ĐẬT VẤN ĐẾ ^ tiếp của bửc xạ mặt trời...Các nghiên cứu đã chửng Sự suỵ giảm tang ozon iàm gia tăng cường độ tia minh một trong những cơ chế bảo vệ địa y khỏi tác hại ụ [r]
(1)KHẢO SÁT KHẢ NĂNG BẢO VỆ KHỎI TIA uv CỦA MYCOSPORINE - HỢP CHẤT TỪ ĐỊA Y D E R M A T O C A R P O N M I N I A T U M (L.) w MANN
Ts Nguyễn Thị Thu Trâm (Bộ mơn Hóa học, Trường Đại học YDược cần Thơ), Ts Chollet-Krugler Marylène, Ts Lohézic-Le Dévéhat Frangoise, Rouaud Isabelle'
GS Boustie Joel (Trường Đại học Rennes 1)
TÓM TẢT
_ Đặt vắn đề: Trước tâc hại tia uv, việc tìm kiểm nguồn dược liệu từ hợp chất thiên nhiên có khả năng bảo vệ khỏi xạ đẫ mối quan tâm hàng đầu.
Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát khả bảo vệ khỏi tia u v mycosporìne cao chiết nước đia y Dermatocarpon miniatum (L.) w Mann.
Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Địa y thu hái vùng Bretagne, Pháp Khả bảo vệ khỏi tia u y đánh giá thông qua khả sàng lọc xạ, độ bên đọc tính tế bào trịng trường hợp có khơng có chiếu xạ u y theo hướng dẫn OECD 432 cấ u trúc chất tinh khiết xác định phươnq pháp phổ rĩỹhiệm: ESI-HRMS, NMR, IR UV-VIS.
Kết quả: cô lập lần hai mycosporine: mycosporine glutaminol (1) mycosporine glutamicol (2) địa y D miniatum Hai mycosporìne cao chiết nuúc ban tinh chế ngăn hiệu tia UVB Các mẫu thừ vân ổn định cường độ chiếu xạ thử nghiệm lên đến 5J/m2 không gây độc tỉnh dòng tế bào HaCaT trong hai trường hợp có khơng có chiếu xạ UVA.
Kết luận: Kết quà hứa hẹn khả ứng dụng càc mycosporine cao chiết nước bàn tinh chế mỹ phầm chống nắng.
Từ khóa: Địa y, Dermatocarpon, mycosporines, độc tính tế bào SUMMARY
MYCOSPORINES - PHOTOPROTECTIVÈ COMPOUNDS IN THE LICHEN DERMATOCARPON MINIATUM (L.) w MANN
Nguyen Thi Thu Tram1 Chollet-Krugler Maryỉène2, Lohézic-Le Dévéhat Franọoise2, Rouaud Isabelle2, Boustie Joêi2
1 Can Tho University of Medicine and Pharmacy University of Rennes
Background: The substantial loss in the stratospheric ozone layer and consequent increase in solar ultraviolet radiation on the earth’s surface have augmented the interest in searching for natural photoprotective compounds.
Objectives: study on photoprotective properties o f isolated mycosporines in the lichen Dermatocarpon m iniatum (L) w Mann and aqueous extracts containing such compounds.
Materials and methods: Lichen M/as collected in Bretagne, France Photoprotective properties were investigated by UV-fiiters, photostability and photocytotoxicity according to the OECD guideline 432 The structures were elucidated by ESI-HRMS, NMR, IR and UV-VIS spectra.
Results: two mycosporines: mycosporine glutaminol (1) and mycosporine glutamicol (2), were isolated fo r the first time in the lichen D.miniatum The two mycosporines and the semi-purified aqueous extract can be considered as eligible UVB filters Such test samples were found stable until 5J/m2 UVA and UVB radiations Moreover, these mycosporines and semi purified extract did not induce any phototoxicity on HaCaT cells exposed to UVA radiations.
Conclusion: the results suggest an application of mycosponnes and semi-purified aqueous extract in UV- protecting cosmetics.
