Luận án tiến sĩ dược học FULL (BC và CND) nghiên cứu bào chế nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac và bước đầu đánh giá sinh khả dụng của chế phẩm

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: TS Nguyễn Trần Linh PGS TS Nguyễn Văn Long Những người thầy nhiệt tình hướng dẫn hết lịng giúp đỡ tơi thời gian làm luận án vừa qua Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới tồn thể thầy, cô giáo, kỹ thuật viên môn Bào chế, Bộ môn Dược lực, Bộ môn công nghiệp dược, Bộ mơn Vật lý – Hóa lý nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn: Viện kiểm nghiệm, nghiên cứu dược trang thiết bị Y tế quân đội; Các bác sĩ khoa mắt Bệnh viện Trung Ương Quân đội 108 Đã nhiệt tình giúp đỡ tơi hồn thành nội dung thực nghiệm q trình học tập nghiên cứu khoa học Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Nhà trường, Phòng Đào tạo sau đại học quan tâm giúp đỡ tơi q trình cơng tác, học tập nghiên cứu Cuối cùng, xin cảm ơn người thân gia đình bạn bè ln bên, giúp đỡ, động viên, tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Hà Nội, ngày iii tháng năm 2016 MỤC LỤC Trang BẢNG CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC CÁC HÌNH xii ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 THÔNG TIN VỀ DƯỢC CHẤT ACID DICLOFENAC 1.1.1 Công thức hóa học 1.1.2 Đặc tính lý hóa 1.1.3 Tác dụng, định 1.2 NANO NHŨ TƯƠNG 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Thành phần 1.2.3 Kỹ thuật bào chế nano nhũ tương 1.2.4 Đặc tính nano nhũ tương 1.2.5 Ưu nhược điểm nano nhũ tương 11 1.3 NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT 16 1.3.1 Đặc điểm cấu tạo mắt liên quan đến hấp thu dược chất 16 1.3.2 Một số nghiên cứu nano nhũ tương nhỏ mắt 18 1.3.3 Đánh giá sinh khả dụng nano nhũ tương mắt 22 Chương NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN, ĐỘNG VẬT THÍ NGHIỆM 34 2.1.1 Nguyên liệu 34 2.1.2 Thiết bị 35 2.1.3 Động vật thí nghiệm 36 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 36 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.3.1 Phương pháp bào chế nano nhũ tương diclofenac 36 2.3.2 Phương pháp bào chế dung dịch nhỏ mắt diclofenac so sánh 38 2.3.3 Phương pháp đánh giá số đặc tính hệ nano nhũ tương 39 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định 45 2.3.5 Phương pháp thử kích ứng mắt 46 2.3.6 Phương pháp nghiên cứu sinh khả dụng 48 2.3.7 Phương pháp xây dựng tương quan in vitro – in vivo 52 2.3.8 Phương pháp ghi xử lý số liệu 54 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .55 3.1 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG DƯỢC CHẤT TRONG MẪU NANO NHŨ TƯƠNG VÀ MƠI TRƯỜNG GIẢI PHĨNG 55 3.1.1 Tính đặc hiệu phương pháp 55 3.1.2 Xác định tính tuyến tính 55 3.1.3 Xác định độ .57 3.1.4 Xác định độ lặp lại .58 3.1.5 Kết luận .58 3.2 XÂY DỰNG CÔNG THỨC VÀ QUY TRÌNH BÀO CHẾ NANO NHŨ TƯƠNG 59 3.2.1 Bào chế nano nhũ tương kỹ thuật siêu âm 59 3.2.2 Bào chế nano nhũ tương kỹ thuật siêu âm kết hợp đồng hóa áp suất cao 80 3.2.3 Bào chế nano nhũ tương kỹ thuật phân cắt tốc độ cao 