Khảo sát phân bố nồng độ chế phẩm tiêm 3 (2 cloropyridin 3 yl) 2 methyl 4(3h) quinazolinon (nl197) trên mô gan, mô thận chuột nhắt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN BÁ LỘC KHẢO SÁT PHÂN BỐ NỒNG ĐỘ CHẾ PHẨM TIÊM 3-(2-CLOROPYRIDIN-3-YL)-2-METHYL-4(3H)-QUINAZOLINON (NL197) TRÊN MÔ GAN, MÔ THẬN CHUỘT NHẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN BÁ LỘC KHẢO SÁT PHÂN BỐ NỒNG ĐỘ CHẾ PHẨM TIÊM 3-(2-CLOROPYRIDIN-3-YL)-2-METHYL-4(3H)-QUINAZOLINON (NL197) TRÊN MÔ GAN, MÔ THẬN CHUỘT NHẮT Chuyên ngành: Dược lý – Dược lâm sàng Mã số: 60720405 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS TRẦN MẠNH HÙNG Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2017 i LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu nghiên cứu nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác DS Nguyễn Bá Lộc i Luận văn thạc sĩ dược học – Năm 2017 KHẢO SÁT PHÂN BỐ NỒNG ĐỘ CHẾ PHẨM TIÊM 3-(2-CLOROPYRIDIN-3-YL)-2-METHYL-4(3H)-QUINAZOLINON (NL197) TRÊN MÔ GAN, MÔ THẬN CHUỘT NHẮT Nguyễn Bá Lộc Thầy hướng dẫn: PGS TS Trần Mạnh Hùng Mở đầu đặt vấn đề: Một phần nghiên cứu tiền lâm sàng dược động học chế phẩm tiêm NL197 3,125 mg/kg Đối tượng: Phân bố nồng độ NL197 theo thời gian mô gan, mô thận chuột nhắt đực khỏe mạnh chủng Swiss albino (30 ± g) sau tiêm tĩnh mạch liều Phương pháp nghiên cứu: Thực tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg chuột chế phẩm tiêm NL197 Định lượng NL197 mô gan, mô thận lô, lô chuộ Mô thu hoạch thời điểm 5, 10, 15, 20, 30, 60, 90 phút sau tiêm phương pháp phân tích HPLC-PDA Kết bàn luận: LD50 chế phẩm tiêm NL197 ước tính theo phương pháp Miller-Tainter 27,42 ± 2,06 mg/kg chuột Nồng độ NL197 cao mơ gan 5,405 ± 1,849 µg/g mơ mơ thận 4,952 ± 1,489 µg/g mô vào thời điểm phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg Sau thời điểm đó, nồng độ NL197 mô chuột nhắt giảm dần theo thời gian Tốc độ đảo thải NL197 trung bình mơ gan chuột nhắt 55,45 ng/g mô /phút nhanh so với tốc độ đảo thải NL197 trung bình mơ thận 39,62 ng/g mô /phút nên giá trị AUC5’→90’ mơ gan chuột nhắt 268,34 µg x phút/g mô, nhỏ so với mô thận chuột nhắt 387,02 µg x phút/g mơ Kết luận: Sau tiêm tĩnh mạch liều NL197 9,375 mg/kg, NL197 nhanh chóng theo máu phân bố đến mơ gan mô thận đạt đến nồng độ tối đa sau phút Nồng độ NL197 mô gan ban đầu cao mô thận lại thải trừ nhanh nên mô thận theo thời gian ii Graduation thesis for Master’s Degree – Academy year 2017 DISTRIBUTION OF SINGLE DOSE INTRAVENOUS INJECTION OF 3-(2-CLOROPYRIDIN-3-YL)-2-METHYL-4(3H)-QUINAZOLINON (NL197) IN LIVER AND KIDNEYS OF HEALTHY MICES Nguyễn Bá Lộc Supervisor: Assoc Prof Dr Trần Mạnh Hùng Introduction: It’s a part of pre-clinical study of pharmacokinetic of paclitaxel 3,125 mg/ml injection concentrate formulation Objectives: Distribution of single dose intravenous injection of NL197 in liver and kidneys of healthy mices, species Swiss albino (30 ± g) Methods: Intravenous injections were administrated in the lateral tail vene with a single dose of 9,375 mg/kg of formulation The concentration of NL197 in liver and kidneys samples from lots, each lot consisted of mices colected blood at 5, 10, 15, 20, 30, 60, 90 minute after administration were determined by validatied HPLC-PDA