Nghiên cứu lựa chọn cơ chất hữu cơ để sản xuất phân hữu cơ vi sinh cho cây chè shan tại tỉnh yên bái

BỘ GIÁO DỤC VÀO ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT -* - NGUYỄN THỊ YÊN NGHIÊN CỨU LỰA CHỌN CƠ CHẤT HỮU CƠ ĐỂ SẢN XUẤT PHÂN HỮU CƠ VI SINH CHO CÂY CHÈ SHAN TẠI TỈNH YÊN BÁI LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC HÀ NỘI – 2012 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn với cố gắng, nỗ lực thân tơi xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới Thầy Lê Như Kiểu, Phó Viện trưởng, Cơ Lê Thị Thanh Thủy, Phó Trưởng Bộ mơn Vi sinh vật, Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn Thầy, Cô giáo Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật, Trường Đại Học Thái Nguyên tận tình truyền đạt cho Tôi kiến thức suốt năm học tập, tảng cho Tơi q trình nghiên cứu luận văn, hành trang qúy báu theo suốt đời Tôi xin chân thành cảm ơn Cô, Chú, Anh ,Chị công tác Bộ mơn Vi sinh vật, Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa giúp đỡ Tơi q trình hồn thành luận văn Cuối Tơi xin kính chúc q Thầy, Cơ, Anh, Chị gia đình dồi sức khỏe, thành cơng nghiệp! Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 30 tháng 10 năm 2012 Học viên Nguyễn Thị Yên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn hoàn toàn trung thực, chưa sử dụng cho bảo vệ học vị Mọi giúp đỡ cho hoàn thành luận văn cảm ơn Các thơng tin, tài liệu trình bày luận văn ghi rõ nguồn gốc Tác giả Nguyễn Thị Yên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên MỤC LỤC MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mục đích yêu cầu 3 Nội dung nghiên cứu CHƢƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Cở sở khoa học thực tiễn đề tài 1.1 Cơ sở khoa học 1.2 Cơ sở thực tiễn Tổng quan trình ủ compost 2.1 Khái niệm 2.2 Các yếu tố tham gia vào trình ủ compost 2.3 Cơ sở lý, hóa học trình ủ compost 2.4 Điều khiển trình ủ compost 10 2.5 Các tiêu đánh giá chất lượng compost 12 2.6 Những lợi ích hạn chế trình ủ compost 13 Những nghiên cứu nƣớc xử lý chất hữu 14 Những nghiên cứu nƣớc xử lý chất hữu 18 Điều tra nguồn than bùn phụ phẩm nông nghiệp tỉnh Yên Bái 20 5.1 Than bùn 20 5.2 Nguồn phế phụ phẩm nông nghiệp 22 Phân hữu vi sinh 24 CHƢƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 27 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Đối tƣợng, vật liệu nghiên cứu 27 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 27 Phƣơng pháp nghiên cứu 27 3.1 Các môi trường dùng nghiên cứu: 27 3.2 Các phương pháp nghiên cứu 28 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 Nghiên cứu tuyển chọn chủng giống cho sản xuất chế phẩm vi sinh phân giải cellulose …………………………………………………….34 1.1 Tuyển chọn chủng VSV có khả phân giải cellulose 34 1.2 Tổ hợp chủng vi sinh vật phân giải cellulose 36 1.3 Một số đặc điểm sinh học chủng vi sinh vật tuyển chọn 38 1.4 Đánh giá độ an toàn sinh học chủng vi sinh vật tuyển chọn 39 1.5 Định danh chủng VSV lựa chọn 40 Ảnh hƣởng yếu tố môi trƣờng đến sinh trƣởng, phát triển khả phân giải cellulose chủng vi sinh vật tuyển chọn 41 2.1 Ảnh hưởng oxy 41 2.2 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy 42 2.3 Ảnh hưởng pH 44 2.4 Ảnh hưởng nhiệt độ 45 Nghiên cứu xử lý nguyên liệu hữu làm chất hữu cho sản xuất phân hữu vi sinh (HCVS) cho chè Shan 46 3.1 Biến động nhiệt độ 46 3.2 Sự thay đổi pH thùng ủ 47 3.3 Biến động quần thể VSV 49 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên 3.4 Hàm lượng chất dinh dưỡng trước sau ủ 51 3.5 Đặc điểm cảm quan sản phẩm sau xử lý 54 3.6 Đánh giá độ hoai mục độ an toàn sản phẩm sau ủ 54 Nghiên cứu bổ sung dinh dƣỡng (đa, trung, vi lƣợng) để nâng cao chất lƣợng phân HCVS cho chè Shan 57 4.1 Xác định tỷ lệ phối trộn nguyên tố đa, trung, vi