Đánh giá đáp ứng miễn dịch trên đàn gia cầm sau khi tiêm phòng vaccine h5n1 trong chương trình phòng chống dịch cúm gia cầm tại hà nội

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM MẠC PHƢƠNG THANH ĐÁNH GIÁ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH TRÊN ĐÀN GIA CẦM SAU KHI TIÊM PHÒNG VACCINE H5N1 TRONG CHƢƠNG TRÌNH PHỊNG CHỐNG DỊCH CÚM GIA CẦM TẠI HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM MẠC PHƢƠNG THANH ĐÁNH GIÁ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH TRÊN ĐÀN GIA CẦM SAU KHI TIÊM PHỊNG VACCINE H5N1 TRONG CHƢƠNG TRÌNH PHỊNG CHỐNG DỊCH CÚM GIA CẦM TẠI HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Tô Long Thành TS Nguyễn Quang Tính Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa công bố công trình khác Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Mạc Phương Thanh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt hai năm học hoàn thành luận văn, nỗ lực thân, nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình nhiều cá nhân tập thể, cho phép tơi tỏ lịng biết ơn cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên, Khoa Sau Đại học, thầy cô giáo giúp đỡ, tạo điều kiện để tơi học tập, tiếp thu kiến thức chương trình học PGS.TS Tơ Long Thành TS Nguyễn Quang Tính người hướng dẫn khoa học trực tiếp, hướng dẫn nhiệt tình, tạo điều kiện thuận lợi đóng góp nhiều ý kiến quan trọng qua bước nghiên cứu q trình hồn thành luận văn Ban lãnh đạo, cán công nhân viên môn virus, Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung Ương tạo điều kiện thuận lợi cho thời gian thực tập Tập thể cán bộ, nhân viên Chi cục Thú y Hà Nội giúp đỡ trình thu thập số liệu lấy mẫu xét nghiệm để thực luận văn Nhân dịp xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè động viên, giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn suốt q trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài Một lần tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới tập thể, cá nhân tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành chương trình học tập Tác giả luận văn Mạc Phương Thanh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v iii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình ix MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn Chƣơng I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quát bệnh cúm gia cầm 1.1.1 Giới thiệu chung bệnh cúm gia cầm 1.1.2 Lịch sử bệnh cúm gia cầm 1.2 Tình hình dịch cúm gia cầm nước giới 1.2.1 Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam 1.2.2 Tình hình dịch cúm gia cầm giới 1.3 Đặc điểm sinh học virus cúm typ A 12 1.3.1 Đặc điểm cấu trúc chung virus thuộc họ Orthomyxoviridae 12 1.3.2 Đặc điểm hình thái, cấu trúc virus cúm typ A 13 1.3.3 Đặc tính kháng nguyên virus cúm typ A 15 1.3.4 Thành phần hóa học 17 1.3.5 Quá trình nhân lên virus 17 1.3.6 Độc lực virus 19 1.3.7 Danh pháp 20 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v iv 1.3.8 Nuôi cấy lưu giữ virus cúm gà 21 1.4 Dịch tễ học bệnh cúm gà 21 1.4.1 Phân bố dịch bệnh 21 1.4.2 Động vật cảm nhiễm 21 1.4.3 Động vật mang virus 21 1.4.4 Sự truyền lây 22 1.4.5 Sức đề kháng virus cúm 23 1.4.6 Mùa vụ phát bệnh 23 1.5 Triệu chứng, bệnh tích bệnh cúm gia cầm 24 1.5.1 Triệu chứng