method Results and discussion: Median lethal dose (LD50).of the injection of NL197 is 27,42 ± 2,06 mg/kg following Miller-Tainter estimated method That max concentration in liver is 5,405 ± 1,849 µg/g and max concentration in kidneys is 4,952 ± 1,489 µg/g were determinated in lot which organs were harvested at minutes after single dose IV 9,375 mg/kg each mouse Liver’s mean clearance calculated at 55,45 ng/g /min, is higher than kidneys’s mean clearance calculated at 39,62 ng/g /min So, AUC5’→90’of liver estimated at 268,34 µg.min/g, is smaller than AUC5’→90’of kidneys estimated at 387,02 µg.min/g Conclusion: After 9,375 mg/kg single dose intravenous NL197 ịnjection in mice, NL197 intermediately goes to liver and kidneys through circulatory system Max concentration in organs were determinated at minutes from ịnjection Liver’s level is higher than kidneys’s level at begin Besides, Liver’s level goes down faster than kidneys’s level i MỤC LỤC DANH MỤC MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vii CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 HỢP CHẤT 3-(2-CLOROPYRIDIN-3-YL)-2-METHYL-4(3H)- QUINAZOLINON (NL197) 2.1.1 Cơng thức hóa học 2.1.2 Phương pháp tổng hợp NL197 2.1.3 Phương pháp bào chế chế phẩm tiêm NL197 2.1.4 Dược động học thuốc tiêm NL197 thỏ 2.1.5 Một số nghiên cứu NL197 năm gần 2.2 PHÂN BỐ HOẠT CHẤT TRONG MÔ SINH HỌC 10 2.2.1 Phân bố hoạt chất mô 10 2.2.2 Phương pháp xử lý mẫu mô 10 2.2.3 Phương pháp phân tích chuẩn hóa với chất chuẩn nội 12 2.2.4 Thẩm định quy trình phân tích hoạt chất dịch sinh học 12 2.3 MÔ HÌNH VÀ CÁC THƠNG SỐ DƯỢC ĐỘNG HỌC 14 2.3.1 Mơ hình dược động học 14 2.3.2 Các thông số dược động học 18 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .20 3.1.1 Thuốc thử nghiệm 20 3.1.2 Thú thử nghiệm .20 3.1.3 Mô thử nghiệm 20 3.2 Hóa chất trang thiết bị .22 3.2.1 Hóa chất – dung mơi .22 3.2.2 Dụng cụ trang thiết bị 22 ii 3.3 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH LD50 23 3.3.1 Thử nghiện sơ 23 3.3.2 Thử nghiệm xác định 23 3.3.3 Ước tính giá trị LD50 .24 3.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 3.4.1 Quy trình lấy mẫu chuột nhắt 25 3.4.2 Quy trình xử lý mẫu phân tích 26 3.4.3 Điều kiện tiến hành sắc kí .28 3.4.4 Thẩm định quy trình phân tích 28 3.3.5 Xử lý kết 31 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 32 4.1 ĐÁNH GIÁ THUỐC TIÊM 32 4.1.1 Định tính HPLC-PDA 32 4.1.2 Định lượng HPLC-PDA 32 4.2 XÁC ĐỊNH LIỀU GÂY CHẾT LD50 CỦA CHẾ PHẨM TIÊM 33 4.2.1 Thử nghiệm sơ 33 4.2.2 Thử nghiệm xác định 34 4.3 THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG NL197 TRONG MƠ BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC VỚI ĐẦU DÒ PDA 36 4.3.1 Điều kiện tiến hành sắc kí .36 4.3.2 Thẩm định quy trình định lượng NL197 dịch mơ gan 36 4.3.3 Thẩm định quy trình định lượng NL197 dịch mô thận 48 4.4 KẾT QUẢ THEO DÕI NỒNG ĐỘ NL197 TRÊN MẪU GAN, MẪU THẬN THEO THỜI GIAN .59 4.4.1 Mẫu mô gan 59 4.4.2 Mẫu mô thận 61 4.5 BÀN LUẬN 62 4.5.1 Độc tính cấp NL197 62 4.5.2 Phương pháp định lượng HPLC-PDA mô .62 iii 4.5.3 Phân bố hoạt chất mô 63 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65 5.1 KẾT LUẬN 65 5.2 KIẾN NGHỊ 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO viii TÀI LIÊU TIẾNG