lượng 57 4.2 Xác định tỷ lệ phối trộn VSV 59 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 62 Kết luận 62 Đề nghị 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Ký hiệu Diễn giải HCVS Hữu vi sinh PPP Phế phụ phẩm PTNT Phát triển nông thôn TCN Tiêu chuẩn ngành TCVN VPG Vòng phân giải VSV Vi sinh vật Tiêu chuẩn Việt Nam Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1: Động thái nhiệt độ trình ủ compost với số phế phụ phẩm nơng nghiệp, chế biến (oC) Bảng 2: Mức độ phân giải tối đa số nguyên liệu compost 10 Bảng 3: Một số tiêu chất lượng than bùn Phù Nham, Yên Bái 21 Bảng 4: Phân tích thành phần hóa học PPP tỉnh Yên Bái năm 2011 22 Bảng 5: Thành phần hoá học số loại phân gia súc, gia cầm 24 Bảng 6: Các cơng thức thí nghiệm 32 Bảng 7: Khả phân giải cellulose chủng VSV tuyển chọn 34 Bảng 8: Tỷ lệ giảm khối lượng rơm bình ủ 37 0C sau ngày 36 Bảng 9: Khả tác động tương hỗ chủng VSV tuyển chọn 37 Bảng 10: Mật độ tế bào (CFU/g) hoạt tính phân giải cellulose chủng VSV chất mang 37 Bảng 11: Một số đặc điể chủng VSV tuyển chọn 38 Bảng 12: Tình trạng sức khoẻ chuột thời gian thí nghiệm 39 Bảng 13: Trọng lượng chuột thời gian thí nghiệm 40 41 Bảng 15: Mật độ tế bào chủng VSV điều kiện nuôi cấy lắc nuôi tĩnh sau 48 nuôi cấy 42 Bảng 16: Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy tới mật độ 43 chủng VSV lựa chọn 43 Bảng 17: Mật độ tế bào (CFU/ml) chủng VSV lựa chọn điều kiện pH khác sau thời gian nuôi cấy* 44 Bảng 18: Mật độ tế bào (CFU/ml) chủng VSV lựa chọn điều kiện nhiệt độ khác sau thời gian nuôi cấy* 45 Bảng 19: Biến động nhiệt độ thùng ủ compost 46 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Bảng 20: Sự thay đổi pH thùng ủ compost 48 Bảng 21: Mật độ tế bào hoạt tính phân giải cellulose 49 chủng VSV chế phẩm vi sinh 49 Bảng 22: Biến động quần thể VSV thùng ủ compost 50 Bảng 23: Hàm lượng chất dinh dưỡng than bùn trước sau ủ 51 Bảng 24: Hàm lượng chất dinh dưỡng rơm rạ trước sau ủ 52 Bảng 25: Hàm lượng chất dinh dưỡng phân chuồng trước sau ủ52 Bảng 26: Hàm lượng chất dinh dưỡng thân, lạc trước sau ủ 53 Bảng 27: Hàm lượng chất dinh dưỡng thân, đậu tương trước sau ủ 53 Bảng 28: Tính chất cảm quan sản phẩm sau ủ 54 Bảng 29: Khả sinh trưởng hạt cải phân ủ compost sau ngày 55 Bảng 30: Kết kiểm tra nhiệt độ túi phân ủ 56 Bảng 31: Một số kết tổng hợp từ trình ủ compost 57 Bảng 32: Mật độ hoạt tính sinh học chủng VSV hữu ích trước nhiễm vào chất mang 58 Bảng 33: Mật độ hoạt tính sinh học chủng VSV hữu ích phân HCVS chất mang khác 59 Bảng 34: Mật độ tế bào hoạt tính sinh học chủng VSV công thức phối trộn chất mang than bùn 60 Bảng 35: Mật độ tế bào hoạt tính sinh học chủng VSV công thức phối trộn chất mang rơm rạ 61 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Việt Nam quốc gia có tới 80% dân số sống nghề nơng nghiệp, lượng phế thải thải từ nông nghiệp hàng năm lớn gồm (40 triệu rơm rạ, 30 triệu mía, 3,5 triệu thân ngô, triệu thân lạc, triệu thân đậu tương, 0,5 triệu vỏ cà phê triệu thân khoai tây, khoai lang, dưa loại, dứa ) tương đương với 639.000 N, 212.000 P2O5, 835.000 K2O [11] Phế phụ phẩm nông nghiệp phần lớn hợp chất hữu giàu cacbon Sản phẩm sau trình phân hủy chúng tác dụng cung cấp dinh dưỡng cần thiết cho trồng cịn có khả làm cho đất tơi xốp, cải thiện đặc tính đất, khả giữ nước Phế phụ phẩm nông nghiệp bao gồm hợp chất hydratcacbon, protein, lipit số hợp chất hữu khác, ngồi chúng cịn chứa số chất có giá trị dinh dưỡng trình sinh trưởng phát triển cuả trồng Theo phương thức sản xuất nông nghiệp truyền thống, lượng phế phụ phẩm nông nghiệp sau thu hoạch chuyển nhà sử dụng nguồn nguyên liệu để đun nấu nông hộ… ngày thay hầu hết hộ nông dân sử dụng nguồn nguyên liệu khác than, gas, điện cho việc nấu nướng nên phần