Nghiên cứu máy miễn dịch tự động

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BÙI TIẾN DŨNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI Bùi Tiến Dũng CHUYÊN NGÀNH KỸ THUẬT Y SINH NGHIÊN CỨU THIẾT BỊ THU NHẬN VÀ XỬ LÝ SÓNG ĐIỆN NÃO LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC KỸ THUẬT Y SINH KHÓA 2009 Hà Nội – Năm 2011 MỤC LỤC Trang phụ bìa Trang Lời cam đoan Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình vẽ, đồ thị MỞ ĐẦU Chương - ĐẠI CƯƠNG VỀ MIỄN DỊCH 1.1 Khái niệm miễn dịch 1.2 Phân loại miễn dịch 1.1.1 Miễn dịch bẩm sinh 1.1.2 Miễn dịch thích ứng 1.1.2.1 Miễn dịch dịch thể (humoral immunity) 1.1.2.2 Miễn dịch qua trung gian tế bào (cell-mediated immunity) 1.1.2.3 Đặc điểm đáp ứng miễn dịch thích ứng 1.3 Các pha đáp ứng miễn dịch 11 1.4 Kháng nguyên – Kháng thể 13 1.4.1 Kháng nguyên 13 1.4.2 Kháng thể 14 Chương - GIỚI THIỆU CHUNG VỀ MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TỰ ĐỘNG 16 2.1 Vai trò xét nghiệm miễn dịch 16 2.2 Cơ sở y sinh xét nghiệm miễn dịch 16 2.3 Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch 19 2.3.1 Xét nghiệm miễn dịch cạnh tranh không cạnh tranh 20 1    2.3.1.1 Thể thức cạnh tranh 20 2.3.1.2 Thể thức không cạnh tranh (phương pháp sandwich) 22 2.3.2 Phương pháp xét nghiệm miễn dịch đồng không đồng 23 2.4 Các kỹ thuật phát xét nghiệm miễn dịch 24 2.4.1 Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch ban đầu 24 2.4.1.1 Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch RIA 24 2.4.1.2 Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch men EIA 25 2.4.2 Phương pháp xét nghiệm miễn dịch ELISA 26 2.4.2.1 ELISA gián tiếp (indirect ELISA) 27 2.4.2.2 Sandwich ELISA 29 2.4.2.3 ELISA cạnh tranh 30 2.4.3 Xét nghiệm miễn dịch phân cực huỳnh quang FPIA 31 2.4.4 Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch enzyme vi hạt MEIA 33 2.4.5 Xét nghiệm miễn dịch ECL 35 2.4.5.1 Thể thức cạnh tranh 39 2.4.5.2 Thể thức sandwich 41 2.4.5.3 Thể thức bắc cầu 42 Chương - NGUYÊN LÝ HOẠT ĐỘNG CỦA MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TỰ ĐỘNG 44 3.1 Tổng quan máy xét nghiệm miễn dịch tự động 44 3.1.1 Sơ đồ khối tổng quát máy xét nghiệm miễn dịch tự động 44 3.1.2 Nguyên lý hoạt động máy xét nghiệm miễn dịch tự động 45 3.2 Các quy trình xét nghiệm máy xét nghiệm miễn dịch tự động 46 3.2.1 Quy trình xét nghiệm nối tiếp 46 2    3.2.2 Quy trình xét nghiệm song song 49 3.2.2.1 Quy trình xét nghiệm chuẩn 49 3.2.2.2 Quy trình tiền xử lý 50 3.2.2.3 Quy trình ủ 51 3.2.2.4 Quy trình đo lường 52 3.3 Cấu trúc nguyên lý hoạt động phân hệ 53 3.3.1 Phân hệ điều khiển 53 3.3.1.1 Nhiệm vụ phân hệ điều khiển 53 3.3.1.2 Cấu trúc hoạt động phân hệ điều khiển 53 3.3.1.3 Thuật toán điều khiển 55 3.3.2 Phân hệ ủ 57 3.3.3 Phân hệ đo quang 60 Chương - MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TỰ ĐỘNG COBAS E411 65 4.1 Giới thiệu 65 4.2 Các thông số kỹ thuật 66 4.3 Quy trình hoạt động Cobas E411 68 4.3.1 Quá trình chuẩn bị 68 4.3.2 Các giao thức xét nghiệm 69 4.3.3 Quy trình xét nghiệm 71 4.3.4 Hiệu suất làm việc Cobas e411 74 4.3.4.1 Chỉ có xét nghiệm phút 74 4.3.4.2 Chỉ có xét nghiệm 18 phút 74 4.3.4.3 Kết hợp xét nghiệm phút 18 phút 75 4.3.4.4 Chỉ có xét nghiệm 27 phút 75 3    4.3.4.5 Kết hợp xét nghiệm 18 phút 27 phút 75 4.3.5 Quy trình xét nghiệm TSH 77 4.3.5.1 Các bước chuẩn bị vận hành 77 4.3.5.2 Phân phối thuốc thử 1, thuốc thử mẫu (hệ thống đĩa) 78 4.3.5.3 Phân phối thuốc thử 1, thuốc thử mẫu (hệ thống rack) 79 4.3.5.4 Ủ lần 81 4.3.5.5 Chuẩn bị vi hạt 81 4.3.5.6 Hút phân phối vi hạt 82 4.3.5.7 Ủ lần 82 4.3.5.8 Chuẩn bị cho trình đo lường 82 4.3.5.9 Quy trình đo 83 4.3.5.10 Phát tín hiệu chuyển đổi 84 Chương - ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG VỀ MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TẠI KHU VỰC PHÍA BẮC 85 5.1 Một số loại máy xét nghiệm miễn dịch sử dụng Việt Nam 85 5.2 Một số cố thường xảy với máy xét nghiệm miễn dịch tự động 90 5.3 Một số khuyến nghị khắc phục tình trạng 93 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 94 TÀI LIỆU THAM KHẢO 4    DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Các chế miễn dịch bẩm sinh thích ứng Hình 1.2 loại miễn dịch thích ứng Hình 1.3 Các pha miễn dịch thích ứng 5    Hình 1.4 Cấu trúc kháng thể vùng chức Hình 2.1 Kháng nguyên đa trị đặc hiệu cho kháng thể đa dịng Hình 2.2 Mặt đặc hiệu kháng ngun cho kháng thể đơn dịng Hình 2.3 Quy trình tạo kháng thể đơn dịng Hình 2.4 Kháng thể đánh dấu cho phép phát phức hợp kháng nguyên/kháng thể xét nghiệm miễn dịch Hình 2.5 Kháng nguyên đánh dấu cho phép phát phức hợp kháng nguyên /kháng thể xét nghiệm miễn dịch Hình 2.6 Số lượng kháng thể tỉ lệ nghịch với số thuốc thử thể thức xét nghiệm cạnh tranh Hình 2.7 Xét nghiệm cạnh tranh bước Hình 2.8 Xét nghiệm cạnh tranh hai bước Hình 2.9 Phương pháp xét nghiệm phi cạnh tranh sandwich Hình 2.10 Lượng kháng nguyên tỉ lệ thuận với chất đánh dấu (tín hiệu) thể thức cạnh tranh Hình 2.11 Xét nghiệm miễn dịch đồng khơng đồng Hình 2.12 Xét nghiệm miễn dịch phóng xạ RIA sử dụng chất đánh dấu đồng vị phóng xạ Hình 13 Kỹ thuật ELISA gián tiếp Hình 2.14 Các bước Sandwich ELISA Hình 2.15 Xét nghiệm miễn dịch phân cực huỳnh quang cạnh tranh Hình 2.16 Phát huỳnh quang liên hợp phức huỳnh quang Hình 2.17 Đo lường phức hợp kích thước lớn ánh sáng, quay ánh sáng phân cực kỹ thuật FPIA Hình 2.18 Phức hợp kích thước nhỏ cho cường độ sáng thấp Hình 2.19 Các thành phần MEIA Hình 2.20 Quá trình thực phương pháp MEIA Hình 2.21 Phát phức hợp miễn dich đánh dấu ruthenium Hình 2.22 Phản ứng ECL bề mặt điện cực 6    Hình 2.23 Tạo tín hiệu ECL Hình 2.24 Cấu trúc buồng đo ECL Hình 