VIỆT viii TÀI LIÊU TIẾNG NƯỚC NGOÀI ix PHỤ LỤC PL-1 PHỤ LỤC 1: HỒ SƠ PHA CHẾ THUỐC TIÊM NL197 PL-1 PHỤ LỤC 2: TIÊU CHUẨN NGUYÊN LIỆU NL197 PL-4 PHỤ LỤC 3: TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM THUỐC TIÊM nl197 PL-7 PHỤ LỤC 4: KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG MẪU GAN PL-12 PHỤ LỤC 5: KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG MẪU THẬN PL-19 iv DANH MỤC MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT CHỮ TĂT CHỮ NGUYÊN Ý NGHĨ AF Tailing factor Hệ số kéo đuôi (bất đối) AS Analytical Standard Chất chuẩn phân tích AUC Area under curve Diện tích đường cong CNZ Cinnarizin Cmax Nồng độ thuốc cao huyết tương HPLC High performance liquid Sắc ký lỏng hiệu cao chromatography IS Internal Standard Chất chuẩn nội LLOQ Lower limit of quantitation Giới hạn định lượng N 10 NL197 Số đĩa lý thuyết 3-(2-Cloropyridin-3-yl)-2methyl-4(3H)-quinazolinon 11 PDA PhotoDiode Array Đầu dò dải diod quang 12 RSD Relative standard deviation Độ lệch tương đối 13 S 14 SD Standard deviation Độ lệch chuẩn 15 Rt Retention time Thời gian lưu 16 Tmax Diện tích đỉnh Thời điểm nồng độ thuốc cao 17 TPHCM Thành phố Hồ Chí Minh v DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thông số dược động học NL197 thỏ thí nghiệm sau tiêm liều 3,125 mg/kg .6 Bảng 3.1 Thành phần công thức cho ml dịch tiêm .20 Bảng 3.2 Danh sách hóa chất, dung mơi sử dụng nghiên cứu 22 Bảng 3.3 Danh sách dụng cụ trang thiết bị 22 Bảng 3.4 Bảng quy đổi phân suất tử vong thành probit 24 Bảng 4.1 Định tính NL197 chế phẩm tiêm 32 Bảng 4.2 Hàm lượng dung dịch tiêm NL197 33 Bảng 4.3 Kết thử nghiệm dị liều gây độc tính cấp sơ 34 Bảng 4.4 Kết thử nghiệm xác định liều gây độc tính cấp 34 Bảng 4.5 Tính tương thích hệ thống mẫu dịch mô gan .37 Bảng 4.6 Độ chọn lọc NL197 dịch mô gan 39 Bảng 4.7 Tỉ số diện tích đỉnh nồng độ NL197 dịch mơ gan 40 Bảng 4.8 Kết xử lý thống kê tương quan hồi quy tuyến tính .41 Bảng 4.9 Độ xác ngày .42 Bảng 4.10 Độ xác liên ngày .42 Bảng 4.11 Hiệu suất chiết NL197 CNZ dịch mô gan 44 Bảng 4.12 Độ ổn định ngắn hạn mẫu đối chiếu 46 Bảng 4.13 Độ ổn định dài hạn mẫu đối chiếu 47 Bảng 4.14 Độ ổn định ngắn hạn mẫu dịch mô gan 47 Bảng 4.15 Độ ổn định mẫu dịch chiết mô gan sau xử lý đặt autosampler .48 Bảng 4.16 Tính tương thích hệ thống mẫu dịch mô thận .49 Bảng 4.17 Độ chọn lọc NL197 dịch mô thận .51 Bảng 4.18 Tỉ số diện tích đỉnh nồng độ NL197 dịch mô thận 52 Bảng 4.19 Kết xử lý thống kê tương quan hồi quy tuyến tính .53 Bảng 4.20 Độ xác ngày 54 Bảng 4.21 Độ xác liên ngày .54 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-10 Lấy xác ml cho vào bình định mức 10 ml, thêm methanol (HPLC) vừa đủ thể tích, loại bọt khí, lọc qua màng lọc 0,45 𝜇m) Mẩu thử: lấy xác ml chế phẩm cho vào bình định mức 50 ml, thêm 30 ml methanol (HPLC) để hòa tan, lắc đều, thêm methanol (HPLC) vừa đủ thể tích; loại bọt khí, lọc qua màng lọc 0,45 𝜇m Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: tiến hành sắc ký với dung dịch sắc ký đồ thu lần tiêm nhắc lại không lớn 2,0 % Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng NL197, C14H10ClN3O dựa vào diện tích pic NL197 thu sắc ký đồ dung dịch chuẩn dung dịch thử 𝑋 (%) = 𝑆𝑡 × 𝑚𝑐 × 𝑑𝑡 × 𝐶% × 100 𝑆𝑐 × 𝑑𝑐 × 25 Trong đó: - St, Sc: