NGHIÊN cứu mối LIÊN QUAN GIỮA đa HÌNH KIỂU GEN MTHFR c677t với một số BIẾN CHỨNG ở BỆNH NHÂN đái THÁO ĐƯỜNG TYPE 2

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI PHẠM HỒNG NGỌC NGHI£N CøU MốI LIÊN QUAN GIữA ĐA HìNH KIểU GEN MTHFR C677T VớI MộT Số BIếN CHứNG BệNH NHÂN ĐáI THáO §¦êNG TYPE ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI PHM HNG NGC NGHIÊN CứU MốI LIÊN QUAN GIữA ĐA H×NH KIĨU GEN MTHFR C677T VíI MéT Sè BIÕN CHøNG BệNH NHÂN ĐáI THáO ĐƯờNG TYPE Chuyờn ngnh: Sinh lý học Mã số: 60720106 ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: 1.TS Nguyễn Huy Bình 2.TS Nguyễn Thi Thanh Hương HÀ NỘI - 2016 CÁC TỪ VIẾT TẮT ĐTĐ Đái tháo đường HTKTW Hệ thần kinh trung ương Hcy Homocystein TK Thần kinh MTHFR Methyl tetrahydrofolate reductase TBMMN Tai biến mạch máu não TALTT Tăng áp lực thẩm thấu HCTH Hội chứng thận hư DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH MỤC LỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Đái tháo đường (ĐTĐ) bệnh lý phức tạp nhiều yếu tố nhiều gen gây nên Theo thông báo Liên đoàn ĐTĐ quốc tế IDF (International Diabetes Federation) có khoảng 415 triệu người mắc ĐTĐ type số tăng lên tới 642 triệu người vào năm 2020, khơng có hành động can thiệp kịp thời IDF ước tính 183 triệu người họ mắc ĐTĐ [1] Tại Việt Nam theo điều tra số thành phố lớn thấy tỷ lệ mắc ĐTĐ cao gia tăng nhanh chóng Năm 1990 điều tra Hà Nội, Huế, Thành phố Hồ Chí Minh tỷ lệ mắc ĐTĐ type tương ứng 1.2%, 0,96% 2.52% [2] Theo thống kê năm 2008, tỷ lệ mắc bệnh ĐTĐ nước 5% (khoảng 4,5 triệu người), thành phố lớn khu cơng nghiệp có tỷ lệ từ 7,0 đến 10% [3] Như sau 10 năm tỷ lệ ĐTĐ gia tăng 300% Tỷ lệ mắc bệnh ĐTĐ gia tăng nhanh chóng tồn giới kéo theo hậu nghiêm trọng sức khỏe kinh tế toàn xã hội ĐTĐ nguyên nhân gây tử vong đứng hàng thứ giới, gây giảm tuổi thọ trung bình từ đến 10 năm, nguyên nhân hàng đầu gây mù loà suy thận giai đoạn cuối Có nhiều nguyên nhân làm gia tăng biến chứng ĐTĐ là: chế độ ăn uống khơng hợp lý, vận động, khơng tn thủ chế độ chăm sóc điều trị dung thuốc khơng Ngồi cịn yếu tố khác góp phần làm gia tăng biến chứng đột biến gen, có gen MTHFR C677T Gen MTHFR C677T đột biến làm tăng nồng độ homocystein (Hcy) máu làm giảm hoạt tính enzyme methyltetrahydrofolat (MTHF), giảm chuyển hóa Hcy thành methionine Do ức chế phát triển nội mạc, giảm đáp ứng vận mạch, giảm tác dụng heparin làm gia tăng biến chứng ĐTĐ đặc biệt biến chứng tim mạch Những người mang đột biến gen MTHFR 677TT dạng đồng hợp tử enzyme hoạt động 70% so với bình thường cịn dạng dị hợp tử 30 – 40% [7], [8] Trên giới có nhiều nghiên cứu mối liên quan đa hình kiểu gen MTHFR C677T với biến chứng tim mạch, thận, thần kinh… Ở Việt Nam chưa có