Các thông số kỹ thuật được sửa đổi được chuẩn bị tại JECFA lần thứ 65 (2005) và được xuất bản trong FNP 52 Add 13 (2005), thay thế các thông số kỹ thuật được chuẩn bị tại JECFA lần thứ 55 (2000) và được xuất bản trong FNP 52 Add 8 (2000). ADI cho aspartame (040 mg kg bw) được thiết lập tại JECFA lần thứ 25 (1981) và cho acesulfame K (015 mg kg bw) được thiết lập tại JECFA lần thứ 37 (1990) bao gồm các nguyên tố aspartame và muối của acesulfame.
Chuẩn bị JECFA lần thứ 25 (1981), xuất FNP 19 (1981) FNP 52 (1992) Thông số kỹ thuật kim loại thạch tín sửa đổi JECFA lần thứ 57 (2001) ADI 0-40 mg / kg bw thiết lập JECFA lần thứ 25 (1981) ĐỒNG BỘ MÔN: Aspartyl phenylalanin metyl este: APM; INS số 951 ĐỊNH NGHĨA Tên hóa học 3-Amino-N- (alphacarbomethoxy-phenethyl) -succinamic acid, N-L-alphaaspartyl-L-phenylalanin-1-metyl este C.A.S số 22839-47-0 Công thức hóa học C14H18N2O5 Cơng thức cấu tạo Trọng lượng cơng thức 294,31 Thử nghiệm Khơng 98% khơng q 102% sở làm khơ MƠ TẢ Bột kết tinh màu trắng, không mùi, vị đậm CÔNG DỤNG CHỨC NĂNG Chất tạo NÉT ĐẶC TRƯNG NHẬN BIẾT Độ hịa tan (Tập 4) Ít tan nước etanol Thử nhóm amin Hịa tan g ninhydrin 75 ml dimethylsulfoxit, thêm 62 mg hydrindantin, pha loãng thành 100 ml dung dịch đệm liti axetat M (pH 9), lọc Chuyển khoảng 10 mg mẫu vào ống nghiệm, thêm ml dung dịch thuốc thử, đun nóng Màu tím sẫm tạo thành Phép thử este Hoà tan khoảng 20 mg chế phẩm ml metanol, thêm 0,5 ml metanol bão hồ với hydroxylamine hydrochloride, trộn, sau thêm 0,3 ml kali N hiđroxit metanol Đun hỗn hợp đến sơi, sau để nguội, điều chỉnh độ pH đến từ đến 1,5 với axit clohydric TS, thêm 0,1 ml clorua sắt TS M Dịch tiếng anh ACESULFAME POTASSIUM Được chuẩn bị JECFA lần thứ 57 (2001) xuất FNP 52 add 9(20010, thay thông số chuẩn bị JECFA lần thứ 46 (1996) xuất FNP 52 add (1996) ADI từ 0-15 mg/kg thể trọng thành lập JECFA lần thứ 37 (1990) Đồng Acesulfame K; INS số 950 Định nghĩa Tên hóa học Muối kali 6-metyl-1.2.3-oxathiazine-4-one-2,2-dioxide C.A.S số 55589-62-3 Công thức hóa học C4H4KNO4S Cơng thức cấu tạo Cân cơng thức 201,24 khảo nghiệm miêu tả khơng 99,0% không lớn 101,0% sở làm khô tinh bột tinh khiết màu trắng, không mùi công dụng chức chất tạo ngọt, chất điều vị đặc điểm nhận biết độ tan hòa tan tự nước, hịa tan etanol phép đo quang phổ hòa tan 10mg mẫu 1000ml nước Dung dịch cho thấy độ hấp thu cực đại bước sóng 227+2 nm kiểm tra kali vượt qua kiểm tra kiểm tra thu cách đốt cháy 2g mẫu kiểm tra lượng mẫu thêm vài giọt dung dịch natri cobaltinitrit 10% vào dung dịch 0.2 gam mẫu ml axit axetic TS ml nước tạo kết tủa màu vàng RURITY mát