Bài viết trình bày qui trình kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh trưởng để làm sạch bệnh Greening và các bệnh vi rút khác; ứng dụng kỹ thuật PCR để chẩn đoán bệnh Greeng và ELISA để chuẩn đoán bệnh Tristeza trên cây có múi; hệ thống nhà lưới 3 cấp để sản xuất giống cây có múi sạch bệnh...
CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VÀ PHÁT TRIỂN CÂY ĂN QUẢ CĨ MÚI SẠCH BỆNH Ở CÁC TỈNH PHÍA BẮC Ngơ Vĩnh Viễn, Hà Minh Trung, Vũ Đình Phú, Mai Thị Liên, Nguyễn Văn Tuất, Trần Quang Tấn CTV Viện Bảo vệ thực vật Cây có múi ăn có giá trị kinh tế cao Hiện nay, nhiều diện tích trồng có múi đạt giá trị 50 triệu đồng /năm Cá biệt có nơi đạt doanh thu 200 triệu đồng /ha nơng trường Cao Phong - Hồ Bình, Nơng trường 19 - Nghệ An Tuy nhiên số địa phương nhân giống cành chiết mắt ghép trồng quản lý vườn chưa khoa học nên suất, chất lượng tuổi thọ vườn thấp, chí trồng sau vài năm lại phải chặt bỏ Từ năm 1997, Viện Bảo vệ thực vật ứng dụng kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh trưởng, kỹ thuật PCR, ELISA để chẩn đoán bệnh Greening Tristeza làm bệnh lưu giữ nhà lưới chống trùng nhiều giống có múi phổ biến tỉnh phía Bắc như: Bưởi Phúc Trạch, Bưởi Diễn, Bưởi Đoan Hùng, Cam Xã Đoài, Cam Sông Con, Cam Vân Du, Cam Valencia, Cam Bù, Cam Canh, Cam Sành, Quýt Bắc Sơn Đồng thời đề xuất triển khai hệ thống nhà lưới cấp sản xuất giống có múi bệnh Hệ thống phát huy hiệu Hà Giang, Tuyên Quang Nghệ An với công suất 135.000 /năm Các kết nghiên cứu sản xuất giống bệnh phát triển giống có múi đặc sản địa phương Viện bảo vệ thực vật năm vừa qua dựa tiến kỹ thuật, bao gồm: Qui trình kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh trưởng để làm bệnh Greening bệnh vi rút khác Bước Bình tuyển giống đầu dịng có suất cao, phẩm chất tốt, công việc địa phương quan quản lý thu thập thông tin đề xuất lấy trao giải qua hội thi ăn Bước Chuẩn bị gốc ghép lần Hạt gốc ghép gồm giống cam lá, bóc khử trùng dung dịch Javel 1% phút Hạt gieo môi trường thạch chứa dinh dưỡng (môi trường MS) ống nghiệm đặt buồng tối nhiệt độ 28 oC Tiêu chuẩn gốc ghép: Chiều cao 10 - 12 cm, đường kính thân 1,5 - 2mm Bước Chuẩn bị đỉnh sinh trưởng Các chồi non lấy trực tiếp từ bình tuyển địa phương, thu mắt ghép giữ giống nhà lưới để chủ động thu đỉnh sinh trưởng thời gian Để lấy đỉnh sinh trưởng từ chồi non phải vặt giống cần làm trước 10 - 15 ngày nhằm kích thích chồi non phát triển Sau thu chồi non, tỉa to xung quanh, giữ lại phần chồi dài khoảng - 1,5 cm Bc K thut vi ghộp Sơ đồ 1: Qui trình phục tráng làm bệnh Greening bệnh virut khác hại cam quýt công nghệ vi ghÐp ®Ønh sinh tr-ëng Cây gốc ghép 15 ngày tuổi lấy khỏi ống nghiệm, cắt phía cách cổ rế 2,5 cm; rễ cọc cắt bớt để lại - cm Dùng kính lúp soi để soi rạch đường ngang, đường dọc để lấy mảnh vỏ gốc ghép, phải thận trọng để tầng sinh gỗ tượng tầng khơng bị tổn thương Dưới kính hiển vi soi nổi, đỉnh sinh trưởng tỉa bỏ to xung quanh giữ lại lá, dùng dao lưỡi mỏng cắt mô phân sinh dài khoảng 0,1 - 0, 15 mm đặt nhanh vào vị trí ghép gốc ghép Cây sau vi ghép đặt ống nghiệm có sẵn mơi trường lỏng (mơi trường MS + đường saccaro) Cây bảo quản nhiệt độ 28oC, cường độ ánh sáng 1000 lux 16 hàng ngày đèn huỳnh quang