PICORNAVIRUS ROTAVIRUS (VI SINH)

PICORNAVIRUS PICORNAVIRUS Picorna từ Pico-nghĩa nhỏ, RNA ribonucleic acide có kích thước bé, chứa RNA Picornavirus có tính chất sau: • KT bé từ 17-30 nm • Chứa RNA • Vỏ capside hình khối đa diện, đối xứng • Khơng chứa Lipide Họ gồm virus nhỏ cấu tạo đơn giản Tiêu biểu cho virus họ Poliovirus Năm 1957, gộp tất virus Polio, Coxsackie ECHO vào nhóm chung virus đường ruột, (dựa vào týp acide nucleic RNA) kích thước bé, bền vững với ether làm Có 106 thành viên khác nhau, số NC kỹ  Năm 1963, Melnick số thành viên Ủy ban quốc tế nghiên cứu virus đường ruột đề nghị phân nhóm sau:  Các Piconavirus người gồm có:       Enteroviruses Poliovirus Virus Coxsackie A Virus Coxsackie B Virus ECHO Rhinovirus  Các Picornavirus động vật hạ đẳng:   Gần gũi với virus TV KT giống có SL capsomer khác  Ở nói Picornavirus người Từ 1957, với tên Enterovirus bao gồm: virus HAV, virus gây bệnh bại liệt, virus Coxsackie A, B virus ECHO Các type nhóm ghi chữ số (1, 2, 3…)  Enterovirus gồm Rotavirus ký sinh đường TH người (có mũi họng), nhân lên, lan tỏa  tổn thương quan khác, gây bệnh khác người  Về KT cấu tạo, chúng thuộc họ Picorna, bền vững với ether, với desoxycholat sodium, chịu pH toan môi trường (pH=3)   Virus bị diệt 560C 30 phút Mg++ làm tăng tính bền vững với nhiệt độ virus Rất khác tính chất sau:  Tính độc với đv, đặc điểm nuôi cấy mô in-vitro, NKHC, bền vững nhiệt độ acide Mỗi nhóm virus có ĐĐ định độc tính ĐV, với nuôi cấy tế bào in-vitro, khả NKHC CÁC ECHO VÀ COXSACKIE COXSACKIE VIRUSES: Những đại diện virus Coxsackie Dallorf Sickles phân lập từ phân hai em bé mắc chứng bại liệt làng Coxsackie (NewYork - Mỹ) 1948 Các virus Coxsackie chia làm hai phân nhóm: Phân nhóm A: týp từ 1-24 Phân nhóm B: týp từ 1-6 Tính chất sinh học bật gây bệnh cho chuột bạch đẻ  ECHO VIRUSES: Có 34 týp đánh số từ ECHO đến ECHO 34 Virus tìm thấy trình NC bệnh bại liệt (Poliomyolitis) từ 1951, lúc đầu gọi virus mồ côi (Melnick) sau gọi ECHOVIRUS - ECHO (Enteric Cytopathogenic human orphan) có nghĩa virus đường ruột gây bệnh cho tế bào người virus "mồ côi" ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CHUNG CỦA CÁC VI-RÚT COXSACKIE ECHO:     Kích thước: nhỏ từ 20-30 nm Cấu tạo: Có RNA, protein, khơng có lipide   Sức đề kháng: Chịu ether, alcohol 70 C, độ toan pH (pH=3), Desoxycholates sodium Tương đối bền vững với ngoại cảnh  Bị diệt nhanh đun sơi, tia cực tím, formalin 0,3%, chlor 0,3-0,5%  Kháng nguyên: ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CHUNG CỦA CÁC VI-RÚT COXSACKIE ECHO:  Các virus có KN khác khơng gây miễn dịch chéo, khơng có KN chung nhóm Để phân loại virus đường ruột nhóm Coxsackie ECHO, dựa vào tính chất gây bệnh tế bào chuột bạch đẻ:  Các virus ECHO gây hủy hoại tế bào (cytopatho effect)  Các virus Coxsackie A không gây hủy hoại tế bào, gây viêm lan tỏa cho chuột bạch đẻ  Các virus Coxsackie B gây hủy hoại tế bào gây bệnh viêm giới hạn cho chuột bạch đẻ BẢNG PHÂN BIỆT CÁC TÍNH CHẤT VIRUS Gây bệnh cho chuột bạch non Vi-rút Khả hủy hoại TB Viêm lan tỏa Viêm giới hạn - ECHO + - Coxsackie A - + Coxsackie B + + KHẢ NĂNG GÂY BỆNH:  Các virus sống ký sinh ruột người mà không gây bệnh, gây bệnh nhẹ Poliovirus  Các virus Coxsackie ECHO gây bệnh bại liệt thường sau thời gian hồi phục  Các virus đường ruột có sức chịu đựng tốt nên phổ biến ngoại cảnh, đa số nhiễm virus số có BHLS   Thể ẩn /thể BH bệnh lý có MD lâu bền  Bệnh thường xảy trẻ nhỏ thiếu niên Các virus đường ruột xâm nhập vào đường TH gây bệnh nhiều quan khác hệ thần kinh (viêm não, màng não ), viêm tim, viêm KHẢ NĂNG GÂY BỆNH: MẦ M BỆNH BỆNH CHỦ YẾU Coxsacki A, ECHO Sốt bại liệt giống Poliovirus Coxsackie A Viêm não màng não nước Coxsackie A, B, ECHO Viêm màng não nước Coxsackie A (2, 4, 5, 6, 10) Viêm họng đỏ có nốt phồng chủ yếu trẻ nhỏû (bệnh Herpangina) Coxsackie B Coxsackie B, Coxsackie A ECHO có tham gia Bệnh đau dịch tễ (Epidemic myalgia) chủ yếu đau ngực bụng, thường đau khu trú bên phải nhiều bên trái gọi bệnh hay pleurodymia Viêm tim tiên phát người lớn trẻ em (Myocardiopathy) Coxsackie A Sốt ban ECHO Tiêu chảy mùa hè trẻ em ECHO, CoxsackieA Bệnh biểu đường hô hấp (sổ mũi, dạng cúm) tiêu hóa 10 VI PHỊNG BỆNH:  Vaccin Diphtérique, Tétanique et Poliomyélitique, inactivé D.T.P.O.L-IO  Thành phần:       Giải độc tố uốn ván đông khô : liều Vaccin bại liệt bất hoạt týp : liều Vaccin bại liệt bất hoạt týp : liều Vaccin bại liệt bất hoạt týp : liều Liều lượng:   Giải độc tố bạch hầu đông khô:1 liều mũi tiêm 0,5ml, tiêm mũi tiêm thêm mũi sau tiêm mũi thứ ba 12 tháng Tiêm nhắc lại lứa tuổi 10 tuổi Huyết trị liệu:  Gamma-globuline ngăn chặn bệnh nhiễm trùng  dùng sớm chưa BHLS, dùng 0,3 ml/kg  Bệnh xuất hiện, gamma-globuline khơng có hiệu lực 27 ROTAVIRUS  Rotavirus Kapikiau cộng tìm năm 1974-1975 xếp vào giống họ Reovididae có giống:      Reovirus Orbivirus Rotavirus Phytoreovirus Fijivirus  Ba giống đầu có số virus  bệnh người, giống sau có số virus  bệnh TV  Virus Rota có hình bánh xe / phân tiêu chảy nhiều lồi ĐV có vú cịn non, kể người (ở TE, chuột nhắt, thỏ, lợn con, bê, cừu, dê, lừa con, ngựa con, hươu nai linh dương) 28 I ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC: Hình thể cấu trúc:  Hình bánh xe (từ chữ Latinh ROTA = bánh xe) đk 60-75 nm  KHV điện tử trông giống vành bánh xe với nan hoa ngắn   trục to  Lõi có đk 33-40 nm, có RNA hai sợi TLPT 11 triệu daltons chia làm 11 15 đoạn  Capside vỏ có lớp, đối xứng hình hộp với 20 mặt tam giác   Lớp capside ngồi có tố NKHC glycoproteide, Lớp capside có enzyme RNA-polymenase phụ thuộc RNA 29 30 I ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC: Kháng nguyên:  Lớp capside gây nhiễm chứa KN đặc hiệu týp  khác virus Rota loài đv khác Phát KN type pư MDHQ pư TH Ở người có type virus Rota   KN ngưng kết hồng cầu Lớp capside có KN đặc hiệu nhóm chung cho tất virus Rota người đv có vú khác  phát pư KHBT, MDHQ, MDĐD, ELISA 31 I ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC: Nuôi cấy:  Nuôi nhiều virus Rota đv (bê, lợn, khỉ ) TB in vitro phát triển nhiều sau 18-20 Các KN phát MDHQ khắp bào tương TB  Các virus Rota người ni cấy khó khăn TB in