Nghiên cứu điều khiển giới tính tôm càng macrobrachium nipponense de haan đề tài nckh qg 01 05

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC T ự NHIÊN * * Ạ# * * :Ịí * * N G H IÊ N C Ử U Đ IỀ U K H IE N g iớ i t ín h t m c n g Macrobrachium nipponense (De Haan) BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI ĐẶC BIỆT CẤP ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI M Ã SỐ : Q G -0 -0 CHÚ NHIỆM ĐỂ TÀI: PGS.TS NGUYÊN MỘNG HÙNG CÁC CÁN BỘ THAM GIA: GS.TS NGUYEN QUỐC KHANG, PGS.TS NGUYỄN XUÂN QUÝNH THS NGUYỄN LAI THÀNH THS NGUYÊN THỊ AN, CN BÙI VIỆT ANH CN CHU VÁN TRUNG I I, I í RUN í' ỉ, DT/ I SO HÀ NỘI - 2003 liẢ O C Ả O T Ó M TẢ 11 T èn đề tài: Niihiẽn cứu diều khiên giới tính tịm M acrohrưchìitm lìipponenst' (Dc Haan) M ã số: Q G -01.05 b Chủ tri dể tài: PGS.TS Nua vỏ II Mộniĩ Hìniii c C ác cán th a m gia: GS.TS Ncuyỗn Quốc Khans’ PGS.TS Nguyễn Xuân Quýnh ThS Nguyễn Lai Thành ThS Níiu\ễn Thị An CN Bùi Việt Anh CN Chu Văn Trung CN Phan Ni!ọc Quaníi d Mục tiêu nội đuniĩ nỵhièn cứu: Phẫu thuật cát bó tu vốn androsen dê hiên đổi Sỉiới tính đực thành tơm càn a với mục tic LI xa thu nhàn quán thò tịm tồn đực c t tun mat làmphình to tuyến anđro«en đé tách chiẽt thu nhàn chất tiết cùa tuyên Với nội duniỉ sau: N h ậ n bi ết tu v ố n t r n n thái s o n s , C t h ò h o ặ c p h h u ý t u v ế n s a u đ ó n e h i e n c u s ự p h t t r i ẽ n tới t í n h Tách tuyến trướng thành đê nahiên cứu mị hoc thành phán hố học e C ác ket q u đ t đưọc C ác CỊIÌÍỈ việc c h ín h dã làm : Đã cát măt ày phì đại tuvên androsen So sánh mị học iữa tuyến phì đại tuyến bình thườn Đã đưa phân tích điện di tiếu phần protein tuvến phì đại tuyến binh thường so sánh với tuvến 2ÒC mát - Đã cát bò hai bên phải trái tuyến androgen 1000 tôm cỡ dài thân - cm Tý lệ tôm chết sau siái phẫu lớn Đã theo dõi khoán a 200 tòm sons nhiều ngày sau siái phẫu Đã nghiên cứu phút triển tuvến sinh dục biến đổi hình thái 100 tịm sau'giải phẫu tháns Đã làm tiêu bán tun sinh dục khốno 50 tịm Cịn khoáns 50 tõm sống tháng sau giải phău Đã ni tịm ơm trứns theo dõi nở ương nuôi ấu thể Đã d ù n s loại thức ăn như: thuỷ trần cỡ nhỏ men bia thức ăn ươns tôm cành xanh Mỹ Kết chi có ấu thể sống qua 14 ngày C ác kết qu ả khoa học thực đư ợc: Lần giới có dẫn liệu vé cấu trúc m học tuyến androỉĩen loài M ucrobnichiiim nipponense Tuyến ổm rốn tuvên sát với ốim linh cột lõ hào tỗ tia Cãi mill iiày phì đại lê bào với nhiều khỏnii hào Irons tê hào cliàt T Liven amlrouen có số thành phần protein đặc trưiiíi thị hăng 13-16 kDa I 1-13 kDa trC'11 hán gcl điện di Có tiễu phan protein chung íiiữa lu veil tiịc mill tu von androgen the ứ hăng 19-20 kDii Đã hoàn Ihiộn dược phương pháp khứ luyến androizen ứ tòm non M ưcrohnichiỉtnì nippoiìơiisc Đàv phươnti pháp phẫu ihuặi tinh vi Ty lẽ sốnti sau phẫu thuật iưonti đỏi nhó, r f ILIV nhiơn tý lệ t h n h c ỏ n