lâm sàng bệnh cúm gia cầm 24 1.5.2 Bệnh tích đại thể bệnh cúm gia cầm 25 1.5.3 Bệnh tích vi thể 25 1.6 Chẩn đoán bệnh 25 1.7 Kiểm soát bệnh 26 1.8 Vaccine cúm gia cầm 27 1.9 Nghiên cứu nước bệnh cúm gia cầm 29 1.10 Các chiến lược phòng chống bệnh cúm gia cầm 31 1.11 Tình hình sử dụng vaccine cúm gia cầm giới 32 Chƣơng II: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Vật liệu dùng nghiên cứu 34 2.2 Nội dung nghiên cứu 34 2.3 Phương pháp nghiên cứu 34 2.4 Đối tượng, thời gian, địa điểm nghiên cứu 42 Chƣơng III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 43 3.1.1 Tình hình chăn ni gia cầm tỉnh Hà Tây cũ số năm vừa qua 43 3.1.2 Diễn biến dịch cúm gia cầm tỉnh Hà Tây cũ 47 3.2 Kết tiêm phòng vaccine cúm gia cầm H5N1 tỉnh Hà Tây cũ 51 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v v 3.2.1 Cơng tác đạo tiêm phịng vaccine cúm gia cầm tỉnh Hà Tây cũ 51 3.2.2 Kết tiêm phòng vaccine cúm gia cầm H5N1 tỉnh Hà Tây cũ năm 2008 2009 51 3.3 Kết khảo sát độ an toàn vaccine cúm gia cầm H5N1 qua lâm sàng 54 3.4 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch gà vịt tiêm phòng vaccine cúm H5N1 56 3.4.1.Đáp ứng miễn dịch gia cầm tiêm phòng vaccine năm 2008 2009 56 3.4.2 Độ dài miễn dịch gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm H5N1 60 3.5 So sánh hiệu giá kháng thể trung bình tỷ lệ bảo hộ đàn gia cầm năm 2008, 2009 2010 69 3.6 Kết giám sát virus đàn gia cầm tiêm phòng 72 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 75 Kết luận 75 Đề nghị 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 76 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v vi DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ARN: Acid ribonucleic Ct: Cycle threshold GMT: Geometic Mean Titer H: Hemagglutinin HPAI: High Pathogenicity Avian Influenza KT: Kiểm tra N: Neuraminidase NN0 & PTNN: Nông nghiệp phát triển Nông thôn OIE: Office International Epizooties PBS: Phosphate Buffered Saline RT - PCR: Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction RTRT - PCR: Real time Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction WHO: World Health Organization XN: Xét nghiệm Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v vii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng Trình tự chuỗi mẫu dị Primer cho RTRT – PCR phát cúm gia cầm 37 Bảng Chu kỳ nhiệt bước phiên mã ngược (RT) dùng cho Quiagen one step RT - PCR kit 40 Bảng Chu kỳ nhiệt cho tổng hợp gen cặp mồi 41 Bảng 3.1: Số gia cầm huyện tỉnh Hà Tây cũ số năm vừa qua 44 Bảng 3.2: Thiệt hại bệnh cúm gia cầm gây tỉnh Hà Tây cũ 48 Bảng 3.3: Kết tỷ lệ tiêm phòng vaccine cúm gia cầm H5N1 năm 2008 2009 52 Bảng 3.4: Kết theo dõi độ an toàn vaccine đàn gia cầm sau tiêm năm 2008 2009 55 Bảng 3.5: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 năm 2008 57 Bảng 3.6: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 năm 2009 59 Bảng 3.7: Kết giám sát đàn gia cầm trước tiêm vaccine H5N1 đợt năm 2010 61 Bảng 3.8: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 30 ngày đợt năm 2010 62 Bảng 3.9: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 60 ngày đợt năm 2010 64 Bảng 3.10: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 90 ngày đợt năm 2010 65 Bảng 