Nghiên cứu quá trình nhả thuốc insulin của hệ hạt micro chitosab insulinos pla peg PLA OS

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA CÔNG NGHỆ VẬT LIỆU o0o TRỊNH THÚY AN NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH NHẢ THUỐC INSULIN CỦA HỆ - HẠT MICRO CHITOSAN - INSULIN/ OS-PLA-PEG-PLA-OS Chuyên ngành: KỸ THUẬT VẬT LIỆU Mã số : 8520309 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 09 năm 2020 ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA CÔNG NGHỆ VẬT LIỆU o0o TRỊNH THÚY AN NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH NHẢ THUỐC INSULIN CỦA HỆ - HẠT MICRO CHITOSAN - INSULIN/ OS-PLA-PEG-PLA-OS Chuyên ngành: KỸ THUẬT VẬT LIỆU Mã số : 8520309 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 09 năm 2020 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA – ĐHQG - HCM Cán hướng dẫn khoa học: PGS.TS Huỳnh Đại Phú (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán chấm nhận xét: 1: PGS.TS Nguyễn Thị Phương Phong (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán chấm nhận xét: 2: PGS.TS Nguyễn Đại Hải (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Luận văn thạc sĩ bảo vệ Trường Đại học Bách Khoa, ĐHQG Tp.HCM ngày 12 tháng 09 năm 2020 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ luận văn thạc sĩ) Chủ tịch: PGS.TS Nguyễn Đắc Thành Thư ký: TS Nguyễn Thị Lê Thanh Phản biện 1: PGS.TS Nguyễn Thị Phương Phong Phản biện 2: PGS.TS Nguyễn Đại Hải Ủy viên: TS La Thị Thái Hà Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá luận văn Trưởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƯỞNG KHOA PGS.TS NGUYỄN ĐẮC THÀNH PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: TRỊNH THÚY AN MSHV: 1870604 Ngày, tháng, năm sinh: 31/01/1995 Nơi sinh: Bến Tre Chuyên ngành: Kỹ thuật vật liệu Mã số : 8520309 I TÊN ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH NHẢ THUỐC INSULIN CỦA HỆ - HẠT MICRO CHITOSAN – INSULIN/ OS-PLA-PEG-PLA-OS II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: - Tổng hợp oligomer serine (OS) nhạy pH, triblock PLA-PEG-PLA nhạy nhiệt độ, pentablock OS-PLA-PEG-PLA-OS vi hạt chitosan mang thuốc insulin (CINs) - Đánh giá khả chuyển trạng thái sol-gel môi trường in vitro pentablock copolymer, độ nhớt pentablock copolymer hệ vận chuyển thuốc CINs-pentablock pH 7,4 8,9 - Đánh giá khả tương thích sinh học pentablock, CINs mơi trường in vitro zeta hệ vật liệu mang thuốc - Khảo sát khả gel hóa mơi trườn in vivo khả phân hủy sinh học theo thời gian pentablock copolymer hệ chitosan-pentablock copolymer - Đánh giá hình dạng, phân bố hạt chitosan sinh trưởng tế bào bên khối gel hệ chitosan-pentablock copolymer in vivo - Khảo sát khả điều trị bệnh tiểu đường loại hệ vận chuyển thuốc insulin CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS tỷ lệ khác III NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 24/02/2020 IV NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 20/12/2020 V CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: PGS.TS Huỳnh Đại Phú CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGS.TS Huỳnh Đại Phú Tp HCM, ngày 20 tháng 08 năm 2020 CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO TS La Thị Thái Hà TRƯỞNG KHOA CÔNG NGHỆ VẬT LIỆU PGS.TS Huỳnh Đại Phú LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời tri ân sâu sắc đến Thầy Huỳnh Đại Phú, người trực tiếp hướng dẫn thực luận văn Thầy theo dõi chi tiết hướng thí nghiệm, Thầy tận tình bảo, chia sẻ nhiều kiến thức quý báu suốt chương trình học tập tơi Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Thầy Doo Sung Lee tập thể anh chị phịng thí nghiệm Polymer Nano Structure and Properties, Theranostic Macromolecules Research Center, South Korea hỗ trợ sở vật chất, tinh thần, quy trình thủ tục