Keywords: Lichen, Dermatocarpon, mycosporines, photoprotective properties
ĐẬT VẤN ĐẾ ^ tiếp bửc xạ mặt trời Các nghiên cứu chửng Sự suỵ giảm tang ozon iàm gia tăng cường độ tia minh chế bảo vệ địa y khỏi tác hại ụ v đến bề mặt trái đất đưa đến nhiều hệ íụy tăng tia u v sản sinh hợp chầỉ có khả tỉjệ ụng thư da, cân băng hệ sinh thái động thực sàng lọc xạ này, có mycosporine vật biển Thực trạng khơng ngừng thuc đẩy [2,3] Mycosporine la nhóm hợp chất tan tốt việc tìm kiếm hợp chất thiên nhiên có khả nước, trọng lượng phân tử nho (thông thường nho bảo vệ khỏi tác hại xạ u v Địa y, loài thực 400 Da) Mycosporine hấp thu cực đại xạ tử vật bậc tháp đặc biệt, kết cộng sinh tảo lục ngoại vùng 310 nm - 320 nm, với hẹ số hấp ỉhu và/hoặc vi khuẩn lam với nấm [1Ị Địa y đặc biệt mol !ớn (s = 20000 - 34000 M '\c rrÒ cẩu trúc chứa ý có thẻ tồn điều kiện vô khắc cyciohexenone liên kết với nitrogen amino nghiệt đỉnh núi cao quanh năm tuyết acid amino alcol [4], Mycosporine diện phủ hay sa mạc khô cằn, nơi chịu ảnh hưởng trực nhiều loài sinh vật nám, vi khuẩn lam, san ho,
(2)-Gần đây, nhỏm hợp chất tìm thấy địa y lam (cyanoíichen - cộng sính vi khuẩn lam va nắm) [5] chưa công bố írong địa y íục (chlórõiichen - cộng sinh íảo lục nấm), địa y lục chiếm gần 90% tổng số loài địa y Phần lớn chất chuyển hóa thứ cấp địa y lục phenoi, vốn xem ià nhóm hợp chấí bảo vệ địa y Khỏi tác hại tỉa u v dèpside, depsidõne, dibenzofuran, xanthone, anthraquinone [2,6] Tuy nhiên, nghiên cứu thành phần hóa học địa y iục thuộc chi Dermatocarpon (Verrucariaceae) cho thấy chúng không chứa phenol [7-10] Do đó, giả thuyết đặt mycosporine tồn chi Dermatocarpon giữ vai trị bẩo vệ địa y khồí tác hại xạ u v
Mục tiêu nghiên cứu:
1) Cô lập va xác định cấu trúc mycosporine từ loài địa y Dermatocarpon miniatum (L.) w Martn.
2) Khảo sát đặc tỉnh bảo vệ khỏi tia u v mycosporine cô lập cao chiết nước địa y
D.miniatum.
ĐÓI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN u
1 Đối tượng nghiên cứu: Địa y
Dermatocarponminiatum (L.) w Mann ổược thu hái
trên đá, gần bờ biển thuộc vùng Moêỉan, Bretagne, Pháp vào tháng 09/2013 Địa y định danh nhà thực vật học Jean-Yves Monnat, Trường Đại học Bretagne Sud, Pháp Mẫu địa y lưu írữ PhịngThực vạt học, Khoa Dược, Trường Đại học Rennes 1, Pháp với ký hiệu JB/13/004
2 Phương pháp nghiên cứu
2.1 Hóa chắt, th ie t b ị
Các hóa chất sử dụng thuộc hãng Sigma, đạt độ tinh khiết 97-99%
