Nghiên cứu tính sạch mimosine từ cây mắc cỡ mimosa pudica linn và thử tác dụng kháng khuẩn

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TRẦN NGỌC CẨM THANH NGHIÊN CỨU TINH SẠCH MIMOSINE TỪ CÂY MẮC CỠ Mimosa pudica Linn VÀ THỬ TÁC DỤNG KHÁNG KHUẨN Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM VÀ ĐỒ UỐNG LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, THÁNG 12 NĂM 2009 LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cảm ơn thầy cơ, gia đình bạn bè giúp đỡ, hỗ trợ em hoàn thành luận văn Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến: Cô Đống Thị Anh Đào tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm sống quý báu cho em suốt thời gian học, trình thực luận văn Q thầy phụ trách phịng thí nghiệm mơn Công Nghệ Thực Phẩm, cô Nguyễn Thị Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian thực luận văn Quý thầy cô trường Đại Học Bách Khoa TpHCM quý thầy cô Bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm giảng dạy, hướng dẫn để em có kiến thức hơm Các bạn học viên cao học giúp đỡ hỗ trợ suốt thời gian thực luận văn Các thành viên gia đình ln hỗ trợ, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho hoàn thành luận văn Một lần em xin chân thành cảm ơn nhiều! TÓM TẮT Mimosine alkaloid độc có mắc cỡ Mimosa pudica Linn gây tác hại cho thể người động vật Cơ chế gây độc mimosine phức tạp liên quan đến ngăn cản trình chép DNA tế bào ức chế sinh tổng hợp protein Các nghiên cứu gần tận dụng chế gây độc mimosine để ứng dụng lĩnh vực y học khả chống lại tăng sinh mimosine tế bào ung thư nghiên cứu khả kháng loại vi khuẩn nấm da gây bệnh người mimosine Trong nghiên cứu chúng tơi khảo sát quy trình trích ly, tinh mimosine từ mắc cỡ đạt độ tinh cao để thử sơ khả kháng khuẩn mimosine Hàm lượng mimosine tất nghiên cứu xác định xác phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC (High performance liquid chromatography) Q trình trích ly mimosine nghiên cứu tối ưu với điều kiện trích ly tỉ lệ ngun liệu: dung mơi 0,046, nhiệt độ trích ly 66oC thời gian 140 phút đạt hiệu suất trích ly 95.04% Dịch trích mimosine nghiên cứu tinh sắc ký cột trao đổi ion khảo sát điều kiện lượng hạt nhựa cationit nhồi cột chiều dài cột 80mm, lượng dung môi rửa giải 40ml đạt độ tinh 87,28% Kết khảo sát sơ thử khả kháng khuẩn mimosine độ tinh 87,28% cho thấy vi khuẩn Staphylococcus aureus môi trường ni cấy nhạy với mimosine nồng độ 40µg/ml cho đường kính vịng kháng khuẩn 11,5mm ABSTRACT Mimosine, a toxic alkaloid presented in Mimosa pudica Linn affect human and animals The mechanisms of its toxicity are complicated and relate to inhibition of DNA replication and protein synthesis The recent researchs indicated the use of those mechanisms in medicine fields such as antiproliferative effect of mimosine in ovarian cancer or antidermatophytic and bacterial activity of mimosine We studied extraction and purification conditions of mimosine from Mimosa pudica Linn to get high purification rate for antibacterial activity premilinary test of mimosine Mimosine concentration in this study was determined by high performance liquid chromatography (HPLC) analysis method The mimosine extraction conditions were optimized at the ratio of material and solvent 0,046, the temperature 66oC in 140 minutes with gained mimosine extraction yield 95,04% The mimosine extract was carried out study of mimosine purification by ion exchange column chromatography The eluted mimosine gained purification rate 87,28% with the cationit volume equal to column length 80mm and elute volume 40ml The initial test of antibacterial activity of purified mimosine on Staphylococcus aureus indicated that Staphylococcus aureus sensitive with mimosine at