Đánh giá in vitro đáp ứng của tế bào gốc trung mô tuỷ xương người với biodentinetm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHI MINH − Ô TRN PHM HNG NHUNG ĐÁNH GIÁ IN VITRO ĐÁP ỨNG CỦA TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ TUỶ XƢƠNG NGƢỜI VỚI BIODENTINETM CHUYÊN NGÀNH: RĂNG HÀM MẶT MÃ SỐ: 60 72 06 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC Hƣớng dẫn khoa học: TS TRẦN XUÂN VĨNH THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - Năm 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Tác giả luận văn TRẦN PHẠM HỒNG NHUNG MỤC LỤC ĐỐI CHIẾU THUẬT NGỮ ANH VIỆT i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ii DANH MỤC SƠ ĐỒ iii DANH MỤC BIỂU ĐỒ iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan tế bào gốc 1.1.1 Khái niệm tế bào gốc 1.1.2 Đặc điểm tế bào gốc 1.1.3 Phân loại gọi tên tế bào gốc 1.2 Tế bào gốc nha khoa 1.2.1 Tế bào gốc trƣởng thành 1.2.2 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng 1.3 Lành thƣơng 1.3.1 Các giai đoạn lành thƣơng 1.3.2 Sự lành hoá vết thƣơng 1.4 Tổng quan MTA 1.4.1 Thành phần 1.4.2 Phân loại 1.4.3 pH MTA dạng hydrate hoá 1.4.4 Ứng dụng MTA lâm sàng 1.5 BiodentineTM 11 1.5.1 Thành phần 11 1.5.2 pH BiodentineTM dạng hydrate hoá 12 1.5.3 Ứng dụng lâm sàng 13 1.6 Các thử nghiệm in vitro để đánh giá tính tƣơng hợp sinh học vật liệu mức tế bào 14 1.6.1 Khái niệm gây độc 14 1.6.2 Các phƣơng pháp thử nghiệm 14 1.7 Tiêu chuẩn ISO 17 1.7.1 Tiêu chuẩn ISO 10993 17 1.7.2 Tiêu chuẩn ISO 10993-12:2012 18 1.8 Thử nghiệm độc tính 19 1.8.1 Phân tích MTT 19 1.8.2 Phân tích Neutral red uptake 21 1.8.3 Phân tích XTT 21 1.9 Phƣơng pháp xác định mật độ tế bào buồng đếm hồng cầu 21 1.10 Các nghiên cứu đáp ứng tế bào với BiodentineTM MTA dạng dịch chiết 23 1.10.1 Nghiên cứu giới 23 1.10.2 Nghiên cứu nƣớc 24 1.10.3 Nhận xét nghiên cứu thực 24 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 26 2.1.1 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 26 2.1.2 Vật liệu 26 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 2.2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 26 2.2.2 Thiết kế nghiên cứu 27 2.2.3 Chuẩn bị trƣớc nghiên cứu 27 2.3 Thực nghiên cứu 31 2.3.1 Cấy chuyền tế bào: cấy chuyền thứ cấp 31 2.3.2 Chuẩn bị tế bào 32 2.3.3 Chuẩn bị vật liệu 34 2.3.4 Tạo dịch chiết Latex 37 2.3.5 Đánh giá độc tính tế bào phƣơng pháp MTT 38 2.3.6 Đánh giá tăng sinh tế bào 40 2.4 Tóm tắt quy trình thực 43 2.5 Biến số nghiên cứu 43 2.5.1 Biến số độc lập 43 2.5.2 Biến số phụ thuộc 43 2.5.3 Xử lý phân tích số liệu 44 2.6 Trình bày kết 44 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ 46 3.1 Chuẩn bị tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời (cấy chuyền thứ cấp) 46 3.2 Giá trị định lƣợng độc tính nhóm 49 3.2.1 Phần trăm tế bào sống nhóm 49 3.2.2 Phƣơng trình hồi quy độc tính dịch chiết BiodentineTM, MTA 51 3.2.3 Sự khác biệt độc tính nồng độ 100%, 50%, 25%, 12,5% 6,25% BiodentineTM tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 52 3.2.4 Sự khác biệt độc tính nồng độ 100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25% MTA tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 53 3.3 Hình ảnh đánh giá độc tính với tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 54 3.3.1 Dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ chƣa pha loãng (100%) sau ủ với MTT 55 3.3.2 Dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 50% sau ủ với MTT 56 3.3.3 Dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 25% sau ủ với MTT 56 3.3.4 Dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 12,5% sau ủ với MTT 57 3.3.5 Dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25% sau ủ với MTT 57 3.4 Đánh giá tăng sinh tế bào: mật độ tế bào trung bình nhóm 58 3.5 Hình ảnh tế bào tăng sinh 60 3.5.1 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25% vào ngày 61 3.5.2 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25% vào ngày 62 3.5.3 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25% vào ngày 63 3.5.4 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25% vào ngày 64 3.5.5 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25% vào ngày 10 65 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 66 4.1 Bàn luận phƣơng pháp đánh giá độc tính dịch chiết BiodentineTM, MTA tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 66 4.1.1 Đánh giá độc tính tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 66 4.1.2 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với vật liệu dạng dịch chiết 67 4.1.3 Xác định nồng độ pha loãng dịch chiết 68 4.1.4 Đánh giá độc tính dựa vào tiêu chuẩn ISO 10993-5:2009, tạo dịch chiết dựa theo tiêu chuẩn ISO 10993-12:2012 70 4.2 Bàn luận kết đánh giá độc tính dịch chiết BiodentineTM, MTA tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 70 4.2.1 Nguồn tế bào chuẩn bị cho nghiên cứu 71 4.2.2 Phần trăm tế bào sống tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM MTA 71 4.3 Bàn luận phƣơng pháp đánh giá tăng sinh dịch chiết BiodentineTM MTA tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 74 4.3.1 Chọn dịch chiết nồng độ pha loãng 6,25% 74 4.3.2 Xác định mật độ tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời phƣơng pháp buồng đếm hồng cầu tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA 76 4.4 Bàn luận kết tăng sinh tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM MTA nồng độ pha loãng 6,25% vào ngày 2, 4, 6, 10 77 4.5 Hạn chế đề tài 80 4.6 Ý nghĩa lâm sàng ứng dụng đề tài 80 4.7 Đề xuất hƣớng nghiên cứu 81 KIẾN NGHỊ 82 KẾT LUẬN………………………………………………………………….83 i ĐỐI CHIẾU THUẬT NGỮ ANH VIỆT Marker Dấu ấn sinh học Blastocyst Giai đoạn phôi nang Intermediate concerntration Hàm lƣợng trung gian Adipogenic Khả tạo mỡ Periodontal ligament fibroblast Nguyên bào sợi dây chằng nha chu Pulp fibroblasts Nguyên bào sợi tủy Osteoblast Nguyên bào xƣơng Human osteoblast-like cells Tế bào giống nguyên bào xƣơng ngƣời Human Bone marrow stem cells Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời Bone marrow stem cells Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BMSCs Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells DMEM/F12 Dulbecco’smodified Eagle’s medium DMSO Dimethyl sulfoxide FBS Fetal Bovine Serum hBMSCs Human bone marrow stem cells MSCs Mesenchymal stromal cells MTA Mineral trioxide aggregate PBS Phosphate-buffered saline Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 78 14 Khơng có khác biệt BiodentineTM, MTA MM – MTA phần trăm tế bào sống ngày 1, 3, 7, 14 [45] Nghiên cứu đánh giá tăng sinh tế bào hBMSCs tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ pha lỗng 6,25% thơng qua mật độ tế bào trung bình vào ngày thứ 2, 4, 6, 10 Kết thu đƣợc cho thấy nhóm BiodentineTM MTA có mật độ tế bào trung bình tăng từ ngày đến ngày 4, đạt giá trị lớn vào ngày thứ 4, giảm dần đến ngày 10 Sự