2.25 Thể thức cạnh tranh Hình 2.26 Thể thức sandwich Hình 2.27 Thể thức bắc cầu Hình 3.1 Sơ đồ khối máy xét nghiệm miễn dịch Hình 3.2 Sơ đồ chu trình xét nghiệm nối tiếp Hình 3.3 Sơ đồ chu trình xét nghiệm song song Hình 3.4 Quy trình xét nghiệm chuẩn Hình 3.5 Quy trình tiền xử lý Hình 3.6 Quy trình ủ Hình 3.7 Quy trình đo lường Hình 3.8 Sơ đồ khối phân hệ điều khiển Hình 3.9 Lưu đồ thuật tốn điều khiển Hình 3.10 Sơ đồ cấu trúc hệ thống ủ máy xét nghiệm tự động Hình 3.11 Sơ đồ buồng ủ nhiều đai ủ với trạm kết hợp Hình 3.12 Cấu trúc phân hệ đo quang Hình 3.13 Trạm đọc Hình 4.1 Máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas e411 Hình 5.1 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E170 - Roche Hình 5.2 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Elecsys 2010 Hình 5.3 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E601 Hình 5.4 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Access Hình 5.5 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite 2000 Hình 5.6 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite Hình 5.7 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động UniCel DxI800 7    8    DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tầm quan trọng hệ thống miễn dịch Bảng 1.2 Đặc điểm đáp ứng miễn dịch thích ứng Bảng 3.1 Thời gian thực loại xét nghiệm Bảng Các giao thức có Cobas e411 Bảng 4.2 Bảng thời gian cho số loại xét nghiệm điển hình 9    - Khi hồn thành việc hút R2, khối hút S/R nâng lên di chuyển tới trạm rửa Để tránh tiếp xúc R2 nước, khối hút tiếp tục hút 10 µL khơng khí khác Trạm rửa làm bên AssayTip - Sau hút R2, rotor thuốc thử quay tới gói thuốc thử xét nghiệm tới vị trí đặt cấu mở/đóng nắp Cơ cấu dịch chuyển đóng nắp lại - Khối hút dịch chuyển từ trạm rửa tới vị trí lấy mẫu hút tiếp 10 µL khơng khí Trong cảm biến mức chất lỏng làm việc, khối hút hạ xuống cách bề mặt mẫu 2mm hút 50 µL mẫu Trong hút mẫu, cảm biến phát tắc nghẽn làm việc - Khối hút S/R di chuyển từ vị trí lấy mẫu tới vị trí trạm pipet Đầu thăm hạ xuống sâu 2mm hỗn hợp phản ứng để hút mẫu, R2 R1 Sự dịch chuyển xuống xác định cách tính thể tích hỗn hợp phản ứng theo phần mềm điều khiển Khối hút không nâng lên hút - Sau thực bước trên, khối hút S/R di chuyển tới vị trí bỏ đầu hút để bỏ tip 4.3.5.4 Ủ lần - The gripper giữ dịch chuyển cốc chứa hỗn hợp phản ứng từ vị trí pipet tới buồng ủ - Cốc 37oC phút - Trong thời gian ủ, máy tiếp tục làm việc với xét nghiệm khác/ mẫu khác có 4.3.5.5 Chuẩn bị vi hạt Trước trình ủ lần hồn thành, vi hạt TSH trộn để thuận lợi cho trình hút phân phối hạt - Rotor thuốc thử quay tới gói thuốc thử nằm cấu nắp đóng/ mở nắp thuốc thử Cơ cấu dịch chuyển mở nắp Đĩa dịch chuyển gói thuốc thử tới vị trí trộn 91    - Bộ trộn dịch chuyển bên rotor thuốc thử hạ thấp dần xuống cách đáy bình chứa vi hạt 