Tuyển chọn vi khuẩn có khả năng cố định đạm và phân giải lân liên kết với cây lúa cao sản trồng trên đất phèn tại tỉnh an giang

TÓM TẮT Sáu mƣơi mốt chủng vi khuẩn liên kết với lúa đƣợc phân lập t r n g đất phèn trồng lúa huyên Tri Tôn huyện Tịnh Biên - tỉnh An Giang Đa số khuẩn lạc có màu trắng đục màu vàng nhạt, vi khuẩn có dạng hình que Gram âm Tất chủng vi khuẩn có khả tổng hợp ammonium dao động từ 0,18 - 4,87 mg NH4+/L, có khả hịa tan lân khó tan dao động 11,66 - 30,97 mg P2O5/L Hàm lƣợng đạm cố định cao đo đƣợc chủng vi khuẩn đƣợc khảo sát có xu hƣớng tập trung vào ngày sau chủng Các chủng vi khuẩn có khả hịa tan lân FePO4 ngày thứ sau chủng mà khả hòa tan lân tập trung ngày sau Trong 61 chủng vi khuẩn đƣợc phân lập, tuyển chọn bốn chủng vi khuẩn có khả cố định đạm hòa tan cao Cả chủng vi khuẩn (BTB1 BTB10 đƣợc phân lập từ vùng rễ lúa đất phèn Tịnh Biên; BTT2c BTT5b đƣợc phân lập từ vùng rễ lúa đất phèn Tri Tôn) có khả cố định đạm dao động từ 1,30 đến 4,87 mg NH4+/L; có khả hịa tan FePO4 dao động từ 19,57 đến 36,57 mgP2O5/L Chủng vi khuẩn BTB1 có mối quan hệ gần với lồi Burkholderia diffausa, chủng BTB10 có mối quan hệ gần với lồi Enterobacter cloacae, chủng BTT2c có mối quan hệ gần với lồi Enterobacter cloacae chủng BTT5b có mối quan hệ gần với lồi Bacillus subtilis Từ khóa: cố định đạm, đất phèn, FePO4, hòa tan lân, vi khuẩn i ABSTRACT Sixty-one rice associated bacteria strains have been isolated in acid sulphate soil which rice growing in Tri Ton district and Tinh Bien district in An Giang province Most of the colonies are milk – color and light yellow color, with round-shaped and negative Gram All of these strains having both nitrogen fixation and phosphate solubilization characteristics ranging from 0,18 to 4,87 mg NH4+/L, from 11,66 to 30,97 mg P2O5/L The highest fixing nitrogen concentration of the examined strains tended to be concentrated for days after inoculation Bacterial strains were less likely to dissolve FePO4 on days after inoculation with phosphate solubility in later days Of the 61 strains isolated, four strains of nitrogen - fixing and phosphate - solubilizing bacteria were selected All strains of bacteria (BTB1 and BTB10 isolated from rice rhizosphere of acid sulphate soil in Tinh Bien; BTT2c and BTT5b isolated from rice rhizosphere of acid sulphate soil in Tri Ton) All four strains have nitrogen fixation capacity ranging from 1,30 đến 4,87 mg NH4+/L, and FePO4 solubilization capacity, ranging from 19,57 to 36,57 mgP2O5 / L The results were compared partial 16S rRNA sequences gene of strains BTB1, BTB10, BTT2c, BTT5b by BLASTN program showed strain of BTB1 closed with Burkholderia diffausa, strain of BTB10 closed with Enterobacter cloacae, strain of BTT2c closed with Enterobacter cloacae and strain of BTT2c closed with Bacillus subtilis Keywords: acid sulfate soil, bacteria, FePO4, nitrogen fixation, phosphate solubilization ii LỜI CAM KẾT Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu cơng trình nghiên cứu có xuất xứ rõ ràng Nhũng kết luận khoa học công trình nghiên cứu chƣa đƣợc dùng cơng trình khác An Giang, ngày 15 tháng năm 2018 Người thực Lý Ngọc Thanh Xuân iii MỤC LỤC TÓM TẮT………………………………………………………………… ABSTRACT………………………………………………………………… LỜI CAM KẾT……………………………………………………………… DANH SÁCH BẢNG………………………………………………………… DANH SÁCH HÌNH………………………………………………………… DANH SÁCH TỪ VIẾT TẮT………………………………………………… CHƢƠNG GIỚI THIỆU…………………………………………………… 1.1 TÍNH CẦN THIẾT CỦA ĐỀ TÀI……………………………………… 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU……………………………………………… 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU…………………………………………… 1.4 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU……………………………………………… 1.5 NHỮNG ĐÓNG GÓP CỦA ĐỀ TÀI…………………………………… CHƢƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU……………………… 2.1 MỘT SỐ KHÁI NIỆM ………………………………………………… 2.2 CƠ CHẾ CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN…………………………… 2.3 ĐIỀU KIỆN ẢNH HƢỞNG TỚI KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI SINH VẬT …………………………………………………………………… 2.4 CƠ CHẾ HÒA TAN LÂN CỦA VI KHUẨN…………………………… 2.5 ĐIỀU KIỆN ẢNH HƢỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG HÒA TAN LÂN CỦA VI SINH VẬT ………………………………………………………………… 2.6 ĐẶC TÍNH HÓA HỌC ĐẤT PHÈN VÙNG TỨ GIÁC LONG XUYÊN 2.7 CÂU HỎI NGHIÊN CỨU ……………………………………………… CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU……………………………… 3.