• ARN-Polymeraza tác động trên mồi sẽ gây 1 số Nucleotit bổ sung vào vị trí khởi đầu sự tái bản này,tạo nên OH tự do.. • Chính ARN-Polymeraza giữ vai trò khởi động để sau đó enzim P[r]
(1)Bài thuyết trình mơn Bài thuyết trình mơn
CNSH CNSH
Đề tài 16: Làm DNA tự chép (DNA replication).Tóm tắt q trình.
GVHD:Lê Hồng Phú SVTH: Đoàn Thị Anh
Dương Văn Thức Trần Thị Thuỳ
(2)Nội dung
Nội dung
Có nội dung chính:
I.Làm DNA tự chép. II.Các thành phần tham gia.
(3)I.Làm DNA tự chép I.Làm DNA tự chép
• Sự tái DNA có sự khởi động
mồi.Thường “mồi” đoạn DNA ngắn, gắn trước đầu DNA.Nhìn chạc tái bản,ta thấy DNA-Polymeraza,gắn photphat vào đầu 3’ OH tự do,nhưng lúc đầu khơng có OH tự ở điểm gốc tái
bản
ARN-Polymeraza,hoạt động tạo thêm đoạn
“mồi” ngắn tạo 3’ OH tự do, để sau
DNA-Polymeraza bắt đầu hoạt động tái
(4)I.Làm DNA tự chép I.Làm DNA tự chép
• ARN-Polymeraza tác động mồi gây số Nucleotit bổ sung vào vị trí khởi đầu tái này,tạo nên OH tự
• Chính ARN-Polymeraza giữ vai trị khởi động để sau enzim Polymeraza bắt đầu hoạt động tái • DNA-Polymeraza khơng hoạt động, khơng có mồi
ghép đơi vào sợi (+)
(5)I.Làm DNA tự chép I.Làm DNA tự chép
• Sau DNA mồi bị loại
DNA-Polymeraza(khác với
DNA-Polymeraza tái trên) khởi đầu đưa
Nucleotit vào đầu 3’ OH tự do, sau enzim Ligaza nối đoạn tái lại
(6)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
Protein/Enzyme Chức chính:
1 Protein dna A
2 Protein dna B
3 Primase (dna G protein)
4 Helicase
5 Protenin SSB
6 DNA gyrase
(topoisomeraseII)
7 DNA polymeraseIII
8 DNA polymeraseI
9 DNA polymeraseII
10 DNA ligase
Mở xoắn kép vị trí đặc biệt Xúc tác khởi đầu primase Xúc tác tổng hợp ARN mồi
Mở xoắn kép
Làm căng mạch DNA
Chuyển xoắn phải thành xoắn trái
Tổng hợp DNA sở ARN mồi
Loại ARN mồi thay vào DNA
(7)II.Các thành phần tham
II.Các thành phần tham
gia:
gia:
A.Giai đoạn Khởi Sự:
1.ProteinA, B
Ở E.Coli,quá trình
sao chép đầu 3’; có
proteinB đặc hiệu nhận biết điểm khởi đầu
chép(replication origine <Ori>) Protein gắn
vào trình tự base đặc biệt đó(trình tự mở đầu cho
đoạn DNA cần chép)
Protein dna A Protein dna B
B.Xúc tác khởi đầu primase
A.Mở xoắn kép vị trí đặt biệt
(8)II.Các thành phần tham gia: II.Các thành phần tham gia:
2.Gyrase
Tên gọi khác: enzyme
TopoisomeraseII
Tại vị trí đánh dấu proteinB,gyrase tác
động,cắt DNA ;làm tháo xoắn phía proteinB
Cơ chế :Cắt tạm thời hai chuỗi DNA, có tác dụng xếp lại siêu xoắn, tạo siêu xoắn trái chuỗi DNA
xoắn kép Phản ứng cần ATP
-Ở eukaryote, DNA
topoisomerase II tìm thấy
nghiên cứu
Chuyển xoắn phải thành xoắn trái
DNA gyrase
(9)Hình a:Hoạt động topoisomerase II chạc ba chép
(10)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
TopoisomeraseI:
Tháo dạng siêu xoắn bằng cách gắn vào phân tử DNA cắt một hai mạch để tháo xoắn Sau đó,nối lại.