lớn lượng phế phụ phẩm nông nghiệp sau thu hoạch người nông dân đốt đồng ruộng việc đốt lượng phế phụ phẩm nơng nghiẹp đồng ruộng dần hình thành thói quen xấu, khơng gây ảnh hưởng xấu tới mơi trường sinh thái mà cịn lãng phí nguồn nguyên liệu có nguồn gốc thực vật Sản xuất phân bón nước đáp ứng 30% nhu cầu phân đạm, 65% nhu cầu phân lân sản xuất nơng nghiệp, cịn lại phải nhập phân bón từ nước ngồi, đặc biệt phân kali phải nhập 100% Trong giai đoạn 2005-2010 dự tính hàng năm nhu cầu sản xuất cần 1.504.000 N Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị n phịng, tránh nơi có ánh sáng trực tiếp Kết kiểm tra nhiệt độ túi phân ủ thời gian ngày liên tiếp thể bảng 30: Bảng 30: Kết kiểm tra nhiệt độ túi phân ủ Loại phân ủ Than bùn Rơm rạ Phân chuồng Thân lạc Thân đậu tương Nhiệt độ môi trường (oC) Công thức ĐC TN ĐC TN ĐC TN ĐC TN ĐC TN Nhiệt độ (oC)* Ngày thứ Ngày thứ hai 32 33 30 31 34 34 31 31 34 35 31 31 34 34 30 31 34 34 31 31 29 30 Ngày thứ ba 33 31 33 31 34 31 33 31 33 31 30 *: Nhiệt độ trung bình lần nhắc Kết đánh giá độ hoai mục củ ẩn Việt Nam TCVN 7185: 2002 cho thấy, mẫu phân ủ cơng thức thí nghiệm (có bổ sung chế phẩm vi sinh phân giải cenlulose) có nhiệt độ ổn định ngày theo dõi liên tiếp nhiệt độ cao nhiệt độ môi trường khoảng – 2oC Nhiệt độ mẫu phân ủ đối chứng cao từ – 5oC so với nhiệt độ môi trường từ – 4oC so với nhiệt độ mẫu phân ủ thí nghiệm Điều giải thích q trình hơ hấp VSV mẫu phân ủ Sự hô hấp mạnh VSV mẫu phân ủ đối chứng chứng tỏ VSV mẫu phân ủ đối chứng thực trình phân hủ ứng tỏ mẫu phân ủ thí nghiệm hoai mục hồn tồn Kết luận: Các nguyên liệu hữu có sẵn địa phương (than bùn, phế phụ phẩm nông nghiệp) sau trình ủ compost tạo loại chất (phân ủ) mang nhiều điều kiện thuận lợi cho việc sản xuất phân HCVS 56 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Tổng hợp số kết từ trình ủ compost nguyên liệu hữu có sẵn thể bảng 31: Bảng 31: Một số kết tổng hợp từ trình ủ compost TT Chỉ tiêu so sánh Thời gian ủ (ngày) Nhiệt độ cao đống ủ (oC) pH KCl OC (%) Nts (%N) Pts (% P2O5) Kts (% K2O) (%) Màu sắc, cảm quan Khả sống sót hạt cải (%) Than bùn Loại nguyên liệu ủ compost Phân Thân Rơm rạ chuồng lạc Thân đậu tương 28 28 28 28 28 50 53 58 55 54 7,5 22,92 2,20 0,72 0,63 50,17 Đen tuyền 7,0 32,12 2,30 0,80 1,37 50,87 Nâu sẫm 6,9 18,5 0,95 0,22 0,41 33 Đen 7,4 31,12 2,40 0,75 1,25 50,17 Nâu sẫm 7,3 33,71 1,67 2,64 1,07 52,38 Nâu sẫm 94 95 93 90 93 Nghiên cứu bổ sung dinh dƣỡng (đa, trung, vi lƣợng) để nâng cao chất lƣợng phân HCVS cho chè Shan 3.5 Xác định tỷ lệ phối trộn nguyên tố đa, trung, vi lượng Đề tài tiến hành nghiên cứu lựa chọn chất để sản xuất phân hữu vi sinh từ mẫu phân ủ than bùn, rơm rạ, phân chuồng, thân lạc, thân đậu tương Các loại chất nghiền nhỏ, loại bỏ tạp chất phối trộn với chủng VSV (cố định nitơ YB03, phân giải lân BL2, kích thích sinh trưởng ST1) N:P:K theo tỷ lệ 1,3:1:1 Vì chất mang để sản xuất phân bón có số lượng lớn nên khử trùng được, để giảm bớt phát triển nhóm VSV khơng mong muốn khác, đề tài bổ sung thêm lít dịch hỗn hợp VSV (YB03, BL2, ST1 57 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên đạt mật độ tế bào 109 CFU/ml) chất mang nhằm ức chế phát triển chúng Căn vào nhu cầu dinh dưỡng tỷ lệ phân bón cho chè mà Bộ Nông nghiệp PTNT khuyến cáo, đề tài đưa tỷ lệ phối trộn N:P:K vào chất hữu 1,3:1:1 Vì nguyên tố trung vi lượng phân bón khơng có thay đổi nhiều nên thí nghiệm sau tập trung vào xác định tỷ lệ phối trộn nguyên tố sau: nguyên tố dinh dưỡng với trồng N, P,K nguyên tố trung lượng Ca, S Ca S có thành phần supe Lân Cụ thể sau: Khi phối trộn N:P:K theo tỷ lệ 1,3:1:1 tỷ lệ Ca 1,374 % tỷ lệ S 0,686 % Các nguyên tố trung vi lượng khác phối trộn vào chất mang theo tỷ lệ sau: Mg: 0,3%, Acid humic: 