Sắc ký cột nhanh thực hệ thống SPOT Flash Liquid Chromatography (Armen Instrument)
Phổ hồng ngoại IR đo máy PerkỉnElmer UATR Two Infrared Spectrophotometer Phổ tử ngoại khả kiến UV-ViS đo máy Uvikon 931 U V - VlSSpectrophotometer, cuvet 1cm Phồ cộng hưởng từ hạt nhân NMR đo máy Bruker DMX 500 MHz Khối phổ độ phân giải cao ESI-HRMS đo máy Micromass ZabspecTOF Bán điều chế mycosporine thực hệ thống HPLC-DAD Shimadzu LC-2ỎAD, đầu dò PDA 254, 310, 330 360 nm
Hệ thống u v síratalinker 2400 (Stratagene, USA) tạo bưc xạ ỉư ngoại dùng thử nghiệm độ bền
2.2 Cô lạp xác đ ĩnh cấu trú c hai m ycosporíne
Bột địa y khơ (m=120g) chiết với nước (3 X 500 mL, Ó, 12h), sau lọc, cô quay thu 4.0 g cao chiết nước thố (DM1) Cao chiết hòa tan vào 8 mL nước tiến hành sắc ký cộí trao đổi ion (DOWEX 50W-X8, 80g) Giải ly VỚM5Õ mL nước đề loại cốc hợp chất đường polyol Thêm 40 mL NaCl 200 mg/mL^iếp tục giảĩ ly với nước Gom phân đoạn chứa mycosponne (được nhận biết sẳc ký
lớp mỏng (CHCỈ3/ MeOH/ H20 6/4/1) soi u v
312 nm), cô quay, loại muối, thu 1.2 g caọ chiết nước ban tinh chế (DM2) Cao chiết tiến hành sắc ký cột nhanh (Chromabond® Flash RS 15 g SiOH Ref 732801, Macherey-Nagel) giải ly với dung môi A (ACN/ CH3COONH4 50 mM 90:10, pH 5.36)
dung môi B (ẦCN/ H20 / CH3COONH4 50 mM 50:40:10, pH 5.36) theo chương trình sau: 100% A phút, tăng dần tuyến tính 0-100% B 20 phút, giữ 100% B 15 phúí tiếp theo, tốc độ dịng 10 mL/phút, ống nghiệm thu 10 mL Phân đoạn từ ống thư 5-9 chứa mycosporine tiếp tục thực HPLC bán điều chế (cộỉ Prevail C18 Ịjm, 250*10.0 mm) với dung môi A (H20 ) dung mơi B (ACN) thiết lập theo chương trình sau: 100% A tròng 15 phút, 100-50% A phút, giữ 50% A 10 phút, 50- 100% A phút, giữ 100% A phút Lưu lượng mL/phứt Hợp chất (m=7.5 mg) thu R( 7.76 phút, hợp chất (m=6.0mg) thú Rt 19.20 phút
Cấu trúc xác định phổ ESI- HRMS, NMR, IR UV-VISÌ
2.3 Khả sàng /ọc bứ c xạ u v
-C huẩn bị mẫu
Cáchplia Qliii lương
paraffin (10“) 4- mrờc (20g) ■!' sodium dodecỵl sulfate ]0%(l(lg)
Nhữ titoiiggốc(St) NM tương (lĩig) 250-(2.5V)sóng DMSO (111L) J" siêu ảm EtOH chuinđciì 50mL
MlulráDg{S3) Sĩ !»iL ĐMSO 20pL EtOH clmán<5«i25ntL
Mầu đo (S4)C= Mpg/mL
S! ímL
S2 20) iL EiOlỉ c!mẩnđct)25mL
p ' = 10: phần trăm mẫu thử nghiệm nhũ tương íheo tiêu chuẩn Châu Âu
HĨnh 1: Qui trình chuẩn bị mẫu cho đánh giá khả sàng lọc xạ u v
(3)Khả sàng lọc xạ u v được dự đoán theo hinh
430
Z E sb.đ;.