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU……………………………………………… 3.2 PHƢƠNG PHÁP………………………………………………………… 3.3 XỬ LÝ SỐ LIỆU CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN………………………………… 4.1 PHÂN LẬP VI KHUẨN LIÊN KẾT VỚI CÂY LÚA…………………… 4.2 KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨ LIÊN KẾT VỚI CÂY LÚA ………………………………………………………………………… 4.3 KHẢ NĂNG HÒA TAN LÂN CỦA VI KHUẨN LIÊN KẾT VỚI CÂY LÚA…………………………………………………………………………… 4.4 TUYỂN CHỌN VI KHUẨN CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÒA TAN LÂN TỐT………………………………………………………… 4.5 ĐỊNH DANH 04 CHỦNG VI KHUẨN ĐÃ TUYỂN CHỌN ………… CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ………………………………… iv Trang i ii iii vi vii viii 1 2 2 3 5 10 11 11 12 16 17 17 20 22 26 29 34 5.1 KẾT LUẬN……………………………………………………………… 5.2 KIẾN NGHỊ……………………………………………………………… TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC v 34 34 DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 2.1: Thống kê tính chất hóa học tầng mặt (0-20cm) đất phèn vùng Tứ giác Long Xuyên…………………………………………………………… Bảng 4.1 Đặc điểm khuẩn lạc chủng vi khuẩn liên kết với lúa… Bảng 4.2 Đặc điểm tế bào chủng vi khuẩn liên kết với lúa……… Bảng 4.3: Khả cố định đạm, hòa tan lân 08 chủng vi khuẩn liên kết với lúa đƣợc tuyển chọn…………………………………………………… Bảng 4.4: Chỉ số hòa tan lân 08 chủng vi khuẩn đƣợc tuyển chọn sau 20 ngày ủ………………………………………………………………………… Bảng 4.5: Kết định danh chủng vi khuẩn…………………………… Bảng 4.6: Hình thái chủng vi khuẩn định danh……………………… vi 18 18 26 27 29 30 DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1: Sơ đồ dạng lân trao đổi đất…………………………… Hình 4.1: Khuẩn lạc phát triển môi trƣờng Burk, môi trƣờng LGI (a) vịng pellicle xuất mơi trƣờng LGI bán đặc (b)…………………… Hình 4.2: Hình thái khuẩn lạc đƣợc phân lập mơi trƣờng Burk………… Hình 4.3: Hình thái khuẩn lạc đƣợc phân lập môi trƣờng LGI…………… Hình 4.4: Nhuộm gram vi khuẩn Hình 4.5: Tỉ lệ % chủng vi khuẩn vùng rễ có khả cố định đạm cao ngày khảo sát……………………………………………………… Hình 4.6: Tỉ lệ % chủng vi khuẩn nội sinh có khả cố định đạm cao ngày khảo sát……………………………………………………… Hình 4.7: Số dịng vi khuẩn đất vùng rễ tƣơng ứng với khoảng nồng độ đạm đo đƣợc thƣời điểm khảo sát………………………………………… Hình 4.8: Số dòng vi khuẩn nội sinh tƣơng ứng với khoảng nồng độ đạm đo đƣợc thƣời điểm khảo sát…………………………………………… Hình 4.9: Vi khuẩn đƣợc phân lập từ mơi trƣờng Burk môi trƣờng LGI phát triển đƣợc môi trƣờng NBRIP chứa FePO4 pH5………………… Hình 4.10: Tỉ lệ % chủng vi khuẩn nội sinh có khả hòa tan lân cao ngày khảo sát……………………………………………………… Hình 4.11: Tỉ lệ % chủng vi khuẩn nội sinh có khả hịa tan lân cao ngày khảo sát……………………………………………………… Hình 4.12: Số dịng vi khuẩn đất vùng rễ tƣơng ứng với khoảng nồng độ lân đo đƣợc thƣời điểm khảo sát………………………………………… Hình 4.13: Số dòng vi khuẩn nội sinh tƣơng ứng với khoảng nồng độ lân đo đƣợc thƣời điểm khảo sát…………………………………………… Hình 4.14: Hàm lƣợng lân đƣợc hịa tan chủng vi khuẩn mơi trƣờng lân khó tan (FePO4)………………………………………………… Hình 4.15: Kết điện di DNA chủng vi khuẩn đƣợc tuyển chọn… Hình 4.16: Mối quan hệ di truyền chủng vi khuẩn BTB1 (VK1), BTB10 (VK2), BTT2c (VK3) BTT5b (VK4) với chủng vi khuẩn ngân hàng gen………………………………………………………………… vii Trang 17 19 19 20 21 21 22 22 23 24 24 25 25 28 29 33 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT NSC: Ngày sau chủng ĐBSCL: Đồng sông Cửu Long TGLX: Tứ giác Long Xuyên VSV: Vi sinh vật viii CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 TÍNH CẦN THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Hàm lượng đạm khơng khí hình thức N2 xem nguồn đạm vơ tận cho xanh để đưa vào chuỗi, lưới thức ăn Ước tính năm có khoảng 160 – 176 triệu N2 khí cố định chuyển hóa thành dạng đạm khác nhờ vi khuẩn cố định đạm (Hardy & Holsten, 1972; Gi son, 1995 ượng đạm gấp đôi so với lượng phân đạm sản xuất năm toàn th giới mà lại khơng tốn chi phí khơng gây nhi m môi trường Nhiều vi khuẩn vùng r vi khuẩn nội sinh cơng ố có khả cố định đạm Cịn lân, t hút nhiều loại lân lượng hấp thụ cao dạng HPO42- H2PO4- Tuy nhiên, dạng hòa tan đất thường thấp, mức ppm (Goldstein, 1994 Dạng phổ i n lân khơng hịa tan, thường gặp đá dạng apatite, hydroxyapatite, oxyapatite hay dạng k t hợp với sắt, nhơm, mangan Ngồi ra, đất nơng nghiệp cịn chứa lượng lớn lân nguồn gốc từ việc ón phân lân vơ thường xuyên mà trồng không hấp thu h t, sau ị cố k t đất dạng khó tan Nhiều loài vi khuẩn nấm mơ tả khả chuyển hóa lân khó tan thành dạng mà xanh hấp thu Nhiều nghiên cứu cho thấy nhiều loài vi khuẩn đất vùng r vi khuẩn nội sinh vừa có khả cố