làm khô không 1,0%(105 độ, giờ) ph 5,5-7,5(1% soln) tạp chất hữu uv xem mô tả vượt qua mức kiểm tra 20mg/kg thành phần hoạt tính kiểm tra không 3mg/kg, phương pháp 3, dụng lượng mẫu phù hợp thể tích thích hợp dung dịch chuẩn bị để xây dựng đường chuẩn chì không 1mg/kg, xác định cách dụng kỹ thuật hấp thu nguyên tử thích hợp mức quy định việc lựa chọn mẫu phương pháp chẩn bị mẫu dựa nguyên tắc mô tả phần phương pháp dụng cụ kiểm tra kiểm ta tiềm tạp chất hữu tiến hành theo dẫn phương pháp sắc kí ( sắc kí lỏng hiệu cao.FNP 5) sử dụng điều kiện sau dụng axit etyl este 4hydroxybenzoic làm chất đối chứng cột: 25cm×4.6mm stee khơng gỉ pha tĩnh: pha đảo ngược (c18 silica gel, 3-5 um) rửa giải: Isocratic pha động: Acetonitril/ 0,01 mol/ tetrabutyl amoni hydro sulfat (TBAHS) nước, 40/60 lưu lượng: khoảng 1ml/phút loại máy dò: UV diode artay, 227 nm cỡ mẫu: 20ul dung dịch 10gll mẫu nước khử ion hệ thống sắc kí phải có khả tách acesulfame k axit etylic 4-hydroxybenzoic với độ phân giải đỉnh khác acesulfame k xuất vòng ba lần thời gia rửa giải acesulfame k Thì thực lần thứ hai cách sử dụng 20ul dd 0,2 mg/l mẫu tổng diện tích tất pic rửa giải lần chạy vòng lần thời gian rửa giải acesulfame k, ngoại trừ pic acesulfamek, khơng vượt q diện tích pic acesulfame k lần chạy thứ hai phương pháp hỏi hòa tan khoảng 0,15g mẫu làm khơ( hịa tan chậm) Cân xác 50,0ml axit axetic băng chuẩn độ điện axit pecloric 0,1N thêm hai giọt tinh thể tím TS chuẩn độ axit pecloric 0,1N đến điểm cuối màu xanh lam tồn 30 giây thực xác định ẫu màu trắng thực hiệu chỉnh cần thiết ml axit pecloric N tương đương với 20.21 mg CH.KNO,S ASPARTAME Chuẩn bị JECFA lần thứ 25 (1981), xuất FNP 19 (1981) FNP 52 (1992) Thông số kỹ thuật kim loại thạch tín sửa đổi JECFA lần thứ 57 (2001) ADI 0-40 mg / kg bw thiết lập JECFA lần thứ 25 (1981) ĐỒNG BỘ MÔN: Aspartyl phenylalanin metyl este: APM; INS số 951 ĐỊNH NGHĨA Tên hóa học 3-Amino-N- (alpha-carbomethoxy-phenethyl) -succinamic acid, N-L-alpha-aspartyl-L-phenylalanin-1-metyl este C.A.S số 22839-47-0 Cơng thức hóa học C14H18N2O5 Cơng thức cấu tạo Trọng lượng cơng thức Thử nghiệm 294,3 Khơng 98% không 102% sở làm khơ MƠ TẢ Bột kết tinh màu trắng, khơng mùi, vị đậm CÔNG DỤNG CHỨC NĂNG Chất tạo NÉT ĐẶC TRƯNG NHẬN BIẾT Độ hịa tan Ít tan nước etanol Thử nhóm amin Hịa tan g ninhydrin 75 ml dimethylsulfoxit, thêm 62 mg hydrindantin, pha loãng thành 100 ml dung dịch đệm liti axetat M (pH 9), lọc Chuyển khoảng 10 mg mẫu vào ống nghiệm, thêm ml dung dịch thuốc thử, đun nóng Màu tím sẫm tạo thành Phép thử este Hoà tan khoảng 20 mg chế phẩm ml metanol, thêm 