A ( = 'T (1) u v - P F - Ja
T: độ tniyềa qua "Ẹ * EJ>T>.à> 3S0 f.290A í
(2) UVA - PF p MĨZữ _
400
Z E J J , A
220
(3)
?V; = 0.9JA ( Ầ ) d  (4) SUI
-3 S0 I , I k-Ã|
290
■*00
X !a ĩ ~ I
(5) 1SP - ■«x> x i o o (6)
f A ,
290
Âx : độ hấp thu quang tnm g bình từ 290 nm - 385 nm Sau 385 rnn, Â , tinh theo công thức: : _ , 0
-A i ~ A S Í x
15 (7)
khơng (hóa
thịa
thóa khịng
thịa
> '>70 IÌN1 Ị———
m a m
xct licji I
khôn; thỏa
khỏng thịa
Hình 2: Qui trình dự đoán khả sàng lọc xạ u v mẫu th nghiệm {11]
2.4 Độ bền d i ch iế u xạ u v
- Mâu khảo sát (nồng độ 40 ụg/mL) đặt ỉrong đĩa peíri đường kính cm chiếu xa UVA UVB với liều lưựng khác nhau: 0.5 J/m2, 1J/m , 2J/m , 3J/m , 4J/m2 5J/m2 Trước sau chiếu xạ 80 ụL mâu khảo sát thu vào vial, trữ 0°c đến phân tích độ ổn dmh bang HPLC dựa tren độ giảm cap diện tích pic bước sóng 290 nm cho Trolox (chất chứng dương) 310 nm cho mycosporine
■ tii6u Kiẹn H r LO
1 % cột Ả3 ? _100 r 60 mn} \ ạiải iyđơ nnồn g độ dung môi A (nước +
1% acid[ acetic): dung môi B (ACN) 50:50 (v/v) Tốc độ dòng 0.5 mL/phut The tích bơm mâu 30 uL
/ A r M ^ u ? ^ í í SPc0n !ĨẴ : cột Kineíex HIỈJC 100 A í2-6 ỉ m> 100X4 60 mm), dung môi giải ly gồm dung môi A ^ C N : CH3COONH4 50 mM 90:10, pH 36) dung môi BjAC N : HạO: CH3COONH4 5Ọ mM 5^40:10 pH 5 36) đượclập trình nhự sau: 100% A phui, 0-100% B từ đến phut, 100% B từ den 12 phut 0-100% A tư 12 đen 14 phút, cộí cân iại với dung mỏi A phút Tốc độ dòng mL/phút Thể tích bơm mâu
Cách tính tốn
% Còn lại (Trolox) xĩoq
A / -^tữtaỉo (8) % Còn ỉại (Mycosporine) —-— xioo (9)
A x: d i ệ n t í c h p ỉ c t i X J / m ^
A0: diện tích pic J/m2
Atota!X: dịện tích pỉc Trolox sản phẩm giảm cấp X J/m2
A(0(aio: diện tích pic Trolox sản phẩm giảm cấp J/m2
“ bf ° : ^ CJ ínhA bào c v 'sau,iíhi chi®u xạ u v í ‘ (SJAn2, 50 phút) cùa mẫu thử nghiệm S h o o , l i ; t HíaC?T ‘ĩ eo í ướng dẫn PÉCD SỐ 432 với chlorpromazine chất chứng dương [12] Sau khỉ ủ 24h lượng tế bào sống xác định phương pháp Neutral Red Uptake Chúng toi xác định chi so photo-irritancy factor (PIF) để dự đốn độc tính te bao cua rnâu khao sát Nếu PIF>5 mâu
xem có độc tính tê bào ’
I C b ( u v ) ( ) h o ặ c O T - ( 1 )
PIF
I C50( + U V ) C ^ Ư V )
(4)-KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
1 Xác định cấu trú c hai m ycosporíne M ycospịrine glutam lnol (1): chất bột, khơng màu; Rf 0.30, silica gel 60 F254, ÒHCI3/ MeOH/ H20 (6/ 4/1); u v Amax 310 (H20 , £ = 12542); IR vmax cm‘1: 3141, 2987, 1661, 1652, 1531, 1403, 1066; ESÍ-HRMS: m/z