nghiên cứu đề cập đến vấn đề trên, chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu mối liên quan đa hình kiểu gen MTHFR C677T với số biến chứng tim mạch bệnh nhân đái tháo đường type 2” với hai mục tiêu: Xác định tỷ lệ đa hình kiểu gen MTHFR C677T bệnh nhân ĐTĐ type Xác định số liên quan đa hình kiểu gen MTHFR C677T với số biến chứng bệnh nhân ĐTĐ type CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đái tháo đường type 1.1.1 Định nghĩa Theo TCYTTG 2002: Đái tháo đường (ĐTĐ) tình trạng tăng đường máu mãn tính phối hợp với rối loạn chuyển hoá carbonhydrate, lipid, protein thiếu hụt tiết insulin hoạt động hiệu insulin [9] 1.1.2 Sinh lý bệnh đái tháo đường type Hiện chế bệnh sinh ĐTĐ type chưa thực rõ ràng Tuy nhiên ĐTĐ type người ta nhận thấy đặc điểm bật rối loạn không đồng biểu giảm nhạy cảm với insulin gan, vân, mô mỡ suy chức tế bào beta Như khác với ĐTĐ type 1, ĐTĐ type không liên quan tới chế tự miễn hệ thống HLA (human leucocyte antigen) Thay vào tình trạng rối loạn tiết insulin, kháng insulin mơ đích, tăng sản xuất đường gan tham gia yếu tố địa mơi trường Ngồi chế bệnh sinh ĐTĐ type liên quan tới tương tác yếu tố gen yếu tố môi trường 1.1.1.3 Triệu chứng lâm sàng ĐTĐ type gọi ĐTĐ không phụ thuộc insulin đa số xuất sau tuổi 40 thường người béo phì nước phát triển Ở bệnh nhân ĐTĐ type nồng độ insulin huyết tương bình thường cao tương đối, nghĩa cịn khả để trì đường huyết ổn định Nồng độ glucagon huyết tương cao không ức chế insulin 10 Biểu lâm sàng nhóm triệu chứng ăn nhiều, uống nhiều, đái nhiều gầy nhiều Ngồi cịn gặp da khơ, ngứa tồn thân, mờ mắt thống qua Đa số bệnh nhân tình cờ phát ĐTĐ thử máu (75%) có tới 50% mắc đái tháo đường 1-5 năm mà khơng có triệu chứng Cũng có nhiều trường hợp bệnh nhân vào viện với biến chứng nặng nề đái tháo đường nhiễm trùng bàn chân, TBMMN, hôn mê TALTT… 1.1.4 Triệu chứng cận lâm sàng − Đường huyết lúc đói > 126 mg/dl (> mmol/l) − Đường niệu dương tính − HbA1c: HbA1c < 6.5 %, HbA1c tăng: đường máu kiểm sốt khơng tốt − Peptid C : bình thường tăng − Định lượng insulin máu : bình thường tăng − Kháng thể kháng tiểu đảo tụy (ICA, GAD): âm tính − Các XN khác: + Đo BMI, Mạch, HA + Soi đáy mắt + Urê, creatinin + ECG, nghiệm pháp gắng sức + Cholesteron, LDL, HDL, TG + Siêu âm Doppler mạch máu DCXLIV Bảng 3.17 Mối liên quan đột biến gen MTHFR với xơ vữa động mạch chủ Có xơ DCXLV DCXLVII vữa Nhóm đột biến DCXLVIII Nhóm không DCL DCLI Kiểu gen CC DCLII DCLIII đột biến DCLIV DCLV CT DCLVI DCLVII DCLVIII DCLIX TT DCLX DCLXI DCLXII DCLXIV DCLXV DCLXVI DCXLVI DCLXIII p DCXLIX p DCLXVII DCLXVIII Nhận xét: DCLXIX DCLXX DCLXXI Bảng 3.18 Mối liên quan đột biến gen MTHFR với biến chứng thận Có biến DCLXXII