Nghiên cứu quy trình tách chiết và tính chất của anthocyanin từ gạo đen hữu cơ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH Khoa Cơng nghệ Sinh học – Thực phẩm – Môi trường ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT VÀ TÍNH CHẤT CỦA ANTHOCYANIN TỪ GẠO ĐEN HỮU CƠ Ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Giảng viên hướng dẫn: TS Nguyễn Lệ Hà Sinh viên thực hiện: Đinh Thị Kiều My MSSV: 1211110099 Lớp: 12DTP01 TP Hồ Chí Minh, 2016 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà LỜI CAM ĐOAN Là sinh viên năm năm cuối Trường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh, vinh dự làm đồ án tốt nghiệp để hồn tất chương trình học Tơi cam đoan nghiên cứu tiến hành phịng thí nghiệm Khoa Cơng nghệ Sinh học-Thực phẩm-Mơi trường, Trường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh Những số liệu hoàn toàn trung thực chưa có cơng bố Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2016 Sinh viên thực Đinh Thị Kiều My Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà LỜI CẢM ƠN Tận đáy lòng xin gửi vạn lời cảm ơn đến cha mẹ, cha mẹ người cực khổ nuôi nấng, dạy dỗ thành người Cha mẹ người dạy bước đi, người thầy giáo dạy biết chữ, dạy vấp ngã phải biết đứng lên kinh nghiệm quý báu sống Cha mẹ dõi theo bước đường đời, cho dù đâu làm ln biết cha mẹ ủng hộ cho con, chỗ dựa vững cho Với lòng biết ơn sâu sắc Em xin chân thành cảm ơn toàn thể quý Thầy Cơ Khoa Cơng nghệ sinh học-Thực phẩm-Mơi trường, tồn thể Thầy Cô Trường Đại học Công nghệ TP Hồ Chí Minh nhiệt tình giảng dạy truyền đạt cho em kiến thức quý báo sở ngành chuyên ngành từ ngày em bước chân vào giảng đường đại học Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn TS.Nguyễn Lệ Hà, người thầy đáng kính, ln tận tình dẫn, hỗ trợ tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành phần thực nghiệm đồ án Em xin chân thành cảm ơn thầy Huỳnh Văn Thành thầy Nguyễn Trung Dũng tạo điều kiện thuận lợi cho em thực đồ án phịng thí nghiệm Khoa Cơng nghệ sinh học-Thực phẩm-Môi trường, Trường Đại học Công nghệ TP Hồ Chí Minh Cảm ơn tất bạn lớp 12DTP01 ln khích lệ, động viên giúp đỡ suốt trình học tập trường trình làm đồ án tốt nghiệp Xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2016 SVTH: Đinh Thị Kiều My Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà MỤC LỤC TRANG DANH MỤC HÌNH iv DANH MỤC BẢNG vii MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN .4 Gạo đen .4 1.1.1 Khái niệm .4 1.1.2 Nguồn gốc gạo đen hữu 1.1.3 Công dụng gạo đen hữu 1.2 Anthocyanin 1.2.1 Giới thiệu 1.2.2 Sự phân bố Anthocyanin .7 1.2.3 Cấu trúc hóa học Anthocyanin 1.2.4 Tính chất Anthocyanin .12 1.2.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến màu sắc độ bền Anthocyanin .14 1.2.5.1 Cấu trúc 14 1.2.5.2 pH 18 1.2.5.3 Nhiệt độ 20 1.2.5.4 Oxy 22 1.2.5.5 Enzyme 22 1.2.5.6 Ánh sáng 23 1.2.5.7 Đường sản phẩm biến tính chúng .24 i Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 1.2.5.8 Các ion kim loại 25 1.2.5.9 Sulfurdioxide (SO2) .26 1.2.5.10 Acid ascorbic 26 1.2.6 Các Anthocyanin thương mại hóa .29 1.3 Những kết nghiên cứu nước giới 29 1.3.1 Phương pháp tách chiết Anthocyanin từ gạo .29 1.3.2 Phương pháp trích ly Anthocyanin từ dâu Hội An 30 1.3.3 Phương pháp tách triết Anthocyanin từ bắp cải tím 31 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 32 2.1 Nguyên vật liệu 32 2.1.1 Nguồn gạo đen 32 2.1.2 Một số hóa chất sử dụng nghiên cứu 32 2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 33 2.2.1 Xác định thông số cho