84 3.3 NÂNG QUY MÔ BÀO CHẾ .98 3.3.1 Khảo sát lựa chọn thời gian siêu âm nâng quy mô 98 3.3.2 Đánh giá tính lặp lại quy trình nâng quy mô bào chế 103 3.4 DỰ THẢO TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 105 3.5 ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT .106 3.6 KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH CỦA MẪU NANO NHŨ TƯƠNG ĐƯỢC LỰA CHỌN ĐỂ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG 107 3.7 THỬ KÍCH ỨNG MẮT TRÊN THỎ 108 3.8 NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT TRÊN THỎ THÍ NGHIỆM 109 3.8.1 Thẩm định phương pháp định lượng diclofenac dịch tiền phòng 109 3.8.2 Đánh giá sinh khả dụng thông số dược động học 117 3.9 XÂY DỰNG TƯƠNG QUAN IN VITRO – IN VIVO TRONG THIẾT KẾ CÔNG THỨC NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 121 3.9.1 Đánh giá giải phóng dược chất in vitro .121 3.9.2 Mô hình hóa đồ thị giải phóng 123 3.9.3 Thiết lập tương quan 124 3.9.4 Ứng dụng tương quan in vitro – in vivo xây dựng tiêu giải phóng dược chất nano nhũ tương .126 Chương BÀN LUẬN 128 4.1 VỀ ACID DICLOFENAC 128 4.2 VỀ BÀO CHẾ NANO NHŨ TƯƠNG .129 4.2.1 Về công thức bào chế .129 4.2.2 Về thiết bị bào chế 132 4.2.3 Về nhiệt độ nhũ hóa 133 4.2.4 Về tỉ lệ dược chất pha dầu nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac 134 4.2.5 Về cấu trúc nano nhũ tương 135 4.2.6 Về nâng quy mô bào chế 136 4.3 VỀ KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG IN VITRO CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 137 4.4 VỀ NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH .140 4.5 VỀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ 140 4.6 VỀ NGHIÊN CỨU TÍNH KÍCH ỨNG .141 4.7 VỀ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG IN VIVO VÀ THIẾT LẬP TƯƠNG QUAN IN VITRO – IN VIVO .142 4.7.1 Về định lượng diclofenac dịch tiền phòng .144 4.7.2 Về lựa chọn mơ hình dược động học 145 4.7.3 Về xây dựng tương quan in vitro – in vivo .146 KẾT LUẬN .148 ĐỀ XUẤT 149 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC BẢNG CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT ADC Acid diclofenac AIC The Akaike information criterion (Tiêu chuẩn thông tin Akaike) ANOVA Analysis of variance (Phân tích phương sai) AUC The area under the curve (Diện tích đường cong) AUMC Area under the first moment curve (Diện tích đường cong nồng độ × thời điểm) BCS Biopharmaceutics Classification System (Hệ thống phân loại sinh dược học) CĐDH Chất đồng diện hoạt CDH Chất diện hoạt Cmax Maximum concentration (Nồng độ thuốc tối đa) COX Cyclooxygenase Cre Cremophor CT Công thức CTBC Công thức bào chế CTCL Chỉ tiêu chất lượng CTTƯ Công thức tối ưu D/N Dầu/nước DAD Diode Array Detector (Detector mảng quang diod) DC Dược chất DD Dung dịch ĐNH Đồng hóa ECD Electron capture detector (Detector điện hóa) FDA Food and Drug Administration (Cơ quan quản lý thuốc – thực phẩm) GP Giải phóng GPDC Giải phóng dược chất GTTB Giá trị trung bình HLB Hydrophilic-lipophilic balance (Hằng số cân dầu/nước) HPLC High performance liquid chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) HQC High quality control sample (Mẫu kiểm chứng nồng độ cao) IPM Isopropyl myristat IVIVC In vitro – in vivo correlation (tương quan in vitro – in vivo) vii kl Khối lượng KTG Kích thước giọt LC-MS Liquid chromatography–mass spectrometry (Sắc ký lỏng khối phổ) LLOQ Lower limit of quantification (Giới hạn định lượng dưới) LQC Lower quality control sample (Mẫu kiểm chứng nồng độ thấp) MCT Medium-chain triglycerides (triglycerid có acid béo mạch trung bình) MQC Middle quality control sample (Mẫu kiểm chứng nồng độ trung bình) MRT Mean residence time (Thời gian lưu trung bình) MT Mơi trường MTPT Mơi trường phân tán N/D Nước/dầu NaDC Natri diclofenac NSAIDs Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (thuốc chống viêm không steroid) NNT Nano nhũ tương PdI Polydispersity index (chỉ số đa phân tán) PEG Polyethylen glycol PG Propylen glycol PL Phụ lục RSD Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) SD Standard deviation (Độ lệch chuẩn) SKD Sinh khả dụng TB Trung bình TCCS Tiêu chuẩn sở TEM Transmission electron microscopy (Hiển vi điện tử truyền qua) Tmax Maximum time (Thời gian đạt nồng độ thuốc tối đa) tt Thể tích Tw Tween USA The United States of America (Hợp chủng quốc Hoa Kỳ) viii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1: Độ tan amlodipin loại dầu nano nhũ tương o 25 ± C (n = 3) 11 Bảng 1.2: Một số chế phẩm nano nhũ tương nhỏ mắt 21 Bảng 1.3: Một số đặc điểm giải phẫu, sinh lý mắt người mắt thỏ 24 Bảng 1.4 Một số điều kiện chạy sắc ký định lượng ADC dịch tiền phòng 26 Bảng 2.5: Nguyên liệu sử dụng 34 Bảng 2.6: Các thiết bị sử dụng nghiên cứu nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac 35 Bảng 2.7 Thành phần tá dược bào chế nano nhũ tương acid diclofenac 36 Bảng 2.8 Điều kiện bảo quản chu kỳ lấy mẫu kiểm tra theo dõi độ ổn định NNT ADC Bảng 3.21: Giá trị R luyện cho biến đầu vào 45 76 Bảng 2.9: Hệ thống phân loại tổn thương mắt Bảng 3.22: Thành phần 47 công thức NNT lựa Bảng 2.10: Các mơ hình giải phóng khác chọn sử dụng để phân tích liệu 77 in vitro 53 Bảng 3.11: Sự phụ thuộc diện tích pic nồng độ acid diclofenac 56 Bảng 3.12: Kết khảo sát độ phương pháp HPLC 57 Bảng 3.13: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp HPLC 58 Bảng 3.14: Các thành phần công thức NNT ADC 62 Bảng 3.15: Các biến độc lập 63 Bảng 3.16: Các biến phụ thuộc 64 Bảng 3.17: Thiết kế thí nghiệm bào chế NNT kỹ thuật siêu âm 65 Bảng 3.18: Ảnh hưởng thời gian siêu âm tới số tiêu chất lượng chế phẩm nano nhũ tương bào chế theo CT 16 (n = 3) 66 Bảng 3.19: Phần trăm giải phóng DC, độ bền, KTG TB, zeta PdI NNT ADC 67 Bảng 3.20: Kết luyện mạng neuron nhận tạo FormRules 2.0 68 PHỤ LỤC7: PHIẾU KIỂM NGHIỆM (MỤC 3.4) PHỤ LỤC 8: TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC (MỤC 3.4) (Dung diet dem phosphat doa tan 2,36 g dinatri hydrophosphat 0'1a2HP04 12H20) mr6'c vva di'.1 1000 ml E>iu chlrih pH t&i 2,5 b!ing acid phosphoric dc (I-l;P04) n€u d.n.) - T6c d9 dong: J mL/phCJt - Th6 tich tiem: 20 µL - Detector: 