định đạm, vừa hịa tan lân khó tan, chí phân giải hợp chất chứa kali kaolinite, illite, montmorilonite, v.v ( in Qi-mei cs., 2002; Zhao cs., 2008 Các lồi vi khuẩn ổ sung nguồn dinh dưỡng ản cho mà lại h t sức thân thiện với mơi trường Muốn có ch phẩm phân ón vi sinh tốt, cần phải chọn lọc chủng vi sinh vật có sức cạnh tranh lớn, thích ứng rộng, có khả cung cấp dưỡng chất thi t y u cho trồng; đồng thời sinh tổng hợp chất tăng trưởng thực vật ức ch số vi sinh vật gây ệnh Bên cạnh đó, vi sinh vật phân lập từ trồng vùng đất ản địa đạt trạng thái sinh trưởng tốt nhất, thân thiện với mơi trường có hiệu cao chủng trở lại loại trồng vùng đất Chính vậy, đề tài: “Tuyển chọn vi khuẩn có khả cố định đạm phân giải lân liên kết với lúa cao sản trồng đất phèn tỉnh An Giang” thực nhằm tìm vi khuẩn liên k t với lúa có khả ổ sung cho trồng hai loại nguyên tố ản lân đạm Đây tiền đề cho nghiên cứu ch tạo sản xuất phân ón vi sinh cho trồng S dụng phân ón vi sinh nguồn ổ sung thay th cho phân ón hóa học giải pháp hữu hiệu việc nâng cao chất lượng nơng sản, góp phần ảo vệ mơi trường ti n đ n phát triển nông nghiệp ền vững 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Tuyển chọn số chủng vi khuẩn liên k t với lúa trồng đất phèn tỉnh An Giang có khả cố định đạm hòa tan lân (FePO4 điều kiện pH thấp 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Các chủng vi khuẩn liên k t với lúa có khả cố định đạm pH = 5, có khả hòa tan FePO4 pH = 1.4 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Nội dung 1: Thu thập mẫu dựa sở liệu lúa trồng đất phèn tỉnh An Giang; Phân lập tách ròng chủng vi khuẩn liên k t với lúa có khả cố định đạm, hịa tan lân pH = 5; Nội dung 2: Khảo sát khả cố định đạm pH = 5, hòa tan lân (FePO4 điều kiện pH = chủng vi khuẩn phân lập được; Nội dung 3: Nhận diện, định danh mức độ loài số chủng vi khuẩn có triển vọng 1.5 NHỮNG ĐĨNG GĨP CỦA ĐỀ TÀI Theo áo cáo, vi khuẩn nội sinh có nguồn gốc từ đất, đặc iệt đất vùng r Các nghiên cứu nước phân lập tuyển chọn vi khuẩn nội sinh, phân lập tuyển chọn vi khuẩn vùng r Hướng nghiên cứu k t hợp dị tìm nhận diện hai đối tượng: vi khuẩn vùng r vi khuẩn nội sinh lúa Có thể tồn chủng vi khuẩn mà đất vùng r , chúng góp phần ổ sung dinh dưỡng cho điều kiện thích hợp, chúng xâm nhập phát tán đ n ộ phận chủ, cung cấp cho chủ đặc tính quý khác kích thích sinh trưởng khả đối kháng sinh học, kh độc cho môi trường, v v… Rồi thực vật ch t đi, xác ã chúng phát tán vào mơi trường đem theo vi khuẩn có ích này, đầu chu trình xâm nhi m Đồng ằng sơng C u ong nói chung An Giang nói riêng, diện tích trồng lúa nhiều Việc phân lập, tuyển chọn, nhận diện lưu giữ vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn hòa tan lân đất vùng r nội sinh lúa trồng đất phèn công việc vô có ý nghĩa Nó tiền đề để có ch phẩm phân ón vi sinh tốt cho lúa cao sản màu trồng vùng đất Bảng 4.6: Hình thái chủng vi khuẩn định danh Đặc điểm Burkholderia diffausa (BTB1) Hình thái khuẩn lạc Màu sắc Trắng đục Hình dạng Trịn Dạng ìa Ngun Độ Mơ Đường kính 1,5 Đặc điểm tế bào Hình dạng Que Chuyển động Chuyển động Gram Âm Enterobacter Enterobacter cloacae cloacae (BTB10) (BTT2c) Bacillus subtilis (BTT5b) Vàng nhạt Trịn Ngun Mơ 0,6 Vàng nhạt Trịn Ngun Mơ 0,5 Vàng đậm Trịn Ngun Mơ 1,3 Que Chuyển động Âm Que Chuyển động Âm Que Chuyển động Dương Trình tự đoạn DNA chủng BTB1 Burkholderia diffausa TCCGACCATGTCAAGGGTAGGTAAGGTTTTTCGCGTTGCATCGAATTAAT CCACATCATCCACCGCTTGTGCGGGTCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTTAA TCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGTCAACTTCACGCGTTAGCTACGTTA CTAAGGAAATGAATCCCCAACAACTAGTTGACATCGTTTAGGGCGTGGA CTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGTGCATGAGCGT CAGTATTGGCCCAGGGGGCTGCCTTCGCCATCGGTATTCCTCCACATCTC TACGCATTTCACTGCTACACGTGGAATTCTACCCCCCTCTGCCATACTCTA GCCTGCCAGTCACCAATGCAGTTCCCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACAT CGGTCTTAGCAAACCGCCTGCGCACGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTA ACGCTTGCACCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGGT GCTTATTCTTCCGGTACCGTCATCCCCCGGCCATATTAGGACCAAGGATT TCTTTCCGGACAAAAGTGCTTTACAACCCGAAGGCCTTCTTCACACACGC GGCATTGCTGGATCAGGCTTTCGCCCATTGTCCAAAATTCCCCACTGCTG CCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCTGGTCGTC CTCTCAGACCAGCTACTGATCGTCGCCTTGGTAGGCCTTTACCCCACCAA CTAGCTAATCAGCCATCGGCCAACCCTATAGCGCGAGGCCCGAAGGTCC CCCGCTTTCATCCGTAGATCGTATGCGGTATTAATCCGGCTTTCGCCGGG CTATCCCCCACTACAGGACATGTTCCGATGTATTACTCACCCGTTCGCCA CTCGCCACCAGGTGCAAGCACCCGTGCTGCCGTTCGACTTGCATGTGTAA