Sử dụng dữ liệu về phổ đạo hàm bậc 1 của dung dịch mẫu, kết hợp với phương trình đường chuẩn của các chất, tính toán nồng độ hai dược chất trong mẫu.. Kết quả ghi phổ được biểu diễn ở [r]
(1)NGHIÊN CỨU X[C ĐỊNH ĐỒNG THỜI
TELMISARTAN VÀ HYDROCHLOROTHIAZIDE TRONG DƢỢC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PH[P QUANG PHỔ ĐẠO HÀM
Trần Thúc Bình1*, Trần Xuân Quang1 N u n T Qu n Tr n 1,2
1 Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế 2 Đại học Sài Gòn
*Email: ttbinh@hueuni.edu.vn Ngày nhận bài: 21/6/2019; ngày hoàn thành phản biện: 3/7/2019; ngày duyệt đăng: 02/10/2019 TÓM TẮT
Bài báo giới thiệu kết nghiên cứu x{c định đồng thời telmisartan (TEL) hydrochlorothiazide (HYD) dược phẩm phương ph{p quang phổ đạo hàm bậc nhất, sử dụng NaOH 0,1 M l|m dung mơi hịa tan Đã tìm c{c điều kiện thích hợp để ph}n tích đồng thời TEL HYD hỗn hợp áp dụng thành công việc x{c định h|m lượng chúng thuốc viên nén với độ tin cậy cao, thể qua độ lệch chuẩn tương đối RSD% v| độ thu hồi Rev%: RSDTEL(%) = 0,87; RevTEL(%) = 100,33; RSDHYD(%) = 2,57; RevHYD(%) = 99,32 Kết
phân tích TEL HYD thuốc viên nén Micardis Plus phương ph{p n|y đồng với kết phân tích phương ph{p tiêu chuẩn HPLC
Từ khóa: Telmisartan (TEL), Hydrochlorothiazide (HYD), phổ đạo hàm bậc
1 MỞ ĐẦU
(2)chemometric phương ph{p hệ phương trình *7,2,5+, phương ph{p hồi quy cấu tử (PCR) v| bình phương tối thiểu riêng phần (PLS-1) [4], phương ph{p bình phương tối thiểu cổ điển[3],phương ph{p tỷ lệ độ hấp thụ [2], phương ph{p ph}n tích đa th|nh phần *2+, phương ph{p phổ đạo hàm bậc sử dụng dung môi Methanol: nước (1:1) *2+, phương ph{p bước sóng kép [6] Trong báo chúng tơi trình bày kết x{c định đồng thời telmisartan hydrochlorothiazide thuốc dạng viên nén phương ph{p quang phổ đạo hàm sử dụng dung mơi NaOH nhằm góp phần phát triển thêm c{c phương ph{p x{c định đồng thời telmisartan hydrochlorothiazide
2 THỰC NGHIỆM 2.1.Thiết b hóa chất
a) Thiết bị: Máy quang phổ UV – VIS hiệu JASCO V630 với phần mềm UV-Win;
- Các thiết bị dụng cụ khác: Cân phân tích hiệu Precisa XB 2204 độ xác 0,0001 g Máy cất nước hai lần thạch anh, hiệu Fistreem Cyclon Aquatron; Máy lắc hiệu KIKA LABORTECHNIK KS 250 basic; Một số dụng cụ thí nghiệm khác
b Hóa chất
- Chất chuẩn TEL 98,97% HYD 98,10%: cung cấp Bộ Y tế - Viện kiểm nghiệm thành phố Hồ Chí Minh
- Pha dung dịch gốc TEL 1000 µg/mL: cân xác 101,0 mg chất chất chuẩn TEL v|o bình định mức 100 mL, thêm NaOH 0,1 M vào, lắc đều, định mức dung dịch NaOH 0,1M
- Pha dung dịch gốc HYD 1000 µg/mL: cân xác 101,9 mg chất chuẩn HYD v|o bình định mức 100 mL, thêm NaOH 0,1 M vào, lắc đều, định mức dung dịch NaOH 0,1M
- Dùng pipet lấy xác 10mL dung dịch gốc cho v|o bình định mức 100 mL, định mức đến vạch dung dịch NaOH 0,1M, lắc dung dịch làm việc TEL 100 µg/mL HYD 100 µg/mL
2.2 P ƣơn p áp p ân tíc
