Nghiên cứu thành phần hóa học rễ cây cốt khí củ (reynoutria japonica houtt)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ===  === Trần Thanh Hà NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC RỄ CÂY CỐT KHÍ CỦ (REYNOUTRIA JAPONICA HOUTT.) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2012 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ===  === Trần Thanh Hà NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC RỄ CÂY CỐT KHÍ CỦ (REYNOUTRIA JAPONICA HOUTT.) Chun ngành: Hóa học hữu Mã số LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Cán hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Văn Đậu Hà Nội – 2012 LỜI CẢM ƠN Luận văn tốt nghiệp hồn thành Phịng thí nghiệm Hố học hợp chất thiên nhiên, Bộ mơn Hố hữu cơ, Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Với lòng biết ơn sâu sắc, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng lời cảm ơn chân thành đến: PGS TS Nguyễn Văn Đậu tin tưởng giao đề tài, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện nghiên cứu thuận lợi giúp suốt thời gian thực luận văn Tôi gửi lời cảm ơn chân thành tới anh chị em đồng nghiệp Viện Dược liệu - nơi công tác chia sẻ công việc, giúp đỡ suốt thời gian học cao học Đồng thời gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô giáo, nghiên cứu sinh, bạn học viên cao học K21 em sinh viên Phịng thí nghiệm Hố học hợp chất thiên nhiên tạo môi trường nghiên cứu khoa học thuận lợi giúp đỡ tơi hồn thành tốt luận văn Hà Nội, tháng 12 năm 2012 Học viên Trần Thanh Hà Trần Thanh Hà K21 Cao học Hóa MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 THỰC VẬT HỌC 1.1.1 Họ Rau răm (Polygonaceae) 1.1.2 Chi Reynoutria 1.1.3 Cốt khí củ (Reynoutria Japonica Houtt.) 1.2 ỨNG DỤNG 1.3 THÀNH PHẦN HOÁ HỌC 1.3.1 Anthranoid 1.3.2 Stilben dẫn xuất 1.3.3 Phenol 11 1.3.4 Flavonoit 12 1.3.5 Các thành phần khác 14 1.3.6 Thành phần hóa học hoa, lá, thân cốt khí củ 16 1.4 TÁC DỤNG SINH HỌC 17 1.4.1 Tác dụng kháng khuẩn 17 1.4.2 Tác dụng chống oxy hóa 18 1.4.3 Tác dụng chống viêm 19 1.4.4 Tác dụng kháng u, chống ung thư 19 1.4.5 Tác dụng hạ lipit 21 1.4.6 Tác dụng chống virus 21 Luận văn Thạc sĩ 2012 Trần Thanh Hà K21 Cao học Hóa 1.4.7 Trị đái tháo đường 21 1.4.8 Các tác dụng khác 22 Chương 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 PHƯƠNG PHÁP CHIẾT CÁC CHẤT 25 2.2 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VÀ PHÂN TÁCH 25 2.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP PHỔ KHẢO SÁT CẤU TRÚC 26 2.4 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG BẰNG HPLC 26 Chương 3: THỰC NGHIỆM 28 3.1 THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤT 28 3.1.1 Thiết bị 28 3.1.2 Hóa chất 29 3.2 NGUYÊN LIỆU THỰC VẬT 29 3.3 ĐỊNH TÍNH CÁC NHĨM CHẤT CĨ TRONG RỄ CỐT KHÍ CỦ 29 3.3.1 Định tính thành phần dịch chiết ete dầu hỏa 29 3.3.2 Định tính thành phần dịch chiết etanol 30 3.3.3 Định tính