1. Trang chủ
  2. » Khoa Học Tự Nhiên

Nấm

61 655 1
Tài liệu đã được kiểm tra trùng lặp

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Nội dung

Nấm

1Phần 1. MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề Những năm gần đây, ngoài giá trị dinh dưỡng đã được biết đến từ rất lâu, nấm còn được đề cập đến như một nguồn dược liệu quý giá có khả năng chữa trị được nhiều bệnh như nấm linh chi (Ganoderma lucidium), nấm hầu thủ (Hericium enrinaceum)… Khoa học phát triển, dược tính của nấm ngày càng được phát hiện nhiều. Nó có khả năng chữa trị các bệnh về tim mạch, ung thư, nâng cao sức đề kháng của cơ thể… Trong điều kiện khí hậu ở Việt Nam rất thích hợp cho việc nuôi trồng các loại nấm, vừa tận dụng những thuận lợi có sẵn vừa tạo ra nguồn nguyên liệu phục vụ cho nhu cầu chữa bệnh trong nước. Do đó việc tìm ra phương pháp cũng như môi trường nuôi trồng thích hợp đối với từng loại nấm để đạt được hoạt tính nhiều nhất là điều cần thiết. Người ta biết đến hiệu quả chữa bệnh của nấm vân chi thông qua hai hợp chất chính trích từ nấm này là PSP (polysaccharide peptide) và PSK (polysaccharide Kureha). Các chất này được coi là có khả năng chữa trị ung thư, tăng miễn dịch cơ thể, chống các phản ứng phụ của xạ trị và hoá trị, ức chế sự nhân lên của HIV… Nhưng hiện nay, ở Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu về vân chi và ngành trồng nấm vân chi lại chưa phát triển. Trong khi đó ở Nhật và các nước khác đã có rất nhiều sản phẩm thương mại từ vân chi. Các biệt dược bào chế từ nấm vân chi Trametes versicolor đứng đầu trong 10 loại thuốc chống ung thư được tiêu thụ mạnh nhất tại thị trường Nhật Bản, với doanh số năm 1991 đạt tới 358 triệu USD, vượt xa cả Tamoxifen, interferon, cis-Blastin. Những sản phẩm thương mại từ PSP và PSK chiếm 25% thị phần ở thị trường Nhật (1991). Với mong muốn phát triển hơn nữa khả năng nuôi trồng và ứng dụng nấm vân chi trong ngành dược phẩm, chúng tôi thực hiện đề tài: Khảo sát sinh trưởng một chủng nấm vân chi đen Trametes versicolor có nguồn gốc từ Trung Quốc. 2 1.2. Mục đích đề tài 9 Khảo sát môi trường nhân giống cấp một, cấp hai thích hợp cho hệ sợi nấm tăng trưởng tốt. 9 Khảo sát sự tăng sinh khối nấm trong môi trường lỏng trên các môi trường với thành phần dinh dưỡng khác nhau, thu lấy sinh khối và ly trích, định lượng hợp chất chính trong sợi nấm. 9 Khảo sát môi trường nuôi trồng quả thể và quan sát khả năng ra quả thể của nấm vân chi trong điều kiện TpHCM. 1.3. Yêu cầu 9 Tìm ra môi trường nhân giống cấp một, nhân giống cấp hai thích hợp nhất đối với sự phát triển của hệ sợi nấm vân chi. 9 Tìm ra môi trường có sinh khối phát triển mạnh nhất, kinh tế nhất và có hàm lượng dược chất nhiều nhất. 9 Xác định điều kiện, môi trường nuôi trồng quả thể thích hợp. 1.4. Hạn chế đề tài 9 Do giới hạn về trang thiết bị, hoá chất nên không xác định được hết các thành phần dược chất có trong nấm cũng như không tinh khiết được hợp chất trích mà chỉ dừng lại ở mức định lượng hợp chất thô trích từ nấm. 9 Trong quá trình nuôi trồng, chỉ thu được một số quả thể, chưa đủ để đánh giá năng suất của nấm vân chi trên các nghiệm thức nuôi trồng ra quả thể. 3Phần 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. Khái quát về nấm trồng 2.1.1. Giới thiệu sơ lược [2],[8],[17], [18], [30] Tất cả sinh vật sống đều thuộc một trong năm giới. Nấm thuộc một giới riêng gọi là giới nấm (theo hệ thống phân loại của R.H. Whitaker, 1969). Nấm bao gồm cả nấm mốc, nấm men và các loài nấm lớn có quả thể. Nấm không quang hợp được. Do đó nó bắt buộc phải sống trên những chất hữu cơ hoại mục hoặc sống nhờ các động thực vật khác. Nấm là sinh vật hoại sinh, phân huỷ các chất hữu