GGCATGCCGCCAGC Trình tự đoạn DNA chủng BTB10 Enterobacter cloacae ATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGCAGGCGGTCTGTCAAGTCGGA TGTGAAATCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATTCGAAACTGGCAGGCT GGAGTCTTGTAGAGGGGGGTAGAATTCCAGGTGTAGCGGTGAAATGCGT AGAGATCTGGAGGAATACCGGTGGCGAAGGCGGCCCCCTGGACAAAGAC TGACGCTCAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTG 30 GTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGATTTGGAGGTTGTGCCCTTGAGGCG TGGCTTCCGGAGCTAACGCGTTAAATCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCG CAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAG CATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGTCTTGACAT CCACAGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTGCCTTCGGGAACTGTGAGACA GGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTC CCGCAACGAGCGCAACCCTTATCCTTTGTTGCCAGCGGTTAGGCCGGGAA CTCAAAGGAGACTGCCAGTGATAAACTGGAGGAAGGTGGGGATGACGTC AAGTCATCATGGCCCTTACGACCAGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGC ATACAAAGAGAAGCGACCTCGCGAGAGCAAGCGGACCTCATAAAGTGCG TCGTAGTCCGGATTGGAGTCTGCAACTCGACTCCATGAAGTCGGAATCGC TAGTAATCGTAGATCAGAATGCTACGGTGAATACGTTCCC Trình tự đoạn DNA chủng BTT2c Enterobacter cloacae ATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGCAGGCGGTCTGTCAAGTCGGA TGTGAAATCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATTCGAAACTGGCAGGCT AGAGTCTTGTAGAGGGGGGTAGAATTCCAGGTGTAGCGGTGAAATGCGT AGAGATCTGGAGGAATACCGGTGGCGAAGGCGGCCCCCTGGACAAAGAC TGACGCTCAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTG GTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGACTTGGAGGTTGTGCCCTTGAGGCG TGGCTTCCGGAGCTAACGCGTTAAGTCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCG CAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAG CATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACAT CCAGAGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTGCCTTCGGGAACTCTGAGACA GGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTC CCGCAACGAGCGCAACCCTTATCCTTTGTTGCCAGCGGTTAGGCCGGGAA CTCAAAGGAGACTGCCAGTGATAAACTGGAGGAAGGTGGGGATGACGTC AAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGC ATACAAAGAGAAGCGACCTCGCGAGAGCAAGCGGACCTCATAAAGTGCG TCGTAGTCCGGAT Trình tự đoạn DNA chủng BTT5b Bacillus subtilis GGGGAAATCCCGGGAAACCGGGGGTTAATCCCGGATGGTTTTTTGAACC CCATGGGTTAAAACTTAAAAGGGGGTTTTGGGTACCAATTACAGATGGA CCCGGGGCGCATTAGCTAGTTGGGGAGGTAACGGCTCACCAAGGCAACG ATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACAC GGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGAC GAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCG TAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTACCGTTCGAATAGGGCGGTA CCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGC CGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAA GGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACC GGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGT 31 GGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCA GTGGCGAAGGCGACTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGC GTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGA TGAGTGCTAAGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGC ATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCAAAGG AATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAG CAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAATCCTAGAGA TAGGACGTCCCCTTCGGGGGCAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTC AGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTT GATCTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGA CAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGA CCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACAGAACAAAGGGCAGCGAAACC GCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCTCAGTTCGGATCGCAGTCT GCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAT GCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACAACAC GAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGAGGTAACCTTTTAGGAGCCAGC CGCCAAAGGTGGGACAGATGATTGGGGTGAAGTC Phân tích mối quan hệ di truyền thông qua phả hệ chủng vi khuẩn vùng r lựa chọn cho thấy, chúng phân ố nhánh A (Hnh 4.15 Nhánh A chia thành nhánh A1 A2 Nhánh A1 gồm nhánh A11 A12, nhánh A11 chủng vi khuẩn (BTB1 phân lập từ đất vùng r trồng lúa Tịnh Biên, chủng vi khuẩn có mối quan hệ di truyền với lồi Burkholderia diffausa; nhánh A12 chủng vi khuẩn (BTT5 phân lập từ đất vùng r trồng lúa Tri Tôn, chủng vi khuẩn có mối quan hệ di truyền với loài Bacillus subtilis Nhánh A2 gồm nhánh A21 