trình trích ly Anthocyanin từ gạo đen 33 2.2.1.1 Xác định tỷ lệ dung mơi Nước-EtOH q trình trích ly .35 2.2.1.2 Xác định tỷ lệ nguyên liệu dịch trích ly 36 2.2.1.3 Xác định nhiệt độ thích hợp để trích ly Anthocyanin từ gạo đen 38 2.1.2.4 Xác định thời gian thích hợp trích ly Anthocyanin từ gạo đen .39 2.2.2 Khảo sát số tính chất Anthocyanin dịch trích ly từ gạo đen 40 2.2.2.1 Sự biến đổi hàm lượng Anthocyanin pH khác 40 2.2.2.2 Sự ảnh hưởng nhiệt độ đến độ bền Anthocyanin nhiệt độ khác 42 2.2.2.3 Xác định hoạt tính kháng oxy hóa dịch trích ly gạo đen trước quay sau cô quay 43 ii Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 2.3 Các phương pháp phân tích dùng thí nghiệm 43 2.4 Phương pháp xử lý số liệu .43 CHƯƠNG :KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 Xác định thơng số cho quy trình trích ly Anthocyanin từ gạo đen 44 3.1.1 Xác định tỷ lệ dung môi nước: ethanol pha chế dung môi trích ly Anthocyanin từ gạo đen 44 3.1.2 Xác định tỷ lệ nguyên liệu dung môi trình trích ly anthocyanin từ gạo đen 46 3.1.3 Xác định nhiệt độ thích hợp cho q trình trích ly Anthocyanin từ gạo đen .47 3.2 Khảo sát số tính chất Anthocyanin dịch trích ly gạo đen 53 3.3.1 Sự biến đổi hàm lượng anthocyanin pH khác 53 3.3.2 Sự ảnh hưởng nhiệt độ đến độ bền Anthocyanin nhiệt độ khác 54 3.3.3 Hoạt tính kháng oxy hóa dịch trích ly từ gạo đen 58 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN- KIẾN NGHỊ 63 4.1 Kết luận 63 4.2 Kiến nghị .66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 PHỤ LỤC B SỐ LIỆU THÍ NGHIỆM iii Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Gạo đen Hình 1.2 Cấu trúc phổ biến Anthocyanin 11 Hình 1.3 Cation Flavylium .12 Hình 1.4 Sơ đồ cấu trúc anthocyanin chuyển hóa nước 15 Hình 1.5 Những màu sắc phổ biến loại athocyanin .18 Hình 1.6 Sự chuyển đổi cấu trúc anthocyanin điều kiện môi trường pH khác 20 Hình 1.7 Sơ đồ biến tính anthocyanin 3,5-diglucoside pH 3,7 21 Hình 1.8 Sự biến tính Anthocyanin với phản ứng oxy hóa atechol 23 Hình1.9 Phản ứng ngưng tụ .25 Hình 1.10 Sơ đồ Jurd phản ứng thuận nghịch SO2 Anthocyanin (Wiley, 2005) 26 Hình 1.11 Sự chuyển hóa malvin thành malvone H2O2 tạo thành từ oxy hóa Ascorbic acid (Wiley, 2005) .27 Hình 1.12 Fla-2-ene tạo thành từ phản ứng Ascorbic acid Anthocyanin .27 Hình 2.1 Sơ đồ quy trình tóm tắt nội dung thí nghiệm khảo sát thơng số trích ly 34 Hình 2.2 Bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ H2O: Ethanol pha chế dung mơi để trích ly anthocyanin từ gạo đen hữu 35 Hình 2.3 Bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ nguyên liệu thích hợp để trích ly anthocyanin từ gạo đen 37 Hình 2.4 Bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thích hợp để trích ly Anthocyanin từ gạo đen 38 iv Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà Hình 2.5 Bố trí thí nghiệm xác định thời gian thích hợp để trích ly anthocyanin từ gạo đen 39 Hình 2.6 Sơ đồ quy trình tóm tắt nội dung thí nghiệm nghiên cứu tính chất Anthocyanin 40 Hình 2.7 Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng pH đến hàm lượng Anthocyanin dịch trích 41 Hình 2.8 Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng nhiệt độ đến độ bền anthocyanin cá nhiệt độ khác 42 Hình 3.1 Ảnh hưởng tỷ lệ dung mơi H2O:EtOH đến hiệu suất trích ly anthocyanin từ dịch chiết 44 Hình 3.2 Dịch trích ly dung mơi tỷ lệ khác 45 Hình 3.