concentration 40µg/ml and zone of inhibition 11,5mm LỜI MỞ ĐẦU Cây mắc cỡ loài mọc hoang nước ta, thân có chứa nhiều hoạt chất sinh học cần thiết cho thể Selen, Ca, Mg, P, flavonoid, acid ascorbic, beta carotene, acid béo oleic linoleic có ích cho thể bên cạnh có chứa loại alkaloid độc mimosine Cơ chế gây độc mimosine phức tạp gây nên rụng tóc, chậm phát triển, đục nhân mắt, bướu cổ, làm giảm khả sinh sản thể sống… Mặt khác, nghiên cứu gần giới tận dụng chế gây độc mimosine ức chế trình sinh tổng hợp protein ngăn cản chép DNA tế bào để ứng dụng lĩnh vực y học khả tiêu diệt số vi sinh vật, nấm gây bệnh viêm nhiễm da ngưởi khả ức chế phát triển số tế bào ung thư Kết nghiên cứu cho thấy mimosine có khả kháng số loại nấm da vi khuẩn gây viêm Trichophyton rubrum, Trichophyton mentaprophytes, Microsporum canis Epidermophyton floccosum, vi nấm Pityrosporum ovale, vi nấm Candida số vi khuẩn yếm khí gây viêm xoang Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Moraxella catarrhalis, Heamophylus influenzae Trong mimosine có khả ức chế hoàn toàn phát triển số loại nấm da Trichophyton ức chế mạnh với Staphylococcus aureus loài vi khuẩn Trong phạm vi nghiên cứu này, tiến hành khảo sát điều kiện trích ly, tinh mimosine từ nguồn nguyên liệu mắc cỡ mọc hoang bước đầu thử khả kháng khuẩn mimosine loại vi khuẩn Staphylococcus aureus MỤC LỤC -i- MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN TÓM TẮT ABSTRACT LỜI MỞ ĐẦU MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vii CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Cây mắc cỡ 1.1.1 Phân loại thực vật 1.1.2 Đặc điểm hình thái: 1.1.3 Phân bố đặc tính sinh học 1.1.4 Đặc điểm sinh sản phát triển 1.1.5 Nhân giống thu hoạch 1.1.6 Thành phần hóa học 1.2 Độc tố Mimosine 1.2.1 Tính chất vật lý 1.2.2 Tính chất hóa học 1.2.3 Sự tổng hợp mimosine phân bố 11 1.2.4 Cơ chế gây độc mimosine 12 1.3 Giới thiệu trích ly phương pháp trích ly 15 1.3.1 Bản chất trình trích ly 15 1.3.2 Đặc điểm q trình trích ly 15 1.3.3 Phương pháp trích ly 15 1.3.4 Các yếu tố ảnh hưởng tới q trình trích ly 18 1.4 Phương pháp tinh mimosine 19 1.4.1 Nguyên tắc chung 19 GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH MỤC LỤC - ii - 1.4.2 Ionit 19 1.4.3 Cơ chế trao đổi ion 20 1.5 Các phương pháp phân tích dịch mimosine sau tinh 21 1.5.1 Phương pháp sắc ký mỏng 21 1.5.2 Phương pháp hấp phụ quang phổ 22 1.5.3 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC 22 1.6 Các phương pháp thử kháng khuẩn 23 1.7 Kết cơng trình nghiên cứu liên quan nước giới 24 CHƯƠNG II NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Nguyên liệu 28 2.1.1 Cây mắc cỡ 28 2.1.2 Chất chuẩn L - Mimosine 28 2.2 Phương pháp nghiên cứu 29 2.2.1 Sơ đồ thí nghiệm 29 2.2.2 Sơ đồ quy trình cơng nghệ 30 2.2.3 Thuyết minh qui trình cơng nghệ 31 2.3 Nội dung nghiên cứu 31 2.3.1 Khảo sát ảnh hưởng điều kiện trích ly mimosine đến hiệu suất trích ly mimosine từ mắc cỡ 31 2.3.1.1 Khảo sát phương pháp xác định hàm lượng mimosine tổng 31 2.3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng chế độ xử lý nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine 33 2.3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng hệ dung môi đến hiệu suất trích ly mimosine 35 2.3.1.4 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: dung môi đến hiệu suất trích ly mimosine 36 2.3.1.5 Khảo sát ảnh hưởng kích thước nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine 36 2.3.1.6 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến hiệu suất trích ly mimosine 38 GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH MỤC LỤC - iii - 2.3.2 Tối ưu hóa trình trích ly mimosine 39 2.3.3 Nghiên cứu tinh mimosine 39 2.3.3.1 Mục đích 39 2.3.3.2 