DCLXXIV chứng DCLXXIII Nhóm đột DCLXXV biến Kiểu gen DCLXXVI Nhóm khơng DCLXXVII đột biến DCLXXVIII CC DCLXXIX DCLXXX DCLXXXI DCLXXXII CT DCLXXXIII DCLXXXIV DCLXXXV DCLXXXVI TT DCLXXXVII DCLXXXVIII DCLXXXIX DCXCI DCXCII DCXCIII DCXC DCXCIV DCXCV p p Nhận xét: Bảng 3.19 Mối liên quan đột biến gen MTHFR với kiểm soát đường máu Kiểm soát DCXCVI khơng tốt DCXCVIII DCXCIX Nhóm đột biến Nhóm khơng đột DCC DCXCVII Kiểu gen DCCI CC DCCII DCCIII DCCIV DCCV CT DCCVI DCCVII DCCVIII DCCIX TT DCCX DCCXI DCCXII DCCXIV DCCXV DCCXVI DCCXIII DCCXVII DCCXVIII p Nhận xét: biến p DCCXIX CHƯƠNG DCCXX BÀN LUẬN DCCXXI DCCXXII DCCXXIII DCCXXIV TÀI LIỆU THAM KHẢO Nam Han Choet et al (2015) Diabetes around the world International Deabetes Fedẻation, IDF Diabetes Atlas Seventh Edition 2015, International Deabetes Fedẻation, 14 - 19 DCCXXV Tạ Văn Bình (2006) Dịch tễ học bệnh ĐTĐ Việt nam phương pháp điều trị biện pháp dự phòng, Nhà xuất Y học, Hà Nội DCCXXVI DCCXXVII Tạ Văn Bình (2008) Bệnh đái tháo đường - Tăng glucose máu nguyên lý tảng, Nhà xuất Y học, Hà Nội DCCXXVIII DCCXXIX Ozmen Bet et al (2002) Association between homocystein and renal function in patients with type II diabetes mellitus Ann Clin Lab Sci, 3(32), 279 - 286 DCCXXX Angeline Tet et al (2005) Homocystein status and acute myocardial infartion among Tamilians Ind J Clin Biochem, 1(20), 18 20 DCCXXXI George N Welch, Joseph Loscalzo (1998) Homocystein and athrothrombosis The New England Journal of Medicine, 338(15), 1042 - 1050 DCCXXXII Sharp L, Little J (2004) Polymorphisms in genes involved in folate metabolism and colorectal neoplasia: a huge review Am J Epidemiol(159), 423 - 443 DCCXXXIII Refsum Het et al (2004) Facts and recommendations about total Homocystein determination: An expert Opinion Clin Chem.(50), - 32 DCCXXXIV Ngô Quý Châu, Nguyễn Lân Việt, Nguyễn Đạt Anh et al (2012) Bệnh học nội khoa DCCXXXV 10 Gauhan D.J.et et al (2000) The human and mouse methylenetetrahydrofolat reductase genes: genomic organization, mRNA structure and likage to the CLCN6 gene Gene(257), 279 - 289 DCCXXXVI 11 Rodgers GM, Conn MT (1990) Homocystein, an athrogenic stimulus reduces protein C activation by arterial and venous endothelial cells Blood(75), 895 - 901 DCCXXXVII 12 Rodgers GM, Kane WH (1986) Activation of endogenous factor V by a homocystein induced vascular endothelial cell activator J Clin Invest(77), 1909 - 1916 DCCXXXVIII 13 Harker LAet et al (1974) Homocystein: vascular injury and arterial throbosis N Engl J Med(291), 537 - 543 DCCXXXIX 14 Harker LAet et al (1976) Homocystein induced arteriosclerosis: the role of endotheliak cell injury and platelet response in its genesis J Clin Invest(58), 731 - 741 