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu dung mơi đến hiệu suất trích ly Anthocyanin từ gạo đen hữu .46 Hình 3.4 Biểu đồ thể ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến hiệu suất trích ly Anthocyanin từ dịch chiết 48 Hình 3.5 Dịch trích ly anthocyanin nhiệt độ khác .50 Hình 3.6 Biểu đồ thể ảnh hưởng thời gian đến trích ly đến hiệu suất trích ly Anthocyanin dịch chiết 51 Hình 3.7 Dịch trích ly anthocyanin thời gian khác 52 Hình 3.8 Biểu đồ biểu thị biến đổi độ hấp thu anthocyanin mức pH khác 53 Hình 3.9 Biểu đồ biểu thị biến đổi hàm lượng Anthocyanin 00C 54 Hình 3.10 Biểu đồ biểu thị biến đổi hàm lượng anthocyanin 200C 55 Hình 3.11 Biểu đồ biểu thị biến đổi hàm lượng Anthocyanin 00C 56 v Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà Hình 3.12 Biểu đồ biểu thị biến đổi hàm lượng anthocyanin nhiệt độ khác 57 Hình 3.13 Biểu đồ biểu thị ức chế gốc tự vitamin C 58 Hình 3.14 Biểu đồ biểu thị ức chế gốc tự dung dịch Anthocyanin trích ly từ đen 59 Hình 3.15 Biểu đồ biểu thị ức chế gốc tự dung dịch Anthocyanin trích ly từ đen sau quay 60 Hình 3.16 Phản ứng màu dung dịch DPPH cho dịch mẫu trích ly anthocyanin từ gạo đen 61 Hình 3.17 Bố trí thí nghiệm xác định thời gian thích hợp để trích ly Anthocyanin từ gạo đen 63 Hình 4.1 Dịch chiết Anthocyanin trước cô quay 65 Hình 4.2 Dịch chiết sau cô đặc .66 vi Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học gạo đen Bảng 1.2 Bảng Anthocyanin có nguồn gốc thực vật Bảng 1.3 Một số Anthocyanin phổ biến Bảng 1.4 Các nhóm Anthocyanin có .10 Bảng 3.1 Giá trị %I IC50 vitamin C 58 Bảng 3.2 Giá trị %I kết IC50 dịch trích ly anthocyanin từ gạo đen trước quay 59 Bảng 3.3 Giá trị %I kết IC50 dịch trích ly anthocyanin từ gạo đen sau cô quay 60 Bảng 3.4 So sánh giá trị IC50 Ascorbic acid Anthocyanin 61 Bảng Đánh giá sơ cảm quan dịch chiết anthocynin………………………63 vii Đồ án tốt nghiệp Tỉ lệ dung môi GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà pH=1 pH=4.5 Hệ số pha loãng Độ hấp thu Hàm lượng anthocyanin mg/L Hàm lượng trung bình mg/L % Athocyanin 535nm 700nm 535nm 700nm 0.510 0.251 0.464 0.262 20 0.057 19.04 0.88 0.513 0.253 0.465 0.260 20 0.055 18.37 0.85 0.511 0.256 0.466 0.267 20 0.056 18.70 0.86 0.508 0.274 0.429 0.250 20 0.055 18.37 0.513 0.275 0.432 0.252 20 0.058 19.37 0.514 0.281 0.433 0.256 20 0.056 18.70 0.86 0.546 0.301 0.471 0.283 20 0.057 19.04 0.88 0.550 0.299 0.468 0.271 20 0.054 18.03 0.83 0.551 0.300 0.467 0.275 20 0.059 19.70 0.91 0.494 0.266 0.392 0.214 20 0.050 16.70 0.99 0.493 0.265 0.391 0.213 20 0.050 16.70 0.99 0.494 0.267 0.392 0.218 20 0.053 17.70 1.05 0.495 0.280 0.409 0.248 20 0.054 18.03 1.07 0.495 0.283 0.408 0.245 20 0.049 16.36 0.497 0.283 0.408 0.242 20 0.048 16.03 0.95 0.480 0.271 0.399 0.241 20 0.051 17.03 1.01 0.479 0.273 0.387 0.232 20 0.051 17.03 1.01 0.482 0.272 0.400 0.239 20 0.049 16.36 0.97 0.410 0.220 0.310 0.160 20 0.040 13.36 0.97 0.409 0.221 0.309 0.162 20 0.041 13.69 0.99 0.413 0.224 0.309 0.161 20 0.041 13.69 0.99 0.399 0.173 0.364 0.179 20 0.041 13.69 0.99 0.402 0.181 0.362 0.184 20 0.043 14.36 0.404 0.184 0.365 0.185 20 0.040 13.36 0.97 0.420 0.160 0.402 0.181 20 0.039 13.03 0.94 0.425 0.169 0.407 0.196 20 0.045 15.03 1.09 0.416 0.157 0.409 0.189 20 0.039 13.03 0.94 0.284 0.140 0.227 0.119 20 0.036 12.02 1.03 0.286 0.143 0.225 0.118 20 0.036 12.02 0.285 0.145 0.228 0.120 20 0.032 10.69 0.295 0.155 0.253 0.147 20 0.034 11.36 STT 5 1:06 1:08 1:10 1:12 % Athocyanin trung bình 0.85 18.81 16.88 13.69 11.50 0.89 0.97 1.04 1.03 0.91 0.97 0.87 ± 0.02 1.00 ± 0.04 0.99 ± 0.05 0.98 ±0.04 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.298 0.157 0.251 0.145 20 0.035 