Phương pháp phân tích mức độ tinh 39 2.3.3.3 Phương pháp tinh sắc ký trao đổi ion 39 2.3.3.4 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả tinh 43 2.3.4 Khảo sát khả kháng khuẩn chế phẩm mimosine 45 2.4 Các phương pháp phân tích 46 2.4.1 Phương pháp xác định độ ẩm 46 2.4.2 Phương pháp xác định hàm lượng tro 46 2.4.3 Phương pháp xác định hàm lượng mimosine 47 CHƯƠNG III KẾT QUẢ - BÀN LUẬN 51 3.1 Khảo sát thành phần nguyên liệu 52 3.2 Khảo sát phương pháp xác định hàm lượng mimosine tổng 52 3.3 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất trích ly mimosine 53 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng chế độ xử lý nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine 53 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng hệ dung mơi trích ly đến hiệu suất trích ly mimosine 54 3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: dung môi đến hiệu suất trích ly mimosine 55 3.3.4 Khảo sát ảnh hưởng kích thước nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine 56 3.3.5 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến hiệu suất trích ly mimosine 57 3.4 Tối ưu hóa q trình trích ly mimosine 59 3.5 Nghiên cứu tinh mimosine 65 3.5.1 Khảo sát ảnh hưởng lượng hạt nhồi cột đến hiệu suất trao đổi mimosine 65 3.5.2 Khảo sát ảnh hưởng lượng dung môi rửa giải NH4OH đến hiệu suất thu hồi mimosine: 66 GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH MỤC LỤC - iv - 3.5.3 Khảo sát ảnh hưởng pH đến độ tinh mimosine 68 3.5.3.1 Khảo sát giá trị pH thích hợp để loại tạp chất dịch trích mimosine 68 3.5.3.2 Khảo sát độ tinh mimosine sắc ký trao đổi ion sau xử lý pH 69 3.6 Khảo sát khả kháng khuẩn chế phẩm mimosine 70 CHƯƠNG IV KẾT LUẬN - KIẾN NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH DANH MỤC HÌNH -v- DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Các thành phần vô mắc cỡ Bảng 1.2: Thành phần chất béo có mắc cỡ (% chất khô) Bảng 1.3: Thành phần chất béo có hạt mắc cỡ Bảng 2.1: Số liệu nồng độ mimosine diện tích đỉnh 48 Bảng 3.1: Thành phần nguyên liệu 52 Bảng 3.2: Khảo sát thời gian trích ly tồn hàm lượng mimosine tổng nguyên liệu 52 Bảng 3.3: Ảnh hưởng chế độ xử lý nguyên liệu đến hiệu suất trích ly 53 Bảng 3.4: Ảnh hưởng hệ dung mơi trích ly đến hiệu suất trích ly mimosine 54 Bảng 3.5: Ảnh hưởng tỉ lệ ngun liệu: dung mơi đến hiệu suất trích ly mimosine 55 Bảng 3.6: Ảnh hưởng kích thước nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine 56 Bảng 3.7: Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến hiệu suất trích ly mimosine 57 Bảng 3.8: Các mức yếu tố thực tối ưu 59 Bảng 3.9: Các thí nghiệm tiến hành tối ưu 60 Bảng 3.10: Các yếu tố chuyển qua hệ mã hóa 60 Bảng 3.11: Ma trận quy hoạch thực nghiệm nhân tố toàn phần 23 61 Bảng 3.12: Các hệ số phương trình hồi quy 61 Bảng 3.13: Thí nghiệm tâm 62 Bảng 3.14: Các giá trị phân vị Student, tj 62 Bảng 3.15: Các giá trị tính tốn 63 Bảng 3.16: Kết thực nghiệm tối ưu hóa 64 Bảng 3.17: Ảnh hưởng lượng hạt nhồi cột đến hiệu suất trao đổi mimosine 65 Bảng 3.18: Ảnh hưởng lượng dung môi rửa giải NH4OH đến hiệu suất thu hồi mimosine 66 Bảng 3.19: Nồng độ mimosine nồng độ phần trăm chất khơ hịa tan dịch lọc sau xử lý pH 68 GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 25 -PL Hình PL4.5.12: Kết phân tích HPLC mimosine dịch trích khảo sát trích ly nhiệt độ 70°C 240 phút PL4.6 Khảo sát ảnh hưởng lượng hạt nhồi cột đến hiệu suất trao đổi mimosine: Hình PL4.6.1: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu trước qua cột GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 26 -PL Hình PL4.6.2: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột hồi lưu lần khảo sát lượng hạt nhồi cột chiều dài cột L