DCCXL 15 Ratnoff OD (1968) Activation of hageman factor by L - Homocystein Science(162), 1007 - 1009 DCCXLI 16 Lentz SR, Sadler JE (1991) Inhibition of thrombomodulin surface expression and protein C activation by the thrombogenic agent homocystein J Clin Invest(88), 1906 - 1914 DCCXLII 17 Fryer RHet et al (1993) Homocystein a risk factor for premature vascular disease and thrombisis induces tissue factor activity in endothelial cell Arterioscler Thromb Basic Biol(13), 1327 - 1333 DCCXLIII 18 Kumar A, Kumar P, Prasad M et all (2015) Association of C677T polymorphism in the methylenetetrahydrofolate reductase gene (MTHFR gene) with ischemic stroke: a meta-analysis Neurol Res(7), 568 - 577 DCCXLIV 19 Bhargava S, Ali A, Parakh R et all (2012) Higher incidence of C677T polymorphism of the MTHFR gene in North Indian patients with vascular disease Vascular, 20(2), 88 - 95 DCCXLV 20 Yadav U, Kumar P, Yadav SK et all (2015) Polymorphisms in folate metabolism genes as maternal risk factor for neural tube defects: an updated meta-analysis Metab Brain Dis, 30(1), - 24 DCCXLVI 21 Linnebank M, Homberger A, Nowak-Goettl U et al (2000) Linkage disequilibrium of the common mutation 677C→T and 1298A→C of the human methylenetetrahydrofolate reductase gene as proven by the novel polymorphisms 129C→T, 1068C→T Eur J Ped, 159, 472 - 473 DCCXLVII 22 Rosenberg N, Murata M, Ikeda Y et al (2002) The frequent 5,10- methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism is associated with a common haplotype in Whites, Japanese, and Africans Am J Hum Genet, 70, 758 - 762 DCCXLVIII 23 factor Frosst P, Blom H.J, Milos R et al (1995) A candidate genetic risk for vasc ular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase Nat Genet., 10, 111 - 113 DCCXLIX 24 Goyette P, Frosst P, Rosenblatt DS et al (1995) Seven novel mutations in the methylenetetrahydrofolate reductase gene and genotype/phenotype correlations in severe MTHFR deficiency Am J Hum Genet, 56, 1052 - 1059 DCCL 25 Goyette P, Christensen B, Rosenblatt DS et al (1996) Severe and mild mutations in cis for the methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene, and description of novel mutations in MTHFR Am J Hum Genet, 59, 1268 - 1275 DCCLI 26 Viel A, Dall'Agnese L, Simone F et al (1997) Loss of heterozygosity at the 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase locus in human ovarian carcinomas Br J Cancer, 75, 1105 - 1110 DCCLII 27 Weisberg I, Tran P, Christensen B et al (1998) A second genetic polymorphism in methylenetrahydrofolate reductase (MTHFR) associated with decreased enzyme activity Mol Genet Metabol, 64, 169 - 172 DCCLIII 28 Rady PL, Szucs S, Grady J et al (2002) Genetic