276 11111 2.4.3 Ti&n hanh: Dung dich chuin: Can chinh xac khoang 25 mg diclofena.c natti chun vao binb dinh mt'.rc dung tich 25 ml Hoa tan bang methanol (TT), them vira dt'1 on va::h Hut chinh xac 1,0 ml dung dich tren vao blnh dinh mtl'c dung tich 25 ml them methanol (TT) v1ra dt1 d€n vach d duO'c dung djch chuin c6 nbng d() khoang 40 µg/rnL Uic du - Dul1g djch thti: Hut chinh xac 1,0 ml ch@ phfrm cho vao birth dinh muc dung tich 25 ml, themmethanol (TT) vira dudn vch Lc du LQc dung djch chun va thu qua mang J9c 0,45µm - Kim tra kha nllng thich hgp cua h th6ng siic kY· Tifo hanh sc k)' d6i vo·i dung djch chun, di) Jch chu n (Uong a6i Cua cac dtn tfch pie chinJ1tLr Jiin tiem lp l!li khong du9c 16n hon 2,0 % - Tien hanh sc k)·ln Jm;ti v&i dung dich chuk va dung ciich thlr - Tinh nbng d9 diclofenac acid, C14H11Cl2N02, mot ch phfim dva vao din tich pie thu diJQ'C tren SC ky d6 cua dung djch chufuJ, dung djch thtr Va ham ]vQTig := c< C1 H10ChNNa02 diclofenac natri chui\.n Cong th1i'c tfnh Nang d(> diclofenac acid, C 14I-I 1p2N02trong chphm dugc tinh theo cong thuc sau: Trong d6: • C1: Nbng di) diclofcnac acid, C14Il11Cl2N02trong ch€ pham (mg/mL) • me: KJ16i luqng C1Ji10Cl2NNa02 diclofenac nat ri chuĐn can ban dflu (mg) ã S,: Din tich pie chinh cua dung dich thir • S0 :Din tich pie chinh cua dung djch chuh • s6 chuyn d6i kh6i lvQ'Ilg diclofenac natri (C1.HwCliNNa02) diclofenac acid, C ,4H,1Cl2N02 0,9309: H¢ ) I Philn tram diclofenac acid C14H 11Cl2N02cht:ra mi'lu nhli wong nano OU\YC tinh theo cong thuc: H = -·c100 Trong c16: Co • Ct:N6ng Dialysis Membrane (hang Spectrum Laboratories) 12- 14 kD _ Di9n tich b m t mang khuch tan :0,785 cm Moi trniYng khuch tan: dung dich clm phosphat pH 5,8 (Dung dich d m phosphat: Hoa tan 1,19 g dinatri hydrophosphat dihydrnt (TT) va 8,25 g kali dihydro phosphat (TT) nude vt'ra dti l000 mL.) Th€: tich m6i truang khu ch tan: m L Nhi t d(> m 6i truong khu ch tan: 34,0 ± 0,5°C Tbc etc) khu§y:400 vong/phl'.11 - Lin;mg m u nhli tuong nano c1em thtr : l mL );:;> l y m&u: - Lh mfiu gio, m6i gio l y mfiu !An, m6i li'in I mL va ct6ng thm b6 sung mL m oi tnro·ng khu ch tan m6i Luqng d m7c chit giai ph6ng t;;ii theri di m giiY, gio, gio, gier dugc xk c1!nh biing phuang phap siic ky long hi u nang cao nhu mo ta & m\1C 2.4 Mu l y xong c1u9c tiem th ng vao h th 6ng siic ky Cacll tinh % didojenac acid, CiJf nCLJVO:Jiiiii ph 6ng r gi cac tlri'J'i aiim N6ng de) diclofenac m6i twang khu ch tan t;;ii thai cli m thu t: Cc st = S · Cc X 0, 9309 c Trong d6: • C,:N6r:.g o(> diclolenac acid, C 1.fI1 1Cl2N02trong moi trn6ng k:hu€ch tan ti ihaidibrn thi'.r t (1g/mL ) • Cc: N6ng d(l dung dich diclofenac natri, C14H 1.)CliNNa0 chun (à,gimL) ã S,: Din tich pie cua mĐu thir ã Sc: DiÂn tich pie cua mfru chufrn • 0,9309: 1-Ie s6 chuyb obi kh6i lu911g diclofenac natri (C 14HIOCl2NNa02) diclofenac acid, CMH1 1Cl2N02 T6ng h.rc;mg diclofenac acid, C 1ll1 p2N02da giai ph6ng tiJ nhu nrang nano t?i thai di m th(r t: t-1 Qt = V.Ct +v.L: Ci i=l Trong 06: • Q1: T6ng lLrc;mg