thí nghiệm q trình thực tập ngắn hạn Tôi xin gửi lời cảm ơn đến anh/chị/em: Phạm Ngọc Sinh, Lê Thái Minh Duy, Hồ Hồng Gia Vinh, Tơ Thị Cẩm Thạch….tại Phịng thí nghiệm Trung Tâm Nghiên Cứu Vật Liệu Polymer giúp đỡ, thảo luận góp ý cho nhiều ý tưởng đa dạng suốt trình nghiên cứu Và cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn u thương đến gia đình tơi, nơi có cha, mẹ, chị em gái tạo nguồn động lực cho cố gắng ngày, để vượt lên giới hạn thân Trong trình thực luận văn khơng tránh khỏi sai sót định, mong quý thầy cô, anh chị bạn đọc thơng cảm đóng góp ý kiến để tơi điều chỉnh hồn thiện Xin chân thành cảm ơn! Trịnh Thúy An Đề tài thực phịng thí nghiệm Polymer Nano Structure and Properties,Theranostic Macromolecules Research Center, South Korea Phịng thí nghiệm Trung Tâm Nghiên Cứu Vật Liệu Polymer – trường đại học Bách Khoa Tp.HCM, Việt Nam i TÓM TẮT ĐỀ TÀI Luận văn phát triển theo hướng nghiên cứu chế tạo hệ vận chuyển thuốc hạt micro-chitosan mang thuốc insulin (CINs) hydrogel nhạy pH/nhiệt độ, thực nội dung sau: Thừa hưởng kết tốt nhóm nghiên cứu trước tổng hợp thành cơng pentablock OS-PLA-PEG-PLA-OS copolymer (PEG/LA/OS = 1:2:6) có Mn = 4130 g/mol (627-2877-627), với độ phân tán PDI = 1,203; hạt CINs có thơng số tạo hạt Cchitosan = 3,25wt%; U = 12,5kV; Q = 0,2mL/h; L = 13 cm đầu kim tiêm 18G tạo hạt cầu rời rạc có Dtb = 268,2 ± 138,5nm (số hạt n = 505) Đánh giá sản phẩm in vitro: pentablock OS-PLA-PEG-PLA-OS nhạy pH/nhiệt độ, CINs kiểm tra tương thích sinh học với dịng tế bào 293T, RAW 264.7; độ nhớt dung dịch pentablock hệ mang thuốc, zeta đường kính trung bình micelle điều kiện pH 7,4 8,9 Đánh giá sản phẩm in vivo: hạt micro-chitosan phân tán pentablock copolymer OS-PLA-PEG-PLA-OS nhạy pH/nhiệt độ đánh giá khả phân hủy sinh học pH 8,9; tất mẫu thử nghiệm môi trường in vivo mổ tách lấy mẫu để quan sát kích thước, hình dạng mẫu gel, tất mẫu sấy đông khô cân lấy khối lượng, chụp SEM mặt cắt ngang để đánh giá lỗ xốp phân bố hạt Gây bệnh tiểu đường loại thuốc STZ thể chuột có trọng lượng 1820g, chia thành nhóm (n=4) điều trị bệnh tỷ lệ insulin khác nhau, cụ thể: Nhóm 1: 100L dung dịch 30wt% pentablock copolymer Nhóm 2: 100L dung dịch CINs PBS pH 7,4 (0,375 mg/mL CINs) Nhóm 3: 100L dung dịch insulin PBS (insulin 0,075mg/mL) Nhóm 4: 100L với 2,5wt% CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS (0,25mg/mL CINs) Nhóm 5:100L với 3,75wt% CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS (0,375mg/mL CINs) với lượng thuốc insulin “đóng gói” hạt chitosan không đổi 20wt% Tại thời điểm 1h, 2h, 4h…72h… xác định số nồng độ đường huyết thử đường huyết hàm lượng thuốc insulin nhả huyết tương chuột insulin ELISA Đồng thời, quan sát hành vi chuột theo dõi trọng lượng thể suốt trình điều trị ii ABSTRACT A novel insulin composite delivery system was prepared and characterized The composite consisted of a pH-and temperature-sensitive hydrogel which is oligomer serin-bpoly (lactide)-b-poly (ethylene glycol)-b-poly (lactide)-b- oligomer serin (OS-PLA-PEG-PLAOS) pentablock copolymer as matrix and chitosan-insulin electrosprayed nanosphere (CINs) as constituent materials The OS-PLA-PEG-PLA-OS pentablock copolymer and the chitosaninsulin nanoparticles’ properties were investigated The chitosan-insulin nanospheres uniformly distributed in the matrix showed the reinforcing effect on the mechanical property and prolonged the degradation time of the hydrogel depot in body condition The composite solutions accommodating different concentrations of the chitosan-insulin nanospheres were subcutaneously injected into induced diabetic BALB/c mice to study the in vivo insulin-release profile The result showed that insulin concentrations in blood plasma were maintained at a steady-state level