Khảo sát thành phần hóa học cây đinh lăng trổ polyscias guilfoylei bail họ nhân sâm (araliaceae)

Nguyễn Th ị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP.HCM  Nguyễn Thị Kim Liên KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HĨA HỌC Chun ngành : Hóa Hữu Cơ KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VỎ THÂN CÂY ĐINH LĂNG TRỔ Polyscias guilfoylei Bail Họ Nhân Sâm (Araliaceae) Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2012 Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP.HCM  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HĨA HỌC Chun ngành : Hóa Hữu Cơ KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VỎ THÂN CÂY ĐINH LĂNG TRỔ Polyscias guilfoylei Bail Họ Nhân Sâm (Araliaceae) Hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Thị Ánh Tuyết Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Kim Liên Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2012 Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, em xin chân thành cảm ơn: Cảm ơn Cô Nguyễn Thị Ánh Tuyết thầy Dương Thúc Huy theo sát, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, cung cấp kiến thức, động viên em suốt thời gian thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Được Cô Thầy hướng dẫn may mắn lớn em năm học cuối trường đai học Sư Phạm Em xin cảm ơn Cô Thầy! Cảm cô Nguyễn Kim Phi Phụng,đã tạo điều kiện giúp đỡ, đóng góp ý kiến q báu để em hồn thành đề tài Cảm cô Lê Thị Thu Hương, thầy Nguyễn Thụy Vũ cho em ý kiến, kinh nghiệm quý báu để em hoàn thành đề tài Cảm ơn tất q Thầy Cơ khoa Hóa tận tình dạy dỗ em suốt bốn năm qua để em có kiến thức hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cảm ơn bạn tất bạn Nguyễn Vũ Mai Trang, bạn Nguyễn Trần Bảo Huy, bạn Nguyễn Thị Minh Trang, bạn Lê Thị Tú Trinh giúp đỡ, chia tơi khó khăn, vui buồn suốt trình thực đề tài Cảm ơn ba mẹ nuôi nấng, dạy dỗ, chỗ dựa tinh thần vững vàng giúp tơi vượt qua khó khăn tạo điều kiện tốt để hồn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp Xin gửi lời chúc tốt đẹp đến người! Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 MÔ TẢ THỰC VẬT 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ DƯỢC TÍNH 19 Chương 2: THỰC NGHIỆM 24 2.1 HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 24 2.2 KHẢO SÁT NGUYÊN LIỆU 24 2.3 ĐIỀU CHẾ CÁC LOẠI CAO 25 2.4 TÁCH CÁC PHÂN ĐOẠN TỪ CAO BUTANOL 28 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT LIEN-Bu1 34 3.2 KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT LIEN-Bu2 37 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 47 4.1 KẾT LUẬN 47 4.2 ĐỀ XUẤT 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 A PHẦN TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT 50 B PHẦN TÀI LIỆU TIẾNG ANH 51 C PHẦN TÀI LIỆU TRÊN MẠNG INTERNET 53 Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp LỜI MỞ ĐẦU Nước ta nước nhiệt đới, nóng ẩm nên nguồn thực vật phong phú đa dạng Chính phong phú , đa dạng mà ngành hóa học hợp chất thiên nhiên phát triển mạnh mẽ, góp phần lớn vào phát triển y học, chăm sóc sức khỏe cho người dân Từ lâu, dân gian biết dùng loài Đinh lăng để bồi bổ sức khỏe, tăng sức đề kháng cho thể, chống lão hóa, hay điều trị số bệnh như: nhức đầu, đau tức ngực, ức chế phát triển tế bào ung thư buồng trứng… Chính lồi Đinh lăng có nhiều hoạt tính sinh học vậy, nên chọn