diện tích pic mẫu thử, mẫu chuẩn - mc (mg): lượng cân mẫu thử đối chiếu - C%: hàm lượng chất chuẩn đối chiếu - dt, dc: độ pha loãng dung dịch thử, dung dịch mẫu chuẩn đối chiếu 3.9 Giới hạn chất bảo quản: Mẫu chuẩn: pha sung dịch nipagin nipasol methanol (HPLC) có nồng độ 30 𝜇m/ml 𝜇m/ml, lắc đều, loại bọt khí, lọc qua màng lọc 0,45 𝜇m Mẩu thử: lấy xác ml chế phẩm cho vào bình định mức 50 ml, thêm 30 ml methanol (HPLC) để hịa tan, thêm methanol (HPLC) vừa đủ thể tích, lắc đều, loại bọt khí, lọc qua màng lọc 0,45 𝜇m Hàm lượng chất bảo quản xác định phương pháp HPLC, điều kiện tiến hành mục định lượng Tiêm dung dịch chuẩn dung dịch thử hệ thống sắc ký, tiến hành sắc ký ghi lại sắc ký đồ Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-11 Từ diện tích pic nipagin nipasol thu từ dung dịch chuẩn, dung dịch thử, hàm lượng chất chuẩn; tính hàm lượng nipagin nipasol ml chế phẩm theo cơng thức: 𝑋 (%) = 𝑆𝑡 × 𝑚𝑐 × 𝑑𝑡 × 𝐶% 𝑆𝑐 × 𝑑𝑐 Trong đó: - St, Sc: diện tích pic mẫu thử, mẫu chuẩn - mc (mg): lượng cân mẫu thử đối chiếu - C%: hàm lượng chất chuẩn đối chiếu - dt, dc: độ pha loãng dung dịch thử, dung dịch mẫu chuẩn đối chiếu Đóng gói – Bảo quản – Hạn dùng - Đóng gói: Đóng gói thủy tinh đáy bằng, dung dịch ml - Nhãn: quy chế dược - Bảo quản: nơi mát, tránh ánh sáng - Hạn sử dụng: 24 tháng kể từ ngày sản xuất.[6] Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-12 PHỤ LỤC 4: KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG MẪU GAN Ngày 26.07.2015 Diện tích đỉnh (mVs) Nồng độ (µg/ml) NL197 CNZ đỉnh 0,5 29474 718462 0,0410 60648 694782 0,0873 119475 728318 0,1640 252135 760017 0,3317 301289 718422 0,4194 10 626852 736145 0,8515 15 974162 776498 1,2546 20 1323648 700491 1,8896 ŷ = 0,0894x Phương trình tuyến tính Mẫu Tỉ số diện tích R2 = 0,993 Khối Diện tích đỉnh lượng (mVs) mô (g) NL197 CNZ Tỉ số diện tích đỉnh Nồng độ Nồng độ mẫu phân mơ tích (µg/ml) (µg/g mơ) Lơ lấy mẫu mơ phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,142 385525 704092 0,5475 6,122 8,041 1,512 383225 765378 0,5007 5,598 5,553 1,941 224024 751533 0,2981 3,333 2,575 1,783 361573 664363 0,5442 6,085 5,119 1,194 328649 702844 0,4676 5,228 6,567 1,003 204917 749107 0,2735 3,058 4,574 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 5,405 SD 1,849 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-13 Lô lấy mẫu mô 10 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,822 326894 723974 0,4515 5,048 4,156 1,311 390270 724587 0,5386 6,022 6,890 0,905 215041 694171 0,3098 3,463 5,740 1,680 297280 720659 0,4125 4,612 4,118 1,244 260151 682019 0,3814 4,264 5,142 1,727 376874 784910 0,4801 5,368 4,662 Trung bình 5,118 SD 1,064 Lơ lấy mẫu mơ 15 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,529 106705 663134 0,1609 1,800 1,766 1,012 179093 679190 0,2637 2,948 4,370 1,761 192589 782327 0,2462 2,752 2,150 1,224 249477 741288 0,3365 3,763 4,611 1,948 295277 777710 0,3797 4,245 3,269 1,699 384696 729765 0,5272 5,893 5,203 Trung bình 3,594 SD 1,359 Lơ lấy mẫu mô 20 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,030 169392 755989 0,2241 2,505 3,648 0,947 145294 674474 0,2154 2,408 3,815 1,963 140910 789585 0,1785 1,995 1,525 1,706 70024 716834 0,0977 1,092 0,960 1,089 63834 727492 0,0877 0,981 