11.69 1.00 0.299 0.158 0.250 0.142 20 0.033 11.02 0.94 0.324 0.168 0.240 0.120 20 0.036 12.02 1.03 0.319 0.159 0.240 0.115 20 0.035 11.69 1.00 0.325 0.165 0.245 0.118 20 0.033 11.02 0.94 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Tỷ lệ nguyên liệu Count Mean Tỷ lệ nguyên liệu 1:6 Tỷ lệ nguyên liệu 1:12 Tỷ lệ nguyên liệu 1:10 Tỷ lệ nguyên liệu 1:8 Homogeneous Groups 0.867778 X 0.983333 X 0.991111 X 1.00111 X Thí nghiệm Bảng Giá trị OD cùa thí nghiệm xác định nhiệt độ thích hợp cho việc trích ly anthocyanin từ gạo đen pH=1 Nhiệt độ 40oC 50oC pH=4.5 Hệ số pha loãng Độ hấp thu Hàm lượng anthocyanin mg/L Hàm lượng trung bình mg/L % Anthocyanin 535nm 700nm 535nm 700nm 0.630 0.366 0.590 0.359 20 0.033 11.02 0.509 0.642 0.380 0.581 0.349 20 0.030 10.02 0.463 0.643 0.380 0.581 0.354 20 0.036 12.02 0.555 0.530 0.296 0.446 0.244 20 0.032 10.69 0.494 0.534 0.293 0.449 0.246 20 0.038 12.69 0.537 0.293 0.455 0.246 20 0.035 11.69 0.540 0.539 0.295 0.473 0.261 20 0.032 10.69 0.494 0.538 0.291 0.475 0.263 20 0.035 11.69 0.540 0.542 0.299 0.476 0.265 20 0.032 10.69 0.494 0.592 0.320 0.511 0.283 20 0.044 14.70 10 11.24 14.73 0.586 0.679 % Anthocyanin TB 0.519 ± 0.04 0.680 ± 0.03 Đồ án tốt nghiệp 55oC 60oC 65oC 70oC GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.594 0.323 0.511 0.286 20 0.046 15.36 0.710 0.595 0.324 0.512 0.284 20 0.043 14.36 0.663 0.425 0.227 0.349 0.195 20 0.044 14.70 0.679 0.427 0.227 0.350 0.193 20 0.043 14.36 0.663 0.427 0.226 0.349 0.192 20 0.044 14.70 0.679 0.645 0.353 0.542 0.297 20 0.047 15.70 0.725 0.641 0.353 0.540 0.298 20 0.046 15.36 0.710 0.639 0.354 0.541 0.296 20 0.040 13.36 0.617 0.411 0.209 0.339 0.185 20 0.048 16.03 0.740 0.417 0.213 0.344 0.189 20 0.049 16.23 0.750 0.410 0.208 0.339 0.187 20 0.050 16.70 0.771 0.419 0.218 0.331 0.177 20 0.047 15.70 0.420 0.221 0.328 0.178 20 0.049 16.36 0.415 0.217 0.330 0.184 20 0.052 17.37 0.802 0.429 0.229 0.350 0.199 20 0.049 16.36 0.756 0.428 0.231 0.347 0.196 20 0.046 15.36 0.710 0.428 0.233 0.346 0.197 20 0.046 15.36 0.710 0.709 0.389 0.723 0.458 20 0.055 18.37 0.848 0.716 0.390 0.717 0.450 20 0.059 19.70 0.910 0.717 0.403 0.718 0.462 20 0.058 19.37 0.895 0.554 0.265 0.510 0.275 20 0.054 18.03 0.833 0.555 0.264 0.509 0.274 20 0.056 18.70 0.557 0.266 0.514 0.278 20 0.055 18.37 0.848 0.548 0.253 0.512 0.273 20 0.056 18.70 0.864 0.549 0.257 0.513 0.275 20 0.054 18.03 0.833 0.551 0.260 0.514 0.280 20 0.057 19.04 0.879 0.279 0.122 0.229 0.119 20 0.047 15.70 0.725 0.280 0.120 0.224 0.113 20 0.049 16.36 0.756 0.274 0.118 0.228 0.117 20 0.045 15.03 0.694 0.312 0.140 0.289 0.165 20 0.048 16.03 0.740 0.315 0.145 0.286 0.166 20 0.050 16.70 0.312 0.147 0.283 0.163 20 0.045 15.03 0.694 0.300 0.152 0.287 0.188 20 0.049 16.36 0.756 0.295 0.150 0.294 0.196 20 0.047 15.70 0.725 0.299 0.150 0.290 0.193 20 0.052 17.37 0.802 0.403 0.182 0.329 0.154 20 0.046 15.36 0.710 0.398 0.194 0.318 0.160 20 0.046 15.36 0.401 0.196 0.325 0.165 20 0.045 15.03 0.577 0.313 0.488 0.269 20 0.045 15.03 11 0.725 16.16 18.70 16.03 14.88 0.756 0.864 0.771 0.710 0.694 0.694 0.747 ± 0.03 0.864 ± 0.03 0.740 ± 0.04 0.687 ± 0.04 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.581 0.317 0.487 0.270 20 0.047 15.70 0.725 0.583 0.319 0.491 0.272 20 0.045 15.03 0.694 0.606 0.357 0.555 0.349 20 0.043 14.36 0.663 0.607 0.350 0.554 0.342 20 0.045 15.03 0.694 0.598 0.349 0.563 0.353 20 0.039 13.03 0.602 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Nhiệt độ trích ly Count Mean Nhiệt độ trích