3% Sau phối trộn N,P,K nguyên tố trung, vi lượng vào loại chất mang than bùn, rơm rạ, phân chuồng, thân lạc, thân đậu tương (theo tỷ lệ N: 1,3%, P: 1%, K: 1%, Ca: 1,374%, S: 0,686%, Mg: 0,3%, Acid humic: 3%) đề tài tiến hành kiểm tra mật độ tế bào chủng VSV hữu ích hoạt tính sinh học chúng loại phân Kết thể bảng 32: Bảng 32: Mật độ hoạt tính sinh học chủng VSV hữu ích trước nhiễm vào chất mang TT Chủng VSV hữu ích Chỉ tiêu Mật độ tế bào (x10 CFU/ml) Hàm lượng C2H2/ml/h) etylen (nmol Đường kính vịng phân giải lân khó tan (D-d, mm) sau ngày ni cấy Hàm lượng IAA hình thành dung dịch ni cấy sau ngày (µg/ml) 58 YB03 1,7 BL2 2,1 ST1 2,0 421,5 - - - 18,0 - - - 103,23 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Bảng 33: Mật độ hoạt tính sinh học chủng VSV hữu ích phân HCVS chất mang khác Mật độ tế bào VSV (x 106 CFU/g) Thời gian 15 ngày 30 ngày Hoạt tính sinh học Loại chất mang YB03 BL2 ST1 (nmol/ml/ ngày) (mm) (µg/ml) 2,2 427,5 18,8 116,5 3,0 3,4 427,8 18,8 116,7 2,9 2,6 2,1 425,8 16,8 112,8 Thân lạc 2,6 2,5 3,0 420,5 17,0 114,7 Thân đậu tương 3,0 3,2 1,8 423,6 17,0 116,0 Than bùn 1,5 1,6 1,8 427,8 18,6 116,5 Rơm rạ 2,3 2,0 2,3 428,1 18,9 116,8 Phân chuồng 0,23 0,19 1,24 416,8 16,0 110,3 Thân lạc 0,18 0,32 0,25 412,5 16,5 112,5 Thân đậu tương 0,16 0,25 0,16 413,0 16,0 113,0 YB03 BL2 ST1 Than bùn 2,7 2,7 Rơm rạ 3,2 Phân chuồng Từ bảng 33 cho thấy, sau 30 ngày phối trộn mật độ VSV sống sót chất mang than bùn rơm rạ cao so với chất mang lại, đồng thời hoạt tính sinh học chủng VSV khơng bị giảm Từ kết cho thấy, than bùn rơm rạ sau ủ compost đáp ứng đủ điều kiện để trở thành chất cho sản xuất phân hữu vi sinh 3.6 Xác định tỷ lệ phối trộn VSV Phân HCVS loại phân phức hợp phân hữu phân vi sinh Dựa chất mang lựa chọn hỗn hợp than bùn rơm rạ sau ủ phối trộn nguyên tố đa, trung, vi lượng tạo chất hữu cho sản xuất 59 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên phân HCVS Để trở thành phân HCVS chất cần bổ sung thêm VSV để đảm bảo mật độ tế bào VSV phân bón Mật độ tế bào VSV bổ sung vào dạng dịch đạt 109 CFU/ml dịch Sau chất bổ sung dịch lên men VSV tiến hành đóng gói thành phẩm bảo quản điều kiện nhiệt độ phịng Thí nghiệm xác định tỷ lệ VSV bổ sung vào chất thực với loại phân hữu chất mang than bùn rơm rạ sau ủ Các kết thu đượ 34 Bảng 34: Mật độ tế bào hoạt tính sinh học chủng VSV công thức phối trộn chất mang than bùn Mật độ tế bào (x 106 CFU/g) Thời gian Cơng thức ngày Hoạt tính sinh học YB03 BL2 ST1 CT1 6,0 7,8 6,8 YB03 (nmol/ml/ ngày) 427,0 CT2 6,5 7,5 6,7 15 ngày CT1 6,0 7,6 CT2 6,4 30 ngày CT1 CT2 BL2 (mm) ST1 (µg/ml) 18,5 115,4 427,2 18,5 115,4 6,5 426,8 18,5 115,5 7,5 6,6 427,0 18,5 115,4 5,8 7,6 6,5 426,8 18,4 115,3 6,3 7,4 6,4 426,8 18,4 115,3 + CT1: Bổ sung kg lít dịch hỗn hợp VSV chất hữu + CT2: Bổ sung kg lít dịch hỗn hợp VSV chất hữu 60 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Bảng 35: Mật độ tế bào hoạt tính sinh học chủng VSV công thức phối trộn chất mang rơm rạ Mật độ tế bào (x 106 CFU/g) Thời gian Cơng thức ngày Hoạt tính sinh học YB03 BL2 ST1 CT1 6,0 7,8 6,8 YB03 (nmol/ml/ ngày) 427,0 CT2 6,5 7,5 6,7 15 CT1 6,0 7,6 ngày CT2 6,4 30 ngày CT1 CT2 BL2 (mm) ST1 (µg/ml) 18,5 115,4 427,2 18,5 115,4 6,5 426,8 18,5 115,5 7,5 6,6 427,0 18,5 115,4 5,8 7,6 6,5 426,8 18,4 115,3 6,3 7,4 6,4 426,8 18,4 115,3 + CT1: Bổ sung kg lít dịch hỗn hợp VSV chất hữu + CT2: Bổ sung kg lít dịch hỗn hợp VSV chất hữu Dịch VSV bổ sung vào chất hữu với liều lượng khác kết sau 30 ngày khơng có khác biệt công thức mật độ tế bào hay hoạt tính sinh học chủng VSV, đồng thời mật độ tế bào hoạt tính sinh học chủng VSV đảm bảo Do vậy, để tiết kiệm chi phí sản xuất, đề tài định chọn tỷ lệ bổ sung VSV vào chất hữu lit dịch/1 chất để tiếp tục thử nghiệm Kết