Furthermore, the bio-property of the insulin was reserved and showed blood glucose level reducing effect for more than 60 hours after injection to streptozotocin (STZ)-induced diabetic mouse model The results suggested that this injectable pH-temperature sensitive hydrogel contained chitosan-insulin electrosprayed nanospheres composites have promising potential applications for diabetes type treatment iii LỜI CAM ĐOAN CỦA TÁC GIẢ LUẬN VĂN Tơi xin can đoan tồn số liệu luận văn kết nghiên cứu thực hướng dẫn PGS.TS Huỳnh Đại Phú Tp.HCM, ngày 20 tháng 08 năm 2020 Người thực Trịnh Thúy An iv MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ĐỀ TÀI ii ABSTRACT iii LỜI CAM ĐOAN CỦA TÁC GIẢ LUẬN VĂN iv MỤC LỤC v DANH MỤC HÌNH ẢNH viii DANH MỤC BẢNG xii DANH MỤC VIẾT TẮT xiii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan hydrogel nhạy pH/nhiệt độ 1.1.1 Hydrogel tính chất 1.1.2 Hydrogel nhạy nhiệt độ 1.1.3 Hydrogel nhạy pH 1.1.4 Hydrogel có khả nhạy cảm pH nhiệt độ 1.2 Tổng quan hạt chitosan mang thuốc 11 1.2.1 Nguyên lý tạo hạt phương pháp electrospraying 11 1.2.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến hình dạng kích thước hạt cầu 12 1.3 Các trình phân hủy sinh học q trình giải phóng thuốc từ hệ vận chuyển thuốc 15 1.3.1 Quá trình phân hủy sinh học hydrogel, hạt mang thuốc môi trường in vitro 15 1.3.2 Q trình phân hủy sinh học hydrogel mơi trường in vivo 20 1.4 Ứng dụng hệ vận chuyển thuốc điều trị bệnh 23 1.4.1 Tổng quan bệnh tiểu đường loại 23 1.4.2 Ứng dụng điều trị bệnh tiểu đường loại hệ vận chuyển thuốc 25 1.4.3 Cơ chế phân rã, trình đào thải polymer môi trường in vivo 27 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 31 2.1 Nguyên liệu 31 2.2 Thiết bị - Dụng cụ 34 2.3 Phương pháp phân tích 34 v 2.3.1 Quan sát hình thái hạt kính hiển vi điện tử quét – SEM 34 2.3.2 Phương pháp sắc kí gel GPC 35 2.3.3 Phân tích cộng hưởng từ hạt nhân 1HNMR 35 2.3.4 Phương pháp thử nghiệm nghịch chuyển 35 2.3.5 Phương pháp thử nghiệm khả tương thích sinh học copolymer môi trường in vitro 36 2.3.6 Phương pháp tán xạ ánh sáng động (DLS) 37 2.3.8 Khảo sát chuyển pha sol-gel phân hủy sinh học môi trường in vivo 38 2.3.9 Khảo sát khả điều trị bệnh tiểu đường loại hệ CINs/OS-PLAPEG-PLA-OS 39 2.4 Nội dung thực 39 2.5 Các quy trình thực nghiệm 42 2.5.1 Quy trình tổng hợp triblock nhạy nhiệt PLA-PEG-PLA 43 2.5.2 Quy trình tổng hợp mSerine 45 2.5.3 Quy trình tổng hợp pentablock nhạy nhiệt/pH OS-PLA-PEG-PLA-OS 46 2.5.4 Quy trình tổng hợp hạt chitosan mang thuốc insulin 48 2.5.5 Quy trình chế tạo hệ vận chuyển thuốc từ pentablock nhạy pH/nhiệt độ hạt Chitosan mang Insulin 49 2.5.6 Quy trình gây bệnh tiểu đường cho chuột 50 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 52 3.1 Tổng hợp hydrogel nhạy nhiệt độ/pH OS-PLA-PEG-PLA-OS hạt Chitosan mang thuốc insulin 52 3.1.2 Tổng hợp hạt micro Chitosan-Insulin phương pháp electrosprayed 55 3.2 Đánh giá độ nhớt, zeta khả tương thích sinh học pentablock copolymer hệ CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS 57 3.2.1 Khảo sát độ nhớt pentablock copolymer CINs-pentablock điểm pH khác 57 3.2.2 Thế zeta hệ CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS 58 3.2.3 Khả tương thích sinh học CINs pentablock dòng tế bào 293T, RAW 264.7 60 3.3 Nghiên cứu chế tạo hệ vận chuyển thuốc insulin CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS môi trường in vivo 61 3.3.1 Khảo sát khả sol-gel, phân hủy sinh học pentablock copolymer hệ CS-pentablock copolymer môi trường in vivo 61 vi Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ Ảnh SEM CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS in vivo tuần sau sấy thăng hoa HVCH: TRỊNH THÚY AN 89 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ Ảnh SEM CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS in vivo tuần sau sấy thăng hoa HVCH: TRỊNH THÚY AN 90 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ Ảnh SEM CINs/OS-PLA-PEG-PLA-OS in vivo tuần sau sấy thăng hoa HVCH: TRỊNH THÚY AN 91 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ Số liệu dùng vẽ sơ đồ nồng độ đường máu, nồng độ insulin giải phóng mơi trường in vivo Bảng số liệu thô để vẽ đường biểu diễn nồng độ glucose máu chuột Thời gian (h) 12 24 36 48 60 72 Đối chứng 418,66 435 441,66 468,66 428,66 431,33 455 428,66 488,66 497 551,66 513 Độ Độ 3,75CINs- Độ lệch 2,5CINslệch lệch petablock chuẩn penta chuẩn chuẩn 32,51 407,66 24,6401 406,3333 79,43 34,42 113 17,2111 103,3333 15,50 26,27 99 14,3589 79,6667 25,58 34,29 50 7,9373 71,6667 14,04 35,85 80 13,6056 94 12,65 39,50 77,33 14,7258 107,6667 16,77 25,71 85,33 15,8595 143 28,54 38,08 103 14,5826 177 15,09 34,26 94,66 20,0817 367,6667 15,01 72,08 100 14,3589 410,6667 90,94 26,77 338 28,3576 418,6667 80,77 36,49 517,33 31,9304 444 96,02 CINs Độ lệch chuẩn Insulin 412,33 46,33 88 90,67 106,67 139,33 229,67 394,33 379 419,67 470,33 459,67 53,9475 7,3711 12,6458 13,5119 15,0332 24,0069 19,1398 74,4401 25,7162 33,2916 37,3711 25,7941 421,2341 21,3333 43,3231 92,3233 217,6767 319,1333 422,1667 454,1243 479 449,3467 441,3333 489,5267 Độ lệch chuẩn 53,94 17,37 12,64 13,51 25,03 24,01 39,14 74,44 35,72 33,29 37,37 25,79 Bảng số liệu thô dùng để vẽ nồng độ insulin giải phịng mơi trường in vivo Thời gian (h) 12 24 36 48 60 72 84 Đối chứng 0,2398 0,2557 0,2357 0,2506 0,2428 0,2435 0,2401 0,2433 0,2422 Độ Độ Độ Độ Độ 3,75CINs2,5CINslệch lệch lệch CINs lệch lệch petablock penta Insulin chuẩn chuẩn chuẩn chuẩn chuẩn 0 0 0 0 0,0622 2,9269 0,5016 2,6843 0,5559 8,3224 1,2501 12,8811 1,5982 0,0624 4,5552 0,5472 3,1845 0,3949 2,9224 0,6991 4,2504 0,6938 0,0622 6,0119 0,4384 3,4097 0,4199 2,5545 0,6583 0,5635 0,1037 0,0624 6,682 0,3775 3,9293 0,4777 0,8917 0,4735 0,5103 0,0978 0,0623 5,2296 0,3515 3,5714 0,4379 0,7747 0,3494 0,4436 0,0904 0,0623 5,5212 0,3839 2,3626 0,3036 0,6078 0,1086 0,4246 0,0883 0,0622 3,1707 0,2581 0,3382 0,0787 0,3069 0,0752 0,2993 0,0743 0,0623 0,3456 0,066 0,2495 0,0624 0,2478 0,0623 0,2522 0,0624 0,0623 0,2418 0,0623 0,2418 0,0623 0,2447 0,0623 0,2426 0,0623 HVCH: TRỊNH THÚY AN 92 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ Số liệu dùng để vẽ sơ đồ khối lượng chuột q trình điều trị bệnh Bảng khối lượng tính theo phần trăm Thời Độ Độ Độ 3,75CINs2,5CINsgian lệch lệch CINs lệch penta penta (h) chuẩn chuẩn chuẩn 100 11,27 100 4,3414 100 7,0147 105,0816 10,86 102,4951 4,3182 109,43 8,9368 104,8486 11,61 100,8085 3,7732 107,05 6,8372 108,3913 9,54 104,568 2,9004 111,51 5,0883 108,964 9,48 107,1506 3,8127 107,68 7,1556 107,5148 10,33 104,5327 3,4617 110,15 6,5894 107,8368 9,55 105,3233 2,9789 111,03 5,5288 112,292 10,07 108,152 2,5362 113,31 4,7963 113,2582 10,99 110,1548 2,9104 114,34 5,4241 113,6178 11,02 112,7901 4,1922 116,07 7,0903 10 113,3768 10,84 112,2103 4,8689 116,44 6,1549 11 112,8744 11,62 112,7901 4,2639 115,79 6,2445 12 114,4337 9,50 118,8354 1,7815 116,24 6,3341 13 116,6398 8,99 116,5849 5,2447 118,83 6,4242 14 117,7762 11,49 120,0108 2,9104 119,80 6,5138 15 118,8841 11,20 120,1267 3,7384 120,24 6,6034 16 120,1825 11,65 120,3444 3,916 120,78 6,326 Đối chứng 100 91,7764 90,8687 88,4123 85,9201 87,8601 87,8959 89,5337 89,7291 86,7035 88,8411 88,1522 85,8619 86,241 86,0862 85,9313 86,7387 Độ Độ lệch lệch Insulin chuẩn chuẩn 4,9469 100 12,6696 6,4501 102,59 16,526 4,5571 103,03 17,5822 7,8215 101,86 15,626 7,932 101,96 14,8482 6,6702 99,35 17,5344 7,9897 99,03 15,0977 7,728 99,19 16,2653 7,8022 98,94 16,7076 6,055 101,09 16,6922 5,9615 99,97 17,5609 5,3886 101,27 18,1301 9,3449 101,64 22,3838 9,5826 102,19 