ly 40oC Nhiệt độ trích ly 50oC Nhiệt độ trích ly 70oC Nhiệt độ trích ly 65oC Nhiệt độ trích ly 55oC Nhiệt độ trích ly 60oC Thí nghiệm Homogeneous Groups 0.518889 X 0.68 X 0.684444 X 0.738889 X 0.746667 X X 0.862222 Bảng Giá trị OD thí nghiệm xác định thời gian thích hợp cho việc trích ly anthocyanin từ gạo đen STT Thời gian trích ly pH=1 pH=4.5 Hệ số pha loãng Độ hấp thu Hàm lượng (mg/l) Hàm lượng trung bình (mg/l) % Athocyanin 535nm 700nm 535nm 700nm 0.417 0.185 0.380 0.188 20 0.040 13.38 0.618 0.418 0.186 0.378 0.188 20 0.042 14.05 0.649 0.420 0.180 0.378 0.180 20 0.042 14.05 0.460 0.218 0.504 0.302 20 0.040 13.38 0.618 0.460 0.220 0.499 0.301 20 0.042 14.05 0.649 1h 12 14.23 0.649 % Athocyanin trung bình 0.657 ± 0.03 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.459 0.219 0.501 0.304 20 0.043 14.38 0.664 0.279 0.125 0.268 0.160 20 0.046 15.39 0.711 0.280 0.123 0.273 0.159 20 0.043 14.38 0.664 0.285 0.120 0.277 0.157 20 0.045 15.05 0.695 0.397 0.217 0.345 0.224 20 0.059 19.74 0.911 0.396 0.214 0.343 0.220 20 0.059 19.74 0.911 0.398 0.218 0.338 0.212 20 0.054 18.06 0.834 0.479 0.244 0.440 0.259 20 0.054 18.06 0.834 0.482 0.245 0.445 0.261 20 0.053 17.73 0.481 0.248 0.443 0.260 20 0.050 16.72 0.772 0.407 0.203 0.333 0.184 20 0.055 18.40 0.850 0.409 0.196 0.330 0.171 20 0.054 18.06 0.834 0.407 0.198 0.334 0.178 20 0.053 17.73 0.819 0.389 0.206 0.340 0.194 20 0.037 12.38 0.572 0.383 0.197 0.348 0.196 20 0.034 11.37 0.525 0.384 0.198 0.350 0.200 20 0.036 12.04 0.556 0.444 0.230 0.383 0.203 20 0.034 11.37 0.525 0.444 0.233 0.382 0.206 20 0.035 11.71 0.437 0.229 0.383 0.209 20 0.034 11.31 0.522 0.420 0.196 0.392 0.204 20 0.036 12.04 0.556 0.415 0.199 0.385 0.200 20 0.031 10.37 0.479 0.416 0.199 0.380 0.196 20 0.033 11.04 0.510 0.399 0.286 0.375 0.285 20 0.023 7.69 0.355 0.401 0.287 0.377 0.287 20 0.024 8.03 0.371 0.396 0.280 0.371 0.280 20 0.025 8.36 0.386 0.461 0.401 0.369 0.330 20 0.021 7.02 0.324 0.458 0.344 0.358 0.268 20 0.024 7.99 0.459 0.336 0.366 0.266 20 0.023 7.69 0.355 0.511 0.306 0.474 0.291 20 0.022 7.36 0.340 0.512 0.300 0.468 0.282 20 0.026 8.70 0.402 0.513 0.305 0.460 0.280 20 0.028 9.37 0.433 0.412 0.286 0.366 0.255 20 0.015 5.02 0.232 0.416 0.237 0.368 0.202 20 0.013 4.35 0.201 0.407 0.213 0.367 0.189 20 0.016 5.35 0.247 0.451 0.233 0.498 0.292 20 0.012 4.01 0.471 0.244 0.498 0.285 20 0.014 4.68 0.472 0.234 0.497 0.274 20 0.015 5.02 0.232 0.572 0.359 0.496 0.297 20 0.014 4.68 0.216 0.579 0.358 0.496 0.290 20 0.015 5.02 0.232 5 1h30 2h 2h30 3h 13 18.25 11.51 8.02 4.94 0.819 0.541 0.369 0.185 0.216 0.843 ± 0.04 0.532 ± 0.03 0.371 ± 0.03 0.228 ± 0.03 Đồ án tốt nghiệp 0.577 GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.358 0.491 0.291 20 0.019 6.36 0.294 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Thời gian trích ly Count Thời gian trích ly 3h Thời gian trích ly 2h30 Thời gian trích ly 2h Thời gian trích ly 1h Thời gian trích ly 1h30 Thí nghiệm thứ Mean Homogeneous Groups 0.22888 X X 0.37111 X 0.53333 X 0.65777 X 0.84111 Bảng Giá trị OD xác định hàm lượng anthocyanin để xác định giá trị IC50 vitaminC Nồng độ đầu (mg/ml) ND sau (mg/ml) 0.05 0.001219512 0.1 0.002439024 0.25 0.006097561 0.5 0.012195122 0.75 0.018292683 OD 0.559 0.565 0.571 0.414 0.424 0.442 0.283 0.28 0.284 0.043 0.044 0.043 0.039 0.033 0.043 14 % DPPH 16.19 15.29 14.39 37.93 36.43 33.73 57.57 58.02 57.42 93.55 93.40 93.55 94.15 95.05 93.55 TB 15.29 ± 0.09 36.03 ± 2.13 57.67 ± 0.31 93.50 ± 0.09 94.25 ± 0.75 