1.4mm - Bộ trộn khuấy đảo vi hạt để đạt trạng thái lơ lửng đồng - Trong trình khuấy trộn, gripper lấy AssayTip đưa tới vị trí trạm pipet - Khi q trình khuấy trộn hồn thành, bô trộn nâng lên trở trạm rửa để làm - Tại thời điểm này, rotor quay gói thuốc thử TSH tới vị trí lấy vi hạt 4.3.5.6 Hút phân phối vi hạt - Gripper kẹp cốc ủ đưa tới vị trí trạm pipet - Khối hút S/R di chuyển tới trạm pipet nhận AssayTip di chuyển tiếp tới vị trí lấy hạt - Trong khối cảm biến mức chất lỏng làm việc, khối hút hạ thấp xuống bề mặt thuốc thử hút 40 µL vi hạt - Sau hút thuốc thử, đầu hút nâng lên, di chuyển tới vị trí trạm pipet hạ thấp xuống để nhả hạt - Sau phân phối hạt, đầu hút hạ thấp xuống hút toàn thể tích hỗn hợp phản ứng Đầu hút nâng lên trả lại hỗn hợp phản ứng cốc Như vậy, dung dịch trộn phản ứng cốc gia tốc Quá trình trộn thực lần - Đầu hút dịch chuyển tới vị trí tháo bỏ AssayTip để bỏ tip 4.3.5.7 Ủ lần - Gripper kẹp cốc chứa hỗn hợp phản ứng trộn đưa trở lại buồng ủ - Cốc ủ 37 °C phút - Trong thời gian ủ, máy tiếp tục làm việc với xét nghiệm khác/ mẫu khác có 4.3.5.8 Chuẩn bị cho q trình đo lường 92    Trước q trình ủ lần hồn thành, đầu hút sipper hút dung dịch ProCell vào buồng đo để đảm bảo điều kiện tối ưu cho trình đo lường - Đầu hút sipper di chuyển từ vị trí ban đầu tới bình chứa dung dịch ProCell hạ thấp xuống 2mm mức dung dịch, hút ProCell vào buồng đo Khi đầu hút hạ xuống, cảm biến mức chất lỏng hoạt động Đầu hút hạ xuống tới mức cách đáy bình chứa ProCell 1.3mm - Đầu hút nâng lên 4.3.5.9 Quy trình đo - Gripper kẹp dịch chuyển cốc sai lần hai từ buồng ủ tới trạm hút - Đầu hút di chuyển tới trạm hút hạ thấp dần vào cốc - Khi đầu hút phát có hỗn hợp phản ứng cốc, hút 150 µL - Sau hút, đầu hút nâng lên, hút 10 µL khơng khí di chuyển tới trạm rửa đầu hút để làm - Gripper kẹp cốc từ trạm hút đưa tới cửa đổ thải để bỏ cốc - Đầu hút nâng lên - Đầu hút nâng lên dịch chuyển tới vị trí ProCell, hạ thấp vào bình chứa hút ProCell theo cách hút/nhả liên tục Các phức hợp miễn dịch bị bắt vào điện cực làm việc tác động nam châm Các mẫu kháng nguyên không gắn kết bị rửa trôi ProCell - Sau tách thành phân không gắn kết, điện áp cấp điện cực làm việc điện cực đếm Phản ứng ECL thực đo lường ống nhân quang - Đầu hút nâng lên tới vị trí CleanCell hút 20 µL khơng khí Đầu hút sau hạ thấp vào bình chứa CleanCell hút thuốc thử Quy trình lặp lại lần Như vậy, khơng khí dung dịch làm vệ sinh liên tục rửa cho buồng đo Trong trình rửa, điện áp cấp vào điện cực nhằm hỗ trợ cho trình rửa 93    - Đầu hút chuyển tới trạm rửa, hút 20 µL khơng khí hạ thấp vào trạm rửa để làm - Cuối đầu hút nâng lên tới bình chứa ProCell Đầu hút hạ thấp vào bình hút 500 µL dung dịch ProCell Tiếp theo, đầu hút hút 90 µL dung dịch ProCell tới trạm rửa Tại đây, đầu hút nhả 35 µL để rửa đầu hút chuẩn bị cho