Hình PL4.6.3: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột hồi lưu lần khảo sát lượng hạt nhồi cột 2/3L GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 27 -PL Hình PL4.6.4: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột hồi lưu lần khảo sát lượng hạt nhồi cột 1/2L Hình PL4.6.5: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột hồi lưu lần khảo sát lượng hạt nhồi cột 1/3L GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 28 -PL PL4.7 Khảo sát ảnh hưởng lượng dung môi rửa giải NH4OH đến hiệu suất thu hồi mimosine: Hình PL4.7.1: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột khảo sát lượng dung môi rửa giải NH4OH 10ml Hình PL4.7.2: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột khảo sát lượng dung môi rửa giải NH4OH 20ml GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 29 -PL Hình PL4.7.3: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột khảo sát lượng dung mơi rửa giải NH4OH 30ml Hình PL4.7.4: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu sau qua cột khảo sát lượng dung môi rửa giải NH4OH 40ml GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 30 -PL PL4.8 Khảo sát ảnh hưởng pH đến độ tinh mimosine: (a) (b) Hình PL4.8.1: Kết phân tích HPLC mimosine mẫu ban đầu (a) mẫu dịch lọc pH 12 (b) (a) (b) Hình PL4.8.2: Kết phân tích HPLC mimosine dịch trích ban đầu trước qua cột (a) dịch sau rửa giải NH4OH (b) (a) (b) Hình PL4.8.3: Kết phân tích HPLC mimosine dịch lọc pH 12 trước qua cột (a) dịch sau rửa giải NH4OH (b) GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 31 -PL PL4.9 Kết xử lý số liệu thực nghiệm Anova: Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 795.913 265.304 223.24 0.0001 Within groups 4.75365 1.18841 Total (Corr.) 800.666 -Method: 95.0 percent LSD Che xu ly Count Mean Homogeneous Groups -Hap 61.04 X Say 62.41 X Chan 68.115 X Tuoi 86.06 X -Contrast Difference +/- Limits -Chan - Hap *7.075 3.02673 Chan - Say *5.705 3.02673 Chan - Tuoi *-17.945 3.02673 Hap - Say -1.37 3.02673 Hap - Tuoi *-25.02 3.02673 Say - Tuoi *-23.65 3.02673 Hình PL4.9.1: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng chế độ xử lý nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 32 -PL Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 5555.04 925.84 469.45 0.0000 Within groups 13.8054 1.9722 Total (Corr.) 5568.84 13 Multiple Range Tests for hieu suat trich ly by he dung moi -Method: 95.0 percent LSD he dung moi Count Mean Homogeneous Groups -ethanol 23.845 X acid lactic 45.01 X nuoc 50.755 X acid acetic 54.4 X acid citric 55.995 X NaHCO3 80.115 X HCl 87.88 X -Contrast Difference +/- Limits -HCl - NaHCO3 *7.765 3.32077 HCl - acid acetic *33.48 3.32077 HCl - acid citric *31.885 3.32077 HCl - acid lactic *42.87 3.32077 HCl - ethanol *64.035 3.32077 HCl - nuoc *37.125 3.32077 NaHCO3 - acid acetic *25.715 3.32077 NaHCO3 - acid citric *24.12 3.32077 NaHCO3 - acid lactic *35.105 3.32077 NaHCO3 - ethanol *56.27 3.32077 NaHCO3 - nuoc *29.36 3.32077 acid acetic - acid citric -1.595 3.32077 acid acetic - acid lactic *9.39 3.32077 acid acetic - ethanol *30.555 3.32077 acid acetic - nuoc *3.645 3.32077 acid citric - acid lactic *10.985 3.32077 acid citric - ethanol *32.15 3.32077 acid citric - nuoc *5.24 3.32077 acid lactic - ethanol *21.165 3.32077 acid lactic - nuoc *-5.745 3.32077 ethanol - nuoc *-26.91 3.32077 -* denotes a statistically significant difference Hình PL4.9.2: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng hệ dung mơi trích ly đến hiệu suất trích ly mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 33 -PL ANOVA Table for Hieu suat trich ly by Ty le nguyen lieu Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 951.215 317.072 184.62 