Đánh Giá Hiệu Quả Của Một Số Môi Trường Lên Nhân Cụm Mô Sẹo Dừa Sáp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CỦA MỘT SỐ MÔI TRƯỜNG LÊN NHÂN CỤM MÔ SẸO DỪA SÁP CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN TS NGUYỄN BẢO TOÀN LÂM NGỌC TÚ ThS LÊ HỒNG GIANG MSSV:3064430 KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC LỚP:CNSH K32 ỨNG DỤNG Cần Thơ, Tháng 6/2010 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN (Ký tên) (Ký tên) Nguyễn Bảo Toàn Lâm Ngọc Tú DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN …………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Chân thành biết ơn Thầy Nguyễn Bảo Toàn tận tình hướng dẫn, đóng góp nhiều ý kiến kinh nghiệm quý báu, đồng thời tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành tốt luận văn Em xin gởi lòng biết ơn đến chị Lê Hồng Giang tồn thể anh chị phịng Cấy mô truyền đạt kiến thức chuyên môn vô giá giúp đỡ em thời gian thực đề tài Quý thầy cô Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học cung cấp kiến thức kinh nghiệm quý báu suốt trình học tập nghiên cứu Bạn bè người thân hết lòng động viên, giúp đỡ suốt thời gian em học tập rèn luyện Trân trọng! Lâm Ngọc Tú TÓM LƯỢC Nghiên cứu “Đánh giá hiệu số môi trường lên nhân cụm mô sẹo dừa Sáp” nhằm mục tiêu xác định mơi trường thích hợp để nhân mô sẹo dừa Sáp thông qua việc quan sát tiêu chiều cao, đường kính, hình dạng màu sắc đồng thời nhận biết cấu trúc mô sẹo có khả phát sinh quan Nghiên cứu thực hai thí nghiệm: Hiệu kết hợp NAA BA lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp hiệu nước dừa lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Kết ghi nhận được, môi trường Y3 bổ sung mg/l NAA + 14 mg/l BA mg/l NAA + mg/l BA cho hiệu cao lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Môi trường Y3 bổ sung nước dừa 25ml/l có hiệu lên biến đổi cấu trúc mô sẹo dừa Sáp, mơ sẹo có dạng chặt, màu xanh có phát sinh mầm chồi với tỷ lệ khoảng 33,33% 60 ngày sau cấy (NSKC) Sự gia tăng kích thước mơ sẹo khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê nghiệm thức hàm lượng nước dừa Từ khóa: dừa Sáp, mơ sẹo, mầm chồi i MỤC LỤC Trang KÝ TÊN HỘI ĐỒNG CẢM TẠ TÓM LƯỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v TỪ VIẾT TẮT vi CHƯƠNG GIỚI THIỆU CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược dừa Sáp 2.1.1 Nguồn gốc phân bố dừa 2.1.2 Phân loại dừa 2.1.3 Đặc điểm dừa Sáp 2.1.4 Giá trị dừa Sáp 2.1.4.1 Giá trị dinh dưỡng 2.1.4.2 Tiềm sản xuất nhiên liệu sinh học 2.2 Sơ lược mô sẹo 2.2.1 Định nghĩa mô sẹo 2.2.2 Tạo nuôi cấy mô sẹo 2.2.3 Các kiểu mô sẹo 10 2.3 Thành phần tiêu biểu môi trường nuôi cấy dừa 10 2.3.1 Nước dừa 10 2.3.2 Chất điều hòa sinh trưởng 11 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1 Phương tiện 13 3.1.1 Vật liệu 13 ii 3.1.2 Trang thiết bị dụng cụ 13 3.1.3 Địa điểm thời gian thí nghiệm 13 3.1.4 Điều kiện thí nghiệm 13 3.2 Phương pháp 14 3.2.