tăng sinh tế bào hBMSCs hai nhóm BiodentineTM, MTA đạt đỉnh vào ngày 4, nhóm chứng vào ngày (biểu đồ 3.5) Mật độ tế bào trung bình hai nhóm BiodentineTM MTA vào ngày thấp so với nhóm chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê (α=0,05) Điều khác với nghiên cứu Margunato S cộng (2015) cho thấy tế bào hBMSCs nhóm BiodentineTM MTA tăng sinh tuyến tính từ ngày đến đạt đỉnh vào ngày 14 Tế bào tăng sinh hai nhóm BiodentineTM, MTA cao so với nhóm chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê (α=0,05) [45] Sự khác biệt nghiên cứu với Margunato S tác giả đánh giá tăng sinh dịch chiết chƣa pha loãng BiodentineTM MTA Trong đó, nghiên cứu lại thực dịch chiết với nồng độ pha lỗng 6,25% Tuy nhiên có điểm giống hai nghiên cứu khơng có khác biệt tăng sinh tế bào hai nhóm MTA BiodentineTM [45] Kết mật độ tế bào trung bình nhóm chứng cho thấy khoảng thời gian từ ngày đến ngày giai đoạn hồi phục quần thể tế bào sau trình cấy chuyền đạt đƣợc bám dính ổn định Mật độ tế bào bắt đầu tăng từ ngày đến ngày (biểu đồ 3.5) Đây giai đoạn tăng sinh quần thể tế bào, giai đoạn tế bào ổn định phát triển, trình trao đổi chất Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 79 diễn mạnh mẽ giai đoạn Tế bào tăng sinh đạt đỉnh cực đại vào ngày Sau thời điểm mật độ cực đại, tế bào vào giai đoạn cân bằng, tốc độ phân chia nhƣ trao đổi chất tế bào bắt đầu giảm, số lƣợng tế bào chết cân với lƣợng tế bào sinh Mật độ tế bào giảm từ ngày xuống ngày 10 (biểu đồ 3.5) Diện tích bề mặt ni cấy khơng đổi, tế bào liên tục tăng sinh gây tƣợng kìm hãm tiếp xúc, tế bào bắt đầu chết đi, số tế bào chết cao số tế bào sinh Sự sống tế bào bị ảnh hƣởng nhiều yếu tố, yếu tố quan trọng pH Theo quy định ISO 10993-5:2009 yêu cầu pH tối ƣu cho môi trƣờng nuôi cấy tế bào 7,2-7,4 [57] Trong đó, BiodentineTM MTA đƣợc biết đến vật liệu dạng hydrate hố có pH kiềm [34], [46], [66] Điều phù hợp với kết thu đƣợc thực đo pH vật liệu Trƣớc đây, có nghiên cứu in vitro chứng minh pH kiềm ảnh hƣởng đến tăng sinh tế bào [46] Do đó, khác biệt mật độ tế bào trung bình với nhóm chứng đƣợc giải thích pH kiềm ảnh hƣởng đến sống tế bào nhóm BiodentineTM MTA Hai vật liệu mà chúng tơi nghiên cứu có khả phóng thích ion calcium ion hydroxide dạng đơng cứng, ion hydroxide tạo môi trƣờng pH kiềm Tuy nhiên điều kiện lâm sàng, pH kiềm giúp trung hồ pH acid q trình viêm Sự điều hồ giúp môi trƣờng trở pH tối ƣu cho lành thƣơng Bên cạnh ion calcium đƣợc phóng thích từ vật liệu đóng vai trị quan trọng q trình lành thƣơng khống hố mơ [34] Trong nghiên cứu Tran X.V cộng (năm 2012) đánh giá ảnh hƣởng xi măng có thành phần calcium silicate che tủy trực tiếp chuột chứng minh pH kiềm đƣợc cho nguyên nhân gây hoại tử mô tủy chỗ tiếp xúc trực tiếp với vật liệu MTA Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 80 BiodentineTM Tuy nhiên sau ngày trình viêm giảm, sau 14 ngày tạo cầu ngà sửa chữa [62] Mặc dù mật độ tế bào trung bình hBMSCs tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA thấp mật độ tế bào trung bình nhóm chứng, nhƣng BiodentineTM MTA có tác dụng tích cực lên khống hố tái tạo mơ cứng nhờ khả tiết ion calcium đóng vai trị quan trọng q trình lành thƣơng mơ xƣơng [22] 4.5 Hạn chế đề tài Trong q trình thí nghiệm, chúng tơi đánh giá định tính pH dịch chiết BiodentineTM MTA nồng độ khác mà chƣa định lƣợng pH trình tăng sinh tế bào Hiện chƣa có nghiên cứu BiodentineTM vai trò mối liên quan ion calcium