Phân lập và tuyển chọn vi khuẩn bifidobacteria ứng dụng trong sản xuất chế phẩm probiotics

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN HOÀNG TUẤN PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN VI KHUẨN BIFIDOBACTERIA ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTICS LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2017 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN HOÀNG TUẤN PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN VI KHUẨN BIFIDOBACTERIA ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTICS Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 60420107 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Đào Thị Lương PGS.TS Bùi Thị Việt Hà Hà Nội - 2017 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến TS Đào Thị Lương Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học - Đại học Quốc Gia Hà Nội, người trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực tập vừa qua Tôi xin gửi lời cảm ơn đến PGS.TS Bùi Thị Việt Hà - Chủ nhiệm môn Vi sinh - Khoa Sinh học - Trường ĐH Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc Gia Hà Nội, người bảo góp ý nhiệt tình giúp tơi hồn thành luận văn thạc sĩ Tôi xin chân thành cảm ơn PGS TS Dương Văn Hợp, cô anh chị, đặc biệt Ths Trần Thị Lệ Quyên KS Hà Thị Hằng, thuộc Bảo tàng giống chuẩn Vi sinh vật (VTCC) - Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học (IMBT) - Đại học Quốc Gia Hà Nội, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho trình thực tập Tơi xin tỏ lịng biết ơn thầy cô giáo môn Vi sinh, khoa Sinh học, Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc Gia Hà Nội cung cấp cho kiến thức quý báu, tạo tảng giúp hoàn thành luận văn thạc sĩ Cuối cùng, cho phép tơi gửi lời cảm ơn tới gia đình, người thân bạn bè bên cạnh động viên, ủng hộ giúp đỡ tơi suốt q trình thực tập vừa qua Xin chân thành cảm ơn !!! Hà Nội, ngày 20 tháng 11 năm 2017 Học viên Nguyễn Hoàng Tuấn CHỮ VIẾT TẮT VTCC Vietnam Type Culture Collection (Bảo tàng giống chuẩn vi sinh vật Việt Nam) GRAS Generally Recognized as Safe ( Một loại chứng nhận an toàn FDA) FAO Food and Agriculture Organization (Tổ chức Lương thực Nông nghiệp Liên Hiệp Quốc) WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế Thế giới) FISH Fluorescence In situ Hydridization (Lai chỗ phát huỳnh quang) F-6-PPK Fructose-6-Phosphate Phosphoketolase ATP Adenosine Triphosphat GI Tract Gastrointestinal Tract (Đường tiêu hóa) IBD Inflammatory Bowel Disease (Bệnh viêm ruột) HMO Human Milk Oligosaccharides MRS De Man Rogosa Sharpe CMC Carboxymethyl Cellulose OD Optical Density (Mật độ quang học) CFU Colony Forming Unit (Số lượng tế bào vi khuẩn) MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Định nghĩa probiotic 1.2 Tiêu chí lựa chọn chủng probiotic 1.3 Lợi ích probiotic 1.4 Bifidobacteria 1.4.1 Giới thiệu 1.4.2 Phân loại 1.4.2.1 Hình thái 1.4.2.2 Sinh học phân tử 1.4.3 Môi trường sống .9 1.4.4 Đặc điểm sinh lý sinh hóa 11 1.4.4.1 Sự trao đổi carbohydrate 11 1.4.4.2 Nhiệt độ pH sinh trưởng tối ưu 15 1.4.4.3 Độ nhạy cảm oxy .15 1.4.5 Bifidobacteria mang đặc tính probiotic 16 1.4.5.1 Giảm tiêu chảy 16 1.4.5.2 Làm giảm không dung nạp lactose 16 1.4.5.3 Ức chế Helicobacter pylori .17 1.4.5.4 Phòng ngừa bệnh viêm ruột 17 1.4.5.5 Giảm táo bón 17 1.4.5.6 Phòng ung thư đại trực tràng 17 1.4.6 Một số loài bifidobacteria thương mại hóa 18 1.4.6.1 Bifidobacterium adolescentis 18 1.4.6.2 Bifidobacterium animalis 18 1.4.6.3 Bifidobacterium bifidium 19 1.4.6.4 Bifidobacterium breve .20 1.4.6.5 Bifidobacterium longum 21 CHƯƠNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 22 2.1 Nguyên liệu 22 2.1.1 Chủng vi khuẩn 22 2.1.2 Hóa chất 22 2.2 Thiết bị 22 2.3 Môi trường 23 2.4 Phương pháp nghiên cứu 24 2.4.1 Phân lập 24 2.4.2 Phân loại sinh học phân tử 24 2.4.3 Nghiên cứu đặc tính probiotic tuyển chọn chủng 29 2.4.3.1 Khả sinh enzyme ngoại bào 29 2.4.3.2 Khả sinh trưởng 30 2.4.3.3 Khả sinh axít hữu 30 2.4.3.4 Khả chịu muối mật 31 2.4.3.5 Khả kháng vi khuẩn gây bệnh đường ruột 31 2.4.3.6 Khả tồn điều kiện đường tiêu hóa dịch dày ruột mơ 31 2.4.3.7 Khả chịu kháng sinh .32 2.4.4 Lựa chọn điều kiện ni cấy thích hợp cho chủng Bifidobacterium 32 2.4.4.1 Lựa chọn mơi trường ni thích hợp 32 2.4.4.2 Lựa chọn nhiệt độ ni thích hợp 32 2.4.4.3 Lựa chọn pH ni thích hợp 33 2.4.4.4 Lựa chọn nguồn cacbon ni thích hợp 33 2.4.4.5 Lựa chọn nguồn Nitơ ni thích hợp 33 2.4.4.6 Lựa chọn thời gian ni thích hợp 33 2.4.5 Lựa chọn điều kiện lên men thích hợp cho hai chủng Bifidobacterium thiết bị lên men lít 36 2.4.5.1 Chế độ khuấy đảo 36 2.4.5.2 Tỷ lệ giống cấy 36 2.4.5.3 Lựa chọn thời gian ni thích hợp 36 2.4.6 Bước đầu nghiên cứu số loại chất mang thích hợp cho q trình đông khô chủng Bifidobacterium 36 CHƯƠNG - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .37 3.1 Phân lập phân loại 37 3.1.1 Phân lập quan sát hình thái 37 3.1.2 Tách DNA genome xác định gen F-6-PPK 38 3.1.3 Phân loại dưa vào trinh tư rDNA 16S 39 3.2 Nghiên cứu đặc tính probiotic lựa chọn chủng Bifidobacterium 42 3.2.1 Khả sinh enzyme ngoại bào 42 3.2.2 