lớn Sau i h ấ n k h tuyến anđroiien tòm đực non đáo Sỉiới hồn tồn từ đực saníỉ cá hiệt có iìhũìm đao siiới có huổniĩ trứn lớn khơng nhóm cúi đối chứim cùnii tuổi Rát lý thú đao aiới xáy với ca tính trạng s i n h d ụ c t h ứ c ấ p t h í d ụ n h vị trí lỏ đ ẽ SƯ t i ê u bio’ll iiai d u e c o n đ o giới N s h i ê n c ứ u m ỏ h o c c h o iliày s ự b i ế n đổi h o n l o n tù' t u y ê n đ ự c s a n g t u v ê n Việc nuôi đo lôm nàv chưa thực dược chưa có đủ đièu kiện ni chưa có cơnII Iiíihộ Li'0'nii tịm âu the Các cơtỉíịỉ trìn h d ã c o n " bố: C ó hài h o đ ã i m t r o i m c c t p c h í Irons: n c , {đã ( j a n e b o v đ ã d ợ c n h n đ ã n s ỉ h i ) ! Nìuivền Mộnti í Iìinii- Chu Vãn TruiiiZ (2003) Anh hưứnti cua cãt mát tói câu trúc tuvcn Lindroiien 0' tịm càn II M ucri ihruchiitm nippmiciìs de H a an Tap chí Sinh học sị đặc hiệt dành cho Hội nghi Khoa hoc Khoa Sinh hoc íháns 1 n ă m 0 T a p s o A 0 NsLi vỗn M ỏ n i i H ù n s Hình thúi cấu trúc tuyến androgen 0' tòm càn M acrobnn-hittni nippnciìs de H u a n T a p c h í : Di t r u v c n h o c v ứ nu đụn ii s ố n ã m 0 3 Niiuvẽn M ộ ns Hune, Bùi Việt Anh (2004) Cat ho tuyên anđroíien iĩãv chuyển đực sane tịm càns M acrobrachiiim ìũpponenese De Haan Tạp chí Di truyén hoc line dụng số nãm 2004 Có báo cáo cùa sinh viên Chu vãn Truna Hội nshị Khoa học Sinh viên ( 2001 ) - K ết qu ả đào tạo khoa học: Số người bao vệ cử nhân: ( Dươny Quốc Chính Phan Ngọc Q u a n Chu Vân Trung Trong có Chu Vãn Trưns cư nhãn khoá đào tạo tài bào vệ xuất sác) Có học vién cao học: Bùi Việt Anh với tiêu đề : N shiẽn cứu cắt bỏ tuvến anđroaen gâv chuyên đực sang tóm càna M acrohrưchinm nipponenese De Haan bao vệ irons thán tới Tình hình kinh phí cùa đẻ tài Kinh phí hổ trợ cho nhiệm vụ là: Tinh hình sứ dụng kinh phí: 60 triệu đỏng Đã toán: 60 triệu Các thiết bị tăng cường từ nguồn kinh phí hỗ trợ: Một phẫu thuật tinh vi Một pipetman Một pipet tự động Hiện có trons sộ tài sản Phịng Cơns nghệ tế bào động vật, K hoa Sinh học sử dụng tốt cho công tác nghiên cứu KHOA QUẢN LÝ (Kv ghi rõ họ tén) CHÚ TRÌ ĐỂ TÀI (Kv ghi rõ họ tên) Project Title: T H E ST U D Y OF SEX REVERSE FROM M A LE TO F E M A L E A FT E R TH E A N D R O G E N IC (.L A N D ABLATION IN M A C R O B R A C H IU M N IP P O N E SE SE DE HAAN Code N u m b e r Q G -01-05 Pro jec t D irector: Pro jec t m e m b e rs: Ass Prof Ne uven Monti H uns - Prof Dr Nauvon Quoe Khans Ass.Prof.Dr N auyen Xuan Quynh M.s Niuiven Lai Thanh M s N suven Thi An B.s Lui Viet Anh B.s Chu Van Trunu, B.s Phan N 20 C Q uang Project Objectives Sludv o f the proccess o f Ihe sex reverse of M o c r o h m c h iu n i n ip p u iicu se de Huun after the ablation of the androsenic aland M ajor Activities: • Anatomical and histological analysis of normal androgenic aland • Anatomical and histological analysis of andi'Oiienic aland after eyesialk ablation • Ablation