0,5 ml metanol bão hồ với hydroxylamine hydrochloride, trộn, sau thêm 0,3 ml kali N hiđroxit metanol Đun hỗn hợp đến sơi, sau để nguội, điều chỉnh độ pH đến từ đến 1,5 với axit clohydric TS, thêm 0,1 ml clorua sắt TS A có màu tím PURITY Tổn thất làm khơ Khơng q 4,5% (105o, giờ) pH 4,5 - 6,0 (1 125 soln) Vòng quay cụ thể [alpha] 20, D: Giữa + 14,5 + 16,5˚(Dung dịch 4% axit fomic 15 N;xác định vòng 30 phút sau chuẩn bị dung dịch mẫu) Phép đo quang phổ Độ truyền dung dịch axit clohydric 100, N, xác định bằngcuvet cm bước sóng 430 nm với máy quang phổ thích hợp, sử dụng Naxit clohydric làm đối chứng, không nhỏ 0,95, tương đương với độ hấp thụ không xấp xỉ 0,022 Tro sunfat Không 0,2% Thử g mẫu (Phương pháp I) Chì Khơng q mg / kg Xác định cách sử dụng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thí hợp với quy định cấp độ Việc lựa chọn cỡ mẫu phương pháp chuẩn bị mẫu có thểvdựa nguyên tắc phương pháp mô tả Tập 4, “Dụng cụ Phương pháp ” 5-Benzyl-3,6-dioxo-2- Không 1,5% axit axetic piperazine Xem mô tả KIỂM TRA Các đồng phân quang học khác Vượt qua thử nghiệm Xem mô tả KIỂM TRA KIỂM TRA 5-Benzyl-3,6-dioxo- 2- Dụng cụ axit axetic piperazine Sử dụng máy sắc ký khí thích hợp trang bị lửa ion hóa hydro máy dị thiết kế để xử lý cột thủy tinh với tiêm cột (Micro-Tex 220 tương đương), có kích thước 1,83 mét (6 feet) x mm (i.d.) cột thủy tinh đóng gói với 3% OV-1 Supelcoport 80/100 lưới (Supelco, Inc tương đương) Điều hòa cột qua đêm 250˚ trước điều chỉnh cân với điều kiện hoạt động Để loại trừ việc xây dựng- từ oxit silic, thường xuyên làm máy dò axeton Điều kiện hoạt động Các thơng số vận hành khác nhau, tùy thuộc vào dụng cụ sử dụng, thu sắc ký đồ thích hợp cách sử dụng điều kiện sau: Nhiệt độ cột, 200˚ ; Nhiệt độ đầu vào, 200˚ ; Nhiệt độ máy dị, 275˚ ; Khí mang, heli, chảy với tốc độ 75 ml tối thiểu; Lưu lượng hydro khơng khí đến đầu đốt, tối ưu hóa để mang lại độ nhạy tối đa; Máy ghi âm, mV đầy đủ thang đo Lưu ý: Đối với Micro-Tex, độ suy giảm 16 x 10 Thuốc thử Ngay trước sử dụng, pha loãng phần N, O-bis- (trimetylsilyl), theo thể tích axetamit với phần đimetylformamit Chuẩn bị tiêu chuẩn Chuyển khoảng 25 mg axit 5-Benzyl-3, 6-dioxo-2-piperazineacetic Tiêu chuẩn tham chiếu (có sẵn từ Hóa chất thực phẩm Codex, NAS / NRC, 2101 Đại hội Hiến pháp, N.W., Washington, D.C 20418, Hoa Kỳ), xác cân, cho vào bình định mức 50 ml, hịa tan metanol, pha loãng đến vạch mức với metanol, trộn Dùng pipet lấy 10 ml dung dịch cho vào 100 ml thứ hai bình định mức, pha lỗng metanol đến vạch mức lắc Pipet ml dung dịch thứ hai vào lọ dram, có nắp lót Teflon, bay