vitro Ở TB lớp người, khỉ, bê, lợn  virus người nhân lên không trọn vẹn (incomplete replicative cycle),  KN virus / bào tương TB, phát MDHQ Sức đề kháng: Chịu đựng độ pH thấp, không bị hủy ether, virus / phân khả gây nhiễm Ở -20 C virus Rota giữ KN nhiều năm Các enzyme tiêu protein (như trypsine)  tăng gây nhiễm virus , hủy capside RNA virus dễ hoạt động, người ta dùng trypsine việc phân lập virus TB/ON 32 II KHẢ NĂNG GÂY BỆNH VÀ MIỄN DỊCH:  Gây nhiễm trùng chéo loài đv, tự nhiên chưa rõ  Ở người, gây VDD-ruột lẻ tẻ thành dịch trẻ sơ sinh trẻ nhỏ 5-6 tuổi, gặp khắp giới Người lớn bị bị nhẹ, thường bị thể ẩn (nhiễm virus  KT không TCLS)  Bệnh lây đường phân-miệng, virus  TB niêm mạc ruột non nhung mao ruột non nhân lên bào tương tế bào Tế bào bị tổn thương bong ra, rơi vào ruột  nhiều virus/trong phân  thải nhiều từ ngày thứ đến ngày thứ 5-6 sau phát bệnh (đạt 11 10 - 10 gram phân) Sau ngày thứ trở đi, virus thải giảm dần hết 33 Rotaviruses infect and replicate within the mature epithelial cells at the apex of the villus, and viral progeny exit the cell from the luminal membrane by a process of transcytosis The early events in infection are mediated by virusepithelial cell interactions during which at least three contacts between the virus and cell receptors occur Different rotavirus strains display different requirements to infect cells Some strains depend on the presence of sialic acid on the cell surface These first two interactions are mediated by the virus spike protein VP4 After attaching to the cell, all three strains interact with Integrin AlphaVBeta3 and protein HSP70 (70-kD Heat-shock protein 34 ) These molecules which serve as rotavirus receptors is found associated with cholesterol and glycosphingolipid-enriched lipid micro domains, and disorganization of these domains greatly inhibits rotavirus infectivity (Ref.3) Diarrhea may be caused by several mechanisms including (i) malabsorption that occurs secondary to the destruction of enterocytes, (ii) villus ischemia and activation of the ENS (Enteric Nervous System) that may be evoked by release of a vasoactive agent from infected epithelial cells in the absence of significant pathologic lesions or enterocyte damage, (iii) intestinal secretion stimulated by the intracellular or extracellular action of NSP4 (Ref.4) During the first cycle of rotavirus replication in mucosal epithelial cells, the synthesis of rotaviral proteins in the cell cytoplasm leads to an increase in the plasma-membrane permeability to Ca2+, to activation of regulatory mechanisms and to an increase in the concentration of Ca2+ in the endoplasmic reticulum through SERCA  (Sarco- and Endoplasmic Reticulum Ca2+ ATPase) In the extracellular medium, Ca2+ stabilizes the structure of the viral capsid but the increased concentration of cytosolic Ca2+ in infected cells promotes the activation of Ca2+ dependent enzyme, which in turn induces cell lysis and the release of viral proteins and viral progeny (Ref.5). NSP4 also act as a viral enterotoxin to induce secretory diarrhea through