phóng thích từ vật liệu với tăng sinh tế bào phần bàn luận sử dụng kết nghiên cứu MTA thành phần hai vật liệu BiodentineTM MTA giống nhau, nhiên điều chƣa xác BiodentineTM có bổ sung calcium carbonate 4.6 Ý nghĩa lâm sàng ứng dụng đề tài Nghiên cứu nghiên cứu sở, bƣớc đầu xác định tính tƣơng hợp sinh học với tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời BiodentineTM so với MTA Kết nghiên cứu cung cấp chứng khoa học hiệu vật liệu mức độ tế bào ứng dụng điều trị thủng buồng tủy, thủng ống tủy, trám ngƣợc Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 81 4.7 Đề xuất hƣớng nghiên cứu Từ hạn chế đƣợc phân tích nêu trên, chúng tơi đề xuất nghiên cứu đánh giá định lƣợng pH dịch chiết BiodentineTM MTA nồng độ khác trình tăng sinh tế bào Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 82 KIẾN NGHỊ Đây nghiên cứu Việt Nam nhằm thực đánh giá đáp ứng tế bào gốc trung mô tủy xƣơng mà đặc biệt tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với BiodentineTM MTA dạng dịch chiết Dựa ƣu điểm đặc tính học vật lý, đặc biệt giá thành hợp lí BiodentineTM từ kết nghiên cứu sở kết hợp với công bố nghiên cứu khác giới số thành công mặt lâm sàng BiodentineTM, đến đề xuất BiodentineTM vật liệu nhóm calcium silicate mà nhà thực hành lựa chọn lĩnh vực lâm sàng nói chung điều trị thủng buồng tủy, thủng ống tủy trám ngƣợc… nói riêng Ngồi ra, chúng tơi mong muốn có nghiên cứu theo dõi lâm sàng BiodentineTM, MTA so với vật liệu khác nhóm calcium silicate tƣơng lai Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 83 KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu in vitro đánh giá đáp ứng BiodentineTM, MTA tế bào gốc trung mô tuỷ xƣơng ngƣời, rút kết luận sau: Độc tính dịch chiết BiodentineTM, MTA tế bào gốc trung mơ tuỷ xƣơng ngƣời: Nồng độ chƣa pha lỗng (theo chuẩn ISO 10993-5:2009) dịch chiết BiodentineTM, MTA độc với tế bào gốc trung mô tuỷ xƣơng ngƣời Trong nồng độ pha loãng 50%, 25%, 12,5% 6,25% không độc với tế bào gốc trung mô tuỷ xƣơng ngƣời Phần trăm tế bào sống BiodentineTM thấp MTA, nhƣng khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Đánh giá tăng sinh tế bào gốc trung mô tuỷ xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM, MTA nồng độ 6,25%: Mật độ tế bào trung bình tế bào gốc trung mơ tuỷ xƣơng ngƣời hai nhóm BiodentineTM MTA tăng từ ngày đến ngày 4, đạt giá trị cực đại vào ngày 4, giảm dần từ ngày đến ngày 10 Trong mật độ tế bào trung bình nhóm tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM thấp so với dịch chiết MTA, nhƣng khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Nguồn tế bào gốc trung mô tuỷ xƣơng ngƣời phù hợp sử dụng để đánh giá nghiên cứu P4 Những kết thu đƣợc từ nghiên cứu chúng tơi kết luận tính tƣơng hợp sinh học in vitro BiodentineTMvới tế bào gốc trung mô tuỷ xƣơng ngƣời tƣơng tự MTA Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Phan Kim Ngọc, Phạm Văn Phúc, Trƣơng Định (2010), Công nghệ Tế bào gốc, Nhà xuất Giáo dục, Thành phố Hồ Chí Minh Trần Lê Bảo Hà, Tơ Minh Qn, Đồn Ngun Vũ (2014), Cơng nghệ vật liệu sinh học, Nhà xuất giáo dục Việt Nam Tài liệu tiếng anh Aeinehchi M., Eslami B., Ghanbariha M., Saffar A.S (2003), "Mineral trioxide aggregate (MTA) and calcium hydroxide as pulp-capping agents in human teeth: a preliminary report", Int Endod J, 36, pp.225-231 Aghaloo T.L., Chaichanasakul T., Bezoulglaia O., Kang B., Franco R., Dry S.M (2010), "Osteogenic potentia of