Mẫu chứa mỡ máu hoặc bị đục mà không làm trong được bằng ly tâm cần được loại bỏ.[r]
(1)QUY TRÌNH
ĐỊNH LƯỢNG APO A-I( MÁU) I NGUYÊN LÝ
Các protein có dịch thể người tạo thành phức hợp miễn dịch phản ứng hóa miễn dịch với kháng thể đặc hiệu Những phức hợp phát tán chùm ánh sáng qua mẫu Cường độ ánh sáng phân tán tỷ lệ thuận với nồng độ protein có liên quan mẫu Đánh giá kết cách so sánh với mẫu chuẩn có nồng độ biết
Xét nghiệm Apo A-I giúp đánh giá nguy bệnh nhân bị xơ vữa động mạch có giá trị tiên lượng lớn dùng giá trị HDL LDL cholesterol để định Tỉ số Apo B/Apo A-I thông số hiệu để đánh giá nguy bị xơ vữa động mạch: tỉ số lớn nguy cao
II CHUẨN BỊ
1 Cán thực hiện: 01 Bác sỹ 01cán đại học 01 kỹ thuật viên chuyên ngành Hóa sinh
2 Phương tiện, hóa chất 2.1 Phương tiện
Máy phân tích: BN ProSpec Máy ly tâm
Tủ lạnh để bảo quản hóa chất, chất hiệu chuẩn, QC mẫu bệnh phẩm Pipep loại
Ống nghiệm, giá đựng ống nghiệm 2.2 Hóa chất
Thuốc thử N Antiserum to Human Apolipoprotein A-I: sản xuất tạo miễn dịch thỏ Apo A-I người làm tinh khiết Nồng độ kháng thể hoạt động < 1.2 g/L Chất bảo quản sodium azide < g/L
Hóa chất bị tạo tủa bị đục mà nhiễm khuẩn Trường hợp nên lọc với kích thước lỗ lọc 0.45 μm trước dùng
Hóa chất ổn định đến ngày ghi nắp hộp với điều kiện không mở nắp bảo quản nhiệt độ 2-8°C Độ ổn định sau mở, bảo quản 2-8°C lọ đóng kín tuần
2.3 Các dụng cụ tiêu hao khác Ống nghiệm;
(2)Bông, cồn sát trùng, bơm tiêm kim lây máu, dây ga rơ
3 Người bệnh: Cần giải thích mục đích xét nghiệm để bệnh nhân người nhà bệnh hiểu, từ hợp tác trình lấy máu
4 Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thơng tin bệnh nhân bao gồm họ tên, tuổi, khoa phịng, chẩn đốn, tình trạng mẫu, tên BS định, ngày định, ngày lấy mẫu, loại thuốc sử dụng (nếu có)…
III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1 Lấy bệnh phẩm xử lý mẫu bệnh phẩm
Thực mẫu máu: huyết thanh, huyết tương heparin
Mẫu huyết cần làm đơng hồn tồn sau li tâm khơng chứa hạt nhỏ dấu tích fibrin Mẫu mỡ máu bị đục sau rã đông cần làm ly tâm ( 10 phút 15,000 x g)
2 Tiến hành kỹ thuật 2.1 Chuẩn bị máy phân tích
Dựng đường chuẩn: dựa điểm với nồng độ khác nha Phân tích QC: level Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu 2.2 Phân tích mẫu
Mẫu máu sử dụng sớm tốt, bảo quản 2-8 độ C không ngày giữ đông -20 độ C
Mẫu sau ly tâm chuyển vào khay đựng bệnh phẩm
Đánh số (hoặc ID bệnh nhân); chọn test vận hành theo protocol máy tự động phân tích
Mẫu tự động pha loãng 1:20 với N Diluent phải dùng vòng Nếu kết khoảng, xét nghiệm lặp lại với mẫu pha loãng cao thấp
IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Khoảng tham chiếu cho mẫu huyết tương huyết thu thập 369 người khỏe mạnh:
Protein Đối tượng Bách phân vị 2.5-97.5
Apo A-I
Nữ 1.25–2.15 g/L
(3)Apo B/ Apo A-I
Nữ 0.30–0.90
Nam 0.35–1.00
V NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
- Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả: tán huyết mỡ máu, mẫu bị đục sau rã đông
- Xử trí:
+ Khi lấy máu tránh gây vỡ hồng cầu, mẫu bị vỡ hồng cầu nên loại, yêu cầu lấy mẫu máu khác để xét nghiệm