Polyscias guilfoylei Bail., để nghiên cứu Cây Polyscias guilfoylei Bail., [14, 5] nghiên cứu sơ thành phần hóa học, nên định tiếp tục nghiên cứu theo hướng: khảo sát thành phần hóa học vỏ thân Polyscias guilfoylei Bail Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT TRONG BÀI KHÓA LUẬN s (singlet) : mũi đơn d (doublet) : mũi đôi dd (doubletm (m doublet) : mũi đôi – đôi ultiplet) : mũi đa br s (broad singlet) : mũi đơn rộng br d (broad doublet) : mũi đôi rộng J : số ghép RP–18 : Reversed Phase C-18 NMR (Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy) : phổ cộng hưởng từ hạt nhân DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer) HSQC (Heteronuclear Single Quantum Coherence) : tương quan H-C qua nối HMBC (Heteronuclear Multiplet Bond Coherence) : tương quan H-C qua 2, nối COSY (COrrelation SpectroscopY) : phổ tương quan proton- proton C: cloroform; M: metanol; H: nước Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 MƠ TẢ THỰC VẬT Cây Đinh lăng trổ cịn có tên khoa học Polyscias guilfoylei Bail., họ Nhân sâm (Araliaceae) Cây bụi, cao 3-4m, thân phân nhánh Lá đa dạng, có màu lục sáng, viền trắng, chia lông chim đặn, cuống ngắn to, có sọc hay có đốm, chét thn, có không Vùng phân bố: Cây trồng khắp nơi Việt Nam để làm kiểng làm hàng rào Hình 1: Cây Đinh lăng trổ Polyscias guilfoylei Bail 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC Chi Polyscias chi lớn thứ hai họ Nhân sâm [24] , giới có số lồi chi Polyscias nghiên cứu thành phần hóa học như: P filicifolia Bail., P scutellaria (Burm f.) Merr., P amplifolia (Baker) Harms., P dichroostachya Baker., P fulva, P murrayi Harms Polyscias sp nov Trong số này, đặc biệt loài Polyscias fruticosa (L.) Harms quan tâm nghiên cứu nhiều mặt hóa học Do Polyscias guilfoylei Bail., chưa nghiên cứu thành phần hóa học Việt Nam giới Cho nên xin trình bày thêm thành phần hóa học số loài khác thuộc chi Polyscias nghiên cứu nước 1.2.1 Polyscias amplifolia (Baker) Harms Năm 2003, Prakash Chaturvedula V S cộng [38] lập từ bốn hợp chất là: • Acid 3–O–β–D–galactopyranosyloleanolic (1) • Acid 3–O–β–D–galactopyranosyl-(14)-β-D-galactopyranosyloleanolic (2) • Acid 3–O–β–D–galactopyranosyl-(14)-β-D-xylopyranosyloleanolic (3) • Acid 3–O–β–D–galactopyranosyl-(14)- α–L–arabinopyranosyloleanolic (4) Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Các hợp chất thuộc loại saponin có phần aglycon acid oleanolic 1.2.2 Polyscias dichroostachya Baker Năm 1990, Gopalsmy N cộng [25] cô lập bốn hợp chất là: 3– O–α–L–arabinopyranosylhederagenin (5); 3–O–α–L–rhamnopyranosyl-(12)–α–L– arabino-pyranosylhederagenin arabinopyranosylhe-deragenin (6); 3–O–β–D–glucopyranosyl-(12)–α–L– (7); 3–O–α–L–rhamnopyranosyl-(12)–α–L– arabinopyranosylhederagenin– 28–O–β–D–glucopyranosid (8) Các hợp chất thuộc loại saponin có phần aglycon acid hederagenin 1.2.3 Polyscias filicifolia Balf Năm 2007, Nguyễn Thúy Anh Thư cộng • [13] cô lập hợp chất: Hợp chất steroid: stigmasterol (9); spinasterol (10); 3-O-β-D- glucopyranosylstigmas-terol (11) • Hợp chất phenolic: 3,5,7,3',4'-pentamethoxyflavone (12); 5,4'-dihydroxy-3,7-di-(O- α-L-rhamnopyranosyl)flavone (13) • Hợp chất saponin có aglycon acid oleanolic: acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)- β-D-glucuronopyranosyloleanolic (14) • Hợp chất triterpenoid: acid oleanolic (15) 1.3.4 