nhóm chất khác 32 3.4 ĐIỀU CHẾ CÁC PHẦN CHIẾT TỪ RỄ CỐT KHÍ CỦ 33 3.5 PHÂN TÍCH CÁC PHẦN CHIẾT BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG 34 3.5.1 Phân tích phần chiết n-hexan (RJH) 34 3.5.2 Phân tích phần chiết etyl axetat (RJE) 35 3.5.3 Phân tích phần chiết n-butanol (RJB) 36 3.6 PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT TỪ CÁC PHẦN CHIẾT 37 3.6.1 Phân tách phần chiết n-hexan (RJH) 37 Luận văn Thạc sĩ 2012 Trần Thanh Hà K21 Cao học Hóa 3.6.2 Phân tách phần chiết etyl axetat (RJE) 38 3.6.3 Phân tách phần chiết n-butanol (RJB) 40 3.7 HẰNG SỐ VẬT LÝ VÀ DỮ KIỆN PHỔ 41 3.8 PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG RESVERATROL VÀ PICEID 47 3.8.1 Nguyên liệu 47 3.8.2 Chuẩn bị mẫu phân tích: điều chế phần chiết metanol 47 3.8.3 Điều kiện phân tích sắc ký HPLC 47 Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 49 4.1 ĐIỀU CHẾ CÁC PHẦN CHIẾT 49 4.2 ĐỊNH TÍNH CÁC NHĨM CHẤT TRONG RỄ CỐT KHÍ CỦ 51 4.3 PHÂN TÁCH CÁC PHẦN CHIẾT RỄ CÂY CỐT KHÍ CỦ 52 4.3.1 Phân tách phần chiết n-hexan (RJH) 52 4.3.2 Phân tách phần chiết etyl axetat (RJE) 54 4.3.3 Phân tách phần chiết n-butanol (RJB) 56 4.4 CẤU TRÚC CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐƯỢC PHÂN LẬP 57 4.5 PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG RESVERATROL VÀ PICEID 68 4.5.1 Phân tích HPLC dịch chiết MeOH cốt khí củ 68 4.5.2 Xây dựng đường chuẩn resveratrol đường chuẩn piceid .69 KẾT LUẬN 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 PHỤ LỤC Luận văn Thạc sĩ 2012 Trần Thanh Hà K21 Cao học Hóa MỤC LỤC CÁC BẢNG, HÌNH VÀ SƠ ĐỒ TRONG LUẬN VĂN Bảng 3.1 Hiệu suất điều chế phần chiết rễ cốt khí củ 34 Bảng 3.2 Phân tích TLC phần chiết n-hexan (RJH) 35 Bảng 3.3 Phân tích phần chiết etyl axetat (RJE) 36 Bảng 3.4 Phân tích phần chiết n-butanol (RJB) 37 Bảng 4.1 Kết định tính nhóm chất rễ cốt khí củ 51 Bảng 4.2 Nồng độ chất resveratrol piceid hỗn hợp chuẩn 69 Bảng 4.3 Hàm lượng resveratrol piceid có mẫu rễ cốt khí củ 71 Hình 1.1 Một số hình ảnh cốt khí củ Hình 2.1 Phương pháp sắc ký cột 26 Hình 4.1 Tương tác HSQC RJE13 65 Hình 4.2 Tương tác HMBC RJE13 65 Hình 4.3 Sắc ký đồ HPLC 68 Hình 4.4 Phương trình đường chuẩn piceid 70 Hình 4.5 Phương trình đường chuẩn resveratrol 70 Sơ đồ 4.1 Quy trình điều chế phần chiết từ rễ cốt khí củ 50 Sơ đồ 4.2 Quy trình phân tách phần chiết n-hexan 53 Sơ đồ 4.3 Quy trình phân tách phần chiết etyl axetat 55 Sơ đồ 4.4 Quy trình phân tách phần chiết n-butanol 56 Sơ đồ 4.5 Các mảnh cấu trúc emodin 59 200 180 40 160 20 140 ppm 120 100 80 60 119.795 182.729 184.252 HA−RJH2−CD Cl3−C13CPD Current Data Parameters NAME EXPNO PROCNO F2 Date_ Time INSTRUM PROBHD PULPROG TD SOLVENT NS DS SWH FIDRES AQ RG DW DE TE D1 d11 DELTA MCREST MCWRK ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 P1 PL1 SFO1 ======== CHANNEL f2 ==== CPDPRG2 NUC2 PCPD2 PL2 PL12 PL13 SFO2 F2 SI SF WDW SSB LB GB 