A22, nhánh A21 chủng vi khuẩn (BTT2c phân lập từ đất vùng r trồng lúa Tri Tôn, chủng vi khuẩn có mối quan hệ di truyền với loài Enterobacter cloacae; nhánh A22 chủng vi khuẩn (BTB10 phân lập từ đất vùng r trồng lúa Tịnh Biên, chủng vi khuẩn có mối quan hệ di truyền với loài Enterobacter cloacae Jha et al (2011 nhận thấy chi Enterobacter; Kumar cs (2011 nghiên cứu chi Bacillus; chi Burkholderia, Ghosh cs (2016 họ k t luận chi có khả hịa tan lân 32 Hình 4.16: Mối quan hệ di truyền chủng vi khuẩn BTB1 (VK1), BTB10 (VK2), BTT2c (VK3) BTT5b (VK4) với chủng vi khuẩn ngân hàng gen 33 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Sáu mươi mốt chủng vi khuẩn liên k t với lúa phân lập t r n g đất phèn trồng lúa huyên Tri Tôn huyện Tịnh Biên - tỉnh An Giang Đa số khuẩn lạc có màu trắng đục màu vàng nhạt, vi khuẩn có dạng hình que có khả di động Tất chủng vi khuẩn có khả tổng hợp ammonium dao động từ 0,18 - 4,87 mg NH4+/L, hịa tan lân khó tan lân dao động 11,66 - 30,97 mg P2O5/L ượng đạm vi khuẩn cố định lượng lân vi khuẩn hòa tan thấp so với nghiên cứu vi khuẩn liên k t với lúa Bởi 61 dịng vi khuẩn tuyển chọn mơi trường Burk pH = môi trường NBRIP pH = với loại lân khó tan FePO4 Trong nghiên cứu khác tuyển chọn vi khuẩn môi trường Burk pH = 5,5 môi trường NBRIP pH = 7,0 với loại lân d tan Ca3(PO4)2 ượng đạm cố định cao đo chủng vi khuẩn khảo sát có xu hướng tập trung vào ngày sau chủng Các chủng vi khuẩn có khả hịa tan lân FePO4 ngày thứ sau chủng mà khả hòa tan lân tập trung ngày sau Trong 61 chủng vi khuẩn phân lập, tuyển chọn bốn chủng vi khuẩn phân lập vùng r lúa đất phèn Tri Tôn Tịnh Biên Bốn chủng có khả cố định đạm chúng tạo vòng phân giải lân chủng vào đĩa môi trường chứa FePO4 Chủng vi khuẩn BTB1 BTB10 hòa tan FePO4 phụ thuộc vào tăng giảm pH mơi trường ni cấy Cịn pH khơng ảnh hưởng đ n lượng lân hịa tan chủng vi khuẩn BTT2c BTT5b Cả chủng vi khuẩn (BTB1 BTB10 phân lập từ vùng r lúa đất phèn Tịnh Biên; BTT2c BTT5b phân lập từ vùng r lúa đất phèn Tri Tơn) có khả cố định đạm dao động từ 1,30 đ n 4,87 mg NH4+/L; có khả hòa tan FePO4 dao động từ 19,57 đ n 36,57 mgP2O5/L Chủng vi khuẩn BTB1 có mối quan hệ gần với lồi Burkholderia diffausa, chủng BTB10 có mối quan hệ gần với lồi Enterobacter cloacae, chủng BTT2c có mối quan hệ gần với loài Enterobacter cloacae chủng BTT5b có mối quan hệ gần với lồi Bacillus subtilis 5.2 KIẾN NGHỊ Đánh giá khả hòa tan lân dạng AlPO4 04 chủng vi khuẩn Cần xác định khả cố định đạm, hịa tan lân khó tan 04 chủng vi khuẩn nêu đất phèn trồng lúa điều kiện nhà lưới đồng 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Berg, H.R., Max, E.T., Norman, J.N., Vimla, V., and Indra, K.V (1980) Biology of Azospirillum-Sugarcane Association: Enhancement of Nitrogenase Activity Appy Environ Microbiol, 39, 642-649 Berraquero, F.R., Baya, A.M., Cormenzana, A.R., 1976 Establishment of indices for the study of phosphate solubilization by soil bacteria Ars Pharmacéutica, 17, 399-406 Cao Ngọc Điệp, Phạm Thị Khánh Vân, ăng Ngọc Dậu (2007) Phát vi khuẩn Azospirillum lipoferum nội sinh lúa mùa cao sản (Oryza sativa L.) trồng đồng sông Cửu Long Tuyển tập áo cáo Khoa học Hội nghị toàn quốc 2007 Nghiên cứu ản khoa học sống Quy Nhơn: Nhà xuất ản Khoa học Kỹ thuật Cao Ngọc Điệp (2011) Vi khuẩn nội sinh thực vật Nhà xuất ản Đại học Cần Thơ Dương Thị Nguy n Quyên, Nguy n Đức Độ Phạm Văn Kim, 2009 Tìm môi trường nhân nuôi tồn trữ vi khuẩn Burkholderia cepacia TG17 Tạp chí khoa học trường Đại học Cần Thơ, 9, 79-186 Cavalcante, V.A and Dobereiner, J (1988) A new acid-tolerant nitrogen-fixing bacterium associated with sugarcane Plan and soil, 108, 23-31 De Freitas, J.R., M.R Banerjee and J.J Germida (1997) Phosphate-solubilizing rhizobacteria enhance the growth and yield but not phosphorus uptake of canola (Brassica napus L.) Biol Fertil Soils, 24, 358-364 Elbeltagy, A., Nishioka, K., Sato, T., Suzuki, H., Ye, B., Hamada, T., Isawa, T., Mitsui, H., and Minamisawa, K (2001) Endophytic colonization and in planta nitrogen fixation by a Herbaspirillum sp isolation from wide rice species Appl Environ Microbiol, 67, 5285-5293 Elmerich, C (2007) Historical perspective: From bacterization to endophytes In: Associative and endophytic nitrogen-fixing bacteria and cyanobacteria associations C Elmerich (Editor) and W E Newton The Netherland: Springer, 1-20 Gibson, A (1995) Training worshop maual on Rhizobium tecniques, Guangdong – China International Workshop on Rhizobium Techniques