(3)- Bước 1: Chuẩn bị dung dịch chuẩn riêng cấu tử hỗn hợp chúng - Bước 2: Ghi phổ hấp thụ phổ đạo h|m, tìm bước sóng đo thích hợp mà giá trị phổ đạo hàm chất cần phân tích khác cực đại, giá trị phổ đạo hàm cấu tử
- Bước 3: Sau x{c định bước sóng đo bậc đạo hàm định, tiến h|nh định lượng chất theo phương ph{p đường chuẩn thêm chuẩn
3 KẾT QUẢ V\ THẢO LUẬN
3.1 K ảo sát p ổ ấp t ụ p ổ đạo àm củ TEL HYD
Tiến hành: Pha dung dịch chuẩn TEL 10,0 µg/mL HYD 10,0 µg/mL Quét phổ hấp thụ phân tử chúng khoảng bước sóng 220 ÷ 340 nm, khoảng cách bước sóng ghi giá trị phổ 0,2 nm Kết đo phổ hấp thụ phân tử dung dịch phổ đạo hàm bậc chúng thể hình 1a 1b
Hình 1a
Hình 1b
Hình 1. Phổ hấp thụ phân tử (hình 1a) phổ đạo hàm (hình 1b) dung dịch chuẩn TEL 10
(4)Hình 1a cho thấy phổ hấp thụ phân tử dung dịch chuẩn TEL HYD xen phủ khoảng bước sóng 220 ÷ 340 nm Xét phổ đạo hàm bậc hình 1b, khoảng bước sóng 220÷340 nm phổ đạo hàm bậc hai chất xen phủ Tại bước sóng 322,8 nm giá trị phổ đạo hàm bậc HYD 0, giá trị phổ đạo hàm bậc TEL khác Do chọn bước sóng 1 = 322,8 nm để định lượng
TEL Có thể chọn bước sóng 227,5 nm, gi{ trị phổ đạo hàm bậc TEL 0, giá trị phổ đạo hàm HYD kh{c không để x{c định HYD Tuy nhiên qua khảo sát, bước sóng giá trị phổ đạo hàm HYD không ổn định độ dốc đường phổ HYD lớn Do để x{c định HYD, sử dụng phương ph{p hiệu số C{ch x{c định HYD phương ph{p n|y sau: Tại bước sóng 282,4 nm, giá trị phổ đạo hàm bậc TEL v| HYD đạt cực trị, gi{ trị phổ đạo hàm HYD đạt cực đại TEL đạt cực tiểu Do chọn bước sóng 2 = 282,4
nm để định lượng HYD sau định lượng TEL trước v| trừ đóng góp giá trị phổ đạo hàm bậc TEL vào phổ đạo hàm bậc hỗn hợp hai chất bước sóng
3.2 Đƣờn c uẩn củ TEL HYD
Tiến hành: Pha dãy dung dịch chuẩn TEL dãy dung dịch chuẩn HYD có nồng độ tương ứng tăng dần từ µg/mL đến 25,0 µg/mL Quét phổ đạo hàm bậc dung dịch khoảng bước sóng 220 ÷ 340 nm, khoảng c{ch bước sóng ghi phổ 0,2 nm Kết thu được trình bày bảng Đường chuẩn TEL bước sóng 322,8 nm thể hình 2a Đường chuẩn HYD bước sóng 282,4 nm thể hình 2b
Bảng 1. Giá trị đạo hàm bậc theo nồng độ TEL λ =322,8 nm v| HYD λ =282,4 nm
C (µg/mL) 10 15 20 25
dA/d322,8 0,00286 0,00535 0,00816 0,01073 0,01333 0,02008 0,02684 0,03386
(5)Hình 2a
Hình 2b
Hình 2. Đường chuẩn TEL bước sóng 322,8 nm (Hình 2a) v| đường chuẩn HYD bước sóng 282,4 nm (Hình 2b)
Qua khảo sát cho thấy, bước sóng 322,8 nm: giá trị phổ đạo hàm bậc TEL tuyến tính tốt với nồng độ khong nng ữ 25 àg/mL v| cng tng tự HYD bước sóng 282,4 nm Phương trình hồi quy tuyến tính TEL khong nng ữ 25 àg/mL ti bc súng 322,8 nm là: y = 1,3476.10-3x-7,704.10-7, hệ số tương quan R = 0,9999 v| HYD khoảng nồng độ
2 ữ 25 àg/mL ti bc súng 282,4 nm là: y = 3,7333.10-3x - 1,06704.10-3 Trong x l|
nồng độ TEL HYD với đơn vị µg/mL, y giá trị phổ đạo hàm TEL HYD c{c bước sóng lựa chọn
y = 0,00373x -0, 00107 R = 0,9997
0 10 15 20 25
0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10
CHYD(µg/mL) A’
0 10 15 20 25
0.000 0.005 0.010 0.015 0.020 0.025 0.030 0.035
y = 1,3467.10-3x – 7,7049.10-7 R = 0,9999