cơ để lấy chất dinh dưỡng. Nấm dinh dưỡng bằng cách tiến hành sự hấp thụ thức ăn trên toàn bộ bề mặt của sợi nấm thông qua phương thức thẩm thấu. Trong trường hợp nấm dinh dưỡng bằng những chất hữu cơ cần thiết đã có sẵn gọi là dị dưỡng (heterotrophe); bằng những chất hữu cơ chết gọi là hoại sinh (saprophyte). Nấm sử dụng các mô sống để dinh dưỡng gọi là ký sinh (parasite). Trong tự nhiên, nấm đóng một vai trò quan trọng, là máy tái chế sơ cấp. Chúng tạo ra các enzyme để phân huỷ vật chất hữu cơ (thường là các cấu tử gỗ). Phần lớn nấm có khả năng sản sinh ra các enzyme phá huỷ nguyên liệu thực vật thuộc lớp nấm túi (Ascomycetes) và nấm đảm (Basidiomycetes). Nấm cư trú trên gỗ đã chết chủ yếu phân hủy một hoặc nhiều cấu tử gỗ, gây mục mạnh. Hiện nay khoá phân loại nấm hiện đại bao gồm các ngành và ngành phụ như sau: • Ngành nấm nhày (Myxomycota) • Ngành nấm thật (Eumycota) 9 Ngành phụ Nấm tiên mao (Mastigomycotina) 9 Ngành phụ Nấm tiếp hợp (Zygomycotina) 9 Ngành phụ Nấm túi (Ascomycotina) 9 Ngành phụ Nấm đảm (Basidiomycotina) 9 Ngành phụ Nấm bất toàn (Deuteromycotina) 42.1.2. Giá trị của nấm [27],[29],[30],[33] Nấm từ rất lâu đã được biết đến như là một nguồn thức ăn dinh dưỡng giàu đạm, chất xơ, vitamin và tất cả những chất cần thiết cho sự tăng trưởng, phát triển, và sự sống của một người khoẻ mạnh. Từ hàng ngàn năm qua, ở châu Á, cả nấm ăn được và nấm không ăn được đều được sử dụng vì mục đích dinh dưỡng, bồi bổ khí huyết hoặc làm thuốc. Người ta dùng tất cả các bộ phận của nấm. Ngoài giá trị dinh dưỡng, nấm còn có khả năng phòng và trị một số bệnh. Càng ngày người ta càng phát hiện ra nhiều dược chất có tính miễn dịch từ nấm. Quá trình tìm kiếm dược phẩm miễn dịch đã diễn ra ở châu Á (nhất là các nước Trung Quốc, Nhật Bản) từ rất lâu nhưng ở Phương Tây còn chưa chú trọng lắm. Dược phẩm miễn dịch có thể được xem như là chất có hiệu quả trong liệu pháp miễn dịch khi uống vào. Có hơn 50 loài nấm được xếp vào dạng nấm dược liệu có hoạt tính chữa bệnh in vitro hay trên các mẫu động vật thí nghiệm. Một số chất trích từ nấm được phát hiện có hoạt tính tăng cường hệ miễn dịch tiềm năng, hoạt tính miễn dịch chống lại tế bào ung thư hơn hẳn các hoá dược kháng ung thư. Tất cả đều không độc, hiệu quả và rất dễ dung nạp. Nổi bậc nhất có 6 nhóm chất sau: Lentinan, AHCC (trích từ nấm hương Lentinus edodes), Schizophyllan (Nấm chân chim Schizophyllum commune), Grifron-D (Nấm gà gỗ Grifola frondosa), PSP, PSK ( Nấm vân chi Trametes versicolor). Các dịch trích chủ yếu được chiết từ quả thể nấm và sinh khối từ hệ sợi (nuôi cấy lên men trong môi trường lỏng). Cả thành phần tế bào và các hợp chất biến dưỡng thứ cấp của nấm đều có tác dụng trên hệ miễn dịch của tế bào chủ và do đó có thể chữa được nhiều bệnh khác nhau. Hướng kết hợp các tác nhân có tiềm năng miễn dịch với các liệu pháp chống ung thư như giải phẫu, hoá trị, xạ trị đã đạt được bước tiến đáng kể ở Trung Quốc, Nhật Bản nơi mà nấm được xem như một nguồn kháng ung thư hàng thế kỷ qua. 2.2. Tổng quan về nấm vân chi Trametes versicolor (L.:Fr) Pilat 2.2.1. Giới thiệu về nấm vân chi: tên gọi và vị trí phân loại Vân chi có nhiều tên gọi rất khác nhau. Tên tiếng Anh là Turkey tail (đuôi gà tây). Ở Trung Quốc, người ta gọi là “Yunzhi” có nghĩa là loại nấm có hình dạng như 5mây. Người Nhật thì gọi là “Karawatake” do người ta hay tìm thấy chúng ở những nơi gần bờ sông. [19] , [22] Vân chi có tên khoa học phổ biến hiện nay là Trametes versicolor sau một thời gian dài được nghiên cứu và đặt tên khác nhau. Trametes versicolor (L.:Fr) Pilat, tức là loài Coriolus versicolor (L.:fr) Quél, được chính Carl von Linnaeus tìm ra và đặt tên đầu tiên: Boletus versicolor L. (1753). Sau đó Christiaan Hendrik Persoon (1805) lại xác định với tên Boletus vulutinus Pers., và Elias Magnus Fries (1821) đưa vào chi Polyporus (với hai loài: P. versicolor Fr và P. Vulutinus Fr). Lucien Quélet (1886) lại đưa vào Coriolus. Sau 50 năm, Abert Pilát (1936) đề nghị và được đa số các nhà nấm học thống nhất xếp vào chi Trametes, họ polyporacea. Các hệ thống phân loại về sau cũng phù hợp với quan điểm trên, nên hầu hết những tác giả gần đây đều sử dụng danh pháp đã chỉnh lý: Trametes versicolor.