3.11: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 120 ngày đợt năm 2010 67 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v viii Bảng 3.12: Tần số phân bố mức kháng thể gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 150 ngày đợt năm 2010 68 Bảng 3.13: Kết so sánh tỷ lệ bảo hộ đàn gia cầm sau tiêm vaccin năm 2008, 2009 2010 70 Bảng 3.14: So sánh hiệu giá kháng thể trung bình đàn gia cầm sau tiêm vaccine năm 2008, 2009 2010 71 Bảng 3.15: Kết giám sát lưu hành virus cúm gia cầm dịch ngoáy gia cầm đàn tiêm phòng cúm H5N1 năm 2008, 2009 2010 73 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.v Bảng 3.13: Kết so sánh tỷ lệ bảo hộ đàn gia cầm sau tiêm vaccine năm 2008, 2009 2010 Huyện, Thị 10 11 12 13 14 Hà Đơng Sơn Tây Ba Vì Chương Mỹ Đan Phượng Hồi Đức Mỹ Đức Phú Xuyên Phúc Thọ Quốc Oai Thanh Oai Thường Tín Thạch Thất Ứng Hịa Tổng 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 3080 2010 Số mẫu đạt bảo hộ 93 111 91 109 103 107 103 102 107 98 102 114 98 107 1445 Tỷ lệ (%) 77,50 92,50 75,83 90,83 85,83 89,17 85,83 85,00 89,17 81,67 85,00 95,00 81,67 89,17 86,01 68 STT Số mẫu kiểm tra 2008 2009 Số Số Số Số mẫu Tỷ lệ mẫu mẫu Tỷ lệ mẫu đạt (%) kiểm đạt (%) kiểm bảo tra bảo hộ tra hộ 178 80,91 220 187 85,00 120 220 100,00 220 220 100,00 120 166 75,45 220 179 81,36 120 206 93,64 220 188 85,45 120 144 65,45 220 188 85,45 120 191 86,82 220 165 75,00 120 156 70,91 220 202 91,82 120 184 83,64 220 160 72,73 120 180 81,82 220 189 85,91 120 192 87,27 220 164 74,55 120 220 100,00 220 156 70,91 120 192 87,27 220 220 100,00 120 197 89,55 220 196 89,09 120 170 77,27 220 208 94,55 120 2596 84,29 3080 2622 85,13 1680 71 Kết cho thấy tỷ lệ đạt bảo hộ đồng có xu hướng tăng dần qua năm Hầu hết đàn gia cầm tiêm vaccine cho tỷ lệ bảo hộ toàn đàn (≥ 70%) Qua kết đánh giá cơng tác tiêm phịng tỉnh Hà Tây cũ thực nghiêm túc triệt để với phối hợp tốt công tác đạo cấp ngành với tham gia đầy đủ người dân chăn nuôi Bảng 3.14: So sánh hiệu giá kháng thể trung bình đàn gia cầm sau tiêm vaccine năm 2008, 2009 2010 2008 STT Huyện, Thị Loài GMT (log2) 2009 Loài GMT (log2) 2010 Lồi GMT (log2) Hà Đơng Vịt 5,26 Vịt 5,65 Vịt 4,87 Sơn Tây Gà 6,41 Gà 7,15 Gà 6,57 Ba Vì Gà 5,15 Vịt 5,57 Vịt 5,23 Chương Mỹ Gà 6,25 Gà 6,5 Gà 6,45 Đan Phượng Vịt 4,37 Gà 6,82 Gà 6,04 Hoài Đức Gà 5,60 Gà 6,47 Gà 6,33 Mỹ Đức Vịt 3,97 Gà 7,07 Gà 6,22 Phú Xuyên Gà 5,62 Vịt 4,88 Vịt 5,25 Phúc Thọ Gà 5,57 Gà 6,7 Gà 6,40 10 Quốc Oai Vịt 5,33 Vịt 5,28 Vịt 5,33 11 Thanh Oai Gà 7,05 Vịt 4,82 Vịt 5,40 12 Thường Tín Vịt 5,63 Gà 7,62 Gà 6,87 13 Thạch Thất Vịt 5,77 Vịt 5,83 Vịt 5,30 14 Ứng Hòa Vịt 5,03 Vịt 6,84 Vịt 6,09 Tổng Gà 5,95 6,1 6,41 Vịt 5,05 5,25 5,35 72 Qua bảng 3.14 cho thấy kết GMT sau gia cầm tiêm vaccine phòng cúm qua năm đạt bảo hộ (GMT ≥ 4) Điển hình có đàn đạt hiệu giá kháng thể cao lên tới 7log đàn gia cầm huyện Sơn Tây (7,15), Thanh Oai (7,05) Thường Tín (7,62) Tuy nhiên, có số đàn đạt hiệu giá kháng thể thấp Mỹ Đức (3,97), Hà Đông (4,87), Đan Phượng (4,37) điều giải thích có nhiều ngun nhân kỹ thuật tiêm phịng, quy cách tiêm phịng, quy trình bảo quản sử dụng vaccine, kỹ thuật lấy mẫu số lượng mẫu … Đây luôn vấn đề mà cần ý để nâng cao hiệu giá kháng thể cho đàn gia cầm việc nâng cao tỷ lệ bảo hộ đàn gia cầm