đến làm khô nồi cách thủy Thêm ml thuốc thử Silyl hóa vào cặn, Đậy chặt nắp lọ, lắc nung lò 80˚ 30 phút Gỡ bỏ lọ từ tủ sấy, lắc 15 giây làm nguội đến nhiệt độ phòng Chuẩn bị mẫu Chuyển khoảng 10 mg mẫu aspartam, cân xác, vào lọ dram, có nắp lót Teflon, thêm ml thuốc thử Silylation, đậy chặt nắp, lắc nung lò 80˚ 30 phút Lấy lọ khỏi lò, lắc 15 giây làm nguội đến nhiệt độ phòng Thủ tục Bơm phần μl Chế phẩm chuẩn vào máy sắc ký khí, thu sắc ký đồ, đo chiều cao pic tạo axit benzyl-3,6-dioxo-2-piperazineacetic, ghi P Dưới phần nêu điều kiện, thời gian rửa giải khoảng 7-9 phút Tương tự, tiêm phần μl Chuẩn bị mẫu, lấy sắc ký đồ, đo chiều cao đỉnh tạo axit 5-benzyl-3,6-dioxo-2-piperazineacetic chứa mẫu ghi lại dạng p Phép tính Tính phần trăm axit 5-benzyl-3,6-dioxo-2-piperazineacetic mẫu theo công thức: Ở đâu W = trọng lượng xác tính mg chất chuẩn đối chiếu lấy w = trọng lượng xác tính mg aspartam lấy Các thiết bị đồng phân quang học khác Sử dụng máy phân tích axit amin thích hợp (chẳng hạn Hitachi KLA-5, tương đương) trang bị cột 550 mm x mm (i.d.) đóng gói với khoảng 50 g nhựa trao đổi cation mạnh (Hitachi Custom Ion-Exchange Resin No 2613, tương đương), cuộn phản ứng 29-m x 0,5 mm (i.d.), nguồn cung cấp ninhydrin quang kế có lọc nhiễu cho bước sóng 570 nm máy dị tế bào quang selen (xem Hình) Điều kiện hoạt động Các thơng số vận hành khác nhau, tùy thuộc vào dụng cụ sử dụng, thu sắc ký đồ thích hợp cách sử dụng điều kiện sau: - Nhiệt độ cột: 55˚ - Nhiệt độ cuộn phản ứng: 100˚ - Eluant: Dung dịch đệm xitrat pH 5,28 - Áp suất rửa giải: 8-10 kg / cm2 - Tốc độ dòng chảy: 60 ml / h - Áp suất dung dịch ninhydrin: 2-5 kg / cm2 - Tốc độ dòng dung dịch ninhydrin: 30 ml / h - Máy dò trắc quang: đo bước sóng: 570 nm - Máy ghi tồn thang đo: độ hấp thụ: 0-0,1 Thuốc thử dung dịch - Dung dịch đệm xitrat pH 5,28: Hòa tan 34,3 g natri xitrat (C6H5Na3O7.2H2O) khoảng 400 ml nước, thêm 7,5 ml axit clohydric TS (35%) ml rượu benzyl, thêm nước vừa đủ để tạo thành 1.000 ml - Dung dịch đệm xitrat pH 2,2: Hòa tan 1,4 g natri xitrat (C6H5Na3O7.2H2O), 13,0 g axit xitric (C6H8O7H2O) 10,9 g natri clorua khoảng 400 ml nước thêm nước vừa đủ để thành 1.000 ml - Dung dịch Ninhydrin: Đổ 140 ml nước vào cốc 500 ml, thêm 82,0 g natri axetat (C2H3NaO2), khuấy cho tan hoàn toàn, thêm 25 ml băng axit axetic TS pha loãng với nước thành 250 ml Điều chỉnh pH dung dịch để 5,51 ± 0,03 với axit axetic băng TS natri axetat TS (đệm axetat Giải pháp) Rót 750 ml metylcellosolve vào chai thủy tinh nâu 1.000 ml thêm 250 ml dung dịch đệm axetat Cung cấp khí nitơ thơng qua dung dịch, trộn, hịa tan 