303.1551 [M+H]+ (Cìs^aNsOe 303.15506)
K H Ị Ị n A S n n Ị n i Ị „ r > U Ẩ ị U A Ị l U A , „ A , , i V i y u O o j j w i I I I C g i i i l c i M H u u i [ Ĩ Ị C n c ũ u ụ ĩ , K n u i l y H i ữ U ,
Rf 0.23, siíica gel 60 F254, CHCI3/ MeOH/ H20 (6 /4 /1 ); u v Àmax 310 (H20, £ = 17248); IR w crrT: 3354, 2935, 1650, 1557, 1404, 1120, 1024; rH NMR (D20, 500 MHz): ỐH 2.89 (1H, d, J = 17.1 Hz, H-4), 2.77 (1H, d, J = 17.3 Hz, H-4), 2.67 (1H, d, J = 16.9 Hz, H-6), 2.41 (1H, d, J = 16.9 Hz, H-6), 3.53 (2H, s, H-7), 3.57 (3H, s, H-8), 3.73 (1H,m, H-9), 3.70 (1H, dd, J = 4.1, 11.6Hz, H-ÍO), 3.56 (1H, m, H-10), 1.88 (1H, m, H-11),
1.75 (1H, m, H-11), 2.29 (2H, m, H-12); 1ầc NMR (D2Ó,
125 MHz) ổc 185.53 (C, C-1), 130.09 (C, C-2), 158Ĩ89 (C, C-3), 33:45 (CH2, C-4), 72.05 (C, C-5), 42.61 {CH2, C-6), 67.58 (CH2, C-7), 59.14 (CH3.C-8), 55.14 (CH, C- 9), 64.24 (CH2, C-10), 27.37 (CH2, C-11), 31.43 (CH2, C-12), 181.71 (C, C-13); ESI-HRMS: m/z 326.1198 [M +N af (C13H21N 7Na 326.12157), m/z 304.1392 [M+H]+(C13H22NÒ7304.13963)
Bồng 1: Giá trị số dự đoán khả
mycosporine alutaminol (1) mycosporine glutamicol (2) Hình 3: Cau trúc cùa mycosporine va
Trong nghiên cứu này, cô lập lần hai mycosporine từ địa y iục D.miniatum Địa y loài thực vật cộng sinh đặc biệt nên việc tìm hiểu phần có liên quan đến sinh tồng hợp mycosporine điều cần làm rõ Theo nghiên cưu trước đây, mycosporỉne chì tìm địa y lam, vi khuần lam xem la phần sẩn sinh hợp chất đầu tiển địa y Mặt khác dẫn xủẩt glycoside tlm thấy
các loại nấm Ascomycetous, hợp chất có VI
khuẩn lam thuộc lồi Lepỉyngbya sp., hợp chất có trong vi khuẩn lam Degelia plumbea [13] chưa có cơng bố nao diện cua mycosporine ỉảo lục Vì thề kết cùa chúng tơi m inh chứng phần nấm có thề lồ phần đóng vaĩ írị sinh tồng hợp mycosporìne írong địa y D miniatum.
2 Khả sàng lọc xạ UV: Chúng thử nghiệm khả sàng lọc xạ u v của dịch chiết nước thô (DM1), dịch chiết nước bán tinh chế (DM2) hai mycospórine lập Kết trình bày bảng cho thẩý hợp chấí 1, dịch chiết nước bán tinh chế DM2 đóng vai trờ lọc tốt xạ UVB, dịch chiết nước thô DJVI1 khơng có ìác dụng sàng lọc Dịch chiết DM2 sàng lọc hiệu UVB dịch chiết DM1 chứa hàm lượng mycosporine cao [13]
Dịch chiết/ Mycosporìne
UV-PF Ac UVA-PF
SUI ISP
«5
I
Q
1.1 375 1.0 1.7 62
DM2 1.6 332 1.1 1.1 96
1° 10.9 347 2.9 1.0 111 2° 6.1 327 1.3 1.0 110 4~MBCC 3.5 324 1.2 0.9 117 Avobenzone0 1.8 377 3.9 2.3 47
Octocrene® 7.4 336 1.7 1.3 84
bán tinh chế cùa địa y D.miniatum