Ca2+dependent secretion by intestinal cells, Ca2+-dependent secretion of peptides and amines to stimulate the ENS, or by further activation of epithelial-cell chloride (Cl-) secretion by the ENS. NSP4 increases [Ca2+]i and this elevation in [Ca2+]i is not due to an increased influx of extracellular Ca2+ but due to result from the increase in Ca2+ efflux from the endoplasmic reticulum through a PLC (Phospholipase-C)dependent mechanism Exogenous NSP4 induce both Ca2+ release from intracellular stores and plasmalemma Ca2+ influx, through receptormediated PLC activation and IP3 (Inositol 1,4,5-triphosphate) production (Ref.6) In parallel, released virus infects downstream absorptive cells This leads to a massive cell death and, as a consequence, reduction of the absorptive surface of the intestinal epithelium and an osmotic component of diarrhea 35 Ủ bệnh từ 24-48 giờ: khởi phát với dấu hiệu điển hình tiêu chảy, sốt, đau bụng, nơn dẫn đến nước  rộ lên sau 48 giờ, bn viện với lý nước cần truyền dịch Ỉa chảy có giảm hấp thu muối Natri glucose vào TB nhung mao bị tổn thương, TB non khơng có khả hấp thu Khỏi hồn tồn sau khoảng tuần lễ Nặng không chữa trị kịp thời chết KT/HT xuất nhanh lứa tuổi từ tháng đến tuổi Đa số tuổi nhỏ có kháng thể týp Rotavirus người Khơng có MD chéo, dễ tái nhiễm type khác thể KT lưu động type gây bệnh Trẻ sơ sinh - tháng đầu bị nhiễm khơng triệu chứng, bảo vệ theo chế MD thụ động KT mẹ truyền KT chống virus Rota sữa mẹ tới tháng thứ sau sanh Các yếu tố MD chỗ KT tiết IgA Interferon có quan trọng việc chống lại nhiễm trùng virus Rota      36 37 38 III CHẨN ĐOÁN VI SINH HỌC: Tìm vi-rút phân:  Phân tiêu chảy cấp: nhiều virus/ phân, bảo quản -700C, xử lý theo thường quy PL virus Pha hỗn dịch virus khơng dùng HT HT phải coi có KT chống lại virus Rota  XN trực tiếp phân kt hiển vi điện tử (nhuộm acide phosphotungstic) kỹ thuật khác MDHQ, MD khuếch tán, MD điện di đối lưu, MD phóng xạ, MD enzyme (ELISA)  Ngưng kết latex (Latex agglutination) kỹ thuật đặc hiệu nhanh, người ta dùng hạt Latex gắn KT virus Rota Thí dụ: chẩn đoán Rotalatex (LA test kit hãng Orison Diasgnostica, Hensinki) 39 III CHẨN ĐOÁN VI SINH HỌC: Huyết chẩn đốn:  Lấy HT đơi để tìm tăng hiệu giá KT (huyết lần hai lấy vào thời kỳ phục sức sau bị bệnh 2-4 tuần)  KN virus Rota từ phân người Có thể làm pư KHBT, pư NNKHC, MDHQ, pứ TH, MD phóng xạ, ELISA 40 VI PHỊNG VÀ ĐIỀU TRỊ:  Phịng bệnh chung theo nguyên tắc bệnh nhiễm khuẩn đường ruột, tập thể trẻ nhỏ  Phòng đặc hiệu: chưa có kết đặc hiệu 41 ... gamma-globuline khơng có hiệu lực 27 ROTAVIRUS  Rotavirus Kapikiau cộng tìm năm 1974-1975 xếp vào giống họ Reovididae có giống:      Reovirus Orbivirus Rotavirus Phytoreovirus Fijivirus ... Coxsackie A Virus Coxsackie B Virus ECHO Rhinovirus  Các Picornavirus động vật hạ đẳng:   Gần gũi với virus TV KT giống có SL capsomer khác  Ở nói Picornavirus người Từ 1957, với tên Enterovirus bao.. .PICORNAVIRUS Picorna từ Pico-nghĩa nhỏ, RNA ribonucleic acide có kích thước bé, chứa RNA Picornavirus có tính chất sau: • KT bé từ 17-30 nm