polymorphisms of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) and methionine synthase reductase (MTRR) in ethnic populations in Texas: A report of a novel MTHFR polymorphic site, G1793A Am J Med Genet, 107, 162 - 168 DCCLIV 29 Botto LD, Yang Q (2000) 5,10-Methylenetetrahydrofolate reductase gene variants and congenital anomalies: a HuGE review Am J Epidemiol (151), 862 - 877 DCCLV 30 ethnix Wilcken B, Bamforth F, Li Z et al (2003) Geographical and variation of the 677T>C allene of 5, 10 meththylenetetrahydrofolat reductase (MTHFR): findings from over 7000 newborns from 16 areas worldwide J Med Genet, 40, 619 - 625 DCCLVI 31 Schneider J A, Rees D C, Liu Y T et al (1998) Worldwide distribution of a common MTHFR mutation Am J Hum Genet, 62, 1258 - 1260 DCCLVII 32 Sadewa A H, Sunarti, Sutomo R et al (2002) The C677T mutation in he MTHFR gene among the indonesia Javanese populoation Kobe J Med Sci., 8, 137 - 144 DCCLVIII 33 Hegete R A, Tully C., Young T K et al (1997) 677T mutation of MTHFR and cardiovascular disease in Canada Inuit Lancet, 349, 1221 1222 DCCLIX 34 Laura Di Renzo, Luigi Tonino Marsella, Francesca Sarlo et all (2014) C677T gên polymorphism ò MTHFR and metabolic syndrome: response to dietary intervention Journal ò translational medecine, 12, 329 - 348 DCCLX 35 Boyi Yang, Shujun Fan, Xueyan Zhi et all (2014) Associations ò MTHFR C677T and MTRR A66G gen polymorphisms with metabolic sydrome: A case control study in Northern China Int J Mol Sci, 15, 21687 - 21702 DCCLXI 36 Nevin llhan, Mehmet Kucuksu, Dilara Kaman et all (2008) The 677 C/T MTHFR Polymorphism is Associated with Essential Hypertension, Coronary Artery Disease, and Higher Homocysteine Levels Archives of Medical Research, 39(1), 125 - 130 DCCLXII 37 R F Franco, A G Araújo, J F Guerreiro et all (2013) Analysis of the 677 C→T Mutation of the Methylenetetrahydrofolate Reductase Gene in Different Ethnic Group Thrombosis and Haemostasis, 79(1), 119 - 121 DCCLXIII 38 Santosh Kumar Gupta, Jyoti Kotwal, Atul Kotwal (2010) Role ò homocystein and MTHFR C677T gene polymorphism as risk factors for coronary artery disease in young Indians Indian J Med Res, 135, 506 - 512 DCCLXIV 39 factor Frosst P, Blom HJ, Milos R et al (1995) A candidate genetic risk for vascular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase Nat Genet., 10(1), 111 - 113 DCCLXV 40 Makiko Maeda, Isamu Yamamoto, Masakatsu Fukuda et al (2003) MTHFR Gene Polymorphism as a Risk Factor for Diabetic Retinopathy in Type Diabetic Patients Without Serum Creatinine Elevation Diabetes Care, 26(2), 547 - 548 DCCLXVI 41 Vlad Shpichinetsky, Itamar Raz, Yechiel Friedlander et al (2000) The Association between