Nếu chồi ghép sống, sau tháng có thêm mới, đạt tiêu chuẩn ghép lần thứ Sau ghép lần 2, bao trùm túi nilon khoảng tuần Nếu ghép sống, chuyển chậu to bảo quản nhà lưới chống côn trùng (Sơ đồ 1) Cây vi ghép sau nhiều lần kiểm tra không phát bệnh Greening bệnh virút khác cơng nhận đầu dịng bệnh lưu giữ nhà lưới chống côn trùng Cho đến Viện bảo vệ thực vật làm bệnh 43 giống có múi đặc sản nước nhập nội Những giống trì nhà lưới chống trùng phục vụ nghiên cứu phát triển sản xuất Qui trình ứng dụng kỹ thuật PCR để chẩn đoán bệnh Greeng ELISA để chuẩn đốn bệnh Tristeza có múi 2.1 Quy trình chẩn đốn bệnh Greening kỹ thuật PCR Quy trình bao gồm bước: Bước 1: Chuẩn bị mẫu hoá chất cần thiết Bước 2: Tách chết tinh AND tổng số từ mẫu thực vật Bước 3: Chạy PCR Bước 4: Chạy điện di Bước 5: Phân tích kết đèn cực tím 2.2 Quy trình chẩn đốn nhanh bệnh Tristeza phương pháp ELISA Quy trình gồm bước: Bước 1: Chuẩn bị đĩa phản ứng Bước 2: Chuẩn bị dịch chiết Bước 3: Cho kháng thể Bước 4: Cho chất tổng hợp Bước 5: Pha viên phản ứng Bước 6: Đọc kết máy đọc ELISA (Giữa bước phải rửa đĩa dung dịch PBS) Hệ thống nhà lưới cấp để sản xuất giống có múi bệnh Hệ thống sản xuất giống có múi bệnh, tất công đoạn từ gieo gốc ghép, cung cấp mắt ghép hoàn toàn tiến hành nhà lưới bao gồm; - Nhà lưới bảo quản đầu dịng, giữ quan nghiên cứu, lưu giữ quĩ gen lưu giữ địa phương - Nhà lưới bảo quản cung cấp mắt ghép - Nhà lưới sản xuất giống bệnh Hệ thống nhà lưới cấp có ưu điểm bật giống sản xuất từ đầu dòng nên phẩm chất giống đồng chất lỏng giống phẩm chất sau Mỗi cung cấp mắt ghép cung cấp năm từ 300 đến 350 mắt ghép Như cần 02 cung cấp mắt ghép cung cấp mắt ghép đủ trồng cho 01 ngồi sản xuất Ngồi sản xuất Ngồi xây dựng nhà lưới dã chiến địa phương không tiện vận chuyển xa trung tâm để sản xuất giống sở lấy mắt ghép từ cung cấp mắt ghép nhà lưới Kỹ thuật sản xuất giống nhà lưới hỗn hợp bầu không đất Cây gốc ghép: Thừa hưởng kết nghiên cứu chuyên gia Cu Ba năm 1980 gốc ghép cam quýt tỉnh phía Bắc, Viện bảo vệ đề xuất: - Gốc chấp, chanh Volkameriana: Cho giống cam, quýt Bưởi chua: Cho giống bưởi Hỗn hợp bầu: Thực thành công kỹ thuật làm bầu không đất cải tiến chất hỗn hợp cho phù hợp với nguyên vật liệu sẵn có địa phương Hỗn hợp bao gồm: 1/5 cát vàng +2/5 mùn cưa +2/5 mùn hữu phân bón đa, vi lượng + vơi Dạng hỗn hợp vừa đảm bảo giữ nước phân bón, rễ bị hư hại q trình trăm sóc vận chuyển Kích thước túi bầu cải tiến với đường kính 17cm chiều cao 35 cm đủ đảm bảo rễ cọc giống lưu giữ vườn 12 - 14 tháng phát triển thuận lợi Kỹ thuật ghép: áp dụng dây buộc phương pháp ghép mắt có gỗ nhỏ sử dụng dây buộc Parafine thay dây buộc Polyetylene Qui trình trồng mới, thâm canh, chống tái nhiễm bệnh Greening quản lí dịch hại tổng hợp vườn có múi Chuẩn bị đất trồng hàng rào chắn gió Đất trồng có múi cần giải phóng trước tháng Nếu đất chu kỳ nên trồng - vụ họ đậu để cải tạo đất Vệ sinh đồng ruộng, chặt bỏ có múi bị bệnh greening vùng xung quanh Trồng hàng chắn gió tốt nên trồng keo tai tượng Hàng chắn gió ngăn chặn số lồi sâu bệnh hại, ngăn cản đợt gió mạnh nóng đặc biệt tỉnh Thanh Hố, Nghệ An, Hà Tĩnh làm giảm nhiệt độ gặp gió Tây nam Thiết kế lơ, xây dựng hệ thống chống xói mịn, tưới nước Thời