0.0001 Within groups 6.86965 1.71741 Multiple Range Tests for Hieu suat trich ly by Ty le nguyen lieu -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -1:10 63.844 X 1:20 87.738 X 1:30 88.1325 X 1:40 90.774 X -Contrast Difference +/- Limits -1:10 - 1:20 *-23.894 3.63854 1:10 - 1:30 *-24.2885 3.63854 1:10 - 1:40 *-26.93 3.63854 1:20 - 1:30 -0.3945 3.63854 1:20 - 1:40 -3.036 3.63854 1:30 - 1:40 -2.6415 3.63854 Hình PL4.9.3: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: dung mơi đến hiệu suất trích ly mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 34 -PL Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3186.11 796.529 255.70 0.0000 Within groups 15.5752 3.11505 Total (Corr.) 3201.69 Multiple Range Tests for Hieu suat trich trich ly by Kich thuoc nguyen lieu -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -nho hon 2mm 33.375 X 2-4mm 57.2 X 8-10mm 71.61 X 6-8mm 76.09 X 4-6mm 84.15 X -Contrast Difference +/- Limits -2-4mm - 4-6mm *-26.95 4.53696 2-4mm - 6-8mm *-18.89 4.53696 2-4mm - 8-10mm *-14.41 4.53696 2-4mm - nho hon 2mm *23.825 4.53696 4-6mm - 6-8mm *8.06 4.53696 4-6mm - 8-10mm *12.54 4.53696 4-6mm - nho hon 2mm *50.775 4.53696 6-8mm - 8-10mm 4.48 4.53696 6-8mm - nho hon 2mm *42.715 4.53696 8-10mm - nho hon 2mm *38.235 4.53696 Hình PL4.9.4: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng kích thước nguyên liệu đến hiệu suất trích ly mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 35 -PL Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2261.48 11 205.589 94.07 0.0000 Within groups 26.2272 12 2.1856 Total (Corr.) 2287.71 23 Multiple Range Tests for HIEU SUAT TRICH LY by Nhiet thoi gian -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -50-60 55.15 X 60-60 68.785 X 50-120 74.315 X 70-240 78.405 X 70-60 81.35 XX 50-180 81.89 X 70-180 82.4 X 50-240 83.685 X 60-120 87.86 X 60-180 88.9 X 60-240 89.445 X 70-120 89.9 X -Contrast Difference +/- Limits -50-120 - 50-180 *-7.575 3.22112 50-120 - 50-240 *-9.37 3.22112 50-120 - 50-60 *19.165 3.22112 50-120 - 60-120 *-13.545 3.22112 50-120 - 60-180 *-14.585 3.22112 50-120 - 60-240 *-15.13 3.22112 50-120 - 60-60 *5.53 3.22112 50-120 - 70-120 *-15.585 3.22112 50-120 - 70-180 *-8.085 3.22112 50-120 - 70-240 *-4.09 3.22112 50-120 - 70-60 *-7.035 3.22112 50-180 - 50-240 -1.795 3.22112 50-180 - 50-60 *26.74 3.22112 50-180 - 60-120 *-5.97 3.22112 50-180 - 60-180 *-7.01 3.22112 50-180 - 60-240 *-7.555 3.22112 50-180 - 60-60 *13.105 3.22112 50-180 - 70-120 *-8.01 3.22112 50-180 - 70-180 -0.51 3.22112 50-180 - 70-240 *3.485 3.22112 50-180 - 70-60 0.54 3.22112 50-240 - 50-60 *28.535 3.22112 50-240 - 60-120 *-4.175 3.22112 50-240 - 60-180 *-5.215 3.22112 50-240 - 60-240 *-5.76 3.22112 50-240 - 60-60 *14.9 3.22112 50-240 - 70-120 *-6.215 3.22112 50-240 - 70-180 1.285 3.22112 50-240 - 70-240 *5.28 3.22112 50-240 - 70-60 2.335 3.22112 50-60 - 60-120 *-32.71 3.22112 GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 36 -PL 50-60 - 60-120 *-32.71 3.22112 50-60 - 60-180 *-33.75 3.22112 50-60 - 60-240 *-34.295 3.22112 50-60 - 60-60 *-13.635 3.22112 50-60 - 70-120 *-34.75 3.22112 50-60 - 70-180 *-27.25 3.22112 50-60 - 70-240 *-23.255 3.22112 50-60 - 70-60 *-26.2 3.22112 60-120 - 60-180 -1.04 3.22112 60-120 - 60-240 -1.585 3.22112 60-120 - 60-60 *19.075 3.22112 60-120 - 70-120 -2.04 3.22112 60-120 - 70-180 *5.46 3.22112 60-120 - 70-240 *9.455 3.22112 60-120 - 70-60 *6.51 3.22112 60-180 - 60-240 -0.545 3.22112 60-180 - 60-60 *20.115 3.22112 60-180 - 70-120 -1.0 3.22112 60-180 - 70-180 *6.5 3.22112 60-180 - 70-240 *10.495 3.22112 60-180 - 70-60 *7.55 3.22112 60-240 - 60-60 *20.66 3.22112 60-240 - 70-120 -0.455 3.22112 60-240 - 70-180 *7.045 3.22112 60-240 - 