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy 14 3.2.2 Bố trí thí nghiệm 14 3.2.3 Xử lý số liệu 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 4.1 Hiệu kết hợp NAA BA lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp 17 4.1.1 Đường kính mơ sẹo gia tăng tương đối 17 4.1.2 Chiều cao mô sẹo gia tăng tương đối 18 4.2 Hiệu nước dừa lên sinh trưởng mơ sẹo dừa Sáp 23 4.2.1 Đường kính mô sẹo gia tăng tương đối 23 4.2.2 Chiều cao mô sẹo gia tăng tương đối 24 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 5.1 Kết luận 29 5.2 Đề nghị 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Hiệu kết hợp NAA BA lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Phụ lục 2: Hiệu nước dừa lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp iii DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 2.1: Thành phần phôi nhũ Makapuno dừa cao thường Bảng 2.2: Thành phần acid béo chiết xuất từ chất béo phôi nhũ Makapuno dừa cao Laguna Bảng 3.1: Các nồng độ NAA BA nghiệm thức (NT) 15 Bảng 4.1: Hiệu NAA BA lên đường kính gia tăng tương đối (%) thời điểm 50 ngày sau cấy mô sẹo dừa Sáp 18 Bảng 4.2: Hiệu NAA BA lên chiều cao gia tăng tương đối (%) thời điểm 20 ngày sau cấy mô sẹo dừa Sáp 19 Bảng 4.3: Hiệu NAA BA lên chiều cao gia tăng tương đối (%) thời điểm 30 ngày sau cấy mô sẹo dừa Sáp 20 Bảng 4.4: Hiệu NAA BA lên chiều cao gia tăng tương đối (%) thời điểm 40 ngày sau cấy mô sẹo dừa Sáp 21 Bảng 4.5: Hiệu NAA BA lên chiều cao gia tăng tương đối (%) thời điểm 50 ngày sau cấy mô sẹo dừa Sáp 22 Bảng 4.6: Hiệu hàm lượng nước dừa lên đường kính gia tăng tương đối (%) theo thời gian mô sẹo dừa Sáp 24 Bảng 4.7: Hiệu hàm lượng nước dừa lên chiều cao gia tăng tương đối (%) theo thời gian mô sẹo dừa Sáp 25 Bảng 4.8: Hiệu hàm lượng nước dừa lên cấu trúc màu sắc mô sẹo dừa Sáp thời điểm 60 ngày sau cấy 26 iv DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 4.1: Cấu trúc màu sắc mô sẹo dừa Sáp môi trường Y3 bổ sung NAA kết hợp BA 23 Hình 4.2: Cấu trúc mơ sẹo dừa Sáp môi trường Y3 kết hợp với hàm lượng nước dừa 26 Hình 4.3: Một số cấu trúc mơ sẹo dạng chặt môi trường Y3 kết hợp với hàm lượng nước dừa 60 ngày sau cấy 27 Hình 4.4: Mơ sẹo hình thành mầm chồi mơi trường Y3 bổ sung hàm lượng nước dừa 25 ml/l thời điểm 60 ngày sau cấy 27 v CÁC TỪ VIẾT TẮT ADN: Acid deoxyribo nucleic ARN: Acid ribonucleic BA: 6-Benzyl adenine MS: Murashige Skoog (1962) NAA: α-Naphthalene acetic acid NSKC: Ngày sau cấy NT: Nghiệm thức Y3: Eeuwens (1976) vi Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ CHƯƠNG GIỚI THIỆU Dừa thuộc loại thân gỗ sống đa niên có từ ngàn xưa, xem “cây sống” hay “cây thiên đường” Nhiều sản phẩm có giá trị mang lại hiệu kinh tế cao tạo từ vỏ dừa, gáo dừa, cơm dừa chí từ dừa, thân dừa… dừa cịn xem 1.001 cơng dụng Dừa Sáp giống dừa có hàm lượng cơm dừa cao đặc ruột Ở Philippines giống dừa mang tên Makapuno, dạng đột biến gen (Võ Văn Long et al., 2008) Cơm dừa Sáp dày chiếm hết phần gáo, dẻo mềm tựa sáp, khơng có nước nước, nước dừa tình trạng keo, sền sệt có mùi thơm đặc trưng Dừa đặc ruột có giá cao gấp 1020 lần dừa thường, chủ yếu dùng để chế biến thực phẩm (kem, bánh, mứt, kẹo), hương liệu mỹ phẩm (http://www.dost-bentre.gov.vn/chuyen-muc/nghien-cuutrien-khai/788-ging-da-mi-da-sap-thm-mui-da.html) Ngồi ra, dừa Sáp cịn có tiềm lớn việc sử dụng dầu nguồn lượng sinh học Ở Việt Nam, dừa Sáp trồng nhiều huyện Cầu Kè (Trà Vinh) Hiệu kinh tế dừa Sáp cao dừa thông thường từ 2-3 lần Tuy nhiên, quày dừa có khoảng 25% trái dừa Sáp, số cịn lại trái bình thường Những trái Sáp khó nảy mầm, muốn nhân giống dừa Sáp theo cách thơng thường người ta ươm trái bình thường dừa Sáp hệ cho tỷ lệ trái Sáp tương đương 25% (http://www.trangbang.org.vn/vn/San-Pham/Cay-Co-Dau-DaiNgay/Dua-Sap/) Vì vậy, để khắc phục hạn