So với ToloisomeraseII, ToloisomeraseI phổ biến hơn.
DNA polymeraseI
DNA polymeraseII
Loại ARN mồi thay vào DNA
Tham gia sửa chữa DNA
(11)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
3.Helicase
Tên gọi khác: Rep ; enzyme deroulase
Chức năng: Tham gia tách mạch tạo chạc ba chép
Cơ chế: cắt liên kết
hydrogen base bổ sung.Phản ứng cần
sự có mặt ATP HelicaseMở xoắn kép.
Cấu trúc DNA helicase gồm protein có chức mở xoắn kép:
DnaA: nhận biết vị trí đặc biệt điểm mở đầu DnaB: mở xoắn kép
DnaC: cần thiết để DnaB gắn vào điểm mở đầu
(12)Hình b:Hoạt động Helicase
(13)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
4.Protein SSB
Tên gọi: SSB= Single strand binding protein. Chức năng: protein làm căng mặt DNA,ngăn
không cho chập lại ngẫu nhiên xoắn để việc chép diễn dễ dàng.
Cơ chế: Tác động loại bỏ cấu trúc thứ cấp
chuỗi DNA,bằng cách gắn vào mạch đơn của DNA.
(14)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
5.RNA primase
Tên gọi khác: DNA G protein
Chức năng: Tạo ARN mồi,tác động tạo đoạn Okazaki
Hoạt động: Gắn vào phức hợp chạc ba,tạo thành
primosome,bắt đầu tổng hợp ARN mồi với
10-60nomonocleotide
Xúc tác tổng hợp ARN mồi
5.RNA primase
(15)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
A:giai đoạn Khởi Sự: B:Giai đoạn Nối Dài:
I: DNA polymerase:
Có loại Pol1,Pol2 và Pol3.Mỗi loại có chức định trong trình mã,quan trọng
là Pol3. DNA polymeraseIII
Tổng hợp DNA sở Tổng hợp DNA sở ARN mồi
(16)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
a.DNA polymeraseIII:
Là phức hợp gồm nhiều enzyme gắn với nhau(gồm tiểu đơn vị polC, dnaN, dnaZ, dnaX, dnaQ)
Chức năng:
Nối dài mạch DNA tổng hợp theo hướng 5’->3’ Sửa sai nhờ hoạt
tính
exonuclease(là loại enzyme cắt(Cơ chế cắt tìm hiểu
(17)II.Các thành phần tham gia:
II.Các thành phần tham gia:
a.DNA polymeraseIII:
Đặc điểm:
Xúc tác nhiều bước
phản ứng khác nhau.
Ít phải có
trung tâm hoạt
động,mỗi trung tâm ứng với loại
nucleotide.
Có hoạt tính
exonuclease.
(18)I.Các thành phần tham gia:
I.Các thành phần tham gia:
b.DNA polymeraseI
Chức năng:
Loại bỏ đoạn mồi
ARN.
Đặc điểm:
Chứa hoạt tính
exonuclese,chuyê n dụng(hoạt
động)mạnh polIII.
(19)I.Các thành phần tham gia:
I.Các thành phần tham gia:
c.DNA polymerase II Chức năng:
Tham gia sữa chữa
DNA,thay đoạn DNA hỏng DNA bình thường
Đặc điểm:
-Chức hệ thống enzyme cắt
nối.Sữa chữa dựa trình tự mạch DNA
-PolII hoạt động DNA,do đột biến ln xảy ra.Nó hoạt động với khoảng 50 loại
enzyme khác(Sửa sai
(20)I.Các thành phần tham gia:
I.Các thành phần tham gia:
C:giai đoạn kết thúc:
PCNA(proliferating cell nuclear antigen): Có tham gia
ATP,chặn
polymeraseAlpha lại,thúc đẩy
polymerseDeta gắn vào tổng hợp đoạn
Okazaki.PolymeraseAlph a tổng hợp liên tục sang mạch đối diện.
Sự tổng hợp mạch DNA tiếp tục xảy replicon
khác,với nhân tố
(21)III.Tóm tắt trình.
III.Tóm tắt q trình.
• Mời thầy bạn xem đoạn