[14] Vân chi là một loại nấm lớn thuộc phân lớp Basidiomycetes gồm khoảng 22 000 loài đã biết. Nấm vân chi gây hoại sinh cây bệnh, cư trú trên gỗ đã chết, thuộc loại nấm gây mục trắng mạnh có thể phá huỷ đồng thời tất cả các cấu tử gỗ (hemicellulose, cellulose, lignin), giúp phá vỡ các gốc cây già, cây chết vì thế chất dinh dưỡng của cây sẽ trở về đất để tái sử dụng. Nấm vân chi không độc đối với người nhưng cũng không ăn được vì nó là dạng nấm gỗ. [14], [18] Vị trí phân loại nấm vân chi [1],[3],[7],[12], [17] Giới nấm : Fungi Ngành nấm thật : Eumycota Ngành phụ nấm đảm : Basidiomycotina Lớp nấm đảm : Basidiomycetes Phân lớp nấm đảm đơn bào : Holobasidiomycetidae Nhóm bộ : Hymenomycetes Bộ nấm lỗ : Aphyllophorales Họ nấm nhiều lỗ : Polyporaceae Chi : Trametes Loài : Trametes versicolor 62.2.2. Đặc điểm hình thái cấu tạo của Trametes versicolor [3],[14],[19],[22], [31] Hình 2.1: Quả thể nấm vân chi Trametes versicolor Vân chi là loại nấm hàng năm, không cuống, phát triển một bên. Khi non quả thể có dạng nhiều u lồi tròn, mọc thành dạng vành với mép tán màu trắng-trắng kem. Nấm trưởng thành có dạng quả giá, chất da hoá gỗ. Quả thể hình nan quạt có nhiều vân đồng tâm, chồng chất xen kẽ nhau như ngói lợp, nhìn rất giống đuôi gà tây đang xòe. Mũ nấm mỏng, phẳng hoặc hơi quăn hình bán nguyệt, mọc thành cụm kích thước 1 – 6 x 1 – 10 cm. Mặt trên tai nấm có lớp lông mịn, mền như nhung, có màu sắc rất khác nhau tùy chủng từ đen, nâu, xám, xanh đến đo đỏ, trắng hay vàng nhạt. Màu sắc các chủng vân chi phụ thuộc vào môi trường và hệ di truyền. Mặt dưới tai nấm màu trắng, màu kem hay hơi xám có hàng ngàn ống nhỏ. Tất cả các chủng vân chi đều có các ống nhỏ ở mặt dưới, đây là đặc điểm giúp phân biệt vân chi với nấm Stereum hissutum. Các ống này rất nhỏ khoảng 4 – 5 ống/mm, có vách ngăn ngang dày. Miệng ống tròn hay hơi tròn. Các ống này giúp gia tăng diện tích mang bào tử. Thịt nấm màu trắng hoặc trắng kem, gồm nhiều sợi dày 0,6 – 2,5 mm. 2.2.3. Đặc điểm vi học [14], [21] Hệ sợi kiểu trimitic, sợi dinh dưỡng trong suốt, có vách mỏng, có khoá rõ ràng, đường kính cỡ 2,5 – 3 µm; sợi cứng ở vùng thịt nấm có vách rất dày, không thấy có vách ngăn tế bào, đường kính tới 4 – 6 µm, rất hiếm khi thấy phân nhánh; sợi bện cũng có vách ngăn ngang, đường kính sợi nhỏ hơn (2 – 4 µm). Không thấy có liệt bào, song 7có thấy cystidioles dạng fusoid, kích thước 15 – 20 x 4 – 5 µm, có khoá ở phần gốc. Đảm bào hình chùy có bốn tiểu bính (nơi đính của bốn bào tử), có khoá ở phần gốc. Bào tử đảm hình trụ, hơi cong hình quả dưa gang, trong suốt, nhẵn, kích thước 5 – 6 x 1,5 – 2 µm. 2.2.4. Đặc điểm phân bố [19],[22], [25], [34] Vân chi là loại nấm phá gỗ, mọc hoang, thường mọc trên các cây thân gỗ đã chết hoặc khô, đặc biệt là gỗ sồi, dễ dàng tìm thấy ở nhiều nơi trên thế giới. Vân chi thích hợp đối với những nơi có nhiều mưa, ẩm ướt, gần bờ sông… ở vùng ôn đới Bắc Mỹ, châu Á, châu Âu và là loại nấm sinh sản nhiều nhất ở Bắc Bán Cầu. Ở Việt Nam cũng tìm thấy nấm này, nhất là vào mùa mưa. Nhật, Trung Quốc và một vài nước khác đang trồng và chiết xuất PSP, PSK từ vân chi. Ở Việt Nam, TS Lê Xuân Thám (Trung tâm kỹ thuật hạt nhân TpHCM) đã mang một giống chuẩn từ Nhật về, đây là loại mặt trên tai nấm có những vân đồng tâm nâu đen đến đen. Hiện nay giống này đang được trồng thử trên Đà Lạt và cũng được Trung tâm nghiên cứu linh chi và nấm dược liệu TpHCM trồng thử nghiệm trong điều kiện khí hậu của thành phố, đã ra quả thể (tai nấm) tại TpHCM. 