Qua bảng 3.13 3.14 sơ nhận xét nguồn vaccine ngày tốt kết hợp với công tác bảo quản vaccine kỹ thuật tiêm phịng ngày hồn thiện nên hiệu giá kháng thể ngày cao với xấp xỉ 100% đàn gia cầm bảo hộ 3.6 Kết giám sát virus đàn gia cầm đƣợc tiêm phòng Bước cuối đánh giá chất lượng hiệu sử dụng vaccine việc giám sát lưu hành virus đàn gia cầm tiêm phòng Song song với việc lấy mẫu huyết đàn gia cầm tiêm phòng để đánh giá đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch, tiến hành lấy mẫu dịch ngoáy (swab) Mỗi đàn 60 mẫu lấy ngẫu nhiên thời điểm khác nhau, gộp mẫu làm mẫu xét nghiệm Phương pháp xét nghiệm thực phịng virus Trung tâm Chẩn đốn Thú y Trung Ương Kết xét nghiệm tìm gen H5 mẫu dịch ngoáy phương pháp RTRT - PCR trình bày bảng 3.15 Bảng 3.15: Kết giám sát lƣu hành virus cúm gia cầm dịch ngoáy gia cầm đàn đƣợc tiêm phòng cúm H5N1 năm 2008, 2009 2010 STT Huyện, Thị Hà Đơng Sơn Tây Ba Vì Chương Mỹ Đan Phượng Hoài Đức Mỹ Đức Phú Xuyên Phúc Thọ Quốc Oai Thanh Oai Thường Tín Thạch Thất Ứng Hòa Tổng Vịt Gà Gà Gà Vịt Gà Vịt Gà Gà Vịt Gà Vịt Vịt Vịt Số mẫu 150 150 150 150 150 150 150 150 150 150 150 150 150 150 2100 2009 Số Mẫu Mẫu Tỷ lệ Loài mẫu XN +H5 + (%) Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 2100 420 0,0 2010 Số Mẫu Mẫu Tỷ lệ Loài mẫu XN +H5 + (%) Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Gà 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 Vịt 150 30 0,0 2100 420 0,0 71 10 11 12 13 14 Loài 2008 Mẫu Mẫu Tỷ lệ XN +H5 + (%) 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 30 0,0 420 0,0 74 Kết cho thấy, khơng có cảm nhiễm lưu hành virus cúm H5N1 đàn gia cầm tiêm phịng vaccine năm 2008, 2009 2010 Nói cách khác, đàn gia cầm sau tiêm phòng khơng có thải virus ngồi mơi trường Kết hoàn toàn phù hợp với nghiên cứu Đào Yến Khanh (2005) [15], Tô Long Thành (2007) [24], Nguyễn Thị Thuý Hà (2007) [12]: đàn gà, vịt sau tiêm vaccine kiểm tra định kỳ, không thấy lưu hành virus cúm H5N1 Từ kết nghiên cứu cho thấy chủ chương tiêm vaccine tạo miễn dịch chủ động cho đàn gia cầm nhằm tiêu diệt mầm bệnh đem lại kết rõ rệt địa bàn tỉnh Hà Tây cũ nói riêng nước nói chung Cho đến tỉnh Hà Tây cũ khơng có dịch cúm gia cầm tái phát trở lại 75 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận - Dịch cúm gia cầm gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm tỉnh Hà Tây cũ - Từ năm 2005 đến thực tốt cơng tác vệ sinh phịng dịch kết hợp với biện pháp tuyên truyền quản lý đạo quan nên gần không xảy dịch cúm gia cầm địa bàn Hà Tây cũ gia cầm người - Qua năm sử dụng vaccine tiêm phòng đại trà tỉnh thu kết khả quan: + Tỷ lệ tiêm phòng vaccine cúm gia cầm H5N1 cho đàn gia cầm tỉnh Hà Tây cũ năm 2008 2009 đạt 94,4% 98,4% + Hiệu giá kháng thể tăng dần qua năm, đồng thời tỷ lệ bảo hộ ngày cao: đạt từ 87,7% đến 91,9% có huyện đạt 100% + Độ an toàn vaccine cao - Tất đàn gia cầm tiêm vaccine không mang virus cúm gia cầm Đề nghị - Tăng cường tiêm phòng đại trà tỷ lệ cao bước xã hội hố cơng tác tiêm phịng vaccine cúm gia cầm để phòng chống dịch cúm gia cầm Vaccine sử dụng tốt cho gà vịt - Tăng cường giám sát huyết học virus học đàn gia cầm - Tăng cường công tác chăn ni an tồn sinh học vaccine biện pháp phòng bệnh 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Bùi