70-240 *11.04 3.22112 60-240 - 70-60 *8.095 3.22112 60-60 - 70-120 *-21.115 3.22112 60-60 - 70-180 *-13.615 3.22112 60-60 - 70-240 *-9.62 3.22112 60-60 - 70-60 *-12.565 3.22112 70-120 - 70-180 *7.5 3.22112 70-120 - 70-240 *11.495 3.22112 70-120 - 70-60 *8.55 3.22112 70-180 - 70-240 *3.995 3.22112 70-180 - 70-60 1.05 3.22112 70-240 - 70-60 -2.945 3.22112 -* denotes a statistically significant difference Hình PL4.9.5: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến hiệu suất trích ly mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 37 -PL Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 5778.76 1926.25 1657.37 0.0000 Within groups 4.64895 1.16224 Total (Corr.) 5783.41 Multiple Range Tests for Hieu suat trao doi by Luong hat nhoi cot -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -1/3L 31.27 X 1/2L 46.924 X 2/3L 82.65 X L 98.37 X -Contrast Difference +/- Limits -1/2L - 1/3L *15.654 2.99322 1/2L - 2/3L *-35.726 2.99322 1/2L - L *-51.446 2.99322 1/3L - 2/3L *-51.38 2.99322 1/3L - L *-67.1 2.99322 2/3L - L *-15.72 2.99322 -* denotes a statistically significant difference Hình PL4.9.6: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng lượng hạt nhồi cột đến hiệu suất trao đổi mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH PHỤ LỤC - 38 -PL Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 4139.87 1379.96 1174.31 0.0000 Within groups 4.70047 1.17512 Total (Corr.) 4144.57 Multiple Range Tests for Hieu suat thu hoi by Luong dung moi rua giai -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -10 37.12 X 20 69.38 X 30 82.879 X 40 98.984 X -Contrast Difference +/- Limits -10 - 20 *-32.26 3.00976 10 - 30 *-45.759 3.00976 10 - 40 *-61.864 3.00976 20 - 30 *-13.499 3.00976 20 - 40 *-29.604 3.00976 30 - 40 *-16.105 3.00976 Hình PL4.9.7: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng lượng dung môi rửa giải đến hiệu suất thu hồi mimosine Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 19.4533 9.72667 66.32 0.0033 Within groups 0.44 0.146667 Total (Corr.) 19.8933 Multiple Range Tests for duong kinh vong khang khuan by nong mimosine -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -20 7.2 X 30 8.5 X 40 11.5 X -Contrast Difference +/- Limits -20 - 30 *-1.3 1.21879 20 - 40 *-4.3 1.21879 30 - 40 *-3.0 1.21879 -* denotes a statistically significant difference Hình PL4.9.8: Xử lý số liệu thực nghiệm khảo sát khả kháng khuẩn chế phẩm mimosine GVHD: PGS TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO TRẦN NGỌC CẨM THANH LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên: TRẦN NGỌC CẨM THANH Sinh ngày: 15/07/1983 Nơi sinh: Tp.HCM Địa liên lạc: 27D cư xá Lý Thường Kiệt P7.Q10.Tp.HCM Quá trình đào tạo: - 09/2001 – 09/2005: Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên Tp Hồ Chí Minh chuyên ngành Sinh học - 09/2007 - nay: Học cao học chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm Đồ Uống Trường Đại Học Bách Khoa Tp Hồ Chí Minh Q trình cơng tác: - 01/2007 – 01/2009: Công ty TNHH Uni-President Việt Nam - 09/2009 – nay: Trường Đại Học Kỹ Thuật Công Nghệ TpHCM ... bệnh người mimosine Trong nghiên cứu khảo sát quy trình trích ly, tinh mimosine từ mắc cỡ đạt độ tinh cao để thử sơ khả kháng khuẩn mimosine Hàm lượng mimosine tất nghiên cứu xác định xác phương... vi khuẩn gọi nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) Các thử nghiệm kháng khuẩn chất cần thử khả kháng khuẩn thường thiết lập với số kháng sinh có cách thức tác động kháng khuẩn biết Các thử nghiệm kháng. .. Cây mắc cỡ: Trong nghiên cứu này, sử dụng thân mắc cỡ Mimosa pudica L họ Mimosaceae, độ tuổi – tháng, cao khoảng 30 cm, thu hái quận Bình Tân, huyện Bình Chánh, thành phố Hồ Chí Minh nghiên cứu