Polyscias fulva (Hiern) Harms Năm 2001, Bedir cộng [22] cô lập từ phần mặt đất hợp chất: • Các hợp chất saponin có phần aglycon hederagenin: 3-O-α-L-rhamnopyranosyl -(12)-α-L-arabinopyranosylhederagenin (6) 3-O-α-L- rhamnopyranosyl -(12)-α-L-arabinopyranosylhederagenin-28-O-α-Lrhamnopyranosyl-(14)-β-D-glucopyranosyl-(16)-β-D-glucopyranosyl ester (16) • Hợp chất phenolic: 5,7,3',4'-tetrahydroxy-3-O-β-D-glucopyranosylflavone (17) • Hợp chất saponin khác: 12-oxo-3β,16β-20(S)-trihydroxydammar-24-en-3-O-α-L- rham-nopyranosyl-(12)-β-D-glucopyranosid (18) Năm 2004, A C Mitaine Offer [31] cộng cô lập từ phần vỏ thân hợp chất: Trang Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp • Hợp chất steroid: β-sitosterol (19); 3-O-β-D-glucopyranosyl-β-sitosterol (20); 3-O- β-D-glucopyranosylstigmasterol (11) • Hợp chất phenolic: lichexanthon (21) • Hợp chất triterpenoid: acid oleanolic (15); hederagenin (22) • Các hợp chất saponin có phần aglycon hederagenin: 3-O-α-L-arabinopyranosyl- hederagenin (5); 3–O–α–L–rhamnopyranosyl-(12) –α–L– arabinopyranosylhederagenin (6); 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(12)-α-L-arabinopyranosylhederagenin-28-O-α-Lrha-mnopyranosyl-(14)-β-D-glucopyranosyl-(16)-β-D-glucopyranosyl ester (16) • Các hợp chất saponin có aglycon acid oleanolic: acid 3-O-α-L-rhamnopyranosyl- (12)-α-L-arabinopyranosyloleanolic (23) • Các hợp chất saponin khác: 3-O-α-L-arabinopyranosylcollinsogenin (24); acid 3-O- α-L-rhamnopyranosyl-(12)-α-L-arabinopyranosylechynocystic (25) • Hợp chất ceramid cerebrosid:(2S,3S,4R,8E)-2-[(2’R)-2’- hydroxypalmitoylamino]-8- octadecen-1,3,4-triol (26); 1-O-β-D-glucopyranosyl(2S,3S,4R,8E)-2-[(2’R)-2’- hydro-xylpalmitoylamino]-8-octadecen-1,3,4-triol (27) 1.2.5 Polyscias fruticosa (L.) Harm Năm 1989, Nguyễn Khắc Viện [16] nghiên cứu cho thấy rễ có 4% saccarose, chất kết tinh A chưa xác định cấu trúc hóa học, có điểm sơi o khoảng 158-161 C, tan nhiều cloroform aceton Năm 1990, Nguyễn Thới Nhâm cộng [12] công bố thành phần rễ, thân có glycosid, alcaloid, tanin, vitamin B1 khoảng 20 loại acid amin arginin, alanin, asparagin, acid glutamic, leucin, lysin, phenylalanin, prolin, threonin, tyrosin, cystein, tryptophan, metionin Năm 1990, Brophy Joseph J cộng [26] dùng phương pháp GC-MS để phân tích thành phần tinh dầu mọc Fiji Thái Lan Kết cho thấy tinh dầu có khoảng 24 cấu tử, có chất là: β-elemen (28); βgermacren-D (29); E- γ-bisabolen (30) α-bergamoten (31) Năm 1991, Võ Xuân Minh cộng Trang [9] khảo sát hàm lượng saponin tồn Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp phần phận Đinh lăng với kết quả: rễ (0,49%), vỏ rễ (1,00%), lõi rễ (0,11%) (0,38%) Năm 1992, nghiên cứu tiếp theo, Võ Xuân Minh [10] cho biết Đinh lăng có alcaloid, glucosid, saponin, vitamin tan nước B1, B2, B6, C Nghiên cứu cho thấy rễ Đinh lăng có chứa tới 20 acid amin Năm 1992, Lutomski cộng [29] cô lập từ rễ hợp chất thuộc loại hợp chất polyacetylen: (8E)-heptadeca-1,8-dien-4,6-diyn-3,10-diol (32); (8E)-heptadeca1,8-dien-4,6-diyn-3-ol-10-on (33); (8Z)-heptadeca-1,8-dien-4,6-diyn-3-ol-10-on (34); falcarinol (35) panaxydol (36) Cũng vào năm 1992, Nguyễn Thị Nguyệt cộng [11] cô lập acid oleanolic (15) Năm 1995, Chaboud A cộng [17] cô lập từ saponin triterpen, acid 3-O-β-D-galactopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyloleanolic (37) Năm 1996, Chaboud A cộng [18] cô lập từ khô, saponin triterpen acid 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-28-O-β-Dglucopyranosyl-oleanolic (38) Năm 1998, Võ Duy Huấn cộng [42] cô lập 11 saponin triterpen: Acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(14)-β-D-glucuronopyranosyloleanolic (14); acid 3O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucuronopyranosyloleanolic (39); Acid 3-O-[βD-gluco-pyranosyl-(1→2), β-D-glucopyranosyl-(1→4)] -β-Dglucuronopyranosyloleanolic (40); acid 3-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→2), β-Dglucopyranosyl(1→4)] -β-D-glucurono-pyranosyloleanolic (41); acid 3-O-[β-Dgalactopyranosyl-(1→2), β-D-glucopyranosyl-(1→3)]-β-Dglucuronopyranosyloleanolic (42); 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-Dglucuronopyranosyloleanolic-28-O-β-D-glucopyranosyl ester (43); 3-O-[β-Dglucopyra-nosyl-(1→2), β-D-glucopyranosyl-(1→3)] -β-Dglucuronopyranosyloleanolic -28-O-β-D-glucopyranosyl ester (44); 3-O-[α-Larabinopyranosyl-(1→2), β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-β-Dglucuronopyranosyloleanolic -28-O-β -D-glucopyranosyl ester (45); 3-O-[β-D- Trang 10 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 7: Phổ đồ LC hợp chất LIEN-Bu2 Trang 64 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 8: Phổ đồ MS hợp chất LIEN-Bu2 Trang 65 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 9: Phổ H-NMR hợp chất LIEN-Bu2 Trang 66 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 9a: Phổ H-NMR hợp chất LIEN-Bu2 Trang 67 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 9b: Phổ H-NMR hợp chất LIEN-Bu2 Trang 68 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 9c: Phổ H-NMR hợp chất LIEN-Bu2 Trang 69 Nguyễn Thị Kim Liên Phụ lục 10: Phổ Khóa luận tốt nghiệp 13 C-NMR hợp chất LIEN-Bu2 Trang 70 Nguyễn Thị Kim Liên Phụ lục 10a: Phổ Khóa luận tốt nghiệp 13 C-NMR hợp chất LIEN-Bu2 Trang 71 Nguyễn Thị Kim Liên Phụ lục 11: Phổ Khóa luận tốt nghiệp 13 C-NMR kết hợp phổ DEPTcủa hợp chất LIEN-Bu2 Trang 72 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 12: Phổ COSY hợp chất LIEN-Bu2 Trang 73 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 12a: Phổ COSY hợp chất LIEN-Bu2 Trang 74 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 13: Phổ HSQC hợp chất LIEN-Bu2 Trang 75 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 13a: Phổ HSQC hợp chất LIEN-Bu2 Trang 76 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 14: Phổ HMBC hợp chất LIEN-Bu2 Trang 77 Nguyễn Thị Kim Liên Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 14a: Phổ HMBC hợp chất LIEN-Bu2 Trang 78 ... Liên Khóa luận tốt nghiệp BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP.HCM  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC Chuyên ngành : Hóa Hữu Cơ KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HĨA HỌC VỎ THÂN CÂY ĐINH LĂNG TRỔ Polyscias. .. nghiên cứu Cây Polyscias guilfoylei Bail. , [14, 5] nghiên cứu sơ thành phần hóa học, nên định tiếp tục nghiên cứu theo hướng: khảo sát thành phần hóa học vỏ thân Polyscias guilfoylei Bail Trang... Vùng phân bố: Cây trồng khắp nơi Việt Nam để làm kiểng làm hàng rào Hình 1: Cây Đinh lăng trổ Polyscias guilfoylei Bail 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC Chi Polyscias chi lớn thứ hai họ Nhân sâm [24] , giới