Ghosh, R., Barman, S., Mukherjee, R., Mandal, N.C (2016) Role of phosphate solubilizing Burkholderia spp for successful colonization and growth promotion of Lycopodium cernuum L (Lycopodiaceae) in lateritic belt of Birbhum district of West Bengal, India Microbiological Research, 183, 80-91 Glick B R (1995) The enhancemend of plant growth by free living bacteria Can J Microbiol, 41, 109-117 Goldstein, A.H (1994) Involvement of the quinoprotein glucose dehydrogenase in the solubilization of exogenous phosphate by gram-negative bacteria In: A.Torriani-Gorini, E Yagil, S Silver (Editors) Phosphate in Microorganisms: Cellular and Molecular Biology ASM Washington D.C 35 Hardy, R W F and R D Holsten (1972) Symbiotic fixation of atmospheric nitrogen, U.S Patent, 3, 704-546 Henri F., Laurette NN., Annette D., John Q., Wolfgang M., Francois-Xavier M., Dieudonne N (2008) Solubilization of inorganic phosphates and plant growth promotion by strains of Pseudomonas fluorescens isolated from acidic soils of Cameroon Afr J Microbiol,2, 171-178 Jha Y, Subramanian RB, Patel S., 2011 Combination of endophytic and rhizospheric plant growth promoting rhizobacteria in Oryza sativa shows higher accumulation of osmoprotectant against saline stress Acta Physiol Plant, 33,797–802 Kennedy, A.C., (1999) Bacterial Diversity in Agro-ecosystems Agriculture, Ecosystems and Environment, 74, 65-76 Kumar A, Parkash A and Johri B.N (2011) Bacillus as PGPR in Crop Ecosystem In: Bacteria in Agrobiology: Crop Ecosystems, D K., Maheshwari Chapter 2, 37-59 ăng Ngọc Dậu, Nguy n Thị Xuân Mỵ Cao Ngọc Điệp (2007) Khả cố định đạm, hòa tan lân sinh tổng hợp IAA vi khuẩn Azospirillum lipoferum Tuyển tập áo cáo Khoa học Hội nghị toàn quốc 2007 Tuyển tập áo cáo Khoa học Hội nghị toàn quốc 2007 Nghiên cứu ản khoa học sống Quy Nhơn: Nhà xuất ản Khoa học Kỹ thuật Lin, T F., H Huang, F T Shen, and C C Young (2006) The protons of gluconic acid are the major factor responsible for the dissolution of tricalcium phosphate by Burkholderia cepacia CC-A174 Bioresource Technology, 97, 957 - 960 Loganathan, P and Nair, S (2003) Crop-speific endophytic colonization by a novel, salt-tolerant, N2-fixing and phosphate-solubilizing Gluconacetobacter sp from wild rice Biotechnology Letter, 25, 497-501 Madhaiyan, M., Saravannan, V.S., Jovi, D.S., Lee, H., Thenmozhi, R., Hari, K., and Sa, T (2004) Occurrence of Gluconacetobacter diazotrophicus in tropical and subtroical plants of Western Ghats, India Microbiological research, 159, 233243 Muthukumarasamy, R., Revathi, G., Seshadri, S and Laskshminarsimhan, C (2002) Gluconacetobacter diazotrophicus (Syn Acetobacter diazotrophicus), a promising diazotrophic endophyte intropics Curr Sci, 83, 137-145 Ngơ Ngọc Hưng (2009 Tính chất tự nhiên & tiến trình làm thay đổi độ phì nhiêu đất đồng sông Cửu Long Nhà xuất ản Nông nghiệp Nguy n ân Dũng, Nguy n Đình Quy n, Phạm Văn Ty (2007) Vi sinh vật học Nhà xuất ản Giáo Dục Trang 320-354 Nguy n Thị Pha, 2014 Đa dạng di truyền tập đoàn vi khuẩn cố định nitơ đất vùng r lúa Đồng ằng sông C u ong tuyển chọn số dịng có khả cố định đạm cao cho canh tác lúa uận án Ti n sĩ Vi sinh vật học, trường Đại học Cần Thơ, Cần Thơ Nguy n Thị Thu Hà, Hà Thanh Toàn Cao Ngọc Điệp (2009) Phân lập đặc tính vi khuẩn nội sinh số loại cỏ chăn ni Tạp chí Cơng nghệ sinh học, 7(2), 241-250 36 Ohtake H., Wu H., Imazu K., Anbe Y., Kato J., Kuroda A (1996) Bacterial phosphonate degradation, phosphite oxidation and polyphosphate accumulation Conserv Recycl 18, 125–134 Perin, L., L Martínez-Aguilar, R Castro-González, P Estrada-de los Santos, T Cabellos-Avelar, H.V Guedes, V.M Reis, and J Caballero-Mellado (2006) Diazotrophic Burkholderia species associated with field-grown maize and sugarcane Applied and Environmental Microbiology, 72, 3103-3110 Prescott, L., J Harley and D.A Klein (1999) Microbiology Boston: Mc-GrawHill England Roos, L.M.M., and Hattingh M.J (1983) Scanning electron microscopy of Pseudomonas syringae pv morsprunorum on sweet cherry leaves Phytopathol Z, 108, 18-25 Santos, LR, V.P Nascimento, S.D Oliveira, M.L Flores, A.P Pontes, A.R Ribeiro, C.T.P Salle and R.F.F Lopes (2001) Polymerase Chain Reaction (PCR) for the detection of Salmonella in artificially inoculated chicken meat Rev Inst Med Trop Sao Paulo, 43, 247-250 Seshadri S., Ignacimuthu S., Lakshminarsimhan C (2002) Variations in heterotrophic and phosphate solubilizing bacteria from Chennai, southeast coast of India Indian J Mar