2.2.5. Chu trình sống [3] Tầng đảm Đảm Kết hợp nhân ở đảm Hình thành bào tử đảm Quả thể Sợi nấm song hạch Bào tử đảm nảy mầm Sự kết hợp sơ cấp Sơ đồ 2.1: Chu trình phát triển của nấm vân chi 82.2.6. Quy trình nuôi trồng nấm [3],[12],[13] 2.2.6.1. Chọn dòng và giữ giống Gọt sạch chất bẩn bám ở chân Rửa dung dịch chlorine 1% Rửa nước vô trùng 3 lần Đặt lên giấy Lau cồn Tách đôi Tách thịt ấTai nấm Mô thịt Bào tửNgâm nước vô trùng 4 giờ Cấy truyền lên môi trường thạch nghiêng hoặc thạch đĩa Petri. Nuôi ủ ở nhiệt độ phòng Kiểm tra tạp nhiễmGiống gốcGiữ giống Nhân giống cho sản xuấtGiá thể có hệ sợi Sơ đồ 2.2: Quy trình phân lập tổng quát Có nhiều cách để phân lập nấm để tạo giống gốc nhưng hiệu quả nhất là phân lập từ quả thể. Vì đây là phương pháp nhân giống vô tính. Trong khi tách hệ sợi nấm thì không rõ có đúng là nấm cần phân lập hay nấm mốc hoặc nấm dại khác. Còn dùng bào tử nấm cũng không đơn giản vì đây là giai đoạn sinh sản hữu tính, nên nấm hình thành có thể thay đổi đặc tính. Ngoài ra, phương pháp phân lập từ quả thể hạn chế được hiện tượng bị lẫn hay nhiễm tạp các loại vi sinh vật khác vì sử dụng trực tiếp các mô thịt nấm. Nguyên tắc của phương pháp này là chọn tai nấm điển hình và ở giai đoạn trưởng thành, để dễ đánh giá chất lượng giống. Mô thịt nấm tách ở những vị trí kín đáo, ít tiếp xúc với các nguồn bệnh nhất. Môi trường phân lập thường là môi trường dinh dưỡng bao gồm ba thành phần cơ bản. 9 Đường: glucose hay saccharose với liều lượng 2 – 3 %. 9 Thạch: 2%. 99 Chất bổ sung: nước chiết (lấy từ các nguồn tự nhiên như khoai tây, nước giá, carot…) và hóa chất (chủ yếu gồm các khoáng N, P, K, Mg…). Khi có được giống thuần, cấy sợi nấm từ môi trường phân lập vào ống nghiệm chứa môi trường thạch nghiêng để giữ giống. Môi trường giữ giống có thể giống môi trường phân lập. Khi giữ giống, bảo quản ống nghiệm trong tủ lạnh ở nhiệt độ 4 – 10oC và mỗi tháng cấy lại một lần. Ở các cơ quan giữ giống cấp nhà nước các giống nấm phải được giữ trong nitơ lỏng (-195oC) hoặc dùng phương pháp đông khô hay các phương pháp khác để bảo quản lâu dài và giữ ổn định được hoạt chất từng giống. 2.2.6.2. Quy trình nhân giống cấp một và cấp hai Giống cấp một: là các ống thạch nghiêng được cấy từ các ống nấm đã phân lập, thuần khiết và được cấy truyền sang nhiều ống để làm giàu lượng giống thuần. Giống cấp hai: là giống được cấy hệ sợi từ môi trường cấp một vào trong các chai thuỷ tinh hay các túi chất dẻo có miệng là ống nhựa có nút bằng nút bông mỡ. Giống cấp hai có thể chế tạo bằng nhiều công thức khác nhau. Tất cả đều là môi trường xốp với nguyên liệu chính là ngũ cốc, cám, mùn cưa và có thể bổ sung một số chất dinh dưỡng khác. Bảo quản giống cấp hai được thực hiện ở nhiệt độ phòng (29 ± 2oC). 2.2.6.3. Quy trình nuôi trồng ra quả thể Giá thể nuôi trồng nấm rất đa dạng: mùn cưa, gỗ khúc hay các nguồn phế phẩm nông nghiệp như cùi bắp, bã mía, rơm rạ… 10 Mùn cưa bổ sung dinh dưỡng Phối trộn Ẩm độ: 62 – 65%Chai nhựa (thủy tinh), bao PP,PE Phân lập Giống gốc MT thạchKhử trùng Túi phôi, chai phôi Nhân giống Giống sản xuất MT hạtCưa khúc Gỗ khúc Cấy giống Cấy giống Ủ tối 21 – 26oCPha sợi hoàn chỉnhPhòng tưới Nhiệt độ: 15 – 24oC Độ ẩm: 85 – 95% Ánh sáng: 100 – 25 lux Hệ sợi lan kín giá thể Quả thể Hệ sợi lan kín giá thểQuả thể Thu hoạch chế biến Bảo quản Thu hoạch chế biến Bảo quản Cây gỗ mềm Quả thể nấm Sơ đồ 2.3: Quy trình nuôi trồng nấm a. Quy trình nuôi trồng trên gỗ khúc Cây gỗ chặt hạ, bỏ cành, cưa thành khúc 80 – 120 cm, mặt cắt quét vôi, chất đóng ủ khoảng 1 tháng. Sau đó tiến hành các bước sau: 9 Cấy giống Giống sản xuất là giống hỗn hợp mùn cưa, cám, bột bánh dầu, hạt ngũ cốc… Dùng búa hoặc khoan đột những hàng lỗ so le, đường kính 1 – 1,5 cm dọc theo khúc gỗ, cách nhau 5 cm, sâu 3 – 5 cm. [...]