(6)3.3 Giới ạn p át iện (LOD) iới ạn đ n lƣợn (LOQ) củ p ƣơn p áp p ân tích
Để x{c định LOD, LOQ tiến hnh chn khong nng 2ữ2,5 àg/mL xõy dng đường hồi quy tuyến tính Áp dụng quy tắc 3 để x{c định LOD, LOQ phương ph{p Kết x{c định trình bày bảng
Bảng 2. Kết x{c định LOD, LOQ TEL HYD
Chất
Phương trình hồi qui tuyến tính
a b Sy R LOQ
(µg/mL)
LOD (µg/mL)
TEL y =1,3476.10-3x
-7,7049.10-7 1,3476.10
-3 -7,7049.10-7 1,40.10-4 0,9999 1,03 0,31
HYD y=3,7333.10-3x
- 1,06704.10-3 3,7333.10
-3 -1,06704.10
-3 7,29.10
-4 0,9997 1,95 0,59
Bảng 3.2 cho thấy gi{ trị LOD TEL v| HYD tương ứng 0,31 0,59 µg/mL Giá trị LOQ TEL HYD tương ứng 1,03 1,95 µg/mL
3.4 Xâ dựn qu trìn p ân tíc mẫu t ực tế
3.4.1 Xử lý mẫu
Tiến h|nh định lượng TEL HYD thuốc viên nén Micardis Plus sản xuất công ty Boehringer Ingelheim pharma GmbH & Co.KG.Germany Thành phần ghi nhãn thuốc: TEL 40 mg/viên, HYD 12,5 mg/viên
Cân 20 viên thuốc, tính khối lượng trung bình viên M = 438,2 (mg) Dùng cối, chày sứ nghiền viên thuốc thành bột mịn trộn đều, chia làm phần Một phần gởi Trung tâm kiểm nghiệm Thuốc, Mỹ phẩm, Dược phẩm Thừa Thiên Huế để phân tích phương ph{p tiêu chuẩn HPLC Phần cịn lại đem c}n x{c m (mg) lượng mẫu cho vào cốc thủy tinh, hòa tan mẫu dung mơi NaOH 0,1 M, cho v|o bình định mức 250 mL Sau định mức dung mơi NaOH 0,1 M đến ngang vạch Lọc mẫu giấy lọc băng xanh, dung dich thu cho vào bình tam giác 250 mL Dùng pipet hút xác mL dung dịch lọc cho v|o bình định mức 100 mL, định mức đến vạch dung môi NaOH 0,1 M, dung dịch mẫu Quét phổ hấp thụ dung dịch mẫu khoảng bước sóng 220 ÷ 340 nm Sử dụng liệu phổ đạo hàm bậc dung dịch mẫu, kết hợp với phương trình đường chuẩn chất, tính tốn nồng độ hai dược chất mẫu
3.4.2 Tính to{n h|m lượng chất
H|m lượng chất viên tính theo công thức sau: A = 5.C.M/m (mg/viên)
(7)- C: nồng độ chất x{c định dung dịch mẫu đo ( g/mL) - M: khối lượng trung bình viên (mg)
- m: khối lượng bột viên c}n để định lượng (mg) 3.4.3 Định lượng TEL HYD dung dịch mẫu
Tiến hành xử lý mẫu trình b|y mục 3.4.1 với mẫu lặp lại ký hiệu l| M1, M2, M3 Đồng thời, pha dung dịch chuẩn TEL 10 µg/mL, HYD 10 µg/mL Sau qt phổ đạo hàm bậc dung dịch khoảng bước sóng 220 ÷ 340 nm, khoảng c{ch bước sóng ghi giá trị phổ 0,2 nm Kết ghi phổ biểu diễn hình Kết x{c định h|m lượng TEL HYD thuốc trình bày bảng
Hình 3. Phổ đạo hàm bậc dung dịch chuẩn TEL 10µg/mL, HYD 10µg/mL dung dịch mẫu thuốc Micardis Plus M1, M2, M3
Bảng 3. Kết x{c định TEL HYD dung dịch mẫu, h|m lượng tương ứng viên thuốc Micardis Plus
Mẫu Khối lượng mẫu thuốc
(mg)
Nồng độ dung dịch đo (µg/mL)
H|m lượng (mg/viên)
TEL HYD TEL HYD
M1 438,2 7,70 2,57 38,5 12,85
M2 438,3 7,81 2,31 39,05 11,55
M3 438,2 7,92 2,54 39,6 12,7
Kết
m= 438,2
Ctb= 7,81; S = 0,11
RSD = 1,4% RSDHorwitz = 12,8%
Ctb= 2,47; S =
0,14 RSD = 5,7%
RSDHorwitz =
13,96%
xtb= 39,05
S = 0,55 RSD = 1,4%
xtb= 12,37
S = 0,71 RSD = 5,7%
Kết thu cho thấy RSD(PTN) < ½ RSDHorwitz Giá trị RSDHorwitz tính