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà Bảng 10 OD xác định hàm lượng anthocyanin để xác định giá trị IC50 dịch trích ly trước quay Nồng độ đầu (mg/ml) ND sau (mg/ml) 3.768 0.091902439 2.6376 0.064331707 1.884 0.04595122 1.1304 0.027570732 0.942 0.02297561 OD 0.256 0.263 0.259 0.377 0.329 0.317 0.459 0.451 0.448 0.523 0.52 0.511 0.559 0.596 % DPPH 61.62 60.57 61.17 43.48 50.67 52.47 31.18 32.38 32.83 21.59 22.04 23.39 16.19 10.64 0.545 18.29 15 TB 61.12 ± 0.53 48.88 ± 4.76 32.13 ± 0.85 22.34 ± 0.94 15.04 ± 3.95 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà Bảng 11 OD xác định hàm lượng anthocyanin để xác định giá trị IC50 dịch trích ly sau cô quay Nồng độ đầu (mg/ml) ND sau (mg/ml) 2.75 0.067073 2.25 0.054878 1.75 0.042683 1.25 0.030488 0.75 0.018293 OD 0.287 0.288 0.287 0.249 0.248 0.246 0.325 0.324 0.325 0.341 0.343 0.342 0.355 0.358 0.358 % DPPH TB 57.86 57.81 ± 0.08 57.71 57.86 63.44 63.63 ± 0.22 63.58 63.88 52.28 52.33 ± 0.08 52.42 52.28 49.93 49.78 ± 0.15 49.63 49.78 47.87 47.58 ± 0.25 47.43 47.43 Thí nghiệm Bảng 12 Giá trị OD thí nghiệm xác độ hấp thu dịch trích ly từ gạo đen pH khác STT 3 pH 4.5 5.2 535nm 0.467 0.466 0.466 0.288 0.289 0.290 0.341 0.332 0.340 0.368 0.369 700nm 0.225 0.227 0.228 0.144 0.145 0.143 0.261 0.238 0.216 0.242 0.212 16 Độ hấp thu (nm) 0.466 0.289 0.338 0.370 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 3 3 3 6.7 8.8 9.4 0.374 0.083 0.082 0.085 0.211 0.214 0.218 0.033 0.032 0.035 0.118 0.119 0.117 0.058 0.057 0.059 0.199 0.049 0.052 0.048 0.156 0.157 0.159 0.010 0.013 0.010 0.051 0.052 0.054 0.010 0.012 0.013 0.083 0.214 0.033 0.118 0.058 Thí nghiệm Bảng 13 Giá trị OD thí nghiệm xác định hàm lượng ahthocyanin bảo quản 00C pH=1 pH=4.5 Nhiệt STT độ 00C 535nm 700nm 535nm 700nm 0.359 0.348 0.346 0.345 0.343 0.342 0.340 0.335 0.330 0.305 0.296 0.290 0.280 0.280 0.274 0.186 0.187 0.186 0.186 0.186 0.186 0.186 0.186 0.186 0.156 0.155 0.154 0.153 0.162 0.161 0.368 0.367 0.365 0.364 0.362 0.361 0.359 0.358 0.356 0.308 0.297 0.292 0.283 0.275 0.277 0.217 0.220 0.219 0.221 0.221 0.223 0.223 0.224 0.225 0.178 0.177 0.178 0.178 0.178 0.178 17 Hệ số pha loãng Độ hấp thu Hàm lượng mg/L 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.022 0.014 0.014 0.015 0.016 0.017 0.018 0.015 0.013 0.019 0.021 0.022 0.022 0.021 0.014 7.35 4.68 4.68 5.12 5.18 5.79 5.84 5.01 4.17 6.35 7.01 7.35 7.24 6.90 4.56 Hàm lượng trung bình mg/L 5.31 ± 0.93 6.00 ± 0.51 Đồ án tốt nghiệp 9 9 GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.268 0.265 0.256 0.337 0.333 0.332 0.329 0.327 0.324 0.311 0.319 0.310 0.297 0.292 0.294 0.295 0.291 0.290 0.288 0.284 0.286 0.528 0.530 0.517 0.520 0.525 0.507 0.505 0.502 0.499 0.574 0.592 0.610 0.629 0.647 0.665 0.683 0.701 0.719 0.160 0.169 0.148 0.175 0.176 0.175 0.175 0.175 0.175 0.173 0.180 0.184 0.167 0.167 0.166 0.164 0.166 0.160 0.162 0.164 0.163 0.277 0.270 0.297 0.295 0.305 0.324 0.325 0.334 0.342 0.360 0.373 0.386 0.399 0.412 0.425 0.438 0.451 0.464 0.269 0.261 0.263 0.373 0.370 0.370 0.368 0.367 0.365 0.363 0.362 0.360 0.335 0.333 0.335 0.329 0.334 0.339 0.336 0.334 0.334 0.520 0.528 0.505 0.505 0.515 0.484 0.485 0.475 0.458 0.536 0.549 0.562 0.574 0.587 0.600 0.612 0.625 0.638 0.178 0.178 0.178 0.235 0.237 0.238 0.242 0.240 0.240 0.250 0.249 0.255 0.232 0.233 0.234 0.225 0.236 0.238 0.239 0.241 0.240 0.291 0.292 0.310 0.305 0.315 0.321 0.325 0.325 0.325 0.342 0.349 0.356 0.363 0.370 0.377 0.385 0.392 0.399 18 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.017 