... 25 – 30oC Sau 15 – 20 ngày, kiểm tra sự lan tỏa của sợi nấm và chuyển sang ủ trong đất với cát Tưới phun giữ ẩm trong khoảng 30 ngày Vùi đất Chỉ có linh chi mới vùi đất, còn vân chi và một số nấm khác người ta đem vào nhà tưới tiếp tục tưới phun cho đến khi xuất hiện quả thể Các khúc gỗ được cưa thành đoạn 15 – 20 cm (có thể kiểm tra thấy hệ sợi nấm lan trắng mặt gỗ) Vùi cắm các khúc gỗ xuống nền đất... sợi sẽ lan hầu khắp giá thể Tưới đón nấm Hệ sợi bắt đầu bện kết sau 25 – 30 ngày Tại thời điểm này, cần chuyển túi (chai) vào nhà trồng có ánh sáng khuếch tán nhẹ, nhiệt độ hạ thấp 21oC ± 3oC Có thể vùi đất, treo, xếp trên giàn kệ, mở nút túi cho mầm nấm vươn ra dễ dàng Duy trì độ ẩm phòng nuôi cấy ở 80 – 90% Thông thoáng phòng nuôi cho quả thể lớn Tuỳ theo loài nấm mà thời gian thu hoạch thay đổi từ... trồng trên giá thể tổng hợp hay trên gỗ khúc, người ta còn tiến hành thu sinh khối nấm trong các nồi lên men Hiện nay nhiều xí nghiệp dược phẩm đã sản xuất sinh khối nấm vân chi theo phương pháp lên men chìm trong các nồi lên men với các thông số kỹ thuật sau: Môi trường sử dụng: bột khô dầu đậu tương (1%), glucose (3%), bột nấm men khô (0,2%), (NH4)2SO4 (0,25%), MgSO4 (0,05%), KH2PO4 (0,1%), dầu đậu tương... khí vô trùng: 1:0,3 – 1:0,5 (V/V.min) 13 Thời gian lên men: khoảng 48 giờ 2.2.7 Giá trị dược tính của nấm vân chi [3], [19],[25], [27] Đã có hơn 400 khảo cứu về thành phần hoá học, dược lý lâm sàng nấm vân chi công bố khắp thế giới Trong cuốn “Dược vật học” đời nhà Minh (Trung Quốc) ghi lại rằng: Nấm vân chi đen và lục bồi bổ khí huyết, tăng năng lượng cuộc sống, và nó còn có tác dụng làm vững gân... chứng rối loại nhịp tim, điều khiển nồng độ đường trong máu Ở châu Á, nấm được dùng chung với các thành phần thảo mộc khác để chữa trị ung thư Các báo cáo từ những năm 1960 đã cho thấy lợi ích về sức khỏe trong điều trị ung thư dạ dày khi uống trà “Saruno-koshikake” có chứa nấm vân chi Trametes versicolor Nghiên cứu đã chỉ ra rằng nấm này có hoạt tính kháng khuẩn, kháng virus và kháng khối u Ngày nay,... rất nhiều so với các glucan tương ứng không kết hợp với protein Hình 2.2: Cấu trúc chuỗi beta-glucan trích từ nấm (Kidd, 2000) 2.4 Thành phần dược tính chính trích từ nấm vân chi [25], [28], [33], [34] Vào khoảng năm 1965, ở Nhật, một kỹ sư hoá học đã khám phá ra thành phần trị ung thư của nấm vân chi sau khi ông này quan sát thấy người hàng xóm mắc bệnh ung thư hiểm nghèo đã được chữa khỏi sau khi... 3.1.2 Địa điểm Trung tâm nghiên cứu Linh chi và Nấm dược liệu – Công ty cổ phần dược liệu TW2 thành phố Hồ Chí Minh Phòng vi sinh - Bộ môn Công Nghệ sinh Học - Trường đại học Nông Lâm TpHCM 3.2 Nguyên liệu, dụng cụ, thiết bị, hoá chất 3.2.1 Nguyên liệu Nấm vân chi đen Trametes versicolor có nguồn gốc từ Trung Quốc do Trung tâm nghiên cứu Linh chi và nấm dược liệu thuộc Công ty cổ phần Dược Liệu TW2... tử Lấy cốc thuỷ tinh có đựng nước (không đầy đến miệng cốc), đặt quả thể nấm lên trên (quả thể nấm phải lớn hơn đường kính cốc) hướng lớp bào tầng về phía miệng cốc, để nơi kín gió Sau 1 – 2 ngày, lấy bào tử có trong cốc, quan sát dưới kính hiển vi vật kính X40 và chụp hình 3.3.2 Khảo sát đặc điểm dinh dưỡng, sinh lý của hệ sợi nấm vân chi trên