Sci, 31, 69-72 Sperber J I (1958) The incidence of apatite-solubilizing orgamisms in the rhizophere and soil Aust J Agric, 9, 778-781 Sturz, A.V., Christie, B.R., and Nowak, J (2000) Bacterial endophytes: potential role in developing sustainable systems of crop production Critical Reviews in Plant Science, 19, 1-30 Turner, S., K.M Pryer, V.P.W Miao and J.D Palmer (1999) Investigating deep phylogenetic relationships among cyanobacteria and plastids by small subunit rRNA sequence analysis Journal of Eukaryotic Microbiology, 46, 327-338 Văn Thị Phương Như (2015) Phân lập khảo sát đặc tính vi khuẩn nội sinh lúa trồng đất tỉnh Phú Yên Luận án Ti n sĩ Vi sinh vật học, trường Đại học Cần Thơ, Cần Thơ Verma, S.C., Ladha, J.K and Tripathi, A.K (2001) Evaluation of plant growth promoting and colonization ability of endophytic diazotrophs from deep-water rice J Biotechnol, 91, 127-141 Weber, O.B., D L V Baldani, S R K Teixeira, G Kirchof, I J Baldani and J Dobereiner (1999) Isolation and characterization of bacteria from banana and pineapple plants Plant and Soil, 210, 103-113 Zhao, F., X Sheng, Z Huang and L He (2008) Isolation of mineral potassium solublizing bacteria strains from agricultural soils in Shandong Province Biodeversity Science, 16(6), 593-600 Zinniel, D.K , P Lambrecht, N.B Harris, Z Feng, D Kuczmarski, P Higley, C.A Ishimaru, A Arunakumari, R.G Barletta and A.K Vidaver (2002) Isolation and charcaterization of endophytic bacteria from agronomic crops and prairie plants Applied and Environmental Microbiology, 68, 2198-2208 37 PHỤ LỤC Phụ lục 1.1 Công thức môi trường nuôi cấy vi khuẩn Tên môi trường Hóa chất Glucose Mơi trường NBRIP cải tiến (pH 5) MgCl2.6H2O MgSO4.7H2O 0,2 (NH4)2SO4 0,1 (pH 5) 20 (đặc) 10 FePO4 MgCl2.6H2O MgSO4.7H2O 0,25 KCl 0,2 (NH4)2SO4 0,1 Agar Môi trường LGI 0,25 KCl Glucose (pH 5) 10 FePO4 Agar Môi trường NBRIP cải tiến Nồng độ (g/l) 00 (lỏng) Sucrose 10 KH2PO4 0,6 K2HPO4 0,2 MgSO4.7H2O 0,2 CaCl2 0,02 FeCl3 0,01 Na2MoO4.2H2O Bromothmol blue 0.5% KOH 0,2N Agar 0,002 ml 20 (đặc) Môi trường LGI (pH 5) Sucrose 10 KH2PO4 0,6 K2HPO4 0,2 MgSO4.7H2O 0,2 CaCl2 0,02 FeCl3 0,01 Na2MoO4.2H2O Bromothmol blue 0.5% KOH 0,2N Agar Môi trường Burk (pH5) 20 (bán đặc) 10 KH2PO4 0,41 K2HPO4 0,52 Na2SO4 0,05 CaCl2 0,2 MgSO4.7H2O 0,1 Na2MoO4.2H2O Agar (pH5) ml Sucrose FeSO4.7H2O Môi trường Burk 0,002 0,005 0,0025 20 (đặc) Sucrose 10 KH2PO4 0,41 K2HPO4 0,52 Na2SO4 0,05 CaCl2 0,2 MgSO4.7H2O 0,1 FeSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O Agar 0,005 0,0025 00 (lỏng) Môi trường TYGA Trypton Yeast extract Glucose Agar 15 1.2 Hóa chất dùng thí nghiệm định lượng đạm 1.2.1 Phenol C5H5OH – Nitroprusside Na2Fe(CN)5NO(2H2O) Hòa tan gram phenol 0,025 gram nitroprusside nước cất cho đủ thể tích 500 ml 1.2.2 Sodium hypochloride Hịa tan 100/Cml dung dịch sodium hypochloride 15 gram NaOH nước cất cho đủ thể tích lít (C: nồng độ chlorine dung dịch sodium hypochloride) 1.2.3 Dung dịch chuẩn NH4+ (1 mg/l) 1.3 Hóa chất dùng thí nghiệm định lượng lân 1.3.1 Dung dịch A (1) 12 gram (NH4)6MoO24.4H2O (amonium molybdate) + 250 ml H2O (2) 02908 gram KsbOC4H2O6 (potassium antimonyl tartrate) + 100 ml H2O (3) Đong 140 ml H2SO4 đậm đặc thêm H2O vào từ từ cho đủ lít (4) Cho (1) (2) vào (3) sau thêm H2O vào cho đủ lít 1.3.2 Dung dịch B 1,05 gram acid ascorbic + 200 ml dung dịch A Phụ lục 2.1 Khả cố định đạm 36 chủng vi khuẩn đất vùng rễ lúa ĐVT: mgNH4+/L môi trường Burk STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 Chủng vi khuẩn BBT15a BTT9 BBT3b BBT16 BTT20b-B BBT10 BTT9B BTT10B BTT5B BTT2C-B BTT2B BTT1 BTT8B BTT16a-B BBT7 BTT2A BBT20b BTT13A BTT12aB BTT19b-B BBT19a BTT3a BTT6b-B BBT3a BTT12b-B BBT19b BBT8B BTT15 BTT17B BBT4B BTT18B BTT19a-B BBT12b BBT1 BBT18a-B BBT5 Ngày 2.38 1.26 1.17 1.09 0.59 0.52 1.16 0.73 1.07 0.04 0.46 0.43 0.73 0.67 0.70 1.34 1.06 0.45 0.99 0.01 1.54 1.08 0.67 1.59 0.52 0.31 0.21 0.10 0.16 0.89 0.20 0.67 0.11 0.11 0.15 0.04 Ngày 2.93 3.59 2.15 2.05 2.95 0.91 0.49 4.19 2.26 2.76 1.92 1.95 0.53 1.06 1.12 2.27 1.76 1.06 0.54 0.52 0.73 0.32 1.40 0.91 0.51 1.58 0.99 0.75 0.61 0.63 0.73 0.17 0.72 0.34 0.73 0.48 Ngày 1.26 1.87 1.74 1.84 1.91 0.89 0.34 0.08 1.72 2.02 2.30 2.26 1.89 2.37 2.19 0.28 0.84 0.39 1.80 1.70 0.45 1.27 0.69 0.13 1.16 0.36 0.51 0.91 0.62 0.12 0.22 0.50 0.52 0.37 0.39 0.15 Ngày 2.66 2.48 2.24 2.23 1.60 3.35 3.61 0.58 0.43 0.36 0.22 0.22 1.55 0.53 0.59 0.37 0.59 2.05 0.42 1.16 0.64 0.29 0.11 0.15 0.49 0.26 0.75 0.41 0.67 0.26 0.50 0.21 0.10 0.61 