1,351 1,245 41312 777385 0,0531 0,594 0,716 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 2,002 SD 1,370 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-14 Ngày 22.08.2015 Diện tích đỉnh (mVs) Nồng độ (µg/ml) NL197 CNZ đỉnh 0,5 27477 721468 0,0381 58038 671452 0,0864 117428 715346 0,1642 218180 709613 0,3075 294054 698497 0,4210 10 619758 721453 0,8590 15 948731 728831 1,3017 20 1194234 711524 1,6784 ŷ = 0,0849x Phương trình tuyến tính Mẫu Tỉ số diện tích R2 = 0,9991 Khối Diện tích đỉnh lượng (mVs) mô (g) NL197 CNZ Tỉ số diện tích đỉnh Nồng độ Nồng độ mẫu phân mơ tích (µg/ml) (µg/g mơ) Lơ lấy mẫu mơ 30 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,547 74064 791538 0,0936 1,103 1,069 1,177 48815 692200 0,0705 0,831 1,059 0,994 70153 737189 0,0952 1,121 1,692 0,895 83786 734751 0,1140 1,344 2,252 1,452 52751 683356 0,0772 0,910 0,940 1,652 71444 762909 0,0936 1,103 1,002 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 1,336 SD 0,526 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-15 Lô lấy mẫu mô 60 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,932 28830 656600 0,0439 0,517 0,402 1,652 50797 731986 0,0694 0,818 0,742 1,643 74396 689964 0,1078 1,271 1,160 1,154 51656 770958 0,0670 0,790 1,026 1,310 61971 779448 0,0795 0,937 1,073 1,821 45127 735941 0,0613 0,723 0,595 Trung bình 0,833 SD 0,301 Lơ lấy mẫu mơ 90 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 1,048 38324 756440 0,0507 0,597 0,854 1,324 28930 679328 0,0426 0,502 0,569 2,019 58346 734788 0,0794 0,936 0,695 1,229 35063 759584 0,0462 0,544 0,664 1,046 41677 765651 0,0544 0,641 0,920 1,859 36716 776527 0,0473 0,557 0,450 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 0,692 SD 0,175 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-16 Ngày 18.08.2016 Diện tích đỉnh (mVs) Nồng độ (µg/ml) NL197 CNZ đỉnh 0,5 28467 686187 0,0415 59146 738882 0,0800 123014 723824 0,1700 214866 714539 0,3007 291487 728815 0,3999 10 624852 690374 0,9051 15 894173 693635 1,2891 20 1197542 730212 1,6400 ŷ = 0,0841x Phương trình tuyến tính Mẫu Tỉ số diện tích R2 = 0,9967 Khối Diện tích đỉnh lượng (mVs) mơ (g) NL197 CNZ Tỉ số diện tích đỉnh Nồng độ Nồng độ mẫu phân mơ tích (µg/ml) (µg/g mơ) Lơ lấy mẫu mơ phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 1,462 189057 710404 0,2661 3,166 3,248 1,249 92473 737953 0,1253 1,491 1,790 1,359 115470 679268 0,1700 2,022 2,232 1,276 189267 714640 0,2648 3,151 3,704 0,992 105913 774420 0,1368 1,627 2,460 1,398 111633 774552 0,1441 1,715 1,840 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 2,546 SD 0,776 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-17 Lô lấy mẫu mô 10 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 1,136 187575 679695 0,2760 3,283 4,335 0,992 175954 765360 0,2299 2,735 4,135 1,385 103552 730254 0,1418 1,687 1,827 1,085 85624 751008 0,1140 1,356 1,875 1,372 65907 673999 0,0978 1,163 1,272 1,861 66543 681987 0,0976 1,161 0,936 Trung bình 2,397 SD 1,468 Lơ lấy mẫu mơ 15 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 2,010 187197 726722 0,2576 3,064 2,287 1,499 44155 674356 0,0655 0,779 0,779 1,649 71544 748154 0,0956 1,138 1,035 1,751 60949 674312 0,0904 1,075 0,921 1,273 81320 709021 0,1147 