0.013 0.023 0.024 0.024 0.025 0.028 0.025 0.024 0.025 0.026 0.021 0.027 0.025 0.027 0.027 0.027 0.029 0.029 0.027 0.029 0.022 0.024 0.025 0.025 0.020 0.020 0.020 0.018 0.024 0.020 0.020 0.019 0.019 0.018 0.018 0.017 0.017 0.016 5.57 4.23 7.57 8.02 8.02 8.35 9.35 8.24 7.90 8.35 8.68 7.01 8.87 8.42 9.12 9.02 9.03 9.69 9.82 8.88 9.71 7.35 8.02 8.35 8.35 6.68 6.51 6.65 6.01 8.02 6.75 6.59 6.43 6.27 6.11 5.96 5.80 5.64 5.48 7.79 ± 0.63 8.93 ± 0.47 7.68 ± 0.89 6.28 ± 0.43 Đồ án tốt nghiệp ngày GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.202 0.204 0.207 0.300 0.318 0.310 0.350 0.382 0.400 0.177 0.172 0.170 0.218 0.230 0.237 0.252 0.269 0.282 0.337 0.338 0.339 0.342 0.349 0.340 0.345 0.347 0.349 0.330 0.325 0.322 0.278 0.273 0.279 0.265 0.253 0.252 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.018 0.019 0.020 0.018 0.012 0.012 0.018 0.019 0.021 6.01 6.35 6.68 6.01 4.01 4.01 6.01 6.35 7.01 5.78 ± 1.08 Bảng 14 Giá trị OD thí nghiệm xác định hàm lượng ahthocyanin bảo quản 200C Nhiệt độ 200C pH=1 535nm 700nm 535nm 700nm 0.360 0.353 0.352 0.343 0.342 0.338 0.330 0.329 ngày pH=4.5 0.320 0.288 0.287 0.287 0.286 0.286 0.285 0.285 0.284 0.284 0.303 0.301 0.300 0.219 0.216 0.215 0.213 0.211 0.209 0.207 0.205 0.203 0.154 0.150 0.149 0.146 0.144 0.141 0.139 0.136 0.134 0.159 0.157 0.156 0.375 0.371 0.370 0.367 0.365 0.362 0.360 0.357 0.355 0.275 0.275 0.274 0.274 0.273 0.273 0.272 0.272 0.271 0.320 0.317 0.317 0.248 0.247 0.248 0.248 0.248 0.248 0.248 0.248 0.248 0.155 0.149 0.148 0.144 0.140 0.137 0.133 0.130 0.126 0.186 0.183 0.182 19 Hệ số pha loãng Độ hấp thu Hàm lượng 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.014 0.013 0.015 0.011 0.015 0.015 0.012 0.015 0.011 0.014 0.011 0.012 0.010 0.009 0.008 0.007 0.006 0.005 0.010 0.010 0.009 4.68 4.34 5.01 3.67 4.84 5.01 3.84 5.01 3.51 4.68 3.67 4.01 3.45 3.12 2.78 2.45 2.12 1.78 3.34 3.34 3.01 Hàm lượng trung bình 4.43 ± 0.61 3.12 ± 0.51 2.73 ± 0.19 Đồ án tốt nghiệp ngày ngày GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.298 0.297 0.295 0.294 0.292 0.291 0.310 0.310 0.315 0.317 0.308 0.309 0.310 0.306 0.307 0.287 0.286 0.285 0.284 0.287 0.289 0.288 0.288 0.288 0.278 0.275 0.273 0.270 0.268 0.265 0.263 0.260 0.258 0.356 0.350 0.350 0.367 0.350 0.345 0.154 0.153 0.151 0.150 0.148 0.147 0.178 0.172 0.172 0.168 0.165 0.162 0.159 0.160 0.163 0.134 0.136 0.137 0.134 0.135 0.137 0.136 0.137 0.137 0.124 0.121 0.119 0.116 0.113 0.110 0.107 0.105 0.102 0.188 0.195 0.187 0.274 0.268 0.264 0.315 0.314 0.312 0.311 0.309 0.308 0.308 0.315 0.319 0.319 0.319 0.318 0.324 0.321 0.320 0.307 0.306 0.305 0.323 0.323 0.323 0.329 0.334 0.338 0.326 0.327 0.327 0.328 0.328 0.329 0.330 0.330 0.331 0.366 0.369 0.369 0.336 0.333 0.329 0.180 0.178 0.176 0.174 0.172 0.170 0.186 0.187 0.186 0.186 0.186 0.186 0.186 0.186 0.186 0.167 0.168 0.170 0.186 0.185 0.185 0.193 0.197 0.202 0.187 0.188 0.189 0.189 0.190 0.190 0.193 0.190 0.192 0.224 0.235 0.223 0.265 0.271 0.270 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.009 0.008 0.008 0.007 0.007 0.006 0.010 0.010 0.010 0.016 0.011 0.015 0.013 0.011 0.010 0.013 0.012 0.013 0.013 0.014 0.014 0.014 0.015 0.015 0.015 0.016 0.016 0.016 0.016 0.015 0.018 0.015 0.017 0.026 0.021 0.017 0.022 0.020 0.022 2.89 2.73 2.56 2.39 2.23 2.06 3.34 3.34 3.34 5.23 3.51 5.01 4.45 3.79 3.45 4.34 4.01 4.34 4.34 4.68 4.68 4.76 4.87 4.97 4.87 5.21 5.20 5.19 5.40 5.17 6.17 5.15 5.60 8.68 7.01 5.68 7.35 6.68 7.35 3.94 ± 0.76 4.55 ± 0.31 5.33 ± 0.37 6.85 ± 0.88 