vụ trồng Ở tỉnh phía Bắc thời vụ trồng cam quýt mùa xuân mùa thu Nhưng tốt trồng mùa xuân đầu mùa mưa Mật độ Cam, quýt trồng với mật độ 600 - 1200 /ha tùy thuộc vào điều kiện thâm canh địa phương Bưởi trồng với mật độ 380 - 450 /ha tùy thuộc vào điều kiện thâm canh tập quán canh tác địa phương Kỹ thuật trồng Đào hố chuẩn bị phân bón: Hố trồng cam quýt có kích thước 0,8 x 0,8 x 0, 8m x x 1m Khi đào hố cần lưu ý để lớp đất mặt phía, lớp đất phía phía Đào hố phơi khơ tháng, dùng kg vôi bột rắc xung quanh hố Trồng mới: Mỗi hố bón từ 50 - 100 kg phân chuồng hoai mục + kg P2O5 trộn với lớp đất phía cho vào hố, lớp đất mặt + 100 gram Urê + 100 gram Kaly Trồng xong cần cố định cây, tủ gốc để chống thoát nước cỏ dại, tủ cách gốc 10 cm Kỹ thuật chăm sóc Làm cỏ Cỏ xung quanh gốc cần nhổ Phần đường lô nên cắt cỏ để giữ ẩm, chống xói mịn đất nơi cư trú trùng có ích vườn có múi Bón phân Bón phân cung cấp đầy đủ chất dinh dưỡng cho cây, bao gồm nguyên tố đa lượng (N, P, K, Ca), nguyên tố vi lượng (Cu, Zn, Mn, Mg ) để sinh trưởng phát triển tốt cho sản lượng chất lượng cao, tăng cường khả chống chịu sâu bệnh hại Hàng năm, bón bổ sung 50 - 100 kg phân chuồng /cây (hoặc phân hữu cơ), kết hợp bón phân hố học, đào rãnh sâu 25 - 30 cm theo hình chiếu tán cây, bón lấp lại tưới nước - Lượng phân hoá học bón hàng năm: Cây cịn non Tuổi sản lượng Lượng phân bón Urê Lân KCl năm tuổi năm tuổi năm tuổi 120 280 80 150 400 120 300 800 240 Cây lớn 60 kg 90 kg 150 kg 20 kg 40 kg 120 kg quả/ quả/ quả/ quả/cây quả/cây quả/cây cây 600 830 380 Tỉa cành tạo tán Tạo tán sớm theo kỹ thuật mở tán Sau trồng ổn định cần tiến hành cắt cành để tạo tán cho phát triển thành - cành cấp theo hướng Từ cành cấp lại để - cành cấp Thường xuyên cắt bỏ cành vượt (Chú ý cắt sát thân cành để tạo mô sẹo) Cành mang nhiều cần tỉa để phát triển đồng Tưới nước Sau trồng nên tưới nước - lần tuần trời không mưa để tạo điều kiện cho rễ phát triển Những nơi có hệ thống tưới cần tưới cho từ - lần /năm thời kỳ phát lộc, lớn sau đợt bón phân 1100 1400 630 1300 1700 800 1800 2230 1000 2200 2800 1300 2600 3400 1500 Chống tái nhiễm bệnh greening bệnh vi rút khác Thường xuyên thăm vườn, cắt cành chặt bỏ cành, có triệu chứng bệnh greening bệnh vi rút khác Phun thuốc trừ sâu nội hấp phát rầy chổng cánh (Diaphorina citri) môi giới truyền bệnh greening rệp aphid môi giới truyền bệnh Tristeza (chú ý đợt lộc) Phòng trừ tổng hợp loại sâu bệnh khác Trong vườn có múi nhiều loại sâu bệnh khác như: Sâu đục thân, sâu vẽ bùa, nhện, bệnh loét, bệnh chảy gồm Các loại sâu bệnh phịng trừ có hiệu việc áp dụng biện pháp phòng trừ tổng hợp ... lưới cấp để sản xuất giống có múi bệnh Hệ thống sản xuất giống có múi bệnh, tất công đoạn từ gieo gốc ghép, cung cấp mắt ghép hoàn toàn tiến hành nhà lưới bao gồm; - Nhà lưới bảo quản đầu dịng,... năm: Cây cịn non Tuổi sản lượng Lượng phân bón Urê Lân KCl năm tuổi năm tuổi năm tuổi 120 280 80 150 400 120 300 800 240 Cây lớn 60 kg 90 kg 150 kg 20 kg 40 kg 120 kg quả/ quả/ quả/ quả /cây quả /cây. .. cho 01 sản xuất Ngồi sản xuất Ngồi xây dựng nhà lưới dã chiến địa phương không tiện vận chuyển xa trung tâm để sản xuất giống sở lấy mắt ghép từ cung cấp mắt ghép nhà lưới Kỹ thuật sản xuất giống