1,364 1,608 1,388 56461 720835 0,0783 0,932 1,007 Trung bình 1,273 SD 0,572 Lơ lấy mẫu mơ 20 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 1,064 52932 723960 0,0731 0,870 1,226 1,163 67237 730980 0,0920 1,094 1,411 1,081 64337 781708 0,0823 0,979 1,359 0,913 76907 756751 0,1016 0,496 0,815 2,070 76907 756751 0,1016 1,209 0,876 1,665 33557 670519 0,0500 0,595 0,536 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 1,037 SD 0,348 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-18 Lô lấy mẫu mô 30 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 1,162 33959 744524 0,0456 0,543 0,700 1,003 45027 694192 0,0649 0,772 1,154 1,815 30945 692638 0,0447 0,531 0,439 1,998 32629 687559 0,0475 0,565 0,424 1,858 47115 725152 0,0650 0,773 0,624 1,050 35388 741965 0,0477 0,567 0,811 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 0,692 SD 0,271 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-19 PHỤ LỤC 5: KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG MẪU THẬN Ngày 30.07.2015 Diện tích đỉnh (mVs) Nồng độ (µg/ml) NL197 CNZ đỉnh 0,5 27814 775700 0,0359 59478 790078 0,0753 112234 708970 0,1583 235478 683714 0,3444 299741 689588 0,4347 10 600047 768780 0,7805 15 914739 753383 1,2142 20 1279634 778802 1,6431 ŷ = 0,0815x Phương trình tuyến tính Mẫu Tỉ số diện tích R2 = 0,9989 Khối Diện tích đỉnh lượng (mVs) mơ (g) NL197 CNZ Tỉ số diện tích đỉnh Nồng độ Nồng độ mẫu phân mơ tích (µg/ml) (µg/g mô) Lô lấy mẫu mô phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,408 95798 708804 0,1352 1,659 4,066 0,435 91299 765742 0,1192 1,463 3,364 0,257 94404 727520 0,1298 1,593 6,197 0,221 93423 723140 0,1292 1,586 7,175 0,314 94019 722176 0,1302 1,598 5,089 0,382 83274 699847 0,1190 1,460 3,823 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 4,952 SD 1,489 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-20 Lô lấy mẫu mô 10 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,339 90744 678418 0,1338 1,642 4,843 0,255 93045 722091 0,1289 1,581 6,202 0,355 91726 737205 0,1244 1,527 4,302 0,211 86383 737423 0,1171 1,438 6,814 0,385 93747 762661 0,1229 1,509 3,919 0,429 95493 767511 0,1244 1,527 3,559 Trung bình 4,940 SD 1,301 Lô lấy mẫu mô 15 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,208 71341 779549 0,0915 1,123 5,400 0,297 78263 725197 0,1079 1,325 4,460 0,393 61248 778221 0,0787 0,966 2,458 0,215 36214 747701 0,0484 0,837 3,894 0,274 61692 783284 0,0788 0,967 3,528 0,192 47399 748652 0,0633 0,777 4,047 Trung bình 3,964 SD 0,978 Lơ lấy mẫu mơ 20 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,376 57061 772841 0,0738 0,906 2,410 0,231 37210 702135 0,0530 0,650 2,816 0,216 40936 685670 0,0597 0,733 3,392 0,186 46793 784223 0,0597 0,732 3,937 0,345 42694 778019 0,0549 0,673 1,952 0,202 37393 682584 0,0548 0,672 3,328 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 2,973 SD 0,723 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-21 Lô lấy mẫu mô 30 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,462 36214 747701 0,0484 0,594 1,287 0,365 48259 707383 0,0682 0,818 2,242 0,537 47392 762480 0,0622 0,763 1,421 0,372 61692 783284 0,0788 0,669 1,798 0,271 47399 748652 0,0633 0,593 2,190 0,207 40936 685670 0,0597 0,583 2,814 