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.349 0.348 0.347 0.298 0.318 0.317 0.318 0.308 0.299 0.286 0.296 0.288 21 20 20 20 0.020 0.018 0.019 6.52 6.07 6.36 Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà Bảng 15 Giá trị OD thí nghiệm xác định hàm lượng ahthocyanin bảo quản 400C pH=1 Nhiệt độ 40oC 535nm 700nm 535nm 700nm 0.249 0.248 0.250 0.250 0.251 0.251 0.252 0.252 pH=4.5 0.253 0.259 0.253 0.254 0.250 0.257 0.255 0.253 0.260 0.257 0.279 0.270 0.280 0.277 0.275 0.272 0.270 0.268 0.269 0.315 0.318 0.318 0.317 0.315 0.128 0.126 0.126 0.125 0.124 0.123 0.122 0.121 0.120 0.139 0.126 0.127 0.120 0.124 0.123 0.122 0.121 0.120 0.143 0.140 0.146 0.145 0.143 0.140 0.139 0.135 0.138 0.156 0.157 0.159 0.160 0.155 0.247 0.245 0.245 0.244 0.243 0.242 0.241 0.240 0.239 0.241 0.243 0.244 0.246 0.247 0.249 0.250 0.252 0.253 0.266 0.258 0.257 0.255 0.254 0.252 0.251 0.249 0.248 0.324 0.325 0.327 0.328 0.330 0.132 0.130 0.128 0.126 0.124 0.122 0.120 0.118 0.116 0.126 0.125 0.126 0.126 0.126 0.126 0.126 0.126 0.126 0.143 0.141 0.136 0.140 0.135 0.138 0.137 0.136 0.135 0.188 0.188 0.188 0.188 0.188 22 Hệ số pha loãng Độ hấp thu Hàm lượng mg/L 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.006 0.007 0.007 0.008 0.008 0.009 0.009 0.010 0.010 0.005 0.009 0.009 0.010 0.011 0.009 0.006 0.013 0.009 0.013 0.013 0.013 0.016 0.013 0.018 0.017 0.019 0.018 0.023 0.024 0.020 0.016 0.018 2.00 2.34 2.34 2.56 2.73 2.89 3.06 3.23 3.40 1.67 3.01 3.01 3.45 3.73 2.89 2.00 4.23 3.06 4.34 4.34 4.34 5.45 4.40 5.90 5.57 6.46 5.90 7.68 8.02 6.68 5.34 6.07 Hàm lượng trung bình mg/L 2.73 ± 0.46 3.01 ± 0.79 5.19 ± 0.84 6.59 ± 0.92 Đồ án tốt nghiệp ngày GVHD: TS Nguyễn Lệ Hà 0.315 0.313 0.320 0.321 0.281 0.279 0.279 0.272 0.269 0.280 0.270 0.270 0.275 0.262 0.258 0.255 0.251 0.248 0.244 0.240 0.237 0.233 0.306 0.313 0.317 0.389 0.376 0.376 0.415 0.428 0.439 0.163 0.165 0.166 0.168 0.129 0.129 0.120 0.123 0.118 0.129 0.123 0.121 0.130 0.115 0.113 0.110 0.107 0.104 0.101 0.098 0.095 0.093 0.181 0.177 0.175 0.206 0.199 0.195 0.205 0.218 0.210 0.329 0.327 0.331 0.325 0.300 0.298 0.300 0.285 0.284 0.282 0.276 0.272 0.268 0.268 0.263 0.259 0.255 0.251 0.247 0.243 0.239 0.235 0.301 0.306 0.309 0.423 0.416 0.415 0.470 0.490 0.503 0.195 0.197 0.196 0.194 0.172 0.171 0.170 0.160 0.158 0.159 0.153 0.150 0.147 0.148 0.145 0.143 0.139 0.136 0.133 0.131 0.128 0.125 0.194 0.186 0.186 0.258 0.257 0.251 0.279 0.295 0.290 23 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0.017 0.018 0.019 0.022 0.024 0.023 0.029 0.024 0.025 0.028 0.024 0.027 0.024 0.027 0.028 0.028 0.028 0.029 0.029 0.030 0.030 0.031 0.018 0.016 0.019 0.018 0.018 0.017 0.019 0.015 0.016 5.79 6.08 6.23 7.40 8.02 7.68 9.69 8.02 8.35 9.35 8.02 9.08 8.02 8.97 9.23 9.52 9.42 9.52 9.62 10.05 10.15 10.24 6.01 5.34 6.35 6.01 6.01 5.68 6.35 5.11 5.34 8.47 ± 0.72 9.63 ± 0.43 5.80 ± 0.45 ... Anthocyanin từ nguyên liệu phù hợp cho mục đích ứng dụng vào thực phẩm Nghiên cứu tính chất Anthocyanin trình bảo quản dịch chiết từ gạo đen Nội dung nghiên cứu Để thực mục đích nghiên cứu đề ra, nhóm nghiên. .. tính chất anthocyanin từ dịch trích ly gạo đen Xác định hoạt tính kháng oxy hóa Anthocyanin từ dịch trích ly gạo đen Hình 2.6 Sơ đồ quy trình tóm tắt nội dung thí nghiệm nghiên cứu tính chất Anthocyanin. .. lượng Anthocyanin, tính hiệu xuất trích ly Anthocyanin Từ chọn nhiệt độ thích hợp để trích ly 2.2.2 Khảo sát số tính chất Anthocyanin dịch trích ly từ gạo đen Dịch trích ly từ gạo đen Nghiên cứu tính