13,02 9,0096 104,14 19,671 8,4366 105,36 18,2183 8,4628 106,66 21,514 Bảng số liệu thô lấy từ số đo cân trực tiếp khối lượng chuột Thời gian (h) 10 11 12 13 14 15 16 Đối chứng 18,7267 17,1867 17,0167 16,5567 16,09 16,4533 16,46 16,7667 16,8033 16,2367 16,637 16,508 16,0791 16,1501 16,1211 16,0921 16,2433 Độ Độ Độ Độ Độ 3,75CINs2,5CINslệch lệch lệch CINs lệch Insulin lệch penta penta chuẩn chuẩn chuẩn chuẩn chuẩn 0,93 18,63 2,09 18,9733 0,82 18,5267 1,29 18,8333 2,39 1,21 19,5767 2,02 19,4467 0,82 20,2733 1,66 19,3221 3,11 0,85 19,5333 2,16 19,1267 0,72 19,8333 1,27 19,4032 3,31 1,46 20,1933 1,78 19,84 0,55 20,66 0,94 19,1833 2,94 1,49 20,3 1,77 20,33 0,72 19,95 1,33 19,2033 2,79 1,25 20,03 1,92 19,8333 0,66 20,4067 1,22 18,71 3,31 1,49 20,09 1,78 19,9833 0,57 20,57 1,02 18,65 2,84 1,45 20,92 1,88 20,52 0,48 20,9933 0,89 18,68 3,06 1,46 21,1 2,05 20,9 0,55 21,1833 1,01 18,6333 3,15 1,13 21,167 2,05 21,4 0,79 21,5033 1,31 19,04 3,14 1,11 21,1221 2,02 21,29 0,92 21,5733 1,14 18,8267 3,31 1,00 21,0285 2,16 21,4 0,81 21,4539 1,16 19,0721 3,41 1,75 21,319 1,77 22,547 0,34 21,5346 1,17 19,142 4,22 1,79 21,73 1,68 22,12 0,99 22,0152 1,19 19,2452 2,45 1,69 21,9417 2,14 22,77 0,55 22,1959 1,21 19,6133 3,71 1,58 22,1481 2,09 22,792 0,71 22,2765 1,22 19,8421 3,43 1,58 22,39 2,17 22,8333 0,74 22,3767 1,17 20,0867 4,05 HVCH: TRỊNH THÚY AN 93 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 10 Ảnh kính hiển vi quang học thể xâm lấn tế bào thể khối gel tiêm da HVCH: TRỊNH THÚY AN 94 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 11 Bảng số liệu dùng để lập đường cong độ nhớt mẫu pH khác Nhiệt độ o C 14,888 14,984 15,152 15,32 15,48 15,733 15,888 16,129 16,306 16,501 16,678 16,876 17,098 17,303 17,479 17,629 17,792 17,937 18,1 18,266 18,353 18,491 18,645 18,818 19,007 19,177 19,344 19,51 19,683 19,846 20,019 20,173 20,356 20,574 20,746 20,904 21,023 Hydrogel 3,75CINs pH7,4 Pa.s 0,2367 0,8713 0,745 2,4323 0,4614 2,1799 1,2568 2,2827 4,3759 5,2652 2,2121 4,071 6,8826 10,6363 13,8889 19,8305 23,4569 29,1496 37,9193 55,0775 66,7449 83,4336 100,174 123,945 142,816 160,65 177,645 198,322 220,219 238,706 255,32 271,661 293,736 312,865 331,129 355,497 378,132 HVCH: TRỊNH THÚY AN Hydrogel pH 7,4 Pa.s 3,7382 2,6965 1,1511 4,1977 4,087 4,4046 2,8142 3,1406 1,8999 3,1512 2,3742 1,1556 4,4467 3,2018 2,3119 2,4483 2,1695 4,055 1,8442 4,1552 1,3521 2,2593 3,0031 1,5033 1,7048 1,259 1,6064 1,4812 1,662 1,0911 0,8696 1,3134 4,5258 2,5123 1,7094 1,3295 1,1404 Hydrogel 3,75CINs pH 8,9 Pa.s 225,173 231,537 237,119 240,631 242,892 245,452 250,488 250,387 256,398 258,765 262,714 268,408 276,674 278,727 288,41 293,346 297,185 306,658 315,394 324,882 332,994 336,449 350,271 368,644 385,495 396,644 420,875 438,245 454,52 471,018 498,04 520,156 534,872 553,595 572,234 593,439 606,502 Hydrogel pH 8,9 Pa.s 1,4595 0,9933 1,3346 1,0217 2,0861 2,6284 3,1323 4,151 2,7203 2,8071 3,0204 1,1007 0,1219 2,4106 2,37 1,9344 2,615 1,2514 1,6655 1,3445 0,1684 2,6841 2,3888 0,6367 0,1189 0,5018 2,3133 1,786 0,3312 1,9277 1,8245 1,7218 1,4914 4,1975 1,0364 1,5341 1,712 95 Luận văn thạc sĩ 21,169 21,316 21,478 21,663 21,815 21,956 22,066 22,198 22,341 22,513 22,693 22,846 23,019 23,194 23,365 23,523 23,686 23,866 24,031 24,259 24,432 24,582 24,726 24,865 25,02 25,16 25,294 25,415 25,541 25,687 25,855 26,033 26,177 26,357 26,518 26,68 26,878 27,129 27,312 27,471 27,616 27,741 27,919 GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 413,786 423,76 446,445 461,33 483,287 504,503 519,128 540,685 576,715 618,65 652,87 691,019 712,223 741,893 763,647 784,136 817,891 854,41 878,653 912,256 942,501 979,637 1004,25 1029,02 1047,6 1058,44 1078,81 1101,08 1117,53 1123,41 1128,38 1152,75 1170,57 1189,11 1190,93 1201,66 1223,82 1236,93 