mẫu Trong trình hút ProCell, điện cực cấp điện áp ba lần để chuẩn bị cho trình đo lường Mỗi chu trình đo lường sử dụng gần 2ml cho loại ProCell CleanCell 4.3.5.10 Phát tín hiệu chuyển đổi Buồng đo giữ 28 °C suốt trình thực đo lường Các ống nhân quang phát chuyển đổi tín hiệu ECL thành tín hiệu điện để từ máy tính tốn kết xét nghiệm 94    CHƯƠNG 5- ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG VỀ MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TẠI KHU VỰC PHÍA BẮC 5.1 Một số loại máy xét nghiệm miễn dịch sử dụng Việt Nam Trong năm gần đây, máy xét nghiệm miễn dịch sử dụng nhiều bệnh viện Việt Nam Do tính đặc thù, máy sử dụng chủ yếu phòng xét nghiệm chuyên sâu Do nhu cầu chăm sóc sức khỏe người dân nâng cao nên số lượng máy cung cấp cho phòng xét nghiệm bệnh viện tăng lên nhanh chóng Hiện nay, hầu hêt bệnh viện tuyến tỉnh, bệnh viện đa khoa thành phố lớn có máy xét nghiệm miễn dịch Tùy thuộc vào quy mô bệnh viện mà chủng loại máy xét nghiệm thay đổi theo Máy xét nghiệm đại có nhiều thơng số xét nghiệm hơn, giá thành cao chi phí xét nghiệm lớn nên thường có bệnh viện trung ương, bệnh viện thành phố lớn Dưới số loại máy xét nghiệm miễn dịch sử dụng bệnh viện khu vực phía bắc Máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas 411 – hãng Roche: bệnh viện Phụ sản Hà Nội, bệnh viện Phụ sản Trung ương, bệnh viện Bạch mai (khoa hóa sinh, khoa vi sinh, phòng phám theo yêu cầu), bệnh viện Xây dựng, bệnh viện Giao thông vận tải, bệnh viện Bãi cháy – Quảng Ninh, bệnh viện Đa khoa Việt Trì- Phú Thọ, bệnh viện tỉnh Ninh Bình, phịng khám Điện Biên Phủ - Hải Phòng Hệ thống xét nghiệm miễn dịch E170 – Hãng Roche: bệnh viện Bạch Mai (khoa Hóa sinh, phịng khám bệnh theo u cầu), bệnh viện Nội tiết 95    Hình 5.1 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E170 - Roche Hệ thống xét nghiệm Elecsys® 2010 – hãng Roche: bệnh viện Phú Thọ, bệnh viện đa khoa Hải Dương, bệnh viện ng Bí, bệnh viện Bắc Ninh, bệnh viện đa khoa Quảng Ninh, bệnh viện Tân Việt, bệnh viện Hữu Nghị, bệnh viện qn đội 108, phịng khám Family Hình 5.2 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Elecsys 2010 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E601 – hãng Roche: bệnh viện Bạch Mai (khoa hóa sinh, phịng khám theo yêu cầu), bệnh viện K, bệnh viện Việt Tiệp – Hải Phịng, bệnh viện Medlatec 96    Hình 5.3 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E601 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Access – hãng Beckman Counter: bệnh viện quân y 354, bệnh viện quân đội 108, bệnh viện quân đội 103, bệnh viện y học cổ truyền, Bệnh viện Đông Đô – Hà Nội, Bệnh viện An Thịnh – Hà Nội, Bệnh viện đa khoa Cẩm Phả Hình 5.4 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Access Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite 2000 – Hãng Siemen: Bệnh viện Nội Tiết TW, Bệnh viện Xanh Pôn, Viện huyết học truyền máu TW, Bệnh viện trường Đại học Y Hà Nội, Phịng khám 121 Phủ Dỗn Hà Nội, Phịng 97    khám tư nhân Medlatec Hình 5.5 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite 2000 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite – Hãng Siemen: Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội, Bệnh viện Phụ sản TW, Bệnh viện Thanh Nhàn, Bệnh viện Tràng An, Bệnh viện Bắc Thăng Long, Trung tâm chẩn đoán y khoa Thái Hà, Phòng khám 125 Thái Thịnh – Hà Nội, Phòng khám 88 dốc Phụ sản – Hà Nội, Phịng khám tư nhân Medlatec Hình 5.6 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Immulite Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động UniCel DxI800 – hãng Beckman Counter: Bệnh viện Nội tiết TW, Bệnh viện nội tiết Thanh Hóa 98    Hình 5.7 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động UniCel DxI800 Tất hệ thống xét nghiệm sử dụng có tình chung cơng suất làm việc lớn, thời gian thực nhanh, xét nghiệm nhiều thông số : − Xét nghiệm tuyến giáp − Xét nghiệm trước sinh sau sinh − Xét nghiệm tim mạch − Xét nghiệm thiếu máu − Chỉ thị ung thư − Dị ứng Hầu hết hệ thống đại, giá thành lớn, quy trình thực đơn giản hệ thống tự động Tuy nhiên, hệ thống có cấu trúc hoạt động phức tạp nên yêu cầu thủ tục chuẩn bị vật tư tiêu hao phục vụ cho xét nghiệm nghiêm ngặt Song, phòng xét nghiệm hầu hết bệnh viện, kỹ thuật viên chưa có ý thức cao việc tuân thủ quy định vận hành bảo dưỡng định kỳ nên thiết bị chưa tận dụng hết hiệu vốn có Ngồi ra, hệ thống cịn hay gặp cố trình vận hành 99    5.2 Một số cố thường xảy với máy xét nghiệm miễn dịch tự động Kết xét nghiệm sai Nguyên nhân có: − Có bọt Procell/cleancell, thuốc thử hay mẫu bệnh phẩm − Mẫu bệnh phẩm bị đơng − Hóa chất hỏng − Phần cứng: ƒ Mixer trục trặc ( hỏng, sai vị trí, khơng đủ tốc độ) ƒ Kim hút sipper bị tắc, đường ống hút sipper bị bán tắc ƒ Điện cực Reference bị hỏng ƒ Đầu nối ống dây, xi lanh khơng đủ kín ƒ Hỏng dây pinch valve Kết control bệnh phẩm không ổn định Nguyên nhân có: • Procell/cleancell dùng q lâu, bị bay • Điều kiện bảo quản thuốc thử khơng phù hợp • Nhiệt độ thuốc thử khơng phù hợp • Không chạy chuẩn máy/ kiểm tra chất lượng theo định kỳ • Phần cứng: ƒ Hỏng điện cực đo ( 01 năm sử dụng đo 50000 mẫu tùy điều kiện đến trước) ƒ Nhiệt độ điện cực đo, ống nhân quang, khay ủ, hóa chất hệ thống (procell/cleancell) không nằm dải yêu cầu ƒ Ống nhân quang hỏng 3.Khơng thể thực chạy chuẩn hóa chất Ngun nhân có: • Thuốc thử chất chuẩn khơng có máy • Chất chuẩn hết hạn 100    • Mã vạch thuốc thử/ chất chuẩn hỏng • Lot Thuốc thử chất chuẩn khơng phù hợp • Chất chuẩn khơng đặt liền • Phần cứng: ƒ Đầu đọc mã vạch chưa chỉnh xác Máy báo nhiệt độ khay thuốc thử ngồi dải Ngun nhân có: • Thermistor hỏng • Peltier hỏng Gripper khơng