20 g ninhydrin sau 0,38 g clorua stannous (SnCl2 · 2H2O) dung dịch Để dung dịch đứng yên 24 trước sử dụng Sự chuẩn bị - Chuẩn bị tiêu chuẩn: Chuyển 2,50 mg L-alpha-aspartyl-D- phenylalanin metyl este chuẩn đối chiếu (Có sẵn từ Ajinomoto Co Inc., 1-5-8 Kyobashi, Chuo-ku, Tokyo 104, Nhật Bản.) Thành 100 ml bình định mức, hịa tan pha lỗng đến vạch mức nước (Dung dịch A) Chuyển 250 mg L-alpha-aspartyl-L phenylalanin metyl este Chất chuẩn đối chiếu cho vào bình định mức 100 ml khác, hòa tan pH 2,2 dung dịch đệm xitrat, thêm 10,0 ml Dung dịch A pha loãng đến vạch mức có pH 2.2 Dung dịch đệm xitrat Bảo quản chế phẩm 5˚ - Chuẩn bị mẫu: Chuyển 250 mg mẫu vào cốc 100 ml bình định mức, hịa tan pha lỗng đến vạch mức dung dịch đệm xitrat pH 2,2 giải pháp Thủ tục Tái tạo cột natri hydroxit TS 0,2 N sau đệm Dung dịch đệm xitrat pH 5,28 Sau tiến hành dung dịch ninhydrin đến hệ thống, bơm phần 500 μl Chế phẩm chuẩn vào amin máy phân tích axit thu sắc ký đồ Theo điều kiện nêu, thời gian lưu khoảng 100 phút L-alpha-aspartyl-Dphenylalanin metyl este khoảng 115 phút L-alpha-aspartyl-L phenylalanin metyl este, tương ứng Tương tự, bơm phần 500 μl Chuẩn bị Mẫu thu sắc ký đồ So sánh sắc ký đồ với sắc ký đồ chuẩn,Chuẩn bị xác định thành phần cách so sánh thời gian lưu Không đỉnh tương ứng với L-alpha-aspartyl-D-phenylalanin metyl este Được Quan sát (Phương pháp tương tự áp dụng cho Dalpha-aspartyl-L-phenylalanin metyl este Giới hạn phát tổng L-alpha-aspartyl-D-phenylalanin metyl este Dalpha-aspartyl-L-phenylalanin metyl este phương pháp làkhoảng μg / ml.) PHƯƠNG PHÁP HỎI Cân xác khoảng 150 mg mẫu làm khơ trước 105˚ 4h hòa tan 35 ml dimethylformamide, thêm giọt thymol blue TS, chuẩn độ microburette đến điểm cuối màu xanh lam đậm với 0,1 N liti metoxit Thực xác định trống thực điều cần thiết điều chỉnh Mỗi ml liti metoxit 0,1 N tương đương với 29,43 mg C14H18N2O5 Thận trọng: Bảo vệ dung dịch khỏi hấp thụ carbon dioxide ẩm cách đậy bình chuẩn độ nhơm hịa tan mẫu q trình chuẩn độ ... 55589-62-3 Cơng thức hóa học C4H4KNO4S Cơng thức cấu tạo Cân công thức 201,24 khảo nghiệm miêu tả không 99,0% không lớn 101,0% sở làm khô tinh bột tinh khiết màu trắng, không mùi công dụng chức chất... màu vàng RURITY mát làm khô không 1,0%(105 độ, giờ) ph 5,5-7,5(1% soln) tạp chất hữu uv xem mô tả vượt qua mức kiểm tra 20mg/kg thành phần hoạt tính kiểm tra không 3mg/kg, phương pháp 3, dụng... nm kiểm tra kali vượt qua kiểm tra kiểm tra thu cách đốt cháy 2g mẫu kiểm tra lượng mẫu thêm vài giọt dung dịch natri cobaltinitrit 10% vào dung dịch 0.2 gam mẫu ml axit axetic TS ml nước tạo k? ??t