of the androsenic eland and following the sex reverse o f the aonad • Reari ng the larvae of M acrobraciiiurn n ip p o n en se de Haan Results o f research: M acrobrachiurn nipponense de Haan is gonochoristic male much bĨ 22 er and more valuable than female prawn Therefore, production o f all male populations have very important economic effect The androgenic gland is thought to be exclusive source o f hormone responsible for sex-differentation and sexual characteristics in crustaceans A ndrectom y (ablation of androgenic gland) in the early stage of developm ent can completely reverse the sex of the male into female Crossing the sex-reversed female with the normal male gives all-male offspring The results of our studies show the androgenic gland in M acrobrachium nipponens de Haan as a small, transparent mass of tissue, looslv attached to the posterior vas deferens, above the point where the vas deferens enters the coxopodite o f the leg The histological examination revealed that the eland consist of the cords o f epithelial cells The cords arranged radially with the center in the point of contact of the gland to the vas deferens The cords m ay told upon themselves The cells accumulate the secret, disintegrate and liberate the secret into the connective tissue shealh of vas deferens After week of evestalk ablation, the size of the androgenic gland of M arrobrachim n nipponense lie Haan increase time, therefore the volum of the gland must be increased about 27 time The gland is enlarged both by the increasing num ber of cells and by the accumulation of’ more secret by the individual cells The mode of secretion may he holocrinic and the secret may be liberated into the connective tissue sheath of the ductus defferens of the shrimp Three month afler the ablation of the androgenic "land 52 rc of shrimps survived rr surviving demonstrated full reverse to the female primary and secondary sexual characteristics Histologic examination of reversed ovary reveled large amount of interlobular collective tissue Testicular tissue rarely exsist in the ovary as a small follicu! with some spermatogonia and primarv spermatocytes We are not able to re are the larvae o i M acrohruchiitni nippone/ise de Haan so we can not determine the sex of the offsprings Publication: papers published 1.No liveII Mộntỉ Hùnii 2002 M orphology and histologic structure of the androgenic gland in M a crobradiium nipponense De Haan Genetics and application N"l 2003 N suvễn M ộns Hùns Chu Van Truns Effects o f evestalk ablation on the size and histoiosv of the androsenic sland o f M acm h ch iu m iiipponcn.sc De Haan Journal of Biologv V.25 N 2A 2003 N suv ễn Mộng Hùns Bìu Việt Anh 2004 Androgenic aland ablation caused the sex reverse from male to female in M a cro b ch iu m nipponenese De H aan Genetics and application N' l 2004 R