảo nghiệm Đánh giá suất giống lạc ĐM2 điểm khảo nghiệm hệ thống khảo nghiệm quốc gia vụ: vụ Xuân 2015, vụ Xuân 2019, vụ hu Đông 2019 vụ Xuân 2020 trình bày bảng 15 10 Bảng 15 Năng suất giống lạc ĐM2 điểm khảo nghiệm vụ Xuân 2015 Đơn vị tính: Tấn/ha Điểm khảo nghiệm Tên giống Hà Nội Từ Liêm Vượt Trung so với Hải hanh bình đ/c (%) Dương Hóa ĐM2 3,47 3,39 3,76 35,4 6,9 L14 (Đ/c) 3,35 3,19 3,39 33,1 - CV (%) 5,7 5,2 7,2 - - LSD0,05 3,2 2,7 3,9 - - Nguồn: Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia, 2015 Kết đánh giá cho thấy, suất giống lạc ĐM2 vụ Xuân 2015 03 điểm: Từ Liêm (Hà Nội), Hải Dương, hanh Hóa dao động từ 3,39 - 3,76 tấn/ha; cao hanh Hóa đạt 3,76 tấn/ha Năng suất trung bình đạt 35,4 tấn/ha, vượt đối chứng L14 khoảng 7,0% Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 Bảng 16 Năng suất giống lạc ĐM2 điểm vụ Xuân 2019 Đơn vị tính: Tấn/ha Tên giống ĐM2 L14 (Đ/c) CV (%) LSD0,05 Hà Nội 3,46 3,26 6,0 3,6 Điểm khảo nghiệm hái Bình hanh Hóa 2,74 2,89 2,61 2,38 6,9 8,3 3,8 4,1 Bắc Giang 2,88 2,88 9,2 3,8 Trung bình Vượt so với đ/c 2,99 2,78 7,6 - Nguồn: Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia, 2019 Kết đánh giá cho thấy, suất giống lạc ĐM2 vụ Xuân 2019 dao động từ 27,42 - 34,67 tấn/ha; cao Hà Nội đạt 3,46 tấn/ha, thấp hái Bình đạt 2,74 tấn/ha Năng suất trung bình đạt 2,99 tấn/ha vượt đối chứng L14 (2,78 tấn/ha) khoảng 7,6 % Tại điểm khảo nghiệm sản xuất vụ Xuân 2020 suất giống lạc ĐM2 trình bày bảng 17 Bảng 17 Năng suất giống lạc ĐM2 điểm vụ Xuân 2020 Đơn vị tính: Tấn/ha Tên giống ĐM2 L14 (Đ/c) CV (%) LSD0,05 Điểm khảo nghiệm Vượt Trung Hà hái hanh bình so với đ/c Nội Bình Hóa 3,21 3,18 2,98 3,12 13,0 2,96 2,87 247 2,76 6,2 5,2 6,3 4,3 3,6 3,8 - Nguồn: Trung tâm Khảo Kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng Quốc gia Kết đánh giá cho thấy, suất giống lạc ĐM2 vụ Xuân 2020 dao động từ 2,98 - 3,21 tấn/ha; cao Hà Nội 3,21 tấn/ha, thấp hanh Hóa đạt 2,98 tấn/ha Năng suất trung bình đạt 3,12 /ha vượt đối chứng L14 (2,76 tấn/ha) 13% Như vậy, qua 03 vụ khảo nghiệm địa phương đại diện cho tiểu vùng sinh thái tỉnh phía Bắc, giống lạc ĐM2 sinh trưởng phát triển tốt, nhiễm nhẹ với số sâu bệnh hại suất vượt đối chứng L14 từ 6,9 đến 13,0% IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận - Giống lạc ĐM2 có thời gian sinh trưởng ngắn (112 - 121) ngày Số cành cấp từ 5,2 - 6,8 cành Kết khảo nghiệm DUS cho thấy giống lạc ĐM2 có tính khác biệt, tính đồng tính ổn định - Năng suất giống lạc ĐM2 trung bình điểm vụ xuân đạt 2,99 - 3,54 tấn/ha, cao giống đối chứng L14 từ 6,9 - 13,0% - Giống lạc ĐM2 nhiễm nhẹ với số sâu bệnh hại (gỉ sắt, héo xanh,…), đặc biệt kháng bệnh đốm muộn) (điểm 1) xác định nhờ thị phân tử 4.2 Đề nghị - Tiến hành nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhằm tăng suất hiệu kinh tế việc sản xuất giống lạc ĐM2 - Cần mở rộng diện tích giống lạc ĐM2 có suất cao, chống chịu sâu bệnh hại để tăng hiệu việc sản xuất lạc TÀI LIỆU THAM KHẢO Đồng hị Kim Cúc, Lê hanh Nhuận, Phan hanh Phương, Lưu Minh Cúc, Hà Minh hanh, Nguyễn Văn Quang, Phạm hị Mai, Nguyễn hanh Loan, 2016 Nghiên cứu chọn tạo giống lạc kháng bệnh đốm muộn thị phân tử Báo cáo tổng kết Lưu Minh Cúc, Lưu hị Ngọc Huyền, Đồng hị Kim Cúc cs., 2013 Nghiên cứu đa dạng di truyền giống lạc thị phân tử Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam, Số 2/2013 (41): 38-43 Phạm hị Mai, Đồng hị Kim Cúc, Nguyễn Văn Quang, Phan hanh phương, Lê hanh Nhuận, Nguyễn Xuân hu, Phạm Văn Cường, 2017 Kết đánh giá khả chịu hạn điều kiện nhân tạo số dịng/giống lạc làm vật liệu cho cơng tác chọn giống Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, 23(12) QCVN 01-57:2011/BNNPTNT Quy chuẩn Kỹ thuật Quốc gia Khảo nghiệm giá trị canh tác sử dụng giống lạc, 2011 Aquino V.M., Shokes F.M., Gorbet D.W and Nutter F.W., 1993 Late leaf spot progression on peanut as afected by components of partial resistance Plant Dis 79, pp 74-78 FAOSTAT, 2015 Địa chỉ: http:/Faostat.fao.org; truy cập 20/8/2020 