chế này, ni cấy mơ phương pháp thích hợp để nhân giống gia tăng tỷ lệ trái sáp Ở Philippines, nhà khoa học nghiên cứu thành cơng qui trình ni cấy phơi hợp tử, chuyển nhượng đạt tỷ lệ thấp 50% cho tất phôi trồng (http://maidon.pcarrd.dost.gov.ph/news/s&t%20highlights/jun/st0619-01.htm) Nuôi cấy từ phận thực vật để tạo nhân vơ tính cơng việc gặp nhiều khó khăn chưa thấy kết nghiên cứu công bố Việc nhân giống vơ tính thơng qua kỹ thuật nuôi cấy mô thường qua nhiều giai đoạn Trước hết phải kích thích mẫu cấy phát sinh mơ sẹo, sau nhân mơ sẹo biến đổi mơ sẹo thành thành phôi soma Mỗi giai đoạn cần xác định yếu tố cần thiết để tạo mô sẹo, nhân mô sẹo biến đổi thành phôi soma Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 4.6: Hiệu hàm lượng nước dừa lên đường kính gia tăng tương đối (%) theo thời gian mô sẹo dừa Sáp Kích thước ban Nghiệm thức đầu (cm) Ngày sau cấy 10 7,46 b 30 60 21,18 30,39 1/ Y3 + (Đối chứng) 0,5 2/ Y3 + nước dừa 25 ml/l 0,5 20,69 a 35,65 60,52 3/ Y3 + nước dừa 50 ml/l 0,5 12,42 ab 26,58 45,14 4/ Y3 + nước dừa 100 ml/l 0,6 22,30 a 31,12 64,11 * ns ns 52,25 48,89 50,76 F CV (%) Ghi chú: Các số có chữ theo sau giống cột khác biệt khơng ý nghĩa mặt thống kê phép thử Ducan; ns: khác biệt không ý nghĩa; *: khác biệt ý nghĩa mức 5% 4.2.2 Chiều cao mô sẹo gia tăng tương đối Qua kết trình bày Bảng 4.7 nhận thấy, thời điểm 10 NSKC, mơ sẹo có gia tăng chiều cao tương đối nghiệm thức khác biệt không ý nghĩa mặt thống kê Tương tự thời điểm 20-60 NSKC, chiều cao mô sẹo gia tăng tương đối nghiệm thức không khác biệt ý nghĩa mặt thống kê Ở thời điểm 60 NSKC, chiều cao mô sẹo gia tăng tương đối môi trường bổ sung 100 ml/l nước dừa đạt giá trị cao 117,88%, môi trường không bổ sung nước dừa đạt giá trị thấp 102,64% Kết thí nghiệm cho thấy, mơi trường bổ sung nước dừa cho kết không khác biệt môi trường không bổ sung nước dừa lên sinh trưởng chiều cao mô sẹo Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 24 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 4.7: Hiệu hàm lượng nước dừa lên chiều cao gia tăng tương đối (%) theo thời gian mơ sẹo dừa Sáp Kích thước ban Nghiệm thức đầu (cm) Ngày sau cấy 10 30 60 1/ Y3 + (đối chứng) 0,5 19,68 67,04 102,64 2/ Y3 + nước dừa 25 ml/l 0,5 20,46 89,08 117,88 3/ Y3 + nước dừa 50 ml/l 0,5 16,65 73,10 114,83 4/ Y3 + nước dừa 100 ml/l 0,6 17,72 63,28 110,05 ns ns ns 102,79 49,47 49,35 F CV (%) Ghi chú: Các số có chữ theo sau giống cột khác biệt khơng ý nghĩa mặt thống kê phép thử Ducan; ns: khác biệt không ý nghĩa Trên môi trường này, kết ghi nhận mơ sẹo dừa Sáp có thay đổi cấu trúc màu sắc Mô sẹo ban đầu có dạng hạt trịn, rời, màu vàng trắng (Hình 4.2a) Khi ni cấy đến 60 NSKC, mơ sẹo có cấu trúc dạng chuyển sang màu vàng sậm (Hình 4.2b) chiếm tỷ lệ đa số Kết trình bày Bảng 4.8 cho thấy, thời điểm 60 NSKC tỷ lệ mơ sẹo có màu vàng sậm chiếm từ 25-61,11%, cao môi trường đối chứng khơng có bổ sung nước dừa Bên cạnh đó, số mơ sẹo có thay đổi màu sắc thành dạng màu vàng xanh (Hình 4.2c), với tỷ lệ khoảng 11,11% nghiệm thức đối chứng nghiệm thức có bổ sung nước dừa hàm lượng 25 50 ml/l Nghiệm thức bổ sung 100 ml/l nước dừa có tỷ lệ mơ sẹo màu vàng xanh cao 20% Các mô sẹo màu vàng sậm hay vàng xanh có cấu trúc dạng hạt nhỏ, trịn, rời khơng có phát sinh phơi hay mầm chồi Một trường hợp khác, mô sẹo ghi nhận có biến đổi thành cấu