Trung bình 1,958 SD 0,571 Ngày 24.08.2015 Nồng độ (µg/ml) Diện tích đỉnh (mVs) Tỉ số diện tích NL197 CNZ đỉnh 0,5 29459 748527 0,0394 61247 770248 0,0795 119443 703810 0,1697 229453 688320 0,3334 299317 769426 0,3890 10 591023 718064 0,8231 15 924315 766166 1,2064 20 1320462 783941 1,6844 Phương trình tuyến tính Tn thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn ŷ = 0,0826x R2 = 0,9989 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-22 Mẫu Khối Diện tích đỉnh lượng (mVs) mơ (g) NL197 CNZ Tỉ số diện tích đỉnh Nồng độ Nồng độ mẫu phân mơ tích (µg/ml) (µg/g mô) Lô lấy mẫu mô 60 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,514 40792 704613 0,0579 0,701 1,363 0,252 40688 718972 0,0566 0,685 2,718 0,445 39602 700564 0,0565 0,684 1,537 0,504 40178 732789 0,0548 0,654 1,297 0,393 40345 783654 0,0515 0,623 1,585 0,330 35436 707801 0,0501 0,586 1,776 Trung bình 1,713 SD 0,521 Lô lấy mẫu mô 90 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 9,375 mg/kg 0,393 35993 682985 0,0527 0,638 1,623 0,458 37241 714803 0,0521 0,630 1,377 0,454 40345 783654 0,0515 0,606 1,334 0,532 33384 691393 0,0483 0,584 1,098 0,224 33612 769617 0,0437 0,529 2,359 0,296 31814 788400 0,0404 0,508 1,715 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 1,584 SD 0,438 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-23 Ngày 18.08.2016 Diện tích đỉnh Nồng độ (µg/ml) NL197 CNZ đỉnh 0,5 29416 740312 0,0397 62635 738003 0,0849 117476 720387 0,1631 228463 736111 0,3104 303147 746334 0,4062 10 608123 763960 0,7960 15 964523 760393 1,2685 20 1260476 761771 1,6547 ŷ = 0,0827x Phương trình tuyến tính Mẫu Tỉ số diện tích R2 = 0,9991 Khối Diện tích đỉnh lượng (mVs) mơ (g) NL197 CNZ Tỉ số diện tích đỉnh Nồng độ Nồng độ mẫu phân mơ tích (µg/ml) (µg/g mơ) Lơ lấy mẫu mô phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 0,293 39492 728445 0,0542 0,656 2,237 0,245 30148 737287 0,0409 0,494 2,018 0,303 32990 722497 0,0457 0,600 1,980 0,295 34887 703121 0,0496 0,524 1,775 0,297 35959 731636 0,0491 0,594 2,001 0,435 37559 708310 0,0530 0,641 1,474 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 1,914 SD 0,261 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-24 Lô lấy mẫu mô 10 phút sau tiêm tĩnh mạch liều 3,125 mg/kg 0,170 29881 761801 0,0392 0,474 2,790 0,514 45027 694192 0,0649 0,772 1,501 0,235 34799 708133 0,0491 0,594 2,529 0,474 33467 771174 0,0434 0,525 1,107 0,203 39492 728445 0,0542 0,552 2,720 0,372 27843 703491 0,0396 0,479 1,286 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Trung bình 1,989 SD 0,771 ... CNZ 524 5 1985 31 24 5 7 125 63 16,79 0 ,28 36 53 1054 29 198 707945 12, 51 0,15 4016 20 14 30 574 724 535 13, 14 0 ,28 525 6 38 96 2 8 32 1 7194 23 18,56 0,54 428 1 424 6 29 740 7064 23 14 ,39 0,60 6186 22 43 3 23 3 0 726 077... Đạt 6 ,21 726 145 6 ,29 714179 6 ,21 725 489 6 ,30 724 485 6 ,21 726 485 6 ,29 7 034 51 6 ,21 727 164 6 ,29 721 546 6 ,21 726 451 6 ,29 7 134 69 745464 795464 6 ,28 7 32 986 Trung bình 6 ,21 729 533 6 ,29 71 835 3 SD 78 23 0,00 63. .. BÁ LỘC KHẢO SÁT PHÂN BỐ NỒNG ĐỘ CHẾ PHẨM TIÊM 3- (2- CLOROPYRIDIN -3- YL)- 2- METHYL- 4(3H)- QUINAZOLINON (NL197) TRÊN MÔ GAN, MÔ THẬN CHUỘT NHẮT Chuyên ngành: Dược lý – Dược lâm sàng Mã số: 60 720 405