Mangiferin là hợp chất có hoạt tính sinh học chính ở trong lá xoài (Mangifera indica L.) có tác dụng chống viêm, chống oxi hóa, chống bệnh tiểu đường, điều hòa hệ miễn dịch và chống ung thư. Mục đích chính của nghiên cứu này là khảo sát và so sánh các điều kiện chiết mangiferin từ lá xoài trong dung môi ethanol bởi ba phương pháp khác nhau (chiết Soxhlet, chiết có hỗ trợ siêu âm và chiết có hỗ trợ vi sóng). Kết quả cho thấy trong dung môi ethanol thì phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng cho hàm lượng mangiferin cao nhất (88,96 mgg), tiếp theo là phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm với hàm lượng mangiferin 78,75 mgg, còn phương pháp chiết bằng Soxhlet cho hàm lượng mangiferin thấp nhất (50,54 mgg). Xét về khả năng kháng oxy hóa, dịch chiết của phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng lại cho khả năng kháng oxy hóa thấp nhất, tiếp đến là dịch chiết bằng phương pháp Soxhlet, còn dịch chiết của phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm có khả năng kháng oxy hóa cao nhất, do đó phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm là phương pháp chiết mangiferin hiệu quả nhất. So với các dịch chiết lá xoài, các cao chiết lại có hàm lượng mangiferin và khả năng kháng oxy hóa cao hơn nhiều.. Nội dung đồ án tốt nghiệp gồm 4 chương: Chương 1: Tổng quan Chương 2: Đối tượng và phương pháp nghiên cứu Chương 3: Kết quả và thảo luận Chương 4: Kết luận và kiến nghị
ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA HÓA * KHẢO SÁT VÀ SO SÁNH HIỆU QUẢ CHIẾT MANGIFERIN TỪ LÁ XOÀI BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT KHÁC NHAU TRONG DUNG MÔI ETHANOL Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THỊ THOẠI Đà Nẵng – Năm 2018 TÓM TẮT Tên đề tài: Khảo sát so sánh hiệu chiết mangiferin từ xoài phương pháp chiết khác dung môi ethanol Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Thoại Số thẻ SV: 107130086 Lớp 13H2A Mangiferin hợp chất có hoạt tính sinh học xồi (Mangifera indica L.) có tác dụng chống viêm, chống oxi hóa, chống bệnh tiểu đường, điều hịa hệ miễn dịch chống ung thư Mục đích nghiên cứu khảo sát so sánh điều kiện chiết mangiferin từ xồi dung mơi ethanol ba phương pháp khác (chiết Soxhlet, chiết có hỗ trợ siêu âm chiết có hỗ trợ vi sóng) Kết cho thấy dung mơi ethanol phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng cho hàm lượng mangiferin cao (88,96 mg/g), phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm với hàm lượng mangiferin 78,75 mg/g, phương pháp chiết Soxhlet cho hàm lượng mangiferin thấp (50,54 mg/g) Xét khả kháng oxy hóa, dịch chiết phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng lại cho khả kháng oxy hóa thấp nhất, tiếp đến dịch chiết phương pháp Soxhlet, dịch chiết phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm có khả kháng oxy hóa cao nhất, phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm phương pháp chiết mangiferin hiệu So với dịch chiết xoài, cao chiết lại có hàm lượng mangiferin khả kháng oxy hóa cao nhiều Nội dung đồ án tốt nghiệp gồm chương: Chương 1: Tổng quan Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu Chương 3: Kết thảo luận Chương 4: Kết luận kiến nghị ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HỊA XÃ HƠI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA HÓA Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Lớp: 13H2A Nguyễn Thị Thoại Số thẻ sinh viên: 107130086 Khoa: Hóa Ngành: Cơng nghệ thực phẩm Tên đề tài đồ án: Khảo sát so sánh hiệu quả chiết mangiferin từ xồi dung mơi ethanol phương pháp chiết khác Đề tài thuộc diện: ☐ Có ký kết thỏa thuận sở hữu trí tuệ kết thực Các số liệu liệu ban đầu: Nội dung phần thuyết minh tính tốn: - Lời mở đầu - Chương 1: Tổng quan - Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu - Chương 3: Kết thảo luận - Chương 4: Kết luận kiến nghị - Tài liệu tham khảo - Phụ lục Các vẽ, đồ thị ( Không ) Họ tên người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Trúc Loan Ngày giao nhiệm vụ đồ án: 20/01/20118 Ngày hoàn thành đồ án: 28/05/2018 Đà Nẵng, ngày 28 tháng 05 năm 2018 Trưởng Bộ môn …………………… Người hướng dẫn LỜI NÓI ĐẦU Sau gần tháng thực đề tài “Khảo sát so sánh hiệu chiết mangiferin từ xoài nhiều phương pháp chiết khác dung môi ethanol”, với hướng dẫn cô Nguyễn Thị Trúc Loan, em hoàn thành xong đồ án tốt nghiệp Lời đầu tiên, em xin gởi lời cảm ơn đến thầy Khoa Hóa - Trường Đại học Bách Khoa Đà Nẵng nói chung, Bộ mơn Cơng nghệ thực phẩm nói riêng tận tâm truyền đạt cho em kiến thức tảng, giúp đỡ nhiệt tình trình học tập, nghiên cứu để em hồn thành tiến độ chương trình học tập Và đặc biệt hết em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô TS Nguyễn Thị Trúc Loan Trong suốt thời gian thực đồ án, dù công việc bận cô dành nhiều thời gian hướng dẫn bảo em tận tình từ bước bắt đầu chọn đề tài, thực đề tài kết thúc đề tài Cô góp ý, sửa sai sót, giúp em nắm bắt kĩ lưỡng nội dung liên quan đến đồ án hồn thành đồ án cách tốt Đồng thời, em xin gởi lời cảm ơn đến q thầy phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ Thực phẩm, cán quản lý trung tâm Nghiên cứu Bảo vệ môi trưởng, trường Đại học Bách khoa Đà Nẵng, Th.S Đặng Thanh Long (Trưởng phòng phân tích, Viện Cơng nghệ sinh học, Đại học Huế) tạo điều kiện phịng thí nghiệm, trang thiết bị để em hồn thành đề tài cách suôn sẻ kịp tiến độ Cuối em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô hội đồng bảo vệ tốt nghiệp dành thời gian quý báu để đọc nhận xét đồ án em Đà Nẵng, ngày 28 tháng 05 năm 2018 Sinh viên thực Nguyễn Thị Thoại i CAM ĐOAN Em xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng em Các số liệu sử dụng phân tích luận văn có nguồn gốc rõ ràng, cơng bố theo quy định Các kết nghiên cứu đồ án em tự thực hiện, phân tích cách trung thực, khách quan phù hợp với thực tiễn Việt Nam Các kết chưa công bố nghiên cứu khác Tác giả Nguyễn Thị Thoại ii MỤC LỤC Tóm tắt Nhiệm vụ đồ án LỜI NÓI ĐẦU i CAM ĐOAN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC HÌNH VẼ vi DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT x MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan xoài 1.1.1 Giới thiệu 1.1.2 Thành phần hóa học xồi 1.1.3 Tác dụng dược lý xoài 1.2 Tìm hiểu mangiferin 1.2.1 Thành phần hóa học cấu trúc mangiferin 1.2.2 Tính chất mangiferin 1.2.3 Tác dụng dược lí mangiferin 1.3 Cở sở lý thuyết q trình trích ly 1.3.1 Khái niệm 1.