diclofenac acid, C1lllJC12N02da giai ph6ng t?i thoi dim thCr t (µg) • V: Th tich moi tnrng khuech tan (mL) • v: Th tich mlli ln IA.y m n tht'r (mL) • C1: N6ng d(> diclofenac acid, C14H11Cl2N02trong moi tru6ng khuech tan t?i thOi di m thl'.r t (µg/mL) Phdn tram diclofenac acid, C14H 11Cl2N02da giai ph6ng tu nhii tmmg nano ti;ii thO-i dim thU t: Trong d6: • X1: Phn tram diclofenac acid, C14H11Cl2N02giai ph6ng t?i thOi di m thu t (%) • Q1: Kh6i luqng diclofenac acid, C14H11Cl2N02da giai ph6ng t?i thO-i dim thfr t (àg) ã M: Kh6i lu9ng diclofenac acid, C14H 11Cl2\102c6 ml ch phim (µg) 2.6.K{ch tlu.riJc tiiupltdn va thizeta Sfr dvng thil bi Zetasizer Nano ZS90 (Malvern Instrnments, Worcestershire UK) Anh sang tan x duqc 6' g6c 90° Mfiu du9c pha Joang 100 lAn biing mr&c d.t tru&c do, nhi t di) 25 ± 2°C 2.7 pH: Thir theo duqc dien Vi r am IV (phv Ive 6.2) 2.8 D vo khudn: ThiJ theo d uqc di€n Vi t am IV (Ph !l)c 13.7, Phuong phap mang Joe} Ill.DONG GOI - GHI NHAN - BAO QUAN - HN DUNG 3.1 Dong goi: LQ chfit deo IO ml 3.2 Ghi nhan: Jn ro rang, dung quy ch 3.3 Bao qu:in: Nai kho mat tr3nh anh sang 3.4.Hn dimg: 24 thang, k ru san xuit Ha N(Ji, KT th6ng nam 2015 mtuTRUONG NGUOI SON THAO NCS.flng Thi Hin CO QUAN THAM DJNH TIEU CHUAN (Vin Ki m nghim, nghien ct'.ru Duqc va TTB y t@ QD) Nguiri thm djnh Da th m dinh de tieu chi:tinh ch§t, th tich, dinh tinh, dinh luqng, pH va d() VO khuAn · 1flllL TO f\11NH HUNG ThS Nguyn TrQng Du·cmg ThS Nguyn Duy Chi PHỤ LỤC 9: NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC (MỤC 3.5) Bảng PL 9.1 : Kết đánh giá độ ổn định nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac mẻ 001 Giới hạn TT tháng Đạt Đạt Đạt tháng Đạt Đạt tháng Đạt tháng Định Định tính lượng (%) % DC GP giờ KTG TB (nm) PdI Thế zeta (mV) Độ nhớt (cP) pH Độ vơ % NT khuẩn hố 101,0 8,0 12,7 20,4 134,7 0,267 -45,5 4,6 6,99 Đạt 97,9 Đạt 100,4 8,1 12,9 20,5 137,5 0,269 -44,1 4,8 6,92 Đạt 97,1 Đạt Đạt 99,7 8,3 13,0 20,6 140,2 0,271 -42,3 4,9 6,85 Đạt 96,4 Đạt Đạt Đạt 99,1 8,4 13,2 20,8 143,1 0,274 -40,4 5,0 6,80 Đạt 95,7 tháng Đạt Đạt Đạt 101,0 8,0 12,7 20,4 134,7 0,267 -45,5 4,6 6,99 Đạt 97,9 tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 8,2 12,9 20,6 138,2 0,270 -43,3 4,8 6,93 Đạt 97,1 tháng Đạt Đạt Đạt 99,2 8,3 13,1 20,8 141,8 0,273 -41,5 4,9 6,87 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,3 8,5 13,3 21,0 145,5 0,276 -39,2 5,1 6,81 Đạt 95,4 tháng Đạt Đạt Đạt 101,0 8,0 12,7 20,4 134,7 0,267 -45,5 4,6 6,99 Đạt 97,9 tháng Đạt Đạt Đạt 99,9 8,3 13,0 20,7 142,2 0,271 -42,8 4,9 6,91 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 98,8 8,5 13,2 20,9 147,3 0,274 -40,1 5,1 6,81 Đạt 94,9 tháng Đạt Đạt Đạt 97,4 8,8 13,4 21,2 153,7 0,279 -37,6 5,3 6,74 Đạt 93,9 o 40±2 C/75±5% ĐK thực o 5±3 C ĐK CTCL Tính chất bảo quản Th điểm Bảng PL 9.2 : Kết đánh giá độ ổn định nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac mẻ 002 Giới hạn TT tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 7,8 12,8 19,6 tháng Đạt Đạt Đạt 99,5 7,9 12,9 tháng Đạt Đạt Đạt 98,9 8,0 