gắp cup/tip trình đo mẫu Nguyên nhân: • Chỉnh gripper chưa xác • Sai, hỏng sensor xác định vị trí khối gripper • Đứt cầu chì 5v Dc Kim sipper nhỏ giọt Nguyên nhân: Bán tắc đường ống sipper • Bán tắc hệ thống dung dịch thải • Dây pinch valve khơng tốt Màn hình cảm ứng sai vị trí trỏ Ngun nhân: • Màn hình bị bẩn ko khơng vệ sinh • Chuẩn hình khơng xác S/R probe không hút bệnh phẩm, thuốc thử Nguyên nhân: • Chỉnh điện áp LLD ( liquid level detection) chưa xác • S/R probe bẩn gây nhiễu điện • Có bọt khí cup bệnh phẩm, thuốc thử 101    Phần nhiều lỗi xuất phát từ phía kỹ thuật viên như: − Thực thao tác pha hỗn hợp thuốc thử không kỹ thuật làm cho kết xét nghiệm khơng xác − Lớp mã vạch bình thuốc thử bị bụi phủ nên máy không nhận dạng thuốc thử tới đưa tới cảnh báo − Không thay rotor thuốc thử định kỳ nên phận truyền động làm việc khơng xác − Khơng sử dụng thuốc thử phù hợp với xét nghiệm cần tiến hành − Không thay màng lọc định kỳ − Không tiến hành kiểm tra chất lượng xét nghiệm định kỳ − Không nghiên cứu kỹ tài liệu hướng dẫn sử dụng dẫn tới việc xếp trật tự xét nghiệm không phù hợp gây tình trạng xung đột thời gian làm cho máy bị treo tạm thời − Nguồn nước cấp cho máy không xử lý kỹ làm cho hệ thống ống dẫn bị lắng cặn − Các bình thuốc thử khơng lưu trữ mơi trường thích hợp − Không vệ sinh máy định kỳ Một số lỗi máy: − Máy bị treo xung đột liệu Khi kỹ thuật viên tiến hành đồng thời nhiều loại xét nghiệm với thời gian thực khác nhau, chương trình điều khiển máy bị xung đột liệu dẫn tới trình vận hành máy bị tạm ngừng Vì vậy, nhà sản xuất phải liên tục nâng cấp chương trình phần mềm điều khiển Đây điểm khác biệt hệ thống xét nghiệm miễn dịch hãng − Máy xét nghiệm có nhiều hệ thống truyền động nên hay xảy cố với động bước − Hệ thống trộn vi hạt hoạt động không thông số máy 102    5.3 Một số khuyến nghị khắc phục tình trạng Một vấn đề thường gặp phòng xét nghiệm bệnh viện kỹ thuật viên thường bỏ qua khâu chuẩn máy kiểm tra chất lượng máy Vì vậy, việc nâng cao ý thức sử dụng máy cách khoa học có trách nhiệm với kết vận hành việc cần thiết Xét nghiệm miễn dịch đặc biệt quan trọng kết xét nghiệm có liên quan trực tiếp tới q trình điều trị bệnh nhân Nó liên quan tới vấn đề sức khỏe, tính mạng người bệnh nên cần tuyệt đối tránh sai sót chủ quan Ngồi ra, hệ thống nước cung cấp cho bệnh viện cần nâng cao chất lượng Tại nhiều bệnh viện, máy xét nghiệm thường xuyên bị lỗi phần nguyên nhân thường gặp tượng nước chưa xử lý tốt làm ảnh hưởng tới hệ thống ống dẫn máy, gây tắc nghẽn làm máy vận hành khơng xác chí khơng hoạt động 103    KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Qua trình tìm hiểu nghiên cứu, hướng dẫn tận tình thầy giáo PGS.TS Nguyễn Đức Thuận, tơi hồn thành luận văn với đề tài “Nghiên cứu máy miễn dịch tự động” Luận văn cung cấp nhìn tổng quan phương