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết 1.3.3 Các phương pháp chiết 11 1.4 Một số cơng trình nghiên cứu mangiferin 13 1.4.1 Một số cơng trình nghiên cứu Việt Nam 13 1.4.2 Một số cơng trình nghiên cứu giới 14 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.2 Hóa chất dùng nghiên cứu 18 2.3 Thiết bị, dụng cụ sử dụng trình nghiên cứu 18 2.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 20 2.5 Phương pháp nghiên cứu 20 2.5.1 Xây dựng đường chuẩn mangiferin phương pháp đo quang 20 iii 2.5.2 So sánh hàm lượng mangiferin loại xoài giai đoạn sinh trưởng 23 2.5.3 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất chiết mangiferin sử dụng dung môi ethanol phương pháp Soxhlet 23 2.5.4 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất chiết mangiferin sử dụng dung môi ethanol phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm 24 2.5.5 Khảo sát điều kiện ảnh hưởng đến hiệu suất chiết mangiferin từ xồi dung mơi ethanol sử dụng phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng 26 2.5.6 Tối ưu hóa điều kiện chiết tách mangiferin từ xoài phương pháp chiết 27 2.5.7 Khảo sát so sánh hoạt tính kháng oxy hóa dịch chiết phương pháp thử DPPH 28 2.5.8 Cô quay dịch chiết thành cao xác định có mặt chất có cao chiết 28 2.5.9 Định tính định lượng mangiferin cao chiết phương pháp đo quang 29 2.5.10 Khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa cao chiết xoài 30 2.5.11 Phương pháp xử lí số liệu 30 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Đường chuẩn mangiferin chuẩn dung môi ethanol 31 3.1.1 Bước sóng hấp thụ cực đại dung dịch mangiferin chuẩn 31 3.2.2 Bước sóng hấp thụ cực đại dịch chiết xồi 31 3.2.3 Đường chuẩn dung dịch mangiferin chuẩn xây dựng theo phương pháp đo quang 32 3.2 Kết so sánh hàm lượng mangiferin loại xoài giai đoạn sinh trưởng khác 33 3.3 Ảnh hưởng yếu tố phương pháp chiết Soxhlet đến việc trích ly mangiferin từ xồi dung môi ethanol 33 3.3.1 Ảnh hưởng tỉ lệ dung môi/ nguyên liệu (v/w) 33 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ dung môi ethanol 34 3.3.3 Ảnh hưởng thời gian chiết soxhlet 35 3.4 Ảnh hưởng yếu tố phương pháp chiết siêu âm đến việc trích ly mangiferin từ xồi dung mơi ethanol 37 3.4.1 Ảnh hưởng tỉ lệ dung môi/ nguyên liệu (v/w) 37 3.4.2 Ảnh hưởng nồng độ ethanol 38 3.4.3 Ảnh hưởng nhiệt độ siêu âm 39 iv 3.4.4 Ảnh hưởng thời gian siêu âm 40 3.5 Ảnh hưởng yếu tố phương pháp vi sóng đến viêc trích ly mangiferin từ xồi dung môi ethanol 41 3.5.1 Ảnh hưởng tỉ lệ dung môi/ nguyên liệu (v/w) 41 3.5.2 Ảnh hưởng nồng độ ethanol 42 3.5.3 Ảnh hưởng lượng vi sóng 43 3.5.4 Ảnh hưởng thời gian vi sóng 44 3.6 Kết tối ưu hóa q trình chiết mangiferin từ xoài phương pháp đáp ứng bề mặt RSM 45 3.6.1 Tối ưu hóa q trình chiết mangiferin phương pháp chiết có hỗ trợ siêu âm 46 3.6.2 Tối ưu hóa q trình chiết mangiferin phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng 50 3.7 Kết so sánh hàm lượng mangiferin có dịch chiết ba phương pháp 54 3.8 Kết khảo sát so sánh khả kháng oxy hóa dịch chiết chiết ba phương pháp 54 3.9 Kết xác định có mặt chất cao chiết xồi 57 3.10 Kết định tính định lượng mangiferin có cao chiết phương pháp đo quang 60 3.10.1 Kết định tính mangiferin cao chiết 61 3.10.2 Kết định lượng mangiferin