Two Common Mutations C677T and A1298C in Human Methylenetetrahydrofolate Reductase Gene and the Risk for Diabetic Nephropathy in Type II Diabetic Patients J Nutr., 130, 2493 2497 DCCLXVII 42 Tạ Thành Văn ((2010)) PCR số kỹ thuật sinh học phân tử, Nhà xuất y học, 28-119 DCCLXVIII DCCLXIX DCCLXX PHỤ LỤC I MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU DCCLXXI DCCLXXII Mã bệnh án……………………Mã số bệnh nhân……………………… DCCLXXIII DCCLXXIV DCCLXXX DCCLXXXII Đã ký giấy đồng ý tham gia DCCLXXV.DCCLXXVI Có DCCLXXVIII Không DCCLXXIX (Nếu không, kết thúc) Họ tên người tham gia nghiên cứu ĐịaDCCLXXXIII DCCLXXXI Điện thoại liên DCCLXXXV.└─┴─┴─└─┴─└─┴─└─┴─┴─┴─┘ lạc DCCLXXXVI C THÔNG TIN VỀ BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU DCCLXXXVII DCCLXXXVIII Giới DCCLXXXIX Nam DCCXCI.1 DCCLXXXIV DCCXC DCCXCIII DCCXCIV.Ngày Dân tộc C3 DCCCIII DCCCIV D1 DCCXCII.2 Ngày/tháng DCCXCVI /năm  //  DCCXCIX Kinh DCCCI DCCC Khác DCCCII tháng năm sinhDCCXCV C2 DCCXCVII DCCXCVIII Nữ D THÔNG TIN VỀ TIỀN SỬ, TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG VÀ BỆNH ĐTĐ DCCCVIII.1 DCCCV Tiền sử gia đình cóDCCCVI Có người mắc đái tháo DCCCVII Khơng DCCCIX đường DCCCX DCCCXI D2 DCCCXII DCCCXVII DCCCXVIII DCCCXIII Tiền sử sinh ≥ 4kg DCCCXIV Có DCCCXV.1 Khơng DCCCXVI.2 Có DCCCXXI.1 (với nữ) Tiền sử chẩn đoánDCCCXIX D DCCCXXIII.DCCCXXIV D4.1 DCCCXXIX.DCCCXXX D4.2 DCCCXXXII DCCCXXXIII DCCCXXXVIII DCCCXXXIX DCCCXLIV.DCCCXLV D7 DCCCXX đái tháo đường thai nghén (với nữ) Không Tiền sử hút thuốcDCCCXXV DCCCXXVI Có Thời điểm chẩn DCCCXXXI đốn Khơng DCCCXXVIII.2  //  Có Tiền sử mắc bệnh DCCCXL tăng huyết áp DCCCXLI Có DCCCXLII.1 Khơng DCCCXLIII.2 DCCCXLVI Tiền sử mắc bệnh lý khác DCCCXLVII Có  Cơn đau thắt ngực DCCCLI  Loãng xương DCCCLII  Bệnh phổi tắc nghẽn mạn tính DCCCLIII DCCCLV. KhôngDCCCXXXVII.2 Không  Thuốc viên viên Cân nặng (kg)  Suy thận  Khác (ghi rõ ) ………………  Thuốc tiêm, liều ,DCCCLXIV.DCCCLXV D10 D9  Thối hóa khớp gối Bệnh lý tuyến giáp D8  Thuốc tiêm + Vòng eo (cm) , Vịng mơng (cm) , DCCCLXVIII.DCCCLXIX D12 BMI Chiều cao (cm) , DCCCLXXII DCCCLXXIII D14 Huyết áp (mmHg), D11 D13 DCCCLXXV DCCCLXXIV DCCCXLIX.2  Loãng DCCCLVIII xương Dùng thuốc: Thuốc đái tháo đường DCCCLXX.DCCCLXXI DCCCXLVIII.1  Suy DCCCLVI tim DCCCLIX DCCCLX DCCCLXVII DCCCLXVI DCCCXXXVI.1 DCCCLVII DCCCLIV DCCCLXII.DCCCLXIII DCCCXXVII.1 DCCCXXXIV Tiền sử có rối loạn DCCCXXXV Lipid máu DCCCL DCCCLXI DCCCXXII.2 Đo vòng cổ chân DCCCLXXVI P DCCCLXXVII Đo , vòng cổ nghỉ chân T , D DCCCLXXIX DCCCLXXVIII DCCCLXXXIII DCCCLXXXVII DCCCLXXXVI DCCCXC D Lần 1: Lực bóp tay T , DCCCLXXX DCCCLXXXI D18 Lần 2: Lực bóp tay T , Lần 1: Lực bóp tay P , DCCCLXXXV Lần 2: Lực bóp tay P , Thời gian 4m nhanh