mandibular vs long-bone marrow stromal cells", J Dent Res, 89, pp.1293-1298 Akintoye S.O., Lam T., Shi S., Brahim J., Collins M.T., Robey P.G (2006), "Skeletal site-specific characterization of orofacial and iliac crest human bone marrow stromal cells in same individuals", Bone, 38, pp.758768 Anto V., Caprio M.P.D., Ametrano G., Simeone M., Rengo S., Spagnuolo G (2010), "Effect of Mineral Trioxide Aggregate on Mesenchymal Stem Cells", JOE, 36(11), pp.1839-1843 Attik G.N.,Villat C., Hallay F., Pradelle-Plasse N., Colon P., Grosgogeat B (2014), "In vitro biocompatibility of a dentine substitute cement on human MG63 osteoblasts cells: BiodentineTM versus MTA", International Endodontic Journal, 47, pp.1133-1114 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM Baek H.S.,Yoo J.Y., Rah D K., Han D.W., Lee D.H., Kwon O.H., Park J.C (2005), "Evaluation of the Extraction Method for the Cytotoxicity Testing of Latex Gloves", Yonsei Medical Journal, 46(4), pp.579-583 Bogen G., Kim J S., Bakland L.K (2008), "Direct pulp capping with mineral trioxide aggregate An observational study", JADA, 139, pp.305-315 10 Borstlap W.A., Heidbuchel K.L., Freihofer H.P., Kuijpers-Jagtman A.M (1990), "Early secondary bone grafting of alveolar cleft defects A comparison between chin and rib grafts", J Craniomaxillofac Surg, 18, pp.201-205 11 Camilleri J (2008), "Characterization of hydration products of mineral trioxide aggregate", International Endodontic Journal, 41, pp.408-417 12 Camilleri J., Montesin F.E., Papaioannou S., McDonald F., Pitt Ford T.R (2004), "Biocompatibility of two commercial forms of mineral trioxide aggregate", International Endodontic Journal, 37, pp.699-704 13 Camilleri J., Montesin F.E., Silviol L.D., Pitt Ford T.R (2005), "The chemical constitution and biocompatibility of accelerated Portland cement for endodontic use", International Endodontic Journal, 38, pp.834-842 14 Camilleri J., Sorrentinob F., Damidot D (2013), "Investigation of the hydration and bioactivity of radiopacified tricalcium silicate cement, Biodentine and MTA Angelus", Dental Materials Journal, 29, pp.580-593 15 Chai Y.,Jiang X., Ito Y., Bringas J.P., Han J., Rowitch D.H (2000), "Fate of the mammalian cranial neural crest during tooth and mandibular morphogenesis", Development, 127, pp.1671-1679 16 Dammaschke T (2012), "A new bioactive cement for direct pulp capping", International Dentistry – Australian edition, 7, pp.52-58 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 17 Derubeis A.R., Cancedda R (2004), "Bone marrow stromal cells (BMSCs) in bone engineering: limitations and recent advances", Ann Biomed Eng, 32, pp.160-165 18 Dezawa M., Ishikawa H., Itokazu Y., Yoshihara T., Hoshino M., Takeda S (2005), "Bone marrow stromal cells generate muscle cells and repair muscle degeneration", Science, 309, pp.314-317 19 Donovan M.G., Dickerson N.C., Hellstein J.W., Hanson L.J (1993), "Autologous calvarial and iliac onlay bone grafts in miniature swine", J Oral Maxillofac Surg, 51, pp.898-903 20 Egusa H S W., Nishimura M., Atsuta I., Akiyama K (2012), "Stem cells in dentistry – Part I: Stem cell sources", Journal of Prosthodontic Research, 56, pp.151-165 21 Eidelman E., Holan G., Fuks A.B (2001), "Mineral trioxide aggregate vs formacresol in pulpotomized primary molars: a preliminary report", Pediatric Dent, 23, pp.15-18 22 Estrela C., Sydney G.B., Bammann L.L., Felippe J.O (1995), "Mechanism of action of calcium and hydroxyl ions of calcium hydroxide on tissue and bacteria", Braz Dent J, 6(2), pp.85-90 23 Farsi N., Alamoudi N., Balso K., Mushayt A (2005), "Success of mineral trioxide aggregate in pulpotomized primary molars", J Clin Pediatr Dent, 29, pp.307-311 24 Finucane D., Kinirons M.F (1999), "Non-vital immature permanent incisors: factors that may influence treatment outcome", Endod Dent Traumatol, 15, pp.273-277 25 Gandolfia M.G., Ciapetti G., Taddei P., Perut F., Tinti A., Cardoso M.V., Meerbeek B.V., Prati C (2010), "Apatite formation on bioactive calcium-silicate cements for dentistry affects surface topography and human Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM marrow stromal cells proliferation", Dental Materials Journal, 26, pp.974992 26 Gerstenfeld L.C., Cullinane D.M., Barnes G.L., Graves D.T., Einhorn T.A (2003), "Fracture healing as a post-natal developmental process: molecular, spatial, and temporal aspects of its regulation", J Cell Biochem, 88(5), pp.873-884 27 Gomes-Cornelio A.L., Rodrigues E.M., Salles L.P., Mestieri L.B., Faria G., Guerreiro-Tanomaru M (2015), "Bioactivity of MTA Plus, Biodentine and an experimental calcium silicate-based cement on human osteoblast-like cells", International Endodontic Journal, pp 1-9 28 Han J., Okada H., Takai H., Nakayama Y., Maeda T., Ogata Y (2009), "Collection and culture of alveolar bone marrow multipotent mesenchymal stromal cells from older individuals", J Cell Biochem, 107, pp.1198-1204 29 Han L., Okiji T (2013), "Bioactivity evaluation of three calcium silicate-based endodontic materials", Int Endod J, pp.1-7 30 Huang T.H., Ding S.J., Hsu T C., Kao C.T (2003), "Effects of mineral trioxide aggregate (MTA) extracts on mitogen-activated protein kinase activity in human osteosarcoma cell line (U2OS)", Biomaterials, 24, pp.39093913 31 Islam I., Chang H.K., Yap A U.J (2006), "X-Ray diffraction analysis of mineral trioxide aggregate and Portland cement", Int Endod J, 39, pp.220225 32 Kang J.Y., Lee B.N., Son H J (2013), "Biocompatibility of mineral trioxide aggregate mixed with hydration accelerators‖, J Endod, 39, pp.497500 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 33 Keiser K C., Johnson C., Tipton D.A (2000), "Cytotoxicity of Mineral Trioxide Aggregate Using Human Periodontal Ligament Fibroblasts", Journal of endodont, pp.288-291 34 Khan S.I.R., Ramachandran A., Deepalakshmi M., Kumar K.S (2012), "Evaluation of pH and calcium ion release of mineral trioxide aggregate and a new root-end filling material", E J Dentistry, pp.166-169 35 Koh E.T., McDonald F., Pitt Ford T.R., Torabinejad M (1998), "Cellular response to mineral trioxide aggregate", J Endod, 24, pp.543-547 36 Koh E.T., Torabinejad M., Pitt Ford T.R (1997), "Mineral trioxide aggregate stimulates a biological response in human osteoblasts" J Biomed Mater Res, 37, pp.432-439 37 Koubi G., Colon P., Franquin J.C (2013), "Clinical evaluation of the performance and safety of a new dentine substitute, Biodentine, in the restoration of posterior teeth – a prospective study", Clin Oral Investig, 17, pp.243-249 38 Kucukkaya S., Gorduysus M.O., Zeybek N.D., MuftuoLlu S.F (2016), "In Vitro Cytotoxicity of Calcium Silicate-Based Endodontic Cement as Root-End Filling Materials", Hindawi Publishing Corporation Scientifica, pp.1-6 39 Laurent P., Camps J., Meo M., Dejou J (2008), "About I