cao chiết phương pháp đo quang 61 3.11 Kết kiểm tra khả kháng oxy hóa cao chiết 62 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 64 4.1 Kết luận 64 4.2 Kiến nghị 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 PHỤ LỤC v DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 Cây xồi Hình 1.1 Cấu trúc mangiferin Hình 2.1 Cân điện tử 18 Hình 2.2 Thiết bị siêu âm dạng bể 19 Hình 2.3 Máy đo quang Hitachi Uv-vis 19 Hình 2.4 Máy phá mẫu vi sóng 19 Hình 2.5 Bộ chiết Soxhlet 19 Hình 2.6 Máy Vontex 19 Hình 2.7 Máy ly tâm eppendorf 19 Hình 2.8 Máy lọc chân khơng 20 Hình 2.9 Máy sấy hồng ngoại 20 Hình 2.10 Máy cô quay lạnh 20 Hình 2.11 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 21 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn kết khảo sát λmax dung dịch mangiferin chuẩn nồng độ 6,592 µg/ml 8,24 µg/ml 31 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn bước sóng hấp thụ cực đại dịch chiết xoài 32 Hình 3.3 Đường chuẩn dung dịch mangiferin chuẩn xây dựng theo phương pháp đo quang 32 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ v/w đến OD 34 Hình 3.5 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến giá trị OD 35 Hình 3.6 Ảnh hưởng thời gian đến giá trị OD 36 Hình 3.7 Ảnh hưởng tỉ lệ v/w đến giá trị OD 37 Hình 3.8 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến giá trị OD 38 Hình 3.9 Ảnh hưởng nhiệt độ siêu âm đến giá trị OD 39 Hình 3.10 Ảnh hưởng thời gian siêu âm đến giá trị OD 40 Hình 3.11 Ảnh hưởng tỉ lệ v/w đến giá trị OD 42 Hình 3.12 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến giá trị OD 43 Hình 3.13 Ảnh hưởng lượng vi sóng đến giá trị OD 44 Hình 3.14 Ảnh hưởng thời gian vi sóng đến giá trị OD 45 vi Hình 3.15 Biểu đồ chu tuyến 3D (a) biểu đồ bề mặt 2D (b) xác định vùng giá trị cho điều kiện 49 Hình 3.16 Kết điều kiện tối ưu trình chiết siêu âm 49 Hình 3.17 Biểu đồ chu tuyến 2D biểu đồ bề mặt 3D xác định vùng giá trị cho điều kiện 53 Hình 3.18 Kết điều kiện tối ưu trình chiết mangiferin từ xồi dung mơi ethanol phương pháp vi sóng 53 Hình 3.19 Đồ thị biểu mối quan hệ %SC với độ pha loãng dịch chiết soxhlet 56 Hình 3.20 Đồ thị biểu mối quan hệ %SC với độ pha loãng dịch chiết siêu âm 56 Hình 3.21 Đồ thị biểu mối quan hệ %SC với độ pha lỗng dịch chiết vi sóng 57 Hình 3.22 Kết kiểm tra chất có cao chiết soxhlet (a,b,c,d,e,f) 59 Hình 3.23 Kết kiểm tra chất có cao chiết siêu âm (a,b,c,d,e,f) 60 Hình 3.24 Kết quét bước sóng hấp thụ cao chiết siêu âm (a) cao chiết soxhlet (b) 61 Hình 3.25 Mối tương quang %SC với nồng độ cao chiết soxhlet 62 Hình 3.26 Mối tương quang %SC với nồng độ cao chiết siêu âm 63 vii ... Loan 25 Khảo sát so sánh hiệu chiết mangiferin từ xoài (Mangifera indica L.) phương pháp chiết khác dung môi ethanol 2.5.5 Khảo sát điều kiện ảnh hưởng đến hiệu suất chiết mangiferin từ xồi dung. .. 10 Khảo sát so sánh hiệu chiết mangiferin từ xoài (Mangifera indica L.) phương pháp chiết khác dung môi ethanol 1.3.3 Các phương pháp chiết 1.3.3.1 Phân loại Có nhiều cách phân loại, dựa vào... sóng dung mơi ethanol - Tối ưu hóa điều kiện chiết so sánh hiệu suất chiết ba phương pháp - So sánh khả kháng oxy hóa dịch chiết xoài ba phương pháp chiết dung mơi ethanol Từ tìm phương pháp chiết