0.13 0.04 Trung bình 2.31 2.30 1.83 1.80 1.76 1.42 1.40 1.39 1.37 1.30 1.22 1.21 1.17 1.16 1.15 1.07 1.06 0.99 0.94 0.85 0.84 0.74 0.72 0.70 0.67 0.63 0.62 0.54 0.51 0.48 0.41 0.39 0.36 0.36 0.35 0.18 2.2 Khả cố định đạm 25 chủng vi khuẩn nội sinh lúa ĐVT: mgNH4+/L môi trường Burk STT LTR7 LBT10A Ngày 2.71 2.28 0.03 2.96 1.73 Ngày 12.02 12.02 0.76 2.28 3.91 Ngày 3.97 3.14 12.37 2.26 1.29 Ngày 0.79 0.85 0.33 0.16 0.45 Trung bình 4.87 4.57 3.37 1.92 1.84 LTR12A 2.74 2.06 0.89 1.63 1.83 LBT12B 0.19 3.10 2.58 0.68 1.64 LTR11A 0.16 3.60 2.14 0.23 1.53 LTR14A 1.98 1.22 2.10 0.68 1.50 10 LBT14A1 2.55 1.18 0.68 1.51 1.48 11 LBT19B 1.70 2.33 0.88 0.99 1.48 12 LTR18B2 0.59 0.46 3.46 0.73 1.31 13 LBT18 LTR10A LTT20A1-3 LTT10-1 LTT11A1 LBT5a LTR12A LTR12C2 LTT9B2 LTR10C LTT19B LBT6D LTT11A2 2.01 0.43 1.58 1.07 1.27 1.19 0.99 0.45 1.82 0.10 1.04 0.53 0.23 0.25 0.07 0.09 0.75 3.09 1.26 1.50 1.16 2.55 1.02 1.24 0.18 1.54 0.72 1.05 0.30 0.25 0.86 1.51 0.71 0.07 0.33 0.35 1.75 0.42 0.84 0.35 0.12 0.31 1.65 0.42 0.06 0.19 0.39 0.65 0.39 0.05 0.22 0.14 0.24 1.21 1.19 0.97 0.94 0.73 0.69 0.69 0.64 0.56 0.46 0.41 0.35 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Chủng vi khuẩn LTT2b LTT3a LTB3a 2.3 Khả hòa tan lân (FePO4) pH 36 chủng vi khuẩn đất vùng rễ lúa ĐVT: mgP2O5/L môi trường NPRIP STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 Chủng vi khuẩn BTB10 BTT2c BTT5b BTT6b-B BBT18a-B BBT4B BTT18B BTT2C-B BTT2A BTT19b-B BTT17B BTT13A BBT19a BTT19a-B BBT5 BTT20b-B BTT5B BTT3a BTT8B BTT15 BBT1 BTT12aB BBT19b BTT9B BTT10B BBT8B BTT16a-B BBT10 BTT2B BTT9 BBT12b BBT15a BBT3a BTT12b-B BBT20b BBT3b Ngày 23.30 19.57 20.20 25.89 22.85 14.76 22.77 23.13 14.55 22.45 17.59 14.30 14.14 14.07 14.18 14.90 14.87 14.30 14.93 15.07 14.84 14.37 14.94 14.66 14.72 14.58 14.61 14.75 14.49 14.44 14.55 14.09 14.58 13.96 14.34 14.30 Ngày 10 29.62 25.72 25.75 22.51 18.09 15.60 17.96 15.06 15.95 16.42 17.11 16.28 16.11 15.96 15.81 17.79 14.35 16.39 15.62 14.87 15.34 14.69 15.34 16.02 15.80 15.53 17.52 14.77 14.18 15.01 15.00 15.49 15.09 14.86 13.63 13.49 Ngày 15 36.14 33.42 33.11 27.03 35.63 42.64 34.41 31.43 37.39 30.30 32.15 35.38 35.43 34.74 32.64 31.95 33.44 34.36 33.17 34.44 31.37 33.03 31.87 30.68 32.73 31.98 29.44 31.48 31.76 32.04 30.49 29.33 28.47 28.75 27.23 26.13 Ngày 20 34.80 36.97 34.59 30.48 18.66 18.78 16.36 15.38 16.58 15.12 17.16 17.65 17.03 16.83 18.79 16.72 18.35 15.93 17.01 16.02 18.31 17.54 17.40 18.14 16.18 17.21 17.59 17.08 17.44 15.85 17.05 16.25 16.35 15.16 16.69 17.43 Trung bình 30.97 28.92 28.41 26.48 23.80 22.95 22.88 21.25 21.12 21.07 21.00 20.90 20.68 20.40 20.36 20.34 20.25 20.24 20.18 20.10 19.97 19.91 19.89 19.88 19.86 19.83 19.79 19.52 19.47 19.33 19.27 18.79 18.62 18.18 17.97 17.83 2.4 Khả hòa tan lân (FePO4) pH 25 chủng vi khuẩn nội sinh lúa ĐVT: mgP2O5/L môi trường NPRIP STT Chủng vi khuẩn LTT20A1-3 LTT19B LTT11A2 LTR7 Ngày 6.06 15.05 11.27 7.29 Ngày 10 16.67 16.07 16.50 18.79 Ngày 15 32.20 10.01 10.29 10.80 Ngày 20 17.85 16.20 16.92 17.79 Trung bình 18.20 14.33 13.74 13.67 LTT11A1 9.57 17.32 9.68 17.65 13.55 LBT10A 9.89 16.03 10.27 17.83 13.50 LBT6D 8.55 15.78 11.90 17.09 13.33 LTR11A LTT2B LTR12B2 LTR14A LTT3a LTB3a LBT14A1 LTT10-1 LTR10C LTR10A LTR12A LTR12C2 LTT9B2 LBT12B LBT19B LBT18 LBT5a LTR18B2 11.90 17.08 8.28 15.96 13.31 8.96 7.02 8.48 8.29 9.69 8.85 7.21 6.92 6.68 7.86 7.24 7.32 7.75 6.60 6.42 7.42 7.94 16.46 17.43 17.70 17.36 15.53 17.00 17.26 16.24 17.00 15.96 16.56 16.94 15.88 13.92 15.02 17.50 15.42 9.45 10.38 9.05 10.18 11.57 9.73 9.60 10.69 9.20 10.29 9.71 9.67 8.92 9.46 9.80 9.48 8.13 18.03 17.92 17.16 16.54 15.56 15.82 17.41 16.87 17.67 16.43 16.98 15.62 16.43 18.72 16.72 12.42 15.13 13.23 13.19 13.10 13.09 13.09 12.87 12.87 12.68 12.64 12.63 12.62 12.39 12.24 12.18 11.99 11.70 11.66 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 ... ĐỊNH ĐẠM VÀ HỊA TAN LÂN TỐT Sau khảo sát khả cố định đạm khả hòa tan lân 61 chủng vi khuẩn liên k t với lúa, chọn lựa 04 chủng vi khuẩn có khả cố định đạm 04 chủng vi khuẩn có khả hịa tan lân cao. .. thiện với mơi trường có hiệu cao chủng trở lại loại trồng vùng đất Chính vậy, đề tài: ? ?Tuyển chọn vi khuẩn có khả cố định đạm phân giải lân liên kết với lúa cao sản trồng đất phèn tỉnh An Giang? ??... k t với lúa trồng đất phèn tỉnh An Giang có khả cố định đạm hòa tan lân (FePO4 điều kiện pH thấp 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Các chủng vi khuẩn liên k t với lúa có khả cố định đạm pH = 5, có khả