11 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(119)/2020 Breeding and selection of new peanut variety DM2 by molecular markers Dong hi Kim Cuc, Nguyen huy Ngoan, Phan hanh Phuong, Nguyen hanh Loan, Nguyen Duc Cuong, Dang hi Chau Anh, Nguyen Quang Huy, Pham Duy Trinh, Pham Van Linh Abstract New peanut variety DM2 has been created from a crossing combination of TB25 and TN6 peanut varieties he DUS testing results showed that the yield of DM2 variety varied from 3.1 to 3.6 tons/ha in Spring season and from 2.7 to 3.5 tons/ha in Autumn-Winter season he ratio of seeds/pod was 72%, higher than the control variety (L14) DM2 variety had good resistance against major pests and diseases such as green wilt, mild rust, brown spots, especially to late leaf spot disease (point 1), high drought tolerance (point 1) which was determined by molecular markers and ield experiments Keywords: Peanut varieties DM2, breeding and selection, late leaf spot disease, molecular markers Ngày nhận bài: 02/10/2020 Ngày phản biện: 15/10/2020 Người phản biện: PGS TS Ninh hị Phíp Ngày duyệt đăng: 22/10/2020 KẾT QUẢ CHỌN LỌC CÁC DÒNG/GIỐNG LẠC KHÁNG BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN (Ralstonia solanacerum Smith) BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ Nguyễn Xuân hu1, Nguyễn Văn Viết2, Lê hị Bích hủy3, Nguyễn Xuân Đoan1, Lê hị Phương Lan4, Lê Tuấn Tú4, Tạ Hồng Lĩnh5, Trịnh hị hùy Linh1, Nguyễn hị Hồng Oanh1, Nguyễn hị Liễu1, Nguyễn hị Q1, Nguyễn Chí hành1 TĨM TẮT Bài báo trình bày kết đánh giá suất khả kháng bệnh héo xanh vi khuẩn thị phân tử lây nhiễm nhân tạo 22 dòng/giống lạc Kết chọn 13, dịng giống có khả kháng bệnh héo xanh vi khuẩn đồng thời có suất cao từ 3,65 - 4,09 tấn/ha Trong đó, 04 dịng có mức kháng (R) với bệnh héo xanh vi khuẩn là: 1337.6, 1337.7, 1428.1, 1428.5; 09 dịng có mức kháng trung bình (MR) với bệnh héo xanh vi khuẩn là: 1521.2, 1338.8, 1338.9, 1339.3, 1339.7, 1339.12, 1337.4, 1428.6 1428.9 Đây nguồn vật liệu để tiếp tục đánh giá phát triển thành giống phục vụ sản xuất tương lai gần Từ khóa: Dịng/giống lạc, héo xanh vi khuẩn, suất, thị phân tử I ĐẶT VẤN ĐỀ Lạc trồng quan trọng, mặt hàng có giá trị phục vụ nội tiêu, xuất chuyển đổi cấu trồng hành tựu sản xuất lạc Việt Nam từ 15 năm trở lại đạt kết đáng ghi nhận suất từ 1,82 tấn/ha năm 200) lên 2,47 tấn/ha năm 2018) (FAOSTAT, 2019) Tuy nhiên, suất sản lượng lạc tăng chưa tương xứng với tiềm Nguyên nhân chủ yếu hầu hết địa phương trồng lạc, đặc biệt vùng đất trồng lạc nhờ nước trời đất đồi gị, đất bãi ven sơng bị bệnh héo xanh vi khuẩn gây hại làm giảm suất sản lượng Bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacerum Smith gây đối tượng gây hại nặng chủ yếu lạc với khoảng 20% diện tích trồng bị nhiễm bệnh làm giảm suất nghiêm trọng Kết đề tài “Nghiên cứu ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống lạc kháng bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum” chọn nguồn vật liệu phong phú gồm dịng/giống lạc kháng bệnh héo xanh vi khuẩn có suất cao > 3,5 tấn/ha Các dòng, giống phát triển phục vụ sản xuất nhằm giải yêu cầu phòng chống bệnh héo xanh vi khuẩn hại lạc số tỉnh miền Bắc Việt Nam tương lai gần Viện Cây lương thực Cây thực phẩm; Viện Nghiên cứu Phát triển Nafood Viện Công nghệ Sinh học; Viện Bảo vệ thực vật; Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 12 ... Nghiên cứu chọn tạo giống lạc kháng bệnh đốm muộn thị phân tử Báo cáo tổng kết Lưu Minh Cúc, Lưu hị Ngọc Huyền, Đồng hị Kim Cúc cs., 2013 Nghiên cứu đa dạng di truyền giống lạc thị phân tử Tạp chí... giống lạc ĐM2 Bảng 10 Các yếu tố cấu thành suất suất giống lạc ĐM2 Kết theo dõi yếu tố cấu thành suất suất giống lạc ĐM2 trình bày bảng 10 Vụ hu Vụ Xuân Đông 2014 2015 L14 ĐM L14 ĐM Tổng số quả/ cây (quả) ... phát triển giống lạc ĐM2 Kết cho thấy giống lạc ĐM2 có thời gian sinh trưởng vụ Xuân dao động từ 112 - 121 3.4.2 Mức độ nhiễm sâu bệnh Kết đánh giá tình hình nhiễm sâu bệnh giống lạc ĐM2 điều kiện