môi trường thạch 3.3.2.1 Khảo sát tốc độ lan của hệ sợi... thuốc thử ninhydrin và các chất khác được dùng làm phản ứng phát hiện trong các phương pháp phân tích acid amin Trong nấm vân chi có các acid amin chủ yếu như: glutamic, aspartic và một số acid amin dạng trung hoà 2.3.3 Chuỗi liên kết β-D-glucan [27] [32] Các proteoglycan trích từ nấm vân chi chủ yếu là liên kết β-D-glucan Cấu trúc βD-glucan là một cấu trúc lập lại, gồm nhiều phân tử D-glucose nối... từ nấm) với hoá trị hay xạ trị sẽ làm tăng tỉ lệ sống còn của bệnh nhân ung thư và làm giảm các triệu chứng do hoá trị hay xạ trị gây ra Các hợp chất trích từ vân chi rất an toàn khi sử dụng, không có phản ứng phụ, không độc Chỉ tìm thấy một biểu hiện nhỏ khi sử dụng PSK là nó làm đen các đầu ngón tay ở một số rất ít bệnh nhân chịu tác dụng điều trị (khoảng 4/77 người mắc phải) Một số biệt dược của nấm . năm giới. Nấm thuộc một giới riêng gọi là giới nấm (theo hệ thống phân loại của R.H. Whitaker, 1969). Nấm bao gồm cả nấm mốc, nấm men và các loài nấm lớn. có đúng là nấm cần phân lập hay nấm mốc hoặc nấm dại khác. Còn dùng bào tử nấm cũng không đơn giản vì đây là giai đoạn sinh sản hữu tính, nên nấm hình thành

Ngày đăng: 05/11/2012, 13:59

Xem thêm

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

2.2.2. Đặc điểm hình thái cấu tạo của Trametes versicolor [3],[14],[19],[22], [31] - Nấm
2.2.2. Đặc điểm hình thái cấu tạo của Trametes versicolor [3],[14],[19],[22], [31] (Trang 6)
Hình 2.1: Quả thể nấm vân chi Trametes versicolor - Nấm
Hình 2.1 Quả thể nấm vân chi Trametes versicolor (Trang 6)
Sơ đồ 2.2: Quy trình phân lập tổng quát - Nấm
Sơ đồ 2.2 Quy trình phân lập tổng quát (Trang 8)
Sơ đồ 2.3: Quy trình nuôi trồng nấm  a.  Quy trình nuôi trồng trên gỗ khúc - Nấm
Sơ đồ 2.3 Quy trình nuôi trồng nấm a. Quy trình nuôi trồng trên gỗ khúc (Trang 10)
Bảng 2.1: Kết quả phân tích sơ bộ thành phần hoá thực vật - Nấm
Bảng 2.1 Kết quả phân tích sơ bộ thành phần hoá thực vật (Trang 14)
Bảng 2.1: Kết quả phân tích sơ bộ thành phần hoá thực vật - Nấm
Bảng 2.1 Kết quả phân tích sơ bộ thành phần hoá thực vật (Trang 14)
Hình 2.2: Cấu trúc chuỗi beta-glucan trích từn ấm (Kidd, 2000) 2.4. Thành phần dược tính chính trích từ nấm vân chi  [25], [28], [33] ,  [34] - Nấm
Hình 2.2 Cấu trúc chuỗi beta-glucan trích từn ấm (Kidd, 2000) 2.4. Thành phần dược tính chính trích từ nấm vân chi [25], [28], [33] , [34] (Trang 18)
Hình 2.2: Cấu trúc chuỗi beta-glucan trích từ nấm (Kidd, 2000)  2.4. Thành phần dược tính chính trích từ nấm vân chi  [25], [28],  [33],  [34] - Nấm
Hình 2.2 Cấu trúc chuỗi beta-glucan trích từ nấm (Kidd, 2000) 2.4. Thành phần dược tính chính trích từ nấm vân chi [25], [28], [33], [34] (Trang 18)
hình, không ảnh hưởng đến sinh sản.  - Nấm
h ình, không ảnh hưởng đến sinh sản. (Trang 24)
Bảng 3.1: Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong mùn cưa (%)[11] - Nấm
Bảng 3.1 Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong mùn cưa (%)[11] (Trang 31)
Bảng 3.2: Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong các loại bột (%)[11]                    Bột  - Nấm
Bảng 3.2 Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong các loại bột (%)[11] Bột (Trang 31)
Bảng 3.3: Hàm lượng khoáng trong nước dừa (Vanderberlt, 1954) - Nấm
Bảng 3.3 Hàm lượng khoáng trong nước dừa (Vanderberlt, 1954) (Trang 31)
Bảng 3.1: Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong mùn cưa (%)[11] - Nấm
Bảng 3.1 Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong mùn cưa (%)[11] (Trang 31)
Bảng 3.2: Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong các loại bột (%) [11] - Nấm
Bảng 3.2 Hàm lượng khoáng đa lượng cơ bản trong các loại bột (%) [11] (Trang 31)