Induction of specific cell responses to a Ca(3)SiO(5)-based posterior restorative material‖, Dent Mater, 24, pp.1486-1494 40 Lawley G.R., Schindler W.G., Walker W.A., Kolodrubetz D (2004), "Evaluation of ultrasonically placed MTA and fracture resistance with intracanal composite resin in a model of apexification", J Endo, 30, pp.167172 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 41 Lee B.N., Lee K (2014), "Effects of Endodontic Bioactive Cements on Osteogenic Differentiation in Mesenchymal Stem Cells", JOE, pp.1-6 42 Luo Z., Li D., Kohli M.R., Yu Q., Kim S., He W (2014), "Effect of BiodentineTM on the proliferation, migration and adhesion of human dental pulp stem cells", Journal of dentistry, 42, pp 490-497 43 Ma J., Shen Y., Stojicic S., Haapasalo M (2011), "ERRMPutty and ERRM PastBiocompatibility of Two Novel Root Repair Materials‖, JOE, 37(6), pp.793-798 44 Mahmoud A.M., Depoorter B., Piens N., Comhaire F.H (1997), "The performance of 10 different methods for the estimation of sperm concentration", Fertil Steril, 68, pp.340-345 45 Margunato S., Tas P.N.¸ Aydın S., Kazanda K., Fikrettin S (2015), "In Vitro Evaluation of ProRoot MTA, Biodentine, and MM-MTA on Human Alveolar Bone Marrow Stem Cells in Terms of Biocompatibility and Mineralization", JOE, 41(10), pp.1646-1652 46 Matousek J.L., Campbell K.L., Kakoma I., Solter P.F., Schaeffer D.J (2003), "Evaluation of the effect of pH on in vitro growth of Malassezia pachydermatis", The Canadian Journal of Veterinary Research, 67, pp.56-59 47 Mendes S.C.,Tibbe J.M., Veenhof M., Bakker K., Both S., Platenburg P.P (2002), "Bone tissue-engineered implants using human bone marrow stromal cells: effect of culture conditions and donor age", Tissue Eng, 8, pp.911-920 48 Nunez C.M.C., MClinDent, Bosomworth H.J., Field C., Whitworth J.M., Valentine R.A (2014), "Biodentine and Mineral Trioxide Aggregate Induce Similar Cellular Responses in a Fibroblast Cell Line‖, JOE, 40(3), pp.406 -411 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM 49 Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C., Jaiswal R.K., Douglas R., Mosca J.D (1999), "Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells‖, Science, 284, pp.143-147 50 Pradelle-Plasse N., Tran X.V., Colon P., Laurent P., Aubut V., About I (2009), "Emerging trends in (bio)material research An example of new material: preclinical multicentric studies on a new Ca3SiO5-based dental material In: Goldberg M (ed) Biocompatibility or cytotoxic effects of dental composites‖, Oxford, 1, pp.184-203 51 Prati C., Gandolfi M.G (2015), "Calcium silicate bioactive cements: biological perspectives and clinical applications‖, Dent Mater, 31, pp.351370 52 Rada R.E (2013), " New options for restoring a deep carious lesion‖, Dent Today, 32(102), pp.104-105 53 Ren J., Stroncek D.F., Zhao Y., Jin P., Castiello L,, Civini S., Wang H., Feng J (2013), "Intra-subject variability in human bonemarrow stromal cell (BMSC) replicative senescence: Molecular changes associated with BMSC senescence‖, Stem Cell Research, 11, pp.1060-1073 54 Silva E.J.N.L., Rosa T.P., Herrera D.R., Jacinto R.C., Gomes B.P.F.A (2013), "Evaluation of Cytotoxicity and Physicochemical Properties of Calcium Silicate-based Endodontic Sealer MTA Fillapex‖, JOE, 39(2), pp.274-277 55 Song M., Kang M., Kim H.C (2015), "A Randomized Controlled Study of the Use of ProRoot Mineral Trioxide Aggregate and