tháng Đạt Đạt Đạt 98,2 tháng Đạt Đạt Đạt tháng Đạt Đạt tháng Đạt tháng Độ nhớt (cP) pH 130,6 0,260 -46,0 4,5 7,23 Đạt 96,4 19,7 132,7 0,263 -44,1 4,7 7,15 Đạt 95,7 13,0 19,8 135,2 0,266 -42,1 4,8 7,09 Đạt 95,2 8,1 13,1 20,0 137,6 0,269 -40,4 4,9 7,03 Đạt 94,5 100,1 7,8 12,8 19,6 130,6 0,260 -46,0 4,5 7,23 Đạt 96,4 Đạt 99,4 7,9 13,0 19,7 133,5 0,263 -44,3 4,7 7,14 Đạt 95,7 Đạt Đạt 98,4 8,1 13,1 19,9 137,2 0,266 -42,0 4,8 7,05 Đạt 94,7 Đạt Đạt Đạt 97,5 8,3 13,3 20,1 140,3 0,270 -40,2 5,0 6,97 Đạt 93,9 tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 7,8 12,8 19,6 130,6 0,260 -46,0 4,5 7,23 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 98,9 8,0 13,1 19,8 136,2 0,265 -43,0 4,7 7,15 Đạt 95,3 tháng Đạt Đạt Đạt 97,5 8,2 13,3 20,0 142,2 0,268 -40,6 5,0 7,06 Đạt 94,3 tháng Đạt Đạt Đạt 96,4 8,4 13,6 20,3 148,9 0,273 -37,8 5,2 6,99 Đạt 93,0 o 40±2 C/75±5% ĐK thực o 5±3 C ĐK CTCL Tính bảo chất quản Th điểm Định Định % DC GP KTG tính lượng TB giờ (%) (nm) PdI Thế zeta (mV) Độ vô % NT khuẩn hoá Bảng PL 9.3 : Kết đánh giá độ ổn định nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac mẻ 003 Giới hạn TT tháng Đạt Đạt Đạt tháng Đạt Đạt tháng Đạt tháng Định Định tính lượng (%) % DC GP giờ KTG TB (nm) PdI Thế zeta (mV) Độ nhớt (cP) pH Độ vô % NT khuẩn hoá 99,3 7,7 12,9 19,9 126,5 0,269 -46,9 4,7 7,15 Đạt 96,3 Đạt 98,7 7,8 13,0 20,1 128,7 0,272 -45,0 4,8 7,07 Đạt 95,8 Đạt Đạt 98,1 7,9 13,1 20,2 131,1 0,274 -43,3 5,0 7,02 Đạt 95,1 Đạt Đạt Đạt 97,5 8,0 13,3 20,3 133,7 0,276 -41,7 5,1 6,95 Đạt 94,5 tháng Đạt Đạt Đạt 99,3 7,7 12,9 19,9 126,5 0,269 -46,9 4,7 7,15 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,5 7,9 13,0 20,1 129,2 0,272 -44,5 4,9 7,07 Đạt 95,6 tháng Đạt Đạt Đạt 97,7 8,1 13,2 20,3 132,9 0,275 -42,6 5,0 7,01 Đạt 94,9 tháng Đạt Đạt Đạt 97,0 8,2 13,4 20,5 135,4 0,278 -40,3 5,2 6,95 Đạt 94,0 tháng Đạt Đạt Đạt 99,3 7,7 12,9 19,9 126,5 0,269 -46,9 4,7 7,15 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,0 8,0 13,1 20,2 133,1 0,274 -44,2 4,9 7,05 Đạt 95,0 tháng Đạt Đạt Đạt 96,6 8,2 13,3 20,4 139,3 0,278 -41,5 5,2 6,97 Đạt 93,5 tháng Đạt Đạt Đạt 95,6 8,5 13,5 20,7 146,8 0,282 -39,2 5,5 6,91 Đạt 92,3 o 40±2 C/75±5% ĐK thực o 5±3 C ĐK CTCL Tính bảo chất quản Th điểm PL 10: CÁC LUẬT NHÂN QUẢ (Mục 3.2.1 3.2.3) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y1 X6(2)X5(2)X2(2) Mô hình con: Nếu X6 thấp X5 thấp X2 thấp Nếu X6 thấp X5 thấp X2 cao Nếu X6 thấp X5 cao X2 thấp Nếu X6 thấp X5 cao X2 cao Nếu X6 cao X5 thấp X2 thấp Nếu X6 cao X5 thấp X2 cao Nếu X6 cao X5 cao X2 thấp Nếu X6 cao X5 cao X2cao Y1 thấp (0,07) Y1 thấp (0,46) Y1 thấp (0,67) Y1 thấp (0,53) Y1 thấp (0,46) Y1 thấp (0,74) Y1 thấp (0,73) Y1 thấp (0,59) cao (0,93) cao (0,54) cao (0,33) cao (0,47) cao (0,54) cao (0,26) cao (0,27) cao (0,41) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y2 X5(2) Mơ hình con: Nếu X5 thấp Y2 thấp (0,33) Nếu X5 cao Y2 thấp (0,55) cao (0,67) cao (0,45) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y3 X5(3) Mơ hình con: Nếu X5 thấp Y3 thấp (0,38) Nếu X5 