Khả sinh trưởng sinh axít hữu 44 3.2.3 Khả chịu muối mật 46 3.2.4 Khả kháng vi khuẩn gây bệnh đường ruột 47 3.2.5 Khả tồn điều kiện đường tiêu hóa dịch dày ruột 49 3.2.6 Khả chịu kháng sinh 51 3.3 Lựa chọn điều kiện nuôi cấy thích hợp cho khả sinh trưởng hai chủng Bifidobacterium 53 3.3.1 Lựa chọn môi trường nuôi cấy thích hợp 53 3.3.2 Lựa chọn nhiệt độ ni thích hợp 54 3.3.3 Lựa chọn pH ni thích hợp .55 3.3.4 Lựa chọn nguồn cacbon thích hợp 56 3.3.5 Lựa chọn nguồn nitơ thích hợp 57 3.3.6 Lựa chọn thời gian nuôi thích hợp .58 3.4 Lựa chọn điều kiện lên men thích hợp cho hai chủng Bifidobacterium thiết bị lên men lít 59 3.4.1 Lựa chọn tốc độ khuấy thích hợp 59 3.4.2 Lựa chọn tỷ lệ giống cấy thích hợp .61 3.4.3 Lựa chọn thời gian ni thích hợp .62 3.5 Lựa chọn chất mang thích hợp cho hai chủng Bifidobacterium .63 KẾT LUẬN 64 KIẾN NGHỊ 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 PHỤ LỤC 75 DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Môi trường sống loài thuộc chi Bifidobacterium 10 Bảng 1.2: Khả sinh trưởng B longum NCC2705 23 loại carbohydrate .14 Bảng 3.1: Danh sach cac chung phân lâp nghi ngờ thuôc chi Bifidobacterium 37 Bảng 3.2: Độ tương đồng trình tự rDNA 16S chủng vi khuẩn phân lập với chủng chuẩn GenBank 41 Bảng 3.3: Khả sinh enzyme 20 chủng vi khuẩn Bifidobacterium 43 Bảng 3.4: Khả sinh trưởng sinh axit hữu 20 chủng vi khuẩn 45 Bảng 3.5: Khả chịu muối mật 20 chủng vi khuẩn 46 Bảng 3.6: Khả kháng vi sinh vật kiểm định 20 chủng vi khuẩn 48 Bảng 3.7: Khả tồn chủng vi khuẩn điều kiện đường tiêu hóa dịch dày ruột mô 50 Bảng 3.8: Khả chịu kháng sinh chủng vi khuẩn Bifidobacterium 52 Bảng 3.9: Khả tồn chủng nghiên cứu loại chất mang 63 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Các đường chuyển hóa Fructose 6-Phosphat 12 Hình 1.2: Sơ đồ khác q trình chuyển hóa đường bifidobacteria theo Meulen cộng .13 Hình 1.3: Hình dạng tế bào đặc trưng Bifidobacterium Hình 1.4: Cây phát sinh lồi thuộc chi Bifidobacterium dựa trình tự rDNA 16S .8 Hình 1.5: Bifidobacterium adolescentis 18 Hình 1.6: Bifidobacterium animalis 19 Hình 1.7: Bifidobacterium bifidium 20 Hình 1.8: Bifidobacterium breve 20 Hình 1.9: Bifidobacterium longum 21 Hình 3.1: Đoan gen F-6-PPK (591 bp) cac chung vi khuân phân lâp đươc khuyếch đai vơi căp môi đăc hiêu UR1 va UL2 39 Hình 3.2: Vị trí phân loại chủng Bifidobacterium phân lập lồi có quan hệ họ hàng gần dựa vào trình tự rDNA 16S 40 Hình 3.3: Lựa chọn mơi trường ni thích hợp cho chủng Bifidobacterium 54 Hình 3.4: Lựa chọn nhiệt độ ni thích hợp cho chủng Bifidobacterium 54 Hình 3.5: Lựa chọn pH ni thích hợp cho chủng Bifidobacterium 55 Hình 3.6: Lựa chọn nguồn cacbon thích hợp cho chủng Bifidobacterium 56 Hình 3.7: Lựa chọn nguồn nitơ thích hợp cho chủng Bifidobacterium 57 Hình 3.8: Lựa chọn thời gian ni thích hợp cho chủng Bf 3.1 58 Hình 3.9: Lựa chọn thời gian ni thích hợp cho chủng Bf 9.2 58 Hình 3.10: Lựa chọn tốc độ khuấy thích hợp cho chủng Bf 3.1 60 Hình 3.11: Lựa chọn tốc độ khuấy thích hợp cho chủng Bf 9.2 60 Hình 3.12: Lựa chọn tỷ lệ giống cấy thích hợp cho chủng Bifidobacterium 61 Hình 3.13: Lựa chọn thời gian ni thích hợp cho chủng Bf 3.1 quy mơ lít .62 Hình 3.14: Lựa chọn thời gian ni thích hợp cho chủng Bf 9.2 quy mơ lít .62 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 2.1 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAAG CTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCCA TGCTCCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATGATC GCATGTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGTCCTATCA GCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAGA GGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCA GCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTG AGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTCGG GTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTA ATACGTAGGGCGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGC GGCTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCGGG TACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTG GAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCG TCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTG GTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGCACGTTCCACGTGTTC CGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCT AAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATTA ATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGACGCC AGAGATGGCGTTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCA GCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCCC GTGTTGCCAGCACGTTATGGTGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACTCG GAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCAC GCATGCTACAATGGCCGGTACAGCGGGATGCGACATGGCGACATGGAGCGGAT CCCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGGAGCCTGCAACCCGGCTCCGTGAAGG CGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGTGAATGCGTTCCCGGGC CTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGTGG CCTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGACTAA GTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTG 77 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 3.1 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAAG CTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCC CATGCTCCGGAATGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATGAT CGCATGTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGTCCTATC AGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAG AGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGC AGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGT GAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTCG GGTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGT AATACGTAGGGCGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGG CGGCTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCGG GTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGT GGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCC GTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCT GGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGCACGTTCCACGTGTT CCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGC TAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATT AATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGACGC CAGAGATGGCGTTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTC AGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCC CGTGTTGCCAGCACGTTATGGTGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACTC GGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCAC GCATGCTACAATGGCCGGTACAGCGGGATGCGACATGGCGACATGGAGCGGAT CCCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGGAGCCTGCAACCCGGCTCCGTGAAGG CGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGTGAATGCGTTCCCGGGC CTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGTGG CCTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGACTAA GTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTG 78 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 3.2 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCCTGGCG GCCTGGCTGCCGGGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCAACCT GCCCTGTGCACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATACCGGATGCTCCGC CCCACCGCATGGTGGGGTGGGAAATGCTTTTTGCGGCATGGGATGGGGTCGCGT CCTATCAGCTTGTTGGCGGGGTGATGGCCCACCAAGGCGTTGACGGGTAGCCGG CCTGAGAGGGTGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACG GGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACG CCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAG GCACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTAC GTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGG CGTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCCTAA CGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGA ATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGA AGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGA ACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGG GGCCCTTTCCACGGGTCCCGGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGG AGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCG GCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGAC ATGTGCCGGATCGCCGTGGAGACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGTG GTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACG AGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGCGGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGGA CCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTT ACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGGTGCGACACGG TGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAAC TCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGT GAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGTAG CACCCGAAGCCGGTGGCCCGACCCTTGTGGGGGGAGCCGTCTAAGGTGAGACTC GTGATTGGGACT 79 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 4.1 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAAG CTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCC CATACACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCAGTTGA TCGCATGGTCTTCTGGGAAAGCTTTCGCGGTATGGGATGGGGTCGCGTCCTATC AGCTTGACGGCGGGGTAACGGCCCACCGTGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGA GAGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGG CAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCG TGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTATCGGGGAGCAAGCGAGA GTGAGTTTACCCGTTGAATAAGCACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTA ATACGTAGGGTGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGC GGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCCGCGCCGGG TACGGGCGGGCTTGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTG GAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCG TTACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTG GTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGGGGCCCGTTCACGGGTTCC GTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTA AAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATTAA TTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGGTCGTA GAGATACGGCTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCAG CTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCCCG TGTTGCCAGCGGATTATGCCGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACTCGG AGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCACG CATGCTACAATGGCCGGTACAACGGGATGCGACGCGCCGACGCGGAGCGGATC CCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGGC GGAGTCGCTAGTAATCGCGAATCAGCAACGTCGCGGTGAATGCGTTCCCGGGCC TTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGTGGC CTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGGACT 80 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 4.2 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAAG CTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCC CATGCTCCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATGA TCGCATTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGTCCTATC AGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAG AGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGC AGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGT GAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTCG GGTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGT AATACGTAGGGCGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGG CGGCTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCGG GTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGT GGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCC GTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCT GGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGCACGTTCCACGTGTT CCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGC TAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATT AATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGACGC CAGAGATGGCGTTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTC AGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCC CGTGTTGCCAGCACGTTATGGTGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACTC GGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCA CGCATGCTACAATGGCCGTACAGCGGGATGCGACATGGCGACATGGAGCGGAT CCCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGGAGCCTGCAACCCGGCTCCGTGAAGG CGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGTGAATGCGTTCCCGGGC CTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGTGG CCTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGACTAA GTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAGGTGCGGCTG 81 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 4.3 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCCTGGCG GCCTGGCTGCCGGGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCAACCT GCCCTGTGCACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATACCGGATGCTCCGC CCCACCGCATGGTGGGGTGGGAAATGCTTTTTGCGGCATGGGATGGGGTCGCGT CCTATCAGCTTGTTGGCGGGGTGATGGCCCACCAAGGCGTTGACGGGTAGCCGG CCTGAGAGGGTGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACG GGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACG CCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAG GCACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTAC GTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGG CGTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCCTAA CGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGA ATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGA AGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGA ACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGG GGCCCTTTCCACGGGTCCCGGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGG AGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCG GCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGAC ATGTGCCGGATCGCCGTGGAGACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGTG GTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACG AGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGCGGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGGA CCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTT ACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGGTGCGACACGG TGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAAC TCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGT GAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGTAG CACCCGAAGCCGGTGGCCCGACCCTTGTGGGGGGAGCCGTCTAAGGTGAGACTC GTGATTGGGACT 82 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf 5.1 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCCTGGCG GCCTGGCTGCCGGGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCAACCT GCCCTGTGCACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATACCGGATGCTCCGC CCCACCGCATGGTGGGGTGGGAAATGCTTTTTGCGGCATGGGATGGGGTCGCGT CCTATCAGCTTGTTGGCGGGGTGATGGCCCACCAAGGCGTTGACGGGTAGCCGG CCTGAGAGGTGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGG GAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGC CGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAGG CACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTACG TGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGGC GTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCCTAAC GGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAA TTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGAA GGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAA CAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGGG GCCCTTTCCACGGGTCCCGTGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGG AGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCG GCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGAC ATGTGCCGGATCGCCGTGGAGACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGTG GTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACG AGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGGGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGGAC CGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTT ACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGGTGCGACACGG TGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAAC TCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGT GAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGTAG CACCCGAAGCCGGTGGCCCGACCCTTGTGGGGGGAGCCGTCTAAGGTGAGACTC GTGATTGGGACT 83 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Chủng Bf5.2 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAGCT TGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCCCA TACACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCAGTTGATC GCATGGTCTTCTGGGAAAGCTTTCGCGGTATGGGATGGGGTCGCGTCCTATCAG CTTGACGGCGGGGTAACGGCCCACCGTGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAGA GGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCC AGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTG ATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTAT CGGGGAGCAAGCGAGAGTGAGTTTACCCGTTGAATAAGCACCGGCTAACTACG TGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGC GTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAAC GGTGGATCCGCGCCGGGTACGGGCGGGCTTGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAA TTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGAA GGCAGGTCTCTGGGCCGTTACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAA CAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGGG GCCCGTTCCACGGGTTCCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGG AGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCG GCGGAGCATGCGGATTATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACA TGTTCCCGACGGTCGTAGAGATACGGCTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGG TGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGA GCGCAACCCTCGCCCCGTGTTGCCAGCGGATTATGCCGGGAACTCACGGGGGAC CGCCGGGGTTAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTT ACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGGGATGCGACGCG GCGACGCGGAGCGGATCCCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAA CTCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGAATCAGCAACGTCGCGGT GAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAG CACCCGAAGCCGGTGGCCTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGC TCGTGATTGGGGACT 84 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 10 Bf 6.1 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAAG CTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCC CATGCTCCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATGA TCGCATGTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGTCCTAT CAGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGA GAGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGG CAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCG TGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTC GGGTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGG TAATACGTAGGGCGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAG GCGGCTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCG GGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGG TGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGC CGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCC TGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGCACGTTCCACGTGT TCCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGG CTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGAT TAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGACG CCAGAGATGGCGTTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGT CAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCC CCGTGTTGCCAGCACGTTATGGTGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACT CGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTC ACGCATGCTACAATGGCCGGTACAGCGGGATGCGACATGGCGACATGGAGCGG ATCCCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGGAGCCTGCAACCCGGCTCCGTGAA GGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGTGAATGCGTTCCCGG GCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGT GGCCTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGACT 85 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hồng Tuấn – K24 Bộ mơn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 11 Chủng Bf 6.2 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAAG CTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCC CATACACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCAGTTGA TCGCATGGTCTTCTGGGAAAGCTTTCGCGGTATGGGATGGGGTCGCGTCCTATC AGCTTGACGGCGGGGTAACGGCCCACCGTGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGA GAGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGG CAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCG TGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTATCGGGGAGCAAGCGAGA GTGAGTTTACCCGTTGAATAAGCACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTA ATACGTAGGGTGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGC GGTTCGTCGCGTCCGGTGTAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCCGCGCCGGGT ACGGGCGGGCTTGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTGG AATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCGT TACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGG TAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGGGGCCCGTTCCACGGGTTCC GTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTA AAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATTAA TTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGGTCGTA GAGATACGGCTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCAG CTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCCCG TGTTGCCAGCGGATTATGCCGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACTCGG AGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCACG CATGCTACAATGGCCGGTACAACGGGATGCGACGCGGCGACGCGGAGCGGATC CCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGGC GGAGTCGCTAGTAATCGCGAATCAGCAACGTCGCGGTGAATGCGTTCCCGGGCC TTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGTGGC CTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGGACT 86 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hoàng Tuấn – K24 Bộ môn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 12 Chủng Bf 7.3 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCCTGGCG GCCTGGCTGCCGGGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCAACCT GCCCTGTGCACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATACCGGATGCTCCGC CCCACCGCATGGTGGGGTGGGAAATGCTTTTTGCGGCATGGGATGGGGTCGCGT CCTATCAGCTTGTTGGCGGGGTGATGGCCCACCAAGGCGTTGACGGGTAGCCGG CCTGAGAGGTGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGG GAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGC CGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAGG CACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTACG TGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGGC GTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCCTAAC GGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAA TTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGAA GGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAA CAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGGG GCCCTTTCCACGGGTCCCGTGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGG AGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCG GCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGAC ATGTGCCGGATCGCCGTGGAGACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGTG GTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACG AGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGGGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGGAC CGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTT ACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGGTGCGACACGG TGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAAC TCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCGGT GAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGTAG CACCCGAAGCCGGTGGCCCGACCCTTGTGGGGGGAGCCGTCTAAGGTGAGACTC GTGATTGGGACT 87 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hoàng Tuấn – K24 Bộ môn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 13 Chủng Bf 7.4 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCATCAGCT TGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCCCA TACACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCAGTTGATC GCATGGTCTTCTGGGAAAGCTTTCGCGGTATGGGATGGGGTCGCGTCCTATCAG CTTGACGGCGGGGTAACGGCCCACCGTGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAGA GGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCA GCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTG AGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTATCGGGGAGCAAGCGAGAGT GAGTTTACCCGTTGAATAAGCACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAAT ACGTAGGGTGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGCGG TTCGTCGCGTCCGGTGTAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCCGCGCCGGGTAC GGGCGGGCTTGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTGGAA TGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCGTTAC TGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAG TCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGGGGCCCGTTCCACGGGTTCCGTG TCGGAGCTAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAA ACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATTAATT CGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTTCCCGACGGTCGTAGA GATACGGCTTCCCTTCGGGGCGGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCAGCT CGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCCCGTG TTGCCAGCGGATTATGCCGGGAACTCACGGGGGACCGCCGGGGTTAACTCGGA GGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCACGC ATGCTACAATGGCCGGTACAACGGGATGCGACGCGGCGACGCGGAGCGGATCC CTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGGCG GAGTCGCTAGTAATCGCGAATCAGCAACGTCGCGGTGAATGCGTTCCCGGGCCT TGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGCAGCACCCGAAGCCGGTGGC CTAACCCCTTGTGGGATGGAGCCGTCTAAGGTGAGGCTCGTGATTGGGGACT 