luận: Đề tài lựa chọn chất cho sản xuất phân HCVS phân ủ than bùn rơm rạ, tỷ lệ phối trộn (%) nguyên tố đa trung vi lượng vào chất N:P:K:Ca:S:Mg:Acid humic:1,3:1:1:1,374:0,686:0,3:3 Đồng thời, đề tài chọn tỷ lệ bổ sung chủng VSV hữu ích lit dịch hỗn hợp VSV kg chế phẩm VSV cho chất hữu 61 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận - Đã lựa chọn chủng vi sinh vật V2, V4, X2, X3 có khả phân giải cellulose (đường kính vịng phân giải cellulose đạt 28 mm) Các chủng VSV lựa chọn định danh xác định chủng VSV an toàn để sử dụng làm chế phẩm vi sinh phân giải cellulose Kết định danh là: chủng vi khuẩn V2 V4 Bacillus subtilis, chủng X2 Streptomyces lilaceus, chủng X3 Streptomyces misionensis - Đã xác định số yếu tố môi trường ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển hoạt tính phân giải cellulose chủng VSV tuyển chọn: chủng vi khuẩn V2 V4 sinh trưởng tốt điều kiện nuôi lắc, pH từ 6,6 – 7,5, thời gian sinh trưởng ngày, nhiệt độ từ 26 – 31oC; chủng xạ khuẩn X2, X3 sinh trưởng tốt điều kiện nuôi lắc, pH từ 6,6 – 7,5, thời gian sinh trưởng ngày, nhiệt độ từ 31 – 41oC Đồng thời, điều kiện nuôi cấy tối ưu hoạt tính phân giải cellulose chủng VSV tuyển chọn đạt cao (đường kính vịng phân giải cellulose chủng V2, V4, X2, X3 28, 29, 30, 31 mm) - Đã nghiên cứu xử lý nguồn nguyên liệu hữu có sẵn huyện Văn Chấn, Trấn Yên tỉnh Yên Bái gồm: Than bùn, rơm rạ, phân chuồng, thân lạc, thân đậu tương Phân ủ compost nguyên liệu nói tơi, xốp, có màu nâu sẫm đen đồng thời trình ủ compost hàm lượng chất dinh dưỡng (N, P, K tổng số) không bị mà cao hơn so với nguyên liệu trước ủ Do vậy, loại phân ủ compost đạt yêu cầu trở thành nguồn chất hữu cho sản xuất phân HCVS - Đã lựa chọn chất cho sản xuất phân HCVS phân ủ than bùn rơm rạ, tỷ lệ phối trộn (%) nguyên tố đa trung vi lượng vào chất N:P:K:Ca:S:Mg:Acid humic:1,3:1:1:1,374:0,686:0,3:3 Đồng thời, đề tài chọn tỷ lệ bổ sung chủng VSV hữu ích lit dịch hỗn hợp VSV kg chế phẩm VSV cho chất hữu 62 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Đề nghị Những nghiên cứu xử lý loại nguyên liệu: than bùn, rơm rạ, phân chuồng, thân lạc, thân đậu tương đề tài áp dụng xử lý quy mô nhà lưới Do vậy, để đảm bảo khách quan xác nữa, đề tài muốn đề nghị tiếp tục nghiên cứu xử lý quy mơ rộng xử lý thêm số loại nguyên liệu hữu khác 63 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Tăng Thị Chính 2000 Nghiên cứu hoạt động số nhóm vi sinh vật hiếu khí q trình phân hủy rác có thổi khí Luận án Tiến sĩ Sinh học Tăng Thị Chính, Lý Kim Bảng, Nguyễn Thị Phương Chi, Lê Gia Hy 2003 Hiệu sử dụng chế phẩm Micromix xử lý rác thải phương pháp ủ hiếu khí nhà máy chế biến phế thải Việt Trì, Phú Thọ Kỷ yếu Hội nghị NCCB lên thứ 2-7/2003 Nxb Khoa học & Kỹ thuật, tr 567-569 Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh, Ngô Xuân Nghiễn cộng 2001 Kết nghiên cứu công nghệ nuôi trồng nấm ăn nấm dược liệu bã mía Hội thảo quốc tế sinh học, Hà Nội - Việt Nam, Tr.113 - 119 Nguyễn Lân Dũng 1978 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học, Tập 1, 2, 3, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật nông nghiệp Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty Vi sinh vật học Nhà xuất giáo dục Nguyễn Thị Hoài Hà 1998 Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu đặc điểm sinh học chủa số chủng vi sinh vật có khả chuyển hóa phốtpho khó tan, nhăm góp phần vào việc sản xuất phân hữu vi sinh Luận án Thạc sĩ Bùi Huy Hiền, Vũ Thị Kim Thoa ctv 2005 “Nghiên cứu xây dựng chiến lợc kiểm sốt quản lý có hiệu loại phân bón”, Kết nghiên cứu khoa học-quyển 4-Viện Thổ nhỡng nơng hố, Nhà xuất Nơng nghiệp, Hà Nội, trang 240-249 Trịnh Tam Kiệt, Đoàn Văn Vệ, Vũ Mai Liên 1986 Sinh học kỹ thuật nuôi trồng nấm ăn NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Võ Đình Ngơ, Nguyễn Siêu Nhân, Trần Mạnh Trí 1997 Than bùn Việt Nam sử dụng than bùn nông nghiệp, Nhà xuất Nông nghiệp 10 Lê Văn Nhương 2001 Công nghệ xử lý số phế thải nông phẩm chủ yếu 64 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên 11 Trần Thị Tâm cs, Báo cáo tổng kết đề tài 2008 “Nghiên cứu sử dụng phế phụ phẩm nông nghiệp để nâng cao suất trồng, chất lượng nông sản cải thiện độ phì nhiêu đất” 12 Tiêu chuẩn ngành, 10 TCN 366-99, Phân tích phân bón, Phương pháp xác định tổng số Cacbon hữu 13 Tiêu chuẩn Việt Nam, TCVN 5815 – 2001, Phân hỗn hợp NPK, Phương pháp thử 14 Tiêu chuẩn Việt Nam, TCVN 5815 – 1994, Phân hỗn hợp NPK, Phương pháp thử 15 Tiêu chuẩn Việt Nam, TCVN 6108 – 2002 2002 Chế phẩm vi sinh vật phân giải cellulose 16 Tiêu chuẩn Việt Nam, TCVN 6108 – 1996 1996 Phân bón vi sinh vật phân giải cellulose 17 Tiêu chuẩn Việt Nam, TCVN 7185 – 2002 2002 Phân hữu vi sinh 18 Lê Thị Thủy cs, Báo cáo kết nghiên cứu đề tài 2011 “Nghiên cứu giải pháp công nghệ sinh học nhằm nâng cáo suất, chất lượng chè an toàn tỉnh Yên Bái” 19 Lê Thị Thanh Thủy, Phạm Văn Toản 2001 Bước đầu nghiên cứu khả sử dụng vi sinh vật phân giải xenluloza chuyển hố nhanh rơm rạ làm phân bón Hội thảo quốc tế sinh học, Hà Nội, Việt Nam, tr 443-448 20 Phạm Văn Toản 2002 Nghiên cứu sản xuất ứng dụng chế phẩm VSV chuyển hóa nguyên liệu, phế thải giàu hợp chất bon (compost marker) làm phân hữu sinh học Báo cáo hội nghị khoa học chun ngành đất, phân bón hệ thống nơng nghiệp- Bộ NN&PTNT, Nha Trang 8/2004 21 Phạm Văn Toản, Trần Huy Lập, Nguyễn Kim Vũ, Bùi Huy Hiền 2000 Báo cáo chun đề cơng nghệ sinh học (chương trình kỹ thuật kinh tế công nghệ sinh học) 22 Lê Văn Tri 2002 Hỏi đáp phân bón, Nhà xuất Nông nghiệp 65 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên 23 Lê Thị Tú 2003 Nghiên cứu xử lý toàn diện phế liệu dừa nhà máy chế biến đồ hộp công nghệ vi sinh Luận văn thạc sĩ khoa học sinh học trường Đại học Khoa học tự nhiên TP Hồ Chí Minh 24 Nguyễn Cơng Vinh 2002 Hỏi đáp đất, phân bón trồng, Nhà xuất Nông nghiệp 25.Vũ Hữu Yêm 1995 Giáo trình phân bón cách bón phân NXB Nơng nghiệp, Hà Nội TÀI LIỆU TIẾNG NƢỚC NGOÀI VÀ TRANG WEB 26 Chaisit T., Shuichi M and N Kawakubo 2005 Effect soil moisture and temperature on decomposition rates of some waste materials from agriculture and agro-industry 27 Frands Dolberg 1992 Progress in the utilization of urea-ammonia treated crop residues: biological and socio-economic aspects of animal production and application of the technology on small farms Revised version of invited paper presented at the 29th annual meeting of the Brasilian Society of Animal Production, Lavras, July 20 - 24, 1992 28 Pope J 2000 Use of agriculture waste materials in the cultivation of mushroom Science and cultivation of edible fungi, vol.1 A.A Balkema/Rotterdam/Brookfield 29 Reese E., H.S Levision 1952 A comparative study of the breakdown of cellulose by microorganisms Physiol plant 5: 345-366 30 http://www.cipav.org.co/lrrd/lrrd12/1/gao121.htm 31 http://www.epa.gov/epaoswer/non-hw/composting/science.htm 32 http://www.oldgrowth.org/compost/ 33 http://www.phanbonmiennam.com.vn/ 34 http://www.speakeasy.org/ggc/ 66 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Phụ lục : Chủng V2 - Bacillus subtilis Bacillus subtilis strain NK-3 16S ribosomal RNA gene, partial sequence Length=1472 Score = 1110 bits (601), Expect = 0.0 Identities = 601/601 (100%), Gaps = 0/601 (0%) Strand=Plus/Minus Query CTTCGGCGGCTGGCTCCATAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTG 60 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1451 CTTCGGCGGCTGGCTCCATAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTG 1392 Query 61 GTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCG 120 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1391 GTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCG 1332 Query 121 ATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACA 180 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1331 ATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACA 1272 Query 181 GATTTGTGGGATTGGCTTAACCTCGCGGTTTCGCTGCCCTTTGTTCTGTCCATTGTAGCA 240 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1271 GATTTGTGGGATTGGCTTAACCTCGCGGTTTCGCTGCCCTTTGTTCTGTCCATTGTAGCA 1212 Query 241 CGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGG 300 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1211 CGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGG 1152 Query 301 TTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGT 360 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1151 TTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGT 1092 Query 361 TGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCAC 420 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1091 TGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCAC 1032 Query 421 CACCTGTCACTCTGCCCCCGAAGGGGACGTCCTATCTCTAGGATTGTCAGAGGATGTCAA 480 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 1031 CACCTGTCACTCTGCCCCCGAAGGGGACGTCCTATCTCTAGGATTGTCAGAGGATGTCAA 972 Query 481 GACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGG 540 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct 971 GACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGG 912 Query 541 GCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTA 600 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| 67 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Sbjct 852 Query 911 601 Sbjct 851 Nguyễn Thị Yên GCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTA A | A 601 851 Chủng V4 - Bacillus subtilis ACCGTGGGTACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGAT GGTTGTTTGAACCGCATGGTTCAGACATAAAAGGTGGCTTCGGCTACCACTTACAGATGG ACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCC GACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGG CAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGA TGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCCGTTCAAATAGG GCGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGG TAATACGTAgGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGGCGTAAAGGGCTCGCANGCGGT TTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGA ACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATG TGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAA AGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGC TAAGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTG GGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGT GGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTG ACAATCCTAGAGATAGGACGTCCCCTTCGGGGGCAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTC GTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTA GTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTG GGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGAC AGAACAAAGGGCAGCGAAACCGCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCTCAGTTCG GATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAT GCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGT AACACCCGAAGTCGGTGA Chủng X2 - Streptomyces lilaceus GAtTcTgGaAAGTTCcGgCgGTGCAgGATGAGCcCGCgGCCTaTCAGCTTG TtGGTGAgGTAACGGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGgCCTGAGAGGGCGACCGGC 68 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGAcTCcTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCA CAATGGGCGAAAGCcTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAA ACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAAC TACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGT AAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCGCGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTC TGCAGTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGG TGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACT GACGCTGAgGAGCGAAAGCgtGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCC GTAAACGGTGGGCACTAGGTGTGGGCAACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCA tTaAGTGCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGC ACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATA CACCGGAAAGCATTAGAGATAGTGCCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGT CAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCGTGTTgccagC AGGCCCTTGTGGTGCTGGGGACTCACGGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGAC GACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAAAGA GCTGCGATACCGTGAGGTGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAA CTCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCC CGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAAC CCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAgGTGGGACTGGCGATTGGGACGAAgTCGTAACAAGGTAgCC GTACCGGAAgGTGCGGCTGGATCACTCCTTT Trình tự rADN 16S chủng ACT29 tương đồng với trình tự rADN 16S Streptomyces lilaceus 99,9 % ( 1399/1400 bp) Chủng X3 - Streptomyces misionensis gGaCGAaCGCTgGCgGCgTGctTAACACaTGCAaGT CGAACGATGAAGcCCTTCgGGGTgGATTAGTGGCGAaCGGGTGAGTAACACGTGGgCAAT CTGCCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTcTAATACCGGATATGACCATCTT GGGCATCCTTGATGGTGTAAAGCTCCGGCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTT GTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGG CCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGC ACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTA AACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAA CTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCG 69 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên TAAAGAGCTcGTAGGCGGCTTGTCACGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCA GTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGC GCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAG CGAAAGCGtGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCACTA GGTGTGGGCAACATTCCACGTTGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTGCCCCGCCTGGGGAGT ACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGC TTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAAGCATTAGAGATA GTGCCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTG GGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCGTGTTGCCAGCAGGCCCTTGTGGTGCTGGGG ACTCACGGGAGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCC CTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGATACCGTGAGGTGG AGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGA GTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCC CGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAgGGAGCTGT CGAAgGTGGGACTGGCGATTGGGACGAAgTCGTAACAAGGTAGCCGTACCGGAAgGTGCGgCTGG ATCACCTCCTTT Trình tự rADN 16S chủng Act 35 tương đồng với trình tự rADN 16S Streptomyces misionensis 99,9 % ( 1464/1465 bp) 70 ... tài: ? ?Nghiên cứu lựa chọn chất hữ ản xuất phân hữu vi sinh cho chè Shan tỉnh Yên Bái? ?? Mục đích yêu cầu - Lựa chọn nguồn chất hữu thích hợ ản xuất phân hữu vi sinh cho chè Shan tỉnh Yên Bái -... liệu để sản xuất phân phức hợp hữu vi sinh 24 Luận văn Thạc sỹ Sinh học Nguyễn Thị Yên Phân phức hợp hữu vi sinh loại phân có đầy đủ thành phần phân vi sinh, phân hữu cơ, phân vi lượng phân vô... chủng vi khuẩn tuyển chọn - Nghiên cứu xử lý nguyên liệu hữu làm chất hữ ản xuất phân hữu vi sinh (HCVS) cho chè Shan - Nghiên cứu bổ sung dinh dưỡng (đa, trung, vi lượng) để nâng cao chất lượng phân