1268,46 1295,39 1327,5 1339,46 1288,94 HVCH: TRỊNH THÚY AN 2,9685 0,6818 2,7571 3,7371 0,8426 1,1739 2,4919 3,9041 2,8042 4,1425 3,3875 0,5944 0,8128 3,6282 0,8545 3,254 2,5529 2,6359 2,0748 2,4958 0,4134 3,0564 2,0244 3,9773 5,4005 3,8015 3,2533 4,4787 4,8369 5,7569 9,7124 6,1985 8,0269 11,7962 13,4685 13,4971 15,595 17,1817 19,1746 20,8057 24,0862 26,6931 27,7527 619,803 632,928 644,238 656,447 674,383 674,98 686,124 713,81 737,912 772,599 781,355 797,715 825,888 848,618 861,077 881,147 898,378 913,048 933,078 939,352 943,789 950,026 952,562 960,213 977,107 960,595 986,417 1004,8 1000,77 1031,5 1051,32 1078,57 1099,79 1100,22 1131,13 1145,85 1147,24 1172,81 1194,65 1216,25 1229,13 1232,91 1244,07 2,2735 2,1736 1,2604 2,952 1,7054 0,6508 1,039 2,416 1,6098 2,8932 3,5926 2,8873 5,4324 2,2847 2,8687 4,3687 0,8273 1,6074 1,5102 0,544 2,7742 3,8177 1,9174 3,3515 3,8162 3,9379 6,358 6,6512 9,038 7,5401 8,3882 11,1305 11,8339 11,4167 14,3501 16,5786 13,7493 19,1514 21,2468 19,6088 23,4558 23,3843 23,808 96 Luận văn thạc sĩ 28,038 28,181 28,301 28,418 28,566 28,714 28,91 29,069 29,235 29,416 29,58 29,757 29,921 30,083 30,258 30,449 30,66 30,821 30,949 31,102 31,249 31,392 31,538 31,651 31,735 31,886 32,044 32,232 32,45 32,606 32,786 32,952 33,111 33,287 33,514 33,711 33,844 33,978 34,142 34,27 34,427 34,559 34,656 GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 1263,7 1273,7 1287,93 1324,87 1357,4 1392,85 1422,5 1444,63 1451,68 1436,92 1402,14 1399,79 1415,59 1452,78 1484,89 1514,81 1549,03 1570,86 1603,51 1624,7 1643,47 1663,92 1665,11 1669,35 1651,29 1643,78 1631,78 1643,09 1640,01 1569,6 1485,32 1537,87 1587,98 1618,32 1644,18 1670,68 1697,97 1716,37 1735,72 1756,6 1760,71 1777,52 1804,49 HVCH: TRỊNH THÚY AN 34,1799 33,9293 36,5673 40,4457 42,6799 48,2015 49,3689 50,6379 57,4584 60,8348 61,8108 65,9893 70,8757 75,958 78,4236 79,6626 86,7127 87,968 86,8198 97,4616 98,349 104,026 107,503 105,344 117,236 116,255 118,905 121,791 121,214 131,689 132,428 131,817 136,36 142,272 150,109 146,994 150,564 155,407 158,694 159,53 165,134 162,591 165,747 1231,19 1244,16 1245,16 1256,2 1237,5 1258,65 1257,78 1252,06 1282,43 1300,6 1305,93 1325,18 1334,27 1356 1358,81 1375,71 1399,44 1400,26 1429,7 1426,16 1449,24 1446,63 1456,63 1442,33 1431,41 1426,06 1428,4 1425,93 1415,93 1426,67 1426,96 1443,26 1449,03 1482,43 1486,71 1493,02 1499,09 1509,33 1496,28 1507,37 1514,85 1502,43 1490,81 26,74 28,1714 28,9446 32,857 33,6654 35,7857 36,8619 39,9121 41,6327 43,3544 45,4847 47,0478 52,7401 53,9932 57,3769 58,0159 59,9506 59,8031 63,0424 64,8207 66,4295 66,7412 70,5608 69,6215 72,735 77,601 78,894 81,9309 82,0885 86,0359 88,6076 90,839 92,6474 90,6314 93,8879 99,0106 100,467 102,256 100,533 104,204 104,133 103,996 109,208 97 Luận văn thạc sĩ 34,778 34,955 35,096 35,287 35,449 35,64 35,786 35,977 36,146 36,293 36,466 36,673 36,873 37,065 37,167 37,31 37,452 37,589 37,756 37,931 38,093 38,224 38,333 38,446 38,595 38,799 38,938 39,132 39,294 39,481 39,648 39,807 39,972 40,139 40,324 40,546 40,716 40,867 41,008 41,144 41,301 41,453 41,573 GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 1818,89 1831,52 1837,64 1847,47 1853,27 1855,55 1861,02 1874,19 1886,9 1890,54 1900,23 1905,32 1918,58 1921,67 1922,98 1911,91 1912,24 1903,48 1895,78 1702,78 1566,13 1607,58 1656,38 1695,17 1726,78 1740,29 1752,64 1765,63 1764,98 1760,88 1771,83 1778,75 1782,07 1785,84 1784,92 1774,98 1764,27 1736,41 1719,06 1712,52 1671,05 1653,28 1639,31 HVCH: TRỊNH THÚY AN 170,605 173,436 173,449 175,17 179,318 175,675 182,229 182,652 184,666 187,405 188,077 191,71 192,155 198,288 199,659 196,732 204,332 204,543 206,369 201,442 202,498 210,339 207,804 208,013 206,231 208,187 212,735 207,949 204,48 211,125 206,879 210,672 210,768 