Endocem as Direct Pulp Capping Materials‖, J Endod, 41(1), pp.11-15 56 Sukcharoen N., Ngeamjirawat J., Chanprasit Y., Arffiarg A (1994), "A Comparison of Makler Counting Chamber and Improved Neubauer Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM Hemocytometer in Sperm Concentration Measurement‖, J Med A, pp.471476 57 The European Union Per Directive 90/385/EEC (2009), "ISO 10993- 5:2009 Biological evaluation of medical devices – Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity‖, pp.1-34 58 The European Union Per Directive 90/385/EEC (2012), "ISO 10993- 12:2012, Biological evaluation of medical devices – Part 12: Sample preparation and reference materials‖, pp.1-20 59 Torabinejad M., Hong C.U., Lee S.F., Monsef M., Pitt Ford T.R (1995), "Investigation of mineral trioxide aggregate for root-end-filling in dogs‖, J Endod, 21, pp.603-608 60 Torabinejad M., Hong C.U., McDonald F., Pitt Ford T.R (1995), "Physical and chemical properties of a new root-end filling materials‖, J Endod, 21, pp.349-353 61 Torabinejad M., Pitt Ford T.R., McKendry D.J., Abedi H.R., Miller D.A., Kariyawasen S.P (1997), "Histologic assessment of MTA as root end filling in monkeys‖, J Endod, 23, pp.225-228 62 Tran X.V., Gorin C., Willig C., Baroukh B., Pellat B., Decup, Vital S.O., Chaussain C, Boukpessi T (2012), "Effect of a calcium-silicate-based restorative cement on Pulp repair‖, J Dent Res, pp.1-6 63 Villat C., Tran X.V., Pradelle.-Plasse N., Ponthiaux P., Wenger F., Grosgogeat B et al (2010), "Impedance methodology: a new way to characterize the setting reaction of dental cements‖, Dent Mater, 26, pp.11271132 64 Yoshino P., Nishiyama C.K., Modena K.C.S., Santos C.F., Sipert C.R (2013), "In Vitro Cytotoxicity of White MTA, MTA Fillapex® and Portland Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược Tp.HCM Cement on HumanPeriodontal Ligament Fibroblasts‖, Brazilian Dental Journal, 24(2), pp.111-116 65 Zanini M., MPhil, Sautier J.M., Berdal A., Simon S (2012), "Biodentine Induces Immortalized Murine Pulp Cell Differentiation into Odontoblast-like Cells and Stimulates Biomineralization‖, JOE, 38(9), pp.1220-1226 66 Zhao X., He W., Song Z., Tong Z., Li S., Ni L (2012), "Mineral trioxide aggregate promotes odontoblastic differentiation via mitogenactivated protein kinase pathway in human dental pulp stem cells‖, Mol Biol Rep, 39, pp.215-220 67 Zhou H.M., Shen Y., Wang Z., Li L., Zheng Y., Hakkinen L., Haapasalo M (2013), "In Vitro Cytotoxicity Evaluation of a Novel Root Repair Material‖, JOE, 39(4), pp.478-483 68 Zins J.E., Whitaker L.A (1979), "Membranous vs endochondral bone autografts: implications for craniofacial reconstruction‖, Surg Forum, 30, pp.521-523 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... sinh tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời tiếp xúc với dịch chiết BiodentineTM MTA 1.10.3 Nhận xét nghiên cứu thực Nhìn chung, nghiên cứu đánh giá đáp ứng tế bào gốc trung mô tế bào gốc trung mô. .. chung tế bào gốc trung mô tế bào mô đệm trung mô đa [20] 1.2.2 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng Tủy xƣơng ngƣời lớn có chứa tế bào tổ tiên đa tiềm hoi mà thƣờng đƣợc gọi tế bào gốc trung mô tủy... phƣơng pháp đánh giá độc tính dịch chiết BiodentineTM, MTA tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 66 4.1.1 Đánh giá độc tính tế bào gốc trung mô tủy xƣơng ngƣời 66 4.1.2 Tế bào gốc trung mô tủy xƣơng