trúc có dạng chặt, có màu xanh (Hình 4.3) Mơ sẹo dạng xuất bốn môi trường, thấp môi trường Y3 đối chứng với tỷ lệ khoảng 11,11% cao mơi trường có bổ sung nước dừa hàm lượng 100 ml/l Mơi trường có bổ sung nước dừa hàm lượng 25 50 ml/l cho tỷ lệ tương đương 16,67% Trong đó, cấu trúc mơ sẹo dạng chặt có màu xanh mơi trường bổ sung 25 ml/l nước dừa có hình thành mầm chồi với tỷ lệ khoảng 33,33% (Hình 4.4) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 25 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 4.8: Hiệu hàm lượng nước dừa lên cấu trúc màu sắc mô sẹo dừa Sáp thời điểm 60 ngày sau cấy Tỷ lệ mô sẹo màu Tỷ lệ mô sẹo màu Tỷ lệ mô sẹo tạo vàng sậm (%) vàng xanh (%) cấu trúc chặt (%) 1/ Y3 + (đối chứng) 61,11 11,11 11,11 2/ Y3 + nước dừa 25 ml/l 55,55 11,11 16,67 3/ Y3 + nước dừa 50 ml/l 55,55 11,11 16,67 4/ Y3 + nước dừa 100 ml/l 25,00 20,00 25,00 Nghiệm thức a 0,5 cm 0,5 cm 0,2 cm c b a) Sau cấy ngày; b) c) Sau cấy 60 ngày Hình 4.2: Cấu trúc mô sẹo dừa Sáp môi trường Y3 kết hợp với hàm lượng nước dừa Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 26 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ 0,5 cm 0,5 cm c a 0,5 cm b 0,5 cm d Hình 4.3: Một số cấu trúc mô sẹo dạng chặt môi trường Y3 kết hợp với hàm lượng nước dừa 60 ngày sau cấy a) ml/l; b) 25 ml/l; c) 50 ml/l; d) 100ml/l 0,5 cm Mầm chồi Hình 4.4: Mơ sẹo hình thành mầm chồi mơi trường Y3 bổ sung hàm lượng nước dừa 25 ml/l thời điểm 60 ngày sau cấy Kết ghi nhận được, mô sẹo nuôi cấy môi trường đến thời điểm 60 NSKC số bắt đầu sinh trưởng chậm lại chết nên cần thiết cấy chuyền sang môi trường Qua 60 ngày theo dõi thí nghiệm cho thấy hiệu mơi trường bổ sung nước dừa thể qua hình thành cấu trúc mơ sẹo dạng chặt có hình thành mầm chồi Kết mơi trường Y3 có bổ sung nước dừa với hàm lượng 25 ml/l cho hiệu Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 27 Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ tốt Theo Pierik, nước dừa chứa hợp chất có tính auxin (IAA) cytokinin dạng glucoside (các chất tương tự kinetin, zeatin) tỷ lệ thích hợp nên có hiệu lên biến đổi cấu trúc mô sẹo dừa Sáp Như vậy, kết thí nghiệm cho thấy, mơi trường Y3 có bổ sung nước dừa hàm lượng từ 25-100 ml/l có hiệu tương tự môi trường Y3 đối chứng lên gia tăng kích thước mơ sẹo dừa Sáp Cấu trúc màu sắc mơ sẹo có thay đổi mơi trường Trong đó, mô sẹo môi trường Y3 bổ sung 25 ml/l nước dừa có biến đổi tạo cấu trúc dạng chặt, có màu xanh cấu trúc có hình thành mầm chồi với tỷ lệ khoảng 33,33% 60 NSKC Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 28 Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Mơi trường Y3 có bổ sung mg/l NAA kết hợp với 14 mg/l BA mg/l NAA mg/l BA cho hiệu tốt lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Mơi trường Y3 có bổ sung nước dừa 25 ml/l có hiệu lên biến đổi cấu trúc mơ sẹo dừa Sáp, mơ sẹo có dạng chặt, màu xanh có phát sinh mầm chồi với tỷ lệ khoảng 33,33% 60 NSKC Sự gia tăng kích thước mơ sẹo khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê nghiệm thức hàm lượng nước dừa 5.2 ĐỀ NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu mơi trường thích hợp cho tái sinh chồi từ mô sẹo Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 29 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Bá Bổng 1995 Nhân giống nuôi cấy mô, Sở Khoa học Công nghệ môi trường An