1: mycosporine glutaminol, 2: mycosporine glutamicol
4-MBC: 4-methylbenzylidene camphor
UV-PF: u v Protection Factor, UVA-PF: UVA Protection Factor
Ac: critical wavelength, SUI: Spectral Uniformity Index, ISP: Ideal Spectral Profile
a: không xét tiếp (UV-PF < 1.5)
ó: lọc UVB (UV-PF > 1.5, í c < 370 nm, UVA-PF < 2, SUI <1.2, iSP > 90)
c' ơ' vằ e: chất chứng dương lưu hành thị
trường lần lựợt lọc tốt UVB, UVA (UVA+UVB) Độ bền dư i chiếu xạ UV: Một đặc tính quan trọng hợp chất đóng vai trị ngăn xạ u v phải ổn định, không bị biến đồi hay giam cấp xạ Độ bến cùa dịch chiết nước hai mycosporine đánh giá thông qua việc chiếu xạ UVA UVB với liều iừợng khác nhau, kết phân tích HPLC dịch chiết DM2, mycósporine bền vững, khơng bị giảm cấp tạí liều chiếu xạ Trong sản phẩm giảm cẩp cùa Trolox (chất chứng dương) xuất mức 0.5 J/m2, liều chiếu xạ UVA UVB tằng lên J/m2, tỉ lệ giảm cẳpjần iượt 10% 19%
4 Độc tính tế bào: Theo nghiên cứu lâm sàng, nhiều hợp chất liều lượng khơng gây độc tính tế bào trở thành độc tính xạ u v [14] Chung íơi thử nghiệm độ an tồn cùa dịch chiết nước DM1, DM2, mycosporine dòng tế bào HaCaT hai trường hợp có khơng có chiếu xạ UVA Kết trình bày tronq bảng cho thấy khơng có mẫu thử gây độc tính te bào írong hai trường hợp có khơng có chiếu xạ UVA giá trị PIF cùa chúng «
Dịch chiết/ Mycosporine
Đơc tính dịng tế bào HaCaT
IC50 ± SD (ug/mL)
Photo- Irritancy Factor (PIF) - UVA +UVA
DM1 >40 >40 Ì K
DM2 >40 >40 1°
>40 >40 1° 30.00 ±6.00 27.00 ± 4.00 1.11* Chlorpromazine® 22.00 ± 0.50 3.50 ± 0.00 6.29c
bán tinh chế địa y D.miniatum 1: mycosporine glutamỉnol, glutamicoi
achất chứng dương
(5)bCơng thức tính P1F = Cmax(-UV)/Cmax(+UV) cCơng ỉhức ỉính PIF = IC5ũ(-UV)/IC50(+UV) KẾT LUẬN
Từ địa y D miniatum (L.) w Mann, cô lập xác định cấu trúc hai mycosporine : mycosporine glutamỉnol mycosporine glutamicol Sự diện lần nhóm hợp chất địa y iục góp phần giải thích sinh tồng hợp mycosporine địa y
Dịch chiết nước ban tinh chế hai mycosporine lập có khả sàng lọc tốt xạ UVB, với đặc tính bền vững, khơng gây độc tính íế bào nên hứa hẹn khả ưng dụng chúng vào mỹ phẩm chống nắng
TAI LIỆU THAM KHẢO
1 Thomas H Nash ill, 2008 Lichen biology, second edition, Cambridge University Press 1-3
2 Nguyen K-H, Cholleỉ-Krugler M, Gouauit N Tomasi s, 2013 UV-proiectant metabolites fromlichens and their symbiotic partners Nat Prod Rep, 30, 1490- 1508
3 Oren A, Gunde-Cimerman N, 2007 Mycosporines and mycosporine-iike amino acids: u v protectants or multipurpose secondary metabolites?