Sơ đồ 3.2: Quy trình  ly trích hợp chất thô từ nấm vân chi [16],  [20] - Nấm
Sơ đồ 3.2 Quy trình ly trích hợp chất thô từ nấm vân chi [16], [20] (Trang 37)
4.1.1. Hình thái cấu tạo quả thể - Nấm
4.1.1. Hình thái cấu tạo quả thể (Trang 39)
Hình 4.1: Quả thể nấm Vân chi đen Trametes versicolor (theo chiều từ trên xuống,  trái qua phải: Hình 4.1a, Hình 4.1b, Hình 4.1c, Hình 4.1d ) - Nấm
Hình 4.1 Quả thể nấm Vân chi đen Trametes versicolor (theo chiều từ trên xuống, trái qua phải: Hình 4.1a, Hình 4.1b, Hình 4.1c, Hình 4.1d ) (Trang 39)
Hình 4.2: Hệ sợi trích từ quả thể nấm vân chi 4.1.2. Hình thái cấu tạo hệ sợi hệ sợi thứ cấ p   - Nấm
Hình 4.2 Hệ sợi trích từ quả thể nấm vân chi 4.1.2. Hình thái cấu tạo hệ sợi hệ sợi thứ cấ p (Trang 40)
Hình 4.2: Hệ sợi trích từ quả thể nấm vân chi  4.1.2. Hình thái cấu tạo hệ sợi hệ sợi thứ cấp - Nấm
Hình 4.2 Hệ sợi trích từ quả thể nấm vân chi 4.1.2. Hình thái cấu tạo hệ sợi hệ sợi thứ cấp (Trang 40)
Hình 4.3: Hệ sợi vân chi lấy từ môi trường thạch - Nấm
Hình 4.3 Hệ sợi vân chi lấy từ môi trường thạch (Trang 41)
Hình 4.3: Hệ sợi vân chi lấy từ môi trường thạch - Nấm
Hình 4.3 Hệ sợi vân chi lấy từ môi trường thạch (Trang 41)
Hình 4.4: Bào tử nấm vân chi - Nấm
Hình 4.4 Bào tử nấm vân chi (Trang 42)
Bảng 4.1: Đường kính hệ sợi lan trên 5 môi trường theo thời gian - Nấm
Bảng 4.1 Đường kính hệ sợi lan trên 5 môi trường theo thời gian (Trang 42)
Hình 4.4: Bào tử nấm vân chi - Nấm
Hình 4.4 Bào tử nấm vân chi (Trang 42)
Bảng 4.1: Đường kính hệ sợi lan trên 5 môi trường theo thời gian - Nấm
Bảng 4.1 Đường kính hệ sợi lan trên 5 môi trường theo thời gian (Trang 42)
Hình 4.5: Đường kính hệ sợi tăng trưởng trên các môi trường dinh dưỡng sau 4 ngày cấy  - Nấm
Hình 4.5 Đường kính hệ sợi tăng trưởng trên các môi trường dinh dưỡng sau 4 ngày cấy (Trang 43)
Hình 4.5: Đường kính hệ sợi tăng trưởng trên các môi trường dinh dưỡng sau 4  ngày cấy - Nấm
Hình 4.5 Đường kính hệ sợi tăng trưởng trên các môi trường dinh dưỡng sau 4 ngày cấy (Trang 43)
Bảng 4.2: Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở hai mức nhiệt độ theo thời gian        - Nấm
Bảng 4.2 Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở hai mức nhiệt độ theo thời gian (Trang 44)
Bảng 4.2: Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở hai mức nhiệt  độ theo  thời gian - Nấm
Bảng 4.2 Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở hai mức nhiệt độ theo thời gian (Trang 44)
Bảng 4.3: Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở các pH khác nhau theo thời gian  - Nấm
Bảng 4.3 Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở các pH khác nhau theo thời gian (Trang 45)
Hình 4.6: Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở 27oC và 30oC vào ngày thứ 4 - Nấm
Hình 4.6 Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở 27oC và 30oC vào ngày thứ 4 (Trang 45)
Hình 4.6: Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở 27 o C và 30 o C vào ngày  thứ 4 - Nấm
Hình 4.6 Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở 27 o C và 30 o C vào ngày thứ 4 (Trang 45)
Bảng 4.3: Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở các pH khác nhau theo  thời gian - Nấm
Bảng 4.3 Đường kính hệ sợi lan trên môi trường BTH ở các pH khác nhau theo thời gian (Trang 45)
Hình 4.7: Đường kính hê sợi lan trên môi trường BTH ở các pH vào ngày thứ 4 4.3. Khảo sát môi trường nhân giống cấp hai (môi trường hạt)  - Nấm
Hình 4.7 Đường kính hê sợi lan trên môi trường BTH ở các pH vào ngày thứ 4 4.3. Khảo sát môi trường nhân giống cấp hai (môi trường hạt) (Trang 46)
Bảng 4.4: Chiều dài hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống cấp hai - Nấm