trung bình Y3 thấp (0,19) Nếu X5 cao Y3 thấp (0,56) cao (0,62) cao (0,81) cao (0,44) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y4 X6(2) Mơ hình con: Nếu X6 thấp Y4 thấp (0,32) Nếu X6 cao Y4 thấp (0,54) cao (0,68) cao (0,46) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y5 X6(3) Mơ hình con: Nếu X6 thấp Y5 thấp (0,36) cao (0,64) Nếu X6 trung bình Nếu X6 cao Y5 thấp (0,18) Y5 thấp (0,57) cao (0,82) cao (0,43) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y6 X6 (3) Mơ hình con: Nếu X6 thấp Y6 thấp (0,27) Nếu X6 trung bình Y6 thấp (0,10) Nếu X6 cao Y6 thấp (0,53) cao (0,73) cao (0,90) cao (0,47) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y7 X2(2)X4(2)X9(2)+X7(3) Mơ hình con: Nếu X2 thấp X4 thấp X9 thấp Y7 thấp (0,22) Nếu X2 thấp X4 thấp X9 cao Y7 thấp (0,47) Nếu X2 thấp X4cao X9 thấp Y7 thấp (0,58) Nếu X2 thấp X4 cao X9 cao Y7 thấp (0,44) Nếu X2 cao X4 thấp X9 thấp Y7 thấp (0,97) Nếu X2 cao X4 thấp X9 cao Y7 thấp (1.00) Nếu X2 cao X4 cao X9 thấp Y7 thấp (0,72) Nếu X2 cao X4 cao X9 cao Mơ hình con: Nếu X7 = Phosphat Nếu X7 = Citrat Nếu X7 = Borat Y7 thấp (0,58) cao (0,78) cao (0,53) cao (0,42) cao (0,56) cao (0,03) cao (0,00) cao (0,28) cao (0,42) Y7 thấp (0,80) Y7 thấp (0,68) Y7 thấp (0,15) cao (0,20) cao (0,32) cao (0,85) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y8 X2(2)X7(3) Mơ hình con: Nếu X2 thấp X7 = Phosphat Y8 thấp (0,70) Nếu X2 thấp X7 = Citrat Y8 thấp (0,86) Nếu X2 thấp X7 = Borat Y8 thấp (0,80) Nếu X2 cao X7 = Phosphat Y8 thấp (0,55) Nếu X2 cao X7 = Citrat Y8 thấp (0,32) Nếu X2 cao X7 = Borat Y8 thấp (0,75) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y9 X2(2)X7(3)X6(2)+X9(3) cao (0,30) cao (0,14) cao (0,20) cao (0,45) cao (0,68) cao (0,25) Mơ hình con: Nếu X2 thấp X7 = Phosphat X6 thấp Nếu X2 thấp X7 = Phosphat X6 cao Nếu X2 thấp X7 = Citrat X6 thấp Nếu X2 thấp X7 = Citrat X6 cao Nếu X2 thấp X7 = Borat X6 thấp Nếu X2 thấp X7 = Borat X6 cao Nếu X2 cao X7 = Phosphat X6 thấp Nếu X2 cao X7 = Phosphat X6 cao Nếu X2 cao X7 = Citrat X6 thấp Nếu X2 cao X7 = Citrat X6 cao Nếu X2 cao X7= Borat X6 thấp Nếu X2 cao X7 = Borat X6 cao Mơ hình con: Nếu X9 thấp Nếu X9 trung bình Nếu X9 cao thì thì thì thì thì thì Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 Y9 thấp thấp thấp thấp thấp thấp thấp thấp thấp thấp thấp thấp (0,14) (0,31) (0,25) (0,37) (0,58) (0,79) (0,34) (0,13) (0,02) (0,05) (0,00) (0,49) Y9 thấp (0,18) Y9 thấp (0,17) Y9 thấp (0,38) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y10 X2(2) Mơ hình con: Nếu X2 thấp Y10 thấp (0,80) Nếu X2 cao Y10 thấp (0,58) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z1 X4(2)X6(2)X5(2) Mơ hình con: Nếu X4 thấp X6 thấp X5 thấp Z1 thấp (0,13) Nếu X4 thấp X6 thấp X5 cao Z1 thấp (0,46) Nếu X4 thấp X6 cao X5 thấp Z1 thấp (0,81) Nếu X4 thấp X6 cao X5 cao Z1 thấp (0,55) Nếu X4 cao X6 thấp X5 thấp Z1 thấp (0,95) Nếu X4 cao X6 thấp X5 cao Z1 thấp (0,88) Nếu X4 cao X6 cao X5 thấp Z1 thấp (0,68) Nếu X4 cao X6 cao X5 cao Z1 thấp (0,20) hoặc hoặc hoặc hoặc hoặc hoặc cao cao cao