FEMS Microbiol Lett, 269, 1-10
4 La Barre s, Rouliier c, Boustie J, 2014
Mycosporine-like amino acids (MAAs) in biological photosystems Outstanding marine molecules, La Barre
s, Kornprobst J-M editors, WeinheimWiley-VCH, 333-349 Roullier c, Chollet-Krugler M, Pferschy-Wenzig E-M, Anne Maillard A, Rechberger GN, Legouin- Gargadennec B et al., 2011 Characterization and identification of mycosporines-iike compounds in
cyanolichens isolation of mycosporine hydroxygiutamicoi from Nephroma laevigatum Ach Phytochemistry, 72 1348-1357
6 Boustie J, Tomasi s, Grube M, 2010 Bioactive lichen metabolites: alpine habitats as an untapped source
Phytochem Rev, 10,287-307
7 Lindberg B, Misiorny A, Wachtmeister CA, 1953 Studies on the chemistry of lichens Acta Chem Scand, 591-595
8 Ramakrishnan s, Sankara s s , 1966 Amino- acids of Dermatocarpon moulinsii Curr Sci, 35,284-285
9 Czeczuga B, Oiech M, 1990 Investigations on Carotenoids in Lichens XXV Studies of Carotenoids in Lichens from Spitsbergen Phyton, 30, 235-245
10 Duman DC, Aras s, Atakoi 2008.Determination of usnic acid content in some lichen species found in Anatolia J Appl Biol Sci, 2,41 -44
11 Lohézic-Le Dévéhat F, Legouin B, Malargé A, Couteau c , Coiffard L, 16-18 July 2010 Evaluation of a new UV-filter screening method 4èmes ịoumées de
I'AFERP «D Biodiversité, chimie des substances naturelles et medicaments" et 3ème Symposium franco-pakistanais, Besangon (France)
12 OECD Guideline for testing of chemicals, 2004
In vitro 3T3 NRU phototoxicity test, 432
13 Nguyen T X T Chollet-Krugler M, Lohézic-Le DévéhatP, Rouaud I, BoustieJ, 2015 Mycosporine-iike compounds in chiorolichens: isolation and photoprotective properties from Dermatocarpon luridum and
Dermatocarpon miniatum, Planta Medica Lett, 2,1-5
14 Penny J, 2008 In vitro phototoxicity assays,
Principles and practice o f skin toxicology, John Wiley &
Sons, Ltd, 169-181
TỔNG HỢP VÀ THỬ KHÁNG KHUẢN CÁC DẪN CHAT 2- BENZOYLBENZOFURAN
Nguyễn Thị Thu Trang
(Ths., B ộ m ôn Bào chế, Khoa Dược, Trường Đ i họ c K ỹ thuạt ý - D ược Đà Nẵng)
TÓM TÁT
Đặt i/á/7 đề: Hiện nay, thực trạng vi khuẩn đề kháng khống sinh ngày diễn biến phức tạp, Khi tiến
hành nghiên cứu khụng cấu trúc 2-benzoylbenzofuran với mong muốn tìm hợp chất có tác
dụng kháng khuẩn tiềm đề có định hướng cho nghiên cứu sau Mục tiêu nghiên cứu: Tổng hợp 10 dân chất thuộc khung cấu trúc 2-benzoylbenzofumn Tinh chế, xác định độ tinh khiết, xác định cấu trúc thông số đặc trưng chắt tổng hợp Thử tốc dụng kháng khuẩn các dẫn chất tổng hợp đề định hướng cho nghiên cứu sau.
Đổi tượng phương pháp nghiên cứu: dẫn chất 2-benzoylbenzofuran tổng hợp theo bước:
_ \ ~ ' R''yír~\ 1
Br2 C H C Ia ( T ^ l
v s p ' o ^0 0
OHC
X > R’
D M AP, H20
80 ° c
A IC Is C H2C I2 , rt
o r H B r A c O H , 80 ° c
^ u 0 Õ Ò H
_ J > _ (2) <3)
Kiếm nghiệm xốc định cấu trúc chất tổng hợp Sau đó, thử hoạt tỉnh chủng vi khuẩn: Staphylococcus aureus nhạy methicillin (MSSA), Staphylococcus aureus kháng methicillin (MRSA) Streptococcus faecalis, Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa.
Kết quả: Đã tổng hợp xác định cấu trúc 10 dẫn chất tổng hợp Các chất sau tổng hợp được thử hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn chọn.
Kết luận: Nghiên cứu tiến hành tồng hợp 10 'dẫn chất thuộc khung cấu trúc 2-benzoylbenzofuran Kết quả cho thấy số dẫn chắt thể hoạt tỉnh kháng khuẩn AB1, AB2, AB3, AB1D, AB3D tạo tiền đề chò các nghiên cứu tiếp theo.
Từ khóa: khống khắng sinh