esults in e d u c a tio n With the Project were succesfully graduated bachelors of science: Duong Quoc Chinh Chu Van Truna, Phan N 20C Quarts master of science Bui Viet Anh, will be graduated on the next month lì PH ẨN C H ÍN H BÁO CÁO: MỤC LỤC Muc M đầu Tổng quan tài liệu 2.1 Vé tuvến sinh dục đực tơm 2.2 Vé tuyến androgen tịm 2.2.1 Câu tạo tuyến androgen 2.2.2 Vai trò tuvến androgen 2.2.3 Tuyến androgen, lưỡns tính biệt hố giới tính sớm 2.2.4 Ban chất hố sinh chất tiết tuvến đực 2.2.5 Sự die LI hoà nội tiết tuyến đực Vật liệu phương pháp Kết 4.1 Kết qua nshtên cứu hình thái tuyến androgen 4.1.1 Hình thái kích thước tuyến androaen 4.1.2 Cấu trúc m ổ học tuyến androgen 4.2 Kết thí nghiệm cắt mắt Hình thái kích thước tuyến androsen tôm cắt mát 4.2.2 Cấu trúc mỏ học cùa tuvến phì đại sau cắt mát 4.3 Kết qua nshiẽn cứu cát bó tuyến androsen 4.3.1 Đặc điếm sinh dục thứ cấp sau cát tuyên androaen 4.3.2 Tuyến sinh dục tôm khử tuyến 4.4 Kết nshiên cứu hoá sinh tuvến androgen 4.4.1 Phổ điện di 4.4.2 Phản ứn lectin 4.5 Kết thử nghiệm ương nuôi ấu thể tôm Kết luận Tài liệu tham khảo Trang 9 10 11 12 12 l í 13 i4 15 ỉ5 15 16 17 i 11 18 20 20 22 25 25 28 33 33 34 M Ở ĐẨU: Tuyến androgen Cronin phát mô tá lần vào năm 1947 cua C aỉỉincctes sapidơs Sau dó Charniaux-Cotton Peyen (1988) chứng minh vai trò tuyến điều chỉnh biệt hố tính đực tạo tinh tòm Decapod tuyến thường nằm cận cuối bám nhẹ vào ống dan linh Nanamine cộng (1980, 1987) cho biết tuyên có tác động đực hố shép vào tịm Sự cát bỏ tuyến androgen tơm càn" xanh M acrobrachiuni rosenberqiì giai đoạn non gày đáo giới hồn tồn, với hố tính trạng sinh dục sơ cáp thứ cấp vật sinh sàn (theo Amir Sasi cs ỉ 990 1997) Katakura (1989) dùnsỉ SZUL đò tiến hành sò cõnp, ihức ỉ;óns sau phẫu thuật tương dối nhỏ 527c nhiên ty lệ thành còng lớn Sau Ihãns khư tuyên androgen tom đực non íiàv đáo iiiởi hồn tồn tìr dực sane ca biệt có dao giới có buồn SI trứníi lứn khỏna SIì nhóm dõi chứna tuỏi Rất !ý thú đáo giới xây với cá tính trạ na vinh dục thứ cấp ihí dụ vị trí lỏ de tiêu biến sai đực đao giới Nghiên cứu mõ học cho thấy sư biên đổi hoàn toàn từ tuyên đực sana tuvén Việc ni đé tịm chưa thực hiên dược chưa có đủ điêu kiện ni chưa có C ỏn2 n g h ệ n t ị m cíu t h ê Kiên nghị vo quv mo đoi tượnjí áp dụnii nghiên cứu: Ap dụng Cư phạm vi toàn quốc sứ nghiên cứu va nuoi thu\ sán , tren doi tượng tóm ni troniỉ Thu trưưns quan chu trì đẽ tái Chu nhiệm đè tài Nau vẻn Mộng Họ tên Học h àm Chu tịch Hội đon" đánh oiá chinh Ihưc • •* Hùns PGS TS " / ị học v ị " •• m ĨS : Kí tên Đóng dấu ị p p ' 1' s Thu trương cu quan quan lý đè tai TÓM TĂT C Á C C Ồ N G TRÌNH NCKH CỦA CÁ NHÃN (bài báo, báo cáo tai Hội niỊhị khoa học Đ Ó N G TRONG BÁO CÁO CỦA ĐỂ TÀI NCỈÀNH SINH HỌC IA Niĩuvễn Mộng Hùnu 2002 H iĩih t h a i v u Ciiu t i u c t u ỵ c n í i n d r o g c n t o m cùIIII í V l ibi'tK'hiIIIÌIIIIpp