185 130 180 125 175 170 120 ppm 165 160 155 150 145 140 135 HA−RJH2−CDCl3−C13CPD &DEPT DEPT90 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm DEPT135 CH&CH3 CH2 180 C13CPD 180 HA−RJH2−CDCl3−C13CPD &DEPT DEPT90 135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 ppm 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 ppm 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 ppm DEPT135 CH&CH3 CH2 135 130 C13CPD 135 130 PHỤ LỤC 9: PHỔ EI-MS, H-NMR, 13 C-NMR, DEPT CỦA EMODIN BIANTHRON (RJE11) 11.753 84711 97411 04512 HA−RJE11−AcetoneD6−1H Current Data Parameters NAME HA_RJE11 EXPNO PROCNO F2 Date_ Time INSTRUM PROBHD PULPROG TD SOLVENT NS DS SWH FIDRES AQ RG DW DE TE D1 MCREST MCWRK ======== CHANNEL f1 ====== NUC1 P1 PL1 SFO1 F2 SI SF WDW SSB LB GB PC 13 12 1.0001.0000.9920.991 14 2.169 6.4 6.2 6.0 5.8 5.6 5.4 5.2 5.0 4.6 ppm 2.3 2.190 4.8 2.7 34 1.989 6.6 2.164 3.0 85 ppm 1.000 12.0 1.000 11.9 0.992 11.8 ppm 2.006 0.991 6.67 6.61 6 1 2.290 12.0 45 11.9 74 11.8 47 11.7 53 4.50 50 2.238 HA−RJE11−AcetoneD6−1H 528165.243165.165.010162.756689162 244191 115206 HA−RJE11−AcetoneD6−C13CPD Current Data Parameters NAME EXPNO PROCNO F2 Date_ Time INSTRUM PROBHD PULPROG TD SOLVENT NS DS SWH FIDRES AQ RG DW DE TE D1 d11 DELTA MCREST MCWRK ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 P1 PL1 SFO1 ======== CHANNEL f2 ==== CPDPRG2 NUC2 PCPD2 PL2 PL12 PL13 SFO2 F2 SI SF WDW SSB LB GB − Processing paramete 32768 125.7576773 EM 1.00 ppm 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 165 120 160 115 155 110 150 ppm105 145 140 135 130 125 165.528 165.243 165.010 21.850 162.756 162.689 122.005 56.861 56.822 117.313 117.266 114.873 147.552 147.244 141.106 111.373 110.994 109.782 109.751 145.533 102.696 21.917 HA−RJE11−AcetoneD6−C13CPD&DEPT DEPT90 210 200 190 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm 200 190 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm 200 190 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm DEPT135 CH&CH3 CH2 210 C13CPD 210 HA−RJE11−AcetoneD6−C13CPD&DEPT DEPT90 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 ppm 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 ppm 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 ppm DEPT135 CH&CH3 CH2 120 115 C13CPD 120 115 ... tơi lựa chọn rễ cốt khí củ làm đối tượng nghiên cứu luận văn thạc sĩ với tiêu đề: ? ?Nghiên cứu thành phần hố học rễ cốt khí củ (Reynoutria Japonica Houtt.)” Luận văn có nhiệm vụ nghiên cứu sau: -...ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ===  === Trần Thanh Hà NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC RỄ CÂY CỐT KHÍ CỦ (REYNOUTRIA JAPONICA HOUTT.) Chuyên ngành: Hóa học hữu Mã... hợp để điều chế phần chiết chứa hợp chất hữu poliphenol từ rễ cốt khí củ - Phân tích thành phần hóa học rễ cốt khí củ sắc kí lớp mỏng - Phân tách phần chiết phương pháp sắc kí từ phần chiết thu