Bảng 4.4 Chiều dài hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống cấp hai (Trang 46)
Bảng 4.4: Chiều dài hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống cấp hai - Nấm
Bảng 4.4 Chiều dài hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống cấp hai (Trang 46)
Hình 4.7: Đường kính hê sợi lan trên môi trường BTH ở các pH vào ngày thứ 4  4.3. Khảo sát môi trường nhân giống cấp hai (môi trường hạt) - Nấm
Hình 4.7 Đường kính hê sợi lan trên môi trường BTH ở các pH vào ngày thứ 4 4.3. Khảo sát môi trường nhân giống cấp hai (môi trường hạt) (Trang 46)
Bảng 4.5: Tỉ lệ xuất hiện hệ sợi trên các môi trường nuôi trồng - Nấm
Bảng 4.5 Tỉ lệ xuất hiện hệ sợi trên các môi trường nuôi trồng (Trang 48)
Hình 4.8: Hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống trung gian sau 7 ngày cấy 4.4. Khảo sát môi trường nuôi trồng ra quả thể - Nấm
Hình 4.8 Hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống trung gian sau 7 ngày cấy 4.4. Khảo sát môi trường nuôi trồng ra quả thể (Trang 48)
Bảng 4.5: Tỉ lệ xuất hiện hệ sợi trên các môi trường nuôi trồng - Nấm
Bảng 4.5 Tỉ lệ xuất hiện hệ sợi trên các môi trường nuôi trồng (Trang 48)
Hình 4 .8: Hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống trung gian sau 7 ngày cấy  4.4. Khảo sát môi trường nuôi trồng ra quả thể - Nấm
Hình 4 8: Hệ sợi lan trên các môi trường nhân giống trung gian sau 7 ngày cấy 4.4. Khảo sát môi trường nuôi trồng ra quả thể (Trang 48)
Sinh khối thu được từ 3 loại môi trường nuôi cấy lỏng được trình bày ở Bảng 4.6 - Nấm
inh khối thu được từ 3 loại môi trường nuôi cấy lỏng được trình bày ở Bảng 4.6 (Trang 49)
Bảng 4.6: Sinh khối nấm vân chi trên môi 3 trường lỏng - Nấm
Bảng 4.6 Sinh khối nấm vân chi trên môi 3 trường lỏng (Trang 49)
Hình 4.9: Sinh khối nấm vân chi trong 3 môi trường lỏng - Nấm
Hình 4.9 Sinh khối nấm vân chi trong 3 môi trường lỏng (Trang 50)
Hình 4.9: Sinh khối nấm vân chi trong 3 môi trường lỏng - Nấm
Hình 4.9 Sinh khối nấm vân chi trong 3 môi trường lỏng (Trang 50)
Bảng 4.7: Sinh khối vân chi trên các môi trường bổ sung dinh dưỡng tự nhiên - Nấm
Bảng 4.7 Sinh khối vân chi trên các môi trường bổ sung dinh dưỡng tự nhiên (Trang 51)
Bảng 4.8: Tỉ lệ polysaccharide thô trích từ sinh khối thu được trên 3 môi trường - Nấm
Bảng 4.8 Tỉ lệ polysaccharide thô trích từ sinh khối thu được trên 3 môi trường (Trang 52)
Bảng 4.9: Tỉ lệ hợp chất polysacharide thô trích từ sinh khối nấm vân chi thu được trong 10 môi trường nuôi cấy lỏng  - Nấm
Bảng 4.9 Tỉ lệ hợp chất polysacharide thô trích từ sinh khối nấm vân chi thu được trong 10 môi trường nuôi cấy lỏng (Trang 53)
Bảng 4.9: Tỉ  lệ  hợp chất polysacharide thô trích từ sinh khối nấm vân chi thu  được trong 10 môi trường nuôi cấy lỏng - Nấm
Bảng 4.9 Tỉ lệ hợp chất polysacharide thô trích từ sinh khối nấm vân chi thu được trong 10 môi trường nuôi cấy lỏng (Trang 53)
Bảng 4.10: Khối lượng polysaccharide thô trích được từ sinh khối nấm trong 1 lít môi trường  - Nấm
Bảng 4.10 Khối lượng polysaccharide thô trích được từ sinh khối nấm trong 1 lít môi trường (Trang 55)
Bảng 4.10: Khối lượng polysaccharide thô trích được từ sinh khối nấm trong  1 lít môi trường - Nấm
Bảng 4.10 Khối lượng polysaccharide thô trích được từ sinh khối nấm trong 1 lít môi trường (Trang 55)
Bảng 4.11: Tỉ lệ polysaccharide thô chiết được từ các nguồn nguyên liệu khác nhau (%)  - Nấm
Bảng 4.11 Tỉ lệ polysaccharide thô chiết được từ các nguồn nguyên liệu khác nhau (%) (Trang 56)
Bảng 4.11: Tỉ  lệ polysaccharide thô chiết  được từ các nguồn nguyên liệu khác  nhau (%) - Nấm
Bảng 4.11 Tỉ lệ polysaccharide thô chiết được từ các nguồn nguyên liệu khác nhau (%) (Trang 56)
w