pháp xét nghiệm miễn dịch ứng dụng hệ thống xét nghiệm miễn dịch đại cấu trúc hoạt động hệ thống Đồng thời sâu vào nghiên cứu hoạt động chi tiết máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas e411, cụ thể thực xét nghiệm TSH Bên cạnh đó, luận văn đưa số chủng loại máy sử dụng số bệnh viện khu vực phía bắc tình hình sử dụng máy Kết đạt Về mặt lý thuyết: ‐ Tìm hiểu, nghiên cứu phương pháp xét nghiệm miễn dịch ‐ Tìm hiểu, nghiên cứu cấu trúc nguyên lý hoạt động hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động ‐ Nghiên cứu máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas e411 Về mặt thực nghiệm: ‐ Xác định quy trình vận hành chi tiết máy xét nghiệm miễn dịch tự động giúp cho nhân viên kỹ thuật xác định lỗi khắc phục cố nhanh chóng ‐ Hỗ trợ kỹ thuật viên vận hành máy tận dụng triệt để chức máy xét nghiệm Cobas e411 Kiến nghị phát triển đề tài luận văn tương lai Cobas e411 bắt đầu sử dụng nhiều số bệnh viện Hà Nội bệnh viện Bạch mai, bệnh viện Giao thông vận tải, bệnh viện Xanh pôn, Bệnh viện Phụ sản trung ương… Trong trình khai thác sử dụng máy, cố thường xảy cấu truyền động Vì vậy, tương lai cần có nghiên cứu cải tiến phận động bước mạch điều khiển để tránh tượng xung đột thời gian máy vận hành chế độ kết hợp 104    TÀI LIỆU THAM KHẢO Huỳnh Đình Chiến (2008), Giáo trình miễn dịch học, Đại học Huế Babson Arthur L., Palmieri Thomas, Babson et al (2004), Vessel agitator assembly, United States Patent Application Publication Ilya Malyarov, Thomas Palmieri, Siemen Healthcare Diagnostics Inc., Ilya Malyarov et al (2004), Rotary luminometer, United States Patent Application Publication Palmieri Thomas, Babson Arthur L., Malyarov Ilya, Stein David, Palmieri et al (2004), Multipath access system for use in an automated immunoassay analyzer, United States Patent Application Publication Stein David, Goetz Marcel J., Das Sanchoy, Stein et al (2004), Controller for automated immunoassay system, United States Patent Application Publication Abbott Diagnostics Division (2009), Immunoassay learning guide Roche Diagnostics (2009), Compendium of background information http://www.biology.arizona.edu 105    ... NGUYÊN LÝ HOẠT ĐỘNG CỦA MÁY XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH TỰ ĐỘNG 44 3.1 Tổng quan máy xét nghiệm miễn dịch tự động 44 3.1.1 Sơ đồ khối tổng quát máy xét nghiệm miễn dịch tự động 44... nghiệm miễn dịch tự động E170 - Roche Hình 5.2 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động Elecsys 2010 Hình 5.3 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động E601 Hình 5.4 Hệ thống xét nghiệm miễn dịch tự động. .. Chương I Đại cương miễn dịch Chương II Các phương pháp xét nghiệm miễn dịch Chương III Nguyên lý hoạt động máy xét nghiệm miễn dịch tự động Chương IV Máy xét nghiệm miễn dịch tự động Cobas e411 Chương