88 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hoàng Tuấn – K24 Bộ môn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 14 Chủng Bf 8.2 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCCTGGCG GCCTGGCTGCCGGGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCAACCT GCCCTGTGCACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATACCGGATGCTCCGC CCCACCGCATGGTGGGGTGGGAAATGCTTTTTGCGGCATGGGATGGGGTCGCGT CCTATCAGCTTGTTGGCGGGGTGATGGCCCACCAAGGCGTTGACGGGTAGCCGG CCTGAGAGGGTGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACG GGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACG CCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAG GCACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTAC GTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGG CGTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCCTAA CGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGA ATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGA AGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGA ACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGG GGCCCTTTCCACGGGTCCCGTGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGG GAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGC GGCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGA CATGTGCCGGATCGCCGTGGAGACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGT GGTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAAC GAGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGCGGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGG ACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCC CTTACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGGTGCGACA CGGTGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGC AACTCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGC GGTGAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGG TAGCACCCGAAGCCGGTGGCCCGACCCTTGTGGGGGGAGCCGTCTAAGGTGAG ACTCGTGATTGGGACT 89 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hoàng Tuấn – K24 Bộ môn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 15 Chủng Bf 9.2 GATGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGGATCCCTGGCG GCCTGGCTGCCGGGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCAACCT GCCCTGTGCACCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATACCGGATGCTCCGC CCCACCGCATGGTGGGGTGGGAAATGCTTTTTGCGGCATGGGATGGGGTCGCGT CCTATCAGCTTGTTGGCGGGGTGATGGCCCACCAAGGCGTTGACGGGTAGCCGG CCTGAGAGGGTGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACG GGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACG CCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAG GCACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTAC GTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGG CGTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCCTAA CGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGA ATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCAATGGCGA AGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGA ACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGTGG GGCCCTTTCCACGGGTCCCGTGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGG GAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGC GGCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGA CATGTGCCGGATCGCCGTGGAGACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGT GGTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAAC GAGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGCGGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGG ACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAGATCATCATGCCC CTTACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGGTGCGACA CGGTGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGC AACTCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGC GGTGAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGG TAGCACCCGAAGCCGGTGGCCCGACCCTTGTGGGGGGAGCCGTCTAAGGTGAG ACTCGTGATTGGGACT 90 | Luận văn Thạc sĩ Khoa học - Nguyễn Hoàng Tuấn – K24 Bộ môn Vi sinh vật học – Khoa Sinh học Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội 2017 Phụ lục Hình thái Khuẩn lạc tế bào Hình ảnh khuẩn lạc tế bào chủng Bf 3.1 (Bar 5µm) Kích thước khuẩn lạc: 0,17 – 0,28 mm; Kích thước tế bo: 0,47ì3,43 0,71ì5,22 àm Hỡnh nh khun lc v tế bào chủng Bf 9.2 (Bar 5µm) Kích thước khuẩn lạc: 0,12 – 0,23 mm; Kích thước tế bào: 0,61ì2,03 0,73ì3,54 àm 91 | Lun Thc s Khoa học - Nguyễn Hoàng Tuấn – K24 ... HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN HOÀNG TUẤN PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN VI KHUẨN BIFIDOBACTERIA ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTICS Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 60420107 LUẬN VĂN THẠC... qua ứng dụng sản xuất chế phẩm probiotic cho động vật người Ngoài vi? ??c phân lập chủng Bifidobacterium giúp phong phú thêm sưu tập nguồn gen Quốc Gia Bảo tàng giống chuẩn vi sinh vật (VTCC) – Vi? ??n... thành vi? ?n họ có tất vi khuẩn tế bào eukaryote quan ty thể lục lạp, gen HSP60 không dễ dàng chuyển từ vi khuẩn sang vi khuẩn khác, tính bảo thủ cao có gần tất loài vi khuẩn, đặc trưng cho lồi vi khuẩn