cao cao cao cao cao cao cao cao cao (0,86) (0,69) (0,75) (0,63) (0,42) (0,21) (0,66) (0,87) (0,98) (0,95) (1.00) (0,51) cao (0,82) cao (0,83) cao (0,62) cao (0,20) cao (0,42) cao (0,87) cao (0,54) cao (0,19) cao (0,45) cao (0,05) cao (0,12) cao (0,32) cao (0,80) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z2 X6(3)X7(2)+X5(3)X2(3)+X8(2)X7(3)X3(2) Mơ hình con: Nếu X6 thấp X7 thấp Nếu X6 thấp X7 cao Nếu X6 trung bình X7 thấp Nếu X6 trung bình X7 cao Nếu X6 cao X7 thấp Nếu X6 cao X7 cao Mơ hình con: Z2 thấp (0,00) Z2 thấp (0,54) Z2 thấp (0,78) Z2 thấp (0,40) Z2 thấp (0,45) Z2 thấp (0,58) cao (1.00) cao (0,46) cao (0,22) cao (0,60) cao (0,55) cao (0,42) Nếu X5 thấp X2 = IPM:Migl (1:1) Nếu X5 thấp X2 = Migl Nếu X5 thấp X2 = IPM Nếu X5 trung bình X2 = IPM:Migl (1:1) Nếu X5 trung bình X2 = Migl Nếu X5 trung bình X2 = IPM Nếu X5 cao X2 = IPM:Migl (1:1) Nếu X5 cao X2 = Migl Nếu X5 cao X2 = IPM Z2thấp (0,98) Z2 thấp (0,97) Z2 thấp (0,82) Z2 thấp (0,70) Z2 thấp (0,69) Z2 thấp (0,76) Z2 thấp (0,79) Z2 thấp (0,71) Z2 thấp (0,69) cao (0,02) cao (0,03) cao (0,18) cao (0,30) cao (0,31) cao (0,24) cao (0,21) cao (0,29) cao (0,31) Mơ hình con: Nếu X8 thấp X7 thấp X3 thấp Nếu X8 thấp X7 thấp X3 cao Nếu X8 thấp X7 trung bình X3 thấp Nếu X8 thấp X7 trung bình X3 cao Nếu X8 thấp X7 cao X3 thấp Nếu X8 thấp X7 cao X3 cao Nếu X8 cao X7 thấp X3 thấp Nếu X8 cao X7 thấp X3 cao Nếu X8 cao X7 trung bình X3 thấp Nếu X8 cao X7 trung bình X3 cao Nếu X8 cao X7 cao X3 thấp Nếu X8 cao X7 cao X3 cao Z2 thấp (0,71) Z2 thấp (0,56) Z2 thấp (0,64) Z2 thấp (0,72) Z2thấp (0,48) Z2 thấp (0,22) Z2 thấp (0,96) Z2 thấp (0,87) Z2 thấp (0,69) Z2 thấp (0,71) Z2 thấp (0,51) Z2 thấp (0,40) cao (0,29) cao (0,44) cao (0,36) cao (0,28) cao (0,52) cao (0,78) cao (0,04) cao (0,13) cao (0,31) cao (0,29) cao (0,49) cao (0,60) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z3 X6(3) Mơ hình con: Nếu X6 thấp Nếu X6 trung bình Nếu X6 cao Z3 thấp (0,29) Z3 thấp (0,73) Z3 thấp (0,89) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z4 X4(3)+X3(2)X5(2) Mơ hình con: Nếu X4 thấp Z4 thấp (0,41) Z4 thấp (0,39) Nếu X4 trung bình Z4 thấp (0,67) Nếu X4 cao Mơ hình con: Nếu X3 thấp X5 thấp Nếu X3 thấp X5 cao Nếu X3 cao X5 thấp Nếu X3 cao X5 cao Z4 thấp (0,39) Z4thấp (0,65) Z4 thấp (0,19) Z4 thấp (0,33) cao (0,71) cao (0,27) cao (0,11) cao (0,59) cao (0,61) cao (0,33) cao (0,61) cao (0,35) cao (0,81) cao (0,67) ... thiện sinh khả dụng diclofenac dùng cho mắt tiếp cận dạng bào chế thuốc theo công nghệ nano, đề tài: ? ?Nghiên cứu bào chế nano nhũ tương nhỏ mắt diclofenac bước đầu đánh giá sinh khả dụng chế phẩm? ??... Nhũ tương anion 1.3.3 Đánh giá sinh khả dụng nano nhũ tương mắt 1.3.3.1 Đánh giá sinh khả dụng in vitro Đánh giá sinh khả dụng in vitro nano nhũ tương thực thiết bị khác sử dụng màng giải phóng... mô bào chế 103 3.4 DỰ THẢO TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 105 3.5 ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT .106 3.6 KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH CỦA MẪU NANO