DCCCLXXXVIII DCCCLXXXIX theo vạch kẻ sẵn an toàn (giây) , Số lần đứng lên ngồi xuống phút ( lần ) , E CÁC THĂM DÒ CẬN LÂM SÀNG DCCCXCI.DCCCXCII Glucose  DCCCXCIV.DCCCXCV E2 ,  HbA1c (%)  CM , E4  CMI CholesterolTP (mmol/l) CMV  CMVI , E6  CMVII HDL – chol (mmol/l)CMVIII , CMXI CMXII ,E8  CMXIII AST (UI/l)  CMXVIII , E10  CMXIX  CMXXIV , E12  CMXXV DCCCXCIII E1 DCCCXCVIII DCCCXCVII Triglycerid (mmol/l) CMIV LDL – (mmol/l) CMX ALT (UI/l) CMIII E5 CMIX , DCCCXCIX chol E7 CMXV CMXVI Creatinin (µmol/l) CMXVII E9 CMXXI CMXXII CRP CMXXIII E11 CMXXVII.CMXXVIII Microabumin niệuCMXXIX E13 CMXXXIII.CMXXXIV Hồng cầu (T/l) CMXXXVI DCCCXCVI , CMII , CMXIV , Ure (mmol/l) CMXX , BC niệu CMXXVI ,  CMXXX CMXXXI , E14  Protein niệu (g/l) CMXXXVIII  CMXXXIX BC (G/l) CMXXXII , CMXLI CMXXXV E Hb(g/l) ,  CMXXXVII CMXLIII CMXLIV Tiểu cầu(G/l) CMXLV E17 CMXLIX CML Điện tâm đồ CMLII Siêu âm tim E CMXL NEUT (%)  ,  CMXLII ,  CMXLVI CMXLVII , E18  CMXLVIII , E19 CMLI E20 CMLIII CMLIV CMLV Chụp XQ tim phổi E21 CMLVI CMLVII Siêu âm bụng E22 CMLVIII CMLIX Siêu âm tuyến giáp E23 CMLX CMLXI E24 CMLXVI CMLXVII E26 CMLXXII.CMLXXIII E28 LCMLXII A r m ,  CMLXIII CMLXIV E25 RCMLXV A r m , L L e g CMLXVIII , CMLXIX E27 CMLXX R CMLXXI L e g , B M D CMLXXIV , CMLXXV.CMLXXVI E29 CMLXXVII % , F a t CMLXXVIII.CMLXXIX E30 CMLXXXIV T S c o r e CMLXXX , CMLXXXI.CMLXXXII E31 CMLXXXIII Z S c o r e , CMLXXXV CMLXXXVI CMLXXXVII PHỤ LỤC II Quy trình tách DNA DNA tách từ tế bào bạch cầu sử dụng Kit OMEGA: Lấy 300ul máu, sau bổ sung thêm 900ul Cell Lysis Solution => Mix Ủ 10 phút nhiệt độ phòng Ly tâm 14500 rcf 30 giây Loại bỏ dịch Bổ sung 300ul Nuclei Lysis Solution => Mix Bổ sung 100ul Protein Precipitation Solution Vortex 20 giây Ly tâm 16000 rcf phút Chuyển sịch sang ống eppendorf có chứa 300ul Isopropanol => Mix Ly tâm 16000 rcf 10 phút 10 Loại bỏ dịch Bổ sung 300ul ethanol 70% 11 Ly tâm 16000 rcf phút => Loại bỏ dịch 12 Làm khô mẫu 15 phút máy hút chân không 13 Bổ sung 100ul nước 3D/ DNA Rehydration Solution Ủ 65°C 4°C qua đêm CMLXXXVIII ... mối liên quan đa hình kiểu gen MTHFR C677T với số biến chứng tim mạch bệnh nhân đái tháo đường type 2? ?? với hai mục tiêu: Xác định tỷ lệ đa hình kiểu gen MTHFR C677T bệnh nhân ĐTĐ type Xác định số. .. Xác định số liên quan đa hình kiểu gen MTHFR C677T với số biến chứng bệnh nhân ĐTĐ type 9 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đái tháo đường type 1.1.1 Định nghĩa Theo TCYTTG 20 02: Đái tháo đường (ĐTĐ)... NỘI PHẠM HỒNG NGỌC NGHI£N CøU MốI LIÊN QUAN GIữA ĐA HìNH KIểU GEN MTHFR C677T VớI MộT Số BIếN CHứNG BệNH NHÂN ĐáI THáO §¦êNG TYPE Chuyên ngành: Sinh lý học Mã số: 60 720 106 ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN THẠC