Quang Anh, Văn Đăng Kỳ (2004), “Bệnh cúm gia cầm: lưu hành bệnh, chẩn đoán kiểm soát dịch bệnh”, Khoa học kỹ thuật thú y, XI (3), tr 69 - 75 Caroline Yuen (2004), “Đánh giá tiêm chủng vaccine cúm gà H5 năm 2003 Hồng Kơng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, XI (2), Tr 79 - 80 Dự án sử dụng vaccine nhằm khống chế toán bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao H5N1 (2005), Bộ Nông nghiệp & Phát triển Nông thôn Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn (2005), Tiêu chuẩn ngành - Quy trình chẩn đốn bệnh cúm gia cầm, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội Trần Hữu Cổn, Bùi Quang Anh (2004), “Bệnh cúm gia cầm biện pháp phòng chống”, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Cục Thú y (2004), Bệnh cúm gia cầm biện pháp phòng chống, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Cục thú y (2005), Sổ tay hướng dẫn phòng chống bệnh cúm gia cầm bệnh cúm người, Hà Nội Trương Văn Dung, Nguyễn Viết Không (2004), “Một số hoạt động nghiên cứu khoa học Viện Thú y quốc gia bệnh cúm gia cầm giải pháp khoa học công nghệ thời gian tới”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XI (3), Tr 62 - 68 Nguyễn Tiến Dũng (2004), Bệnh cúm gà, Hội thảo số biện pháp khôi phục đàn gia cầm sau dập dịch, Hà Nội, Tr 5-9 10 Nguyễn Tiến Dũng, Đỗ Quý Phương, Đào Thanh Vân, Bùi Ngọc Anh, Bùi Nghĩa Vượng, Nguyễn Thế Vinh, Nguyễn Thuý Duyên (2005), “Giám sát bệnh cúm gia cầm Thái Bình”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XII (2), tr - 12 77 11 Nguyễn Tiến Dũng, Đào Thanh Vân, Bùi Ngọc Anh, Kenjiro Inui, Bùi Nghĩa Vượng, Nguyễn Thế Vinh, Nguyễn Bá Thành, Phạm Thị Kim Dung (2005), “Giám sát tình trạng nhiễm virus cúm gia cầm đồng Sơng Cửu Long cuối năm 2004”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XII (2), tr 13-18 12 Nguyễn Thị Thuý Hà (2007), Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch gà số sở chăn nuôi gà giống Quốc gia sử dụng vacxin phòng chống cúm gia cầm H5N1, Luận văn thạc sỹ Nông nghiệp 13 Lê Thanh Hồ (2004), Họ Orthomyxoviridae nhóm virus cúm A gây bệnh cúm gà người, Viện khoa học công nghệ 14 Ilaria Capua, Stefano Marangon (2004), “Sử dụng tiêm chủng vaccine biện pháp khống chế bệnh cúm gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, XI (2),tr 59 - 70 15 Đào Yến Khanh (2005), Khảo nghiệm vaccine cúm gia cầm ngoại nhập, Luận văn thạc sỹ Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội 16 Văn Đăng kỳ (2008), “Diễn biến tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam giải pháp phịng chống”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, XV (4), Tr 97 - 91 17 Phạm Sỹ Lăng (2004), “Diễn biến bệnh cúm gia cầm Châu hoạt động phòng chống bệnh”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XI (3), Tr 91 - 94 18 Phạm Sĩ Lăng (2004), Diễn biến bệnh cúm gà giới, Hội thảo số biện pháp khôi phục đàn gia cầm sau dập dịch, Hà Nội, Tr 33 - 38 19 Phạm Sỹ Lăng, Tơ Long Thành, Cù Hữu Phú, Nguyễn Hồi Nam (2004), Bệnh gia cầm kỹ thuật phòng trị, Nxb Nông ngiệp Hà Nội 20 Lê Văn Năm (2004), “Bệnh cúm gà”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XI (1), Tr.81 - 86 21 Lê Văn Năm (2004), “Kết khảo sát biểu lâm sàng bệnh tích đại thể bệnh