214,976 206,375 218,75 218,864 215,634 215,245 214,241 219,904 216,111 215,78 1474,15 1465,49 1467,3 1464,96 1443,8 1446,4 1451,8 1461,71 1468,11 1481,96 1481,9 1470,11 1471,17 1469,62 1484,46 1481,85 1471,76 1473,75 1476,61 1462,2 1450,85 1447,72 1435,52 1416,1 1415,87 1412,2 1397,83 1393 1376,48 1361,19 1370,79 1370,55 1367,65 1366,58 1363,85 1353,81 1354,99 1345,86 1333,65 1339,51 1332,39 1330,77 1323,13 107,937 108,596 112,652 116,477 117,195 122,697 121,175 122,729 122,191 125,621 126,81 126,657 130,394 131,991 129,032 130,514 135,721 136,828 136,254 137,215 135,968 138,708 141,276 143,106 140,313 146,309 143,592 146,169 145,158 149,604 145,28 150,317 150,779 152,633 149,892 151,988 152,512 146,049 153,539 154,517 156,087 155,854 151,598 98 Luận văn thạc sĩ 41,665 41,798 41,964 42,12 42,301 42,469 42,63 42,787 42,968 43,172 43,395 43,6 43,754 43,911 44,025 44,182 44,32 44,483 44,594 44,691 44,846 44,991 45,17 45,315 45,534 45,679 45,851 46,033 46,197 46,362 46,518 46,735 46,952 47,087 47,259 47,37 47,549 47,666 47,832 47,916 48,018 48,144 48,333 GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 1631,68 1591,15 1522,76 1523,48 1524,63 1526,81 1520,59 1526,4 1526,01 1523,05 1519,72 1514,05 1511,97 1499,49 1476,07 1473,92 1467,14 1394,34 1371,39 1385,71 1398,15 1407,64 1412,96 1417,97 1423,34 1421,75 1423,39 1418,49 1418,22 1415,26 1413,72 1411,4 1410,19 1406,68 1405,07 1401,73 1389,06 1292 15109 1129,01 1254,21 1340,66 1303,02 HVCH: TRỊNH THÚY AN 216,823 218,333 215,788 213,562 210,38 207,461 212,207 212,927 212,21 208,597 214,86 211,322 212,839 211,119 212,556 209,75 211,562 207,751 207,989 208,408 209,495 199,789 205,305 204,107 207,252 200,385 201,556 197,647 197,388 201,045 194 198,441 199,942 196,5 192,115 198,511 197,379 192,265 189,071 191,73 192,955 192,185 187,325 1313,55 1304,3 1294,15 1267,02 1252,66 1244,9 1229,86 1213,53 1204,48 1196,61 1195,65 1188,35 1190,9 1183,24 1178,2 1172,61 1157,64 1159,71 1150,64 1139,96 1126,41 1109,4 1089,9 1078 1062,05 1048,22 1025,82 1019,62 1012,28 1011,08 1005,44 991,011 989,488 977,039 976,985 959,545 951,272 938,824 932,345 924,375 923,735 905,325 897,435 153,324 155,086 156,215 157,387 155,126 158,42 158,111 156,613 160,494 160,414 160,8 159,918 162,552 158,527 164,21 161,503 161,776 158,68 166,221 157,126 156,492 159,851 160,425 159,373 162,802 162,401 162,628 160,424 163,395 162,77 161,662 163,676 163,689 164,681 161,964 160,144 157,793 161,984 162,725 159,843 164,995 159,559 158,51 99 Luận văn thạc sĩ 48,504 48,692 48,889 49,048 49,224 49,403 49,606 49,816 49,966 50,13 50,257 50,409 50,571 50,698 50,8 50,91 51,058 51,229 51,381 51,545 51,741 51,889 52,087 52,232 52,413 52,563 52,757 52,981 53,169 53,329 53,446 53,589 53,72 53,886 54,049 54,219 54,378 54,487 54,581 54,731 54,877 55,049 55,24 GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 1371,28 1159,26 1186,77 1219,77 1173,92 1146,25 1095,8 1042,32 994,678 992,913 846,533 851,593 811,727 815,987 701,572 625,904 714,573 767,845 597,628 625,353 579,449 556,412 625,636 481,192 593,254 522,365 424,447 449,278 478,71 412,198 409,802 352,816 329,394 316,145 322,969 231,434 145,633 105,512 167,808 160,595 93,8651 116,546 69,1238 HVCH: TRỊNH THÚY AN 187,121 183,953 183,768 183,307 182,698 183,316 186,719 181,283 179,627 178,956 180,499 177,058 179,011 176,508 179,445 174,659 176,951 173,886 167,705 168,863 172,104 167,227 168,127 165,444 162,638 163,333 163,417 162,799 159,115 158,431 155,638 155,624 153,526 151,055 151,712 152,341 148,915 149,104 149,505 147,821 143,729 144,22 141,429 878,308 865,217 852,377 836,502 830,84 818,581 800,047 792,862 783,608 784,276 770,992 766,624 758,729 751,762 744,577 739,274 724,455 720,005 709,431 702,991 693,552 687,126 675,639 662,682 650,805 639,743 630,261 616,029 605,522 594,713 593,765 589,326 583,076 579,516 573,909 560,529 562,138 553,118 545,065 537,437 534,32 528,318 519,208 158,124 159,347 162,743 160,327 161,915 160,107 158,442 160,636 158,003 159,777 159,564 158,256 157,633 157,657 156,875 156,291 153,857 156,107 154,346 154,646 155,832 154,576 152,41 155,157 150,028 147,822 149,534 146,962 144,478 146,763 142,47 141,623 138,916 139,004 136,779 135,597 136,905 133,048 130,404 131,446 130 129,912 132,671 100 Luận văn thạc sĩ 55,377 55,57 55,749 55,896 56,083 56,252 56,404 56,661 56,85 57,012 57,137 57,306 57,423 57,572 57,732 57,789 57,933 58,067 58,236 58,388 58,578 58,754 58,894 59,052 59,227 59,48 59,707 59,874 60,059 60,16 60,108 GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 98,3103 157,872 79,9897 72,2612 73,5192 131,817 111,344 115,167 74,0846 80,6057 104,512 97,1504 124,202 4,3164 17,7972 83,9691 68,699 61,2391 47,3718 61,8837 81,2715 109,984 29,5886 78,3685 37,2219 62,4065 112,042 106,572 116,419 69,8365 105,298 105,298 HVCH: TRỊNH THÚY AN 142,882 138,505 137,566 138,189 135,22 134,484 136,545 132,986 132,72 129,16 129,316 130,477 128,953 132,74 125,314 127,996 124,819 123,567 122,59 122,428 119,35 124,13 118,674 118,817 118,836 117,793 115,059 116,182 114,05 114,768 114,552 111,787 110,36 109,795 110,147 108,08 107,775 106,336 108,073 109,303 105,285 105,852 105,659 507,622 499,717 488,345 482,437 473,484 465,951 457,583 454,191 452,226 449,174 442,494 438,054 435,441 426,184 422,797 417,515 412,72 410,466 404,069 395,287 394,765 389,481 381,974 374,162 369,075 365,159 360,213 352,891 348,407 347,345 347,389 111,787 110,36 109,795 110,147 108,08 107,775 106,336 108,073 109,303 105,285 105,852 105,659 130,518 130,692 129,785 128,254 131,668 126,725 129,152 128,428 125,246 129,151 123,911 122,752 123,18 121,814 120,407 120,379 121,773 118,615 119,074 117,979 120,03 117,134 116,783 118,04 114,336 117,66 117,969 115,214 114,944 113,051 110,769 111,626 110,707 111,292 110,165 108,302 106,696 105,031 109,277 106,486 103,896 105,124 104,038 101 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ 101,172 99,3524 98,7098 100,019 99,0898 96,2824 94,4706 98,1955 96,1116 95,2295 94,1456 91,3125 95,0873 90,3806 91,3073 91,5147 89,6449 90,0371 89,1179 HVCH: TRỊNH THÚY AN 101,172 99,3524 98,7098 100,019 99,0898 96,2824 94,4706 98,1955 96,1116 95,2295 94,1456 91,3125 95,0873 90,3806 91,3073 91,5147 89,6449 90,0371 89,1179 104,07 102,758 103,01 102,966 103,887 100,251 98,9295 100,525 100,922 97,1087 98,0027 96,1191 93,5396 96,1804 95,5054 94,6804 93,6009 93,8141 91,5092 94,0959 102 Luận văn thạc sĩ GVHD: PGS.TS HUỲNH ĐẠI PHÚ LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ Tên: TRỊNH THÚY AN Ngày, tháng, năm sinh: 31/01/1995 Nơi sinh: Bến Tre Địa liên lạc: 367/ATH, An Phú Trung, Ba Tri, Bến Tre QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO Trường: Đại học Tơn Đức Thắng Niên khóa: 2013 – 2018 Bậc đào tạo: Đại học Hệ đào tạo: Chính quy Khoa: Khoa học ứng dụng Chuyên ngành: Vật liệu hữu HVCH: TRỊNH THÚY AN 103 ... ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH NHẢ THUỐC INSULIN CỦA HỆ - HẠT MICRO CHITOSAN – INSULIN/ OS -PLA- PEG -PLA- OS II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: - Tổng hợp oligomer serine (OS) nhạy pH, triblock PLA- PEG -PLA nhạy... HỌC BÁCH KHOA KHOA CÔNG NGHỆ VẬT LIỆU o0o TRỊNH THÚY AN NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH NHẢ THUỐC INSULIN CỦA HỆ - HẠT MICRO CHITOSAN - INSULIN/ OS -PLA- PEG -PLA- OS Chuyên ngành: KỸ THUẬT... phối thuốc có kiểm soát so với phương pháp truyền thống [8] Với vấn đề nêu trên, đề tài luận văn tập trung: ? ?Nghiên cứu trình nhả thuốc insulin hệ - hạt micro chitosan – insulin/ OS -PLA- PEG -PLA- OS? ??