cúm gia cầm số sở chăn ni tỉnh phía Bắc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, XI (3), Tr 86 - 90 78 22 Tô Long Thành (2004), “Thông tin cập nhật tái xuất bệnh cúm gia cầm nước Châu Á”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XI (4), Tr 87 - 93 23 Tô Long Thành (2006), “Thông tin cập nhật bệnh cúm gia cầm vaccine phòng chống”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XIII (1), Tr 66 - 76 24 Tô Long Thành (2007), “Các loại vacxin cúm gia cầm đánh giá hiệu tiêm phịng”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XIV (2), tr.84 - 90 25 Tô Long Thành, Đào Yến Khanh (2009), “Khảo nghiệm thực địa vacxin cúm gà H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XVI (2), tr.23 - 31 26 Trần Thị Thu (2006), Đánh giá hiệu sử dụng vacxin chương trình phịng chống dịch cúm gia cầm H5N1 tỉnh Bắc Ninh, Luận văn thạc sỹ Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội 27 Đỗ Ngọc Thuý (2007), “Xuất chủng virus cúm gia cầm lây lan sang nước phương Tây”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, XIX (4), Tr 99 - 100 II Tài liệu tiếng Anh 28 Biswas S K and Nayak D P (1996), Influenza virus polymerase basic protein interacts with influenza virus polymerase basic protein at multiple sites, J Virol 70: 6716 - 6722 29 Bosch F X., Orlich M., Klenk H D and Rott R (1979), The structure of the hemagglutinin, a determinant for the pathogenicity of influenza viruses, Virology 95: 197 - 207 30 Buckler White and Muphy B R (1998), Nucleotide sequence analysis of the nucleoprotein gene of an avian and a human influenza virus strain identifies two classes of nucleoproteins, Virology 155: 345 - 355 31 Capua I., Maragon S., Dalla Pozza M., Santucci U (2000), “Vaccination for Avian Influenza in Italy”, Vet Rec., 147, 751 79 32 Casay B and Zhang J (2005), “China, people Republic of poutry and products China Vaccination Program for Avian Influenza 2005”, GAIN report USDA Foreign Agricultural Service, US 33 Collins R A., Ko L S., So K L., Ellis T., Lau L T., Yu A C (2002), “Detection of hyghly pathogenic avian influenza subtype H5(Euracian lineage) using NASBA”, J Virology Methods, 103(2): 213-215 34 Holsinger L J, Nichani V., Pinto L H and Lamb R A (1994), Influeza A virus M2 ion chanel protein: a structurefunction analysis, J Virology, 68: 1551-1563 35 Horimoto T and Kawaoka Y (1995), “Direct reverse transcriptase PCR to determine virulence potential of influenza A viruses in birds”, J Clin Microbiol, 33(3): 748-751 36 Ito T and Kawaoka Y (1998), Avian influenza, p 126-136 In Nicholson K G., Webster R G., and Hay A J (ed.) Textbook of influenza Blackwell Sciences Ltd, Oxford, United Kingdom 37 Ito T., Couceiro J N., Kelm S., Baum L G., Krauss S., Castrucci M R., Donatelli I., Kida H., Pauson J C., Webter R G., and Kawoaka Y (1998), “Molecular basic for the generation in pigs of influenza A viruses with pandemic potential”, J Virology, 72: 7367-7373 38 Kawaoka Y (1991), “Difference in receptor specificity among influenza A viruses from different species of animals”, J Vet Med Sci, 53: 357-358 39 Kawaoka Y (1988), Is the gene pool of influenza viruses in shorebirds and gulls different from that in wild ducks Virology, 179:759-767 40 Kingrbuy (1985), Protective immunity against avian influenza induced by a fowlpox virus recombinant Virology, Raven press NewYork, 1157-1178 41 Lu X, Tumpey T M., Morken T., Zaki S R., Cox N J., and Katz J M (1999), “A mouse model for the evaluation of pathogenesis and immunity to influenza A (H5N1) viruses isolated from human”, J Virology, 73: 5903-5911 80 42 Luong G and Palese P (1992), Genetic analysis of influenza virus, Curr Opinion Gen Develop 2: 77-81 43 Luschow D., Werner O., Mettenleiter T C and Fuchs W (2001) Protection of chickens from lethal avian influenza A virus infection by live-virus vaccination with infectious laryngotracheitis virus recombinants expressing the heamagglutinin (H5) gene , 19, 4249-4259 44 Mo I P., Brugh M., Fletcher O J., Rowland G N., and Swayne D E (1997), Comparative pathology of chickens experimentaly inoculated with avian influenza viruses of low and high pathogenicity, Avian Dis, 41: 125- 136 45 Muphy B R and Webter R G (1996), Orthomyxoviruses, p 1397-1445 In B N Fields, D M Knipe, P M Howley et al (ed.), Fields Virology, 3rd ed Lippincott-Raven Pblishers, Philadenphia, Pa 46 OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive92/40/EEC of 19th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167, 1-15 47 Office International des Epizooties (2006), Update on Avian Influenza in animals (type H5) Http://www.oie.int/downld/AVIAN%20INFLUENZA/A_AI_Asia.htm, 48 Seo S and R G Webter (2001), “Cross-reactive cell-mediated immunity and protection of chickens from lethal H5N1 influenza virus infection in the HongKong poultry markets”, J Virology, 75: 2516-2525 49 Swayne D E and Suarez D L (2000) “Highly pathogenic avian influenza” Rev sci tech Off Int epiz., 20: 463-482 50 Swayne D E., Suarez D L (2003), “Proceeding of the fifth International Syposium on Avian Influenza”, Avian Diseases (Special isues), Carter Comp, Richmond, USA 51 Vey M., Orlich M., Adle S., Klenk H D., Rott R., and Garten W (1992), “Hemagglutinin activation of pathogenic avian influenza viruses of serotype H7 requires the protease recognition motif R-X-K/R-R”, Virology, 188: 408-413 PHẦN PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA Ảnh số 01: Xilanh liên tục dùng để tiêm vaccine Ảnh số 02: Vaccine đƣợc bảo quản nhiệt độ – 40C Ảnh số 03: Tập huấn kỹ thuật tiêm phòng Ảnh số 04: Tiêm vaccine phòng bệnh cúm gia cầm Ảnh số 05: Lấy mẫu huyết Ảnh số 06: Chuẩn độ 4HA Ảnh số 07: Phản ứng ngăn trở ngƣng kết hồng cầu (HI) Ảnh số 08: Kết phản ứng PCR đọc máy Cepheid® Smart Cycler ... tiến hành thực đề tài: ? ?Đánh giá đáp ứng miễn dịch đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine H5N1 chương trình phịng chống dịch cúm gia cầm Hà Nội" Mục tiêu nghiên cứu đề tài - Đánh giá thiệt hại dịch cúm. .. HỌC NÔNG LÂM MẠC PHƢƠNG THANH ĐÁNH GIÁ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH TRÊN ĐÀN GIA CẦM SAU KHI TIÊM PHÒNG VACCINE H5N1 TRONG CHƢƠNG TRÌNH PHỊNG CHỐNG DỊCH CÚM GIA CẦM TẠI HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC... toàn vaccine cúm gia cầm H5N1 qua lâm sàng 54 3.4 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch gà vịt tiêm phòng vaccine cúm H5N1 56 3.4.1 .Đáp ứng miễn dịch gia cầm tiêm phòng vaccine năm 2008 2009