Giang, Xí nghiệp in An Giang Bùi Tuấn Anh, Võ Văn Bé Phạm Thị Nga 2004 Giáo trình Sinh học đại cương A2, Khoa Khoa học, Trường Đại học Cần Thơ Hồ Sỉ Thoảng Trần Mạnh Trí 2009 Năng lượng cho kỷ 21-Những thách thức triển vọng, Nxb Khoa học Kỹ thuật Hoàng Văn Đức Việt Chy 1983 Một số tư liệu dừa, Nhà in Tạp chí Cộng Sản, trang 20 Lê Minh Lý 2007 Hiệu chất điều hòa sinh trưởng auxin cytokinin đến tạo mô sẹo, tái sinh chồi từ mô nhân chồi giống hoa hồng Rosa hydrida, Luận văn tốt nghiệp Đại học, Trường Đại học Cần Thơ Lê Trần Bình, Hồ Hữu nghị Lê Thị muội 1997 Công nghệ sinh học thực vật cải tiến giống trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Bảo Tồn 2004 Giáo trình Ni cấy mô tế bào thực vật, Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Bảo Vệ, Trần Văn Hâu Lê Thanh Phong 2005 Giáo trình Cây đa niên (phần II), Khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Đức Lượng Lê Thị Thủy Tiên 2002 Công nghệ tế bào, Nxb Đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Đức Thành 2000 Nuôi cấy mô tế bào thực vật-Nghiên cứu ứng dụng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Kim Hằng 2005 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đến tạo thành mô sẹo tái sinh chồi-nhân chồi tạo rễ hoa hồng (Rosa chinesis), Luận văn tốt nghiệp Đại học, Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Minh Chơn 2005 Giáo trình chất điều hịa sinh trưởng thực vật, Trường Đại học Cần Thơ Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 30 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Văn Uyển 1984 Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trồng, Nxb Nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh Tơn Thất Trình 1974 Cải thiện ngành trồng dừa Việt Nam, Nxb Lửa Thiêng, Sài Gịn, trang 32 Võ Văn Long, Ngơ Thị Lam Giang, Nguyễn Thị Lệ Thủy, Nguyễn Thị Bích Hồng, Phan Thị Lan Nguyễn Trung Phong 2008 Sổ tay dừa, Viện Nghiên cứu dầu có dầu, Nxb Nơng Nghiệp TP Hồ Chí Minh Vũ Văn Vụ 1999 Sinh lý thực vật ứng dụng, Nxb Giáo dục Tiếng Anh Apacible, A R 1968 The Philippines coconut Sugar New (Manila) 44 (10):599 Canli, F A 2003 Effect of dark and TDZ on callus formation of rose leaf explants Deparment of Horticulture, SDU Faculty of Agriculture, Turkey George, E F 1996 Plant propagation by tissue culture (Part 2), 2nd Edition, Exegetic Limited Huang Tao, Peng Shaolin, Dong Gaofeng, Zhang Lanying and Gengguang 2002 Plant cell tissue and organ culture, Plant regeneration from leaf-derived callus in citrus grandis (Pummelo) effect of auxin in callus induction medium, Printed in the Netherlands Ohler, J.G 1999 Modern coconut management, Food and agriculture organization (FAO), Rome, pp 458 Pierik, R L M 1987 In vitro culture of higher plants, Martinus Nijhoff Publishers Torres, Kenneth C V 1989 Tissue culture techniques for horticultural crops, Chapman & Hall Woodroof, J.G 1979 Coconuts: Production, processing, products, 2nd ed., A V I Publishing company, Inc., Westport, Connecticut, pp 307 Yukio Sugimura 1993 Endosperm Characteristics and Embryo Culture of 'Makapuno' Coconut Japanese journal of tropical agriculture 37(2):129-130 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 31 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ Trang web http://www.dost-bentre.gov.vn/chuyen-muc/nghien-cuu-trien-khai/788-ging-da-mi-dasap-thm-mui-da.html (ngày 16/12/2009) http://www.trangbang.org.vn/vn/San-Pham/Cay-Co-Dau-Dai-Ngay/Dua-Sap/ 16/12/2009) (Ngày http://maidon.pcarrd.dost.gov.ph/news/s&t%20highlights/jun/st0619-01.htm (Ngày 1/05/2004) http://niengiamnongnghiep.vn/index.php?self=article&id=674 (Ngày 27/05/2010) http://www.dost-bentre.gov.vn/chuyen-muc/nghien-cuu-trien-khai/834-th-phn-cho-dasap.html (Ngày 27/04/2010) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 32 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học PHỤ LỤC Bảng phân tích ANOVA Phụ lục 1: Hiệu kết hợp NAA BA lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Bảng 4.9: Đường kính gia tăng tương đối (%) 50 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Giá trị F BA (A) 3471,499 1157,166 0,7874 NAA (B) 744,691 744,691 0,5067 AxB 5582,826 1860,942 1,2662 Sai số 32 47028,777 1469,649 Tổng cộng 39 56827,793 CV (%) Giá trị P 0,3025 103,36 Bảng 4.10: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 10 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Giá trị F BA (A) 398,600 132,867 0,5468 NAA (B) 176,641 176,641 0,7269 AxB 1995,425 665,142 2,7371 Sai số 32 7776,190 243,006 Tổng cộng 39 10346,855 CV (%) 128,71 Giá trị P 0,0597 Bảng 4.11: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 20 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Giá trị F Giá trị P BA (A) 2039,278 679,759 1,5422 0,2226 NAA (B) 576,268 576,268 1,3074 0,2613 AxB 3476,146 1158,715 2,6288 0,0671 Sai số 32 14104,730 440,773 Tổng cộng 39 20196,422 CV (%) 76,17 Bảng 4.12: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 30 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Giá trị F Giá trị P 0,1708 BA (A) 3287,306 1095,769 1,7801 NAA (B) 45,197 45,197 0,0734 AxB 5874,091 1958,030 3,1809 Sai số 32 19698,171 615,568 Tổng cộng 39 28904,766 CV (%) 74,44 0,0371 Bảng 4.13: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 40 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Giá trị F Giá trị P 0,1412 BA (A) 4908,265 1636,088 1,9510 NAA (B) 3,894 3,894 0,0046 AxB 14423,240 4807,747 5,7333 Sai số 32 26834,217 838,569 Tổng cộng 39 46169,616 CV (%) 0,0029 65,11 Bảng 4.14: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 50 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Giá trị F Giá trị P 0,1236 BA (A) 6010,681 2003,560 2,0715 NAA (B) 1,449 1,449 0,0015 AxB 15846,117 5282,039 5,4612 Sai số 32 30950,030 967,188 Tổng cộng 39 52808,276 CV (%) 66,02 0,0038 Phụ lục 2: Hiệu nước dừa lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Bảng 4.15: Đường kính gia tăng tương đối (%) 10 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Nghiệm thức 735,600 245,200 Sai số 16 1078,526 67,408 Tổng cộng 19 1814,126 CV (%) Giá trị F Giá trị P 3,638 0,0357 52,25 Bảng 4.16: Đường kính gia tăng tương đối (%) 30 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Nghiệm thức 575,908 191,969 Sai số 16 3135,380 195,961 Tổng cộng 19 3711,288 CV (%) Giá trị F Giá trị P 0,980 48,89 Bảng 4.17: Đường kính gia tăng tương đối (%) 60 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Nghiệm thức 3589,978 1196,659 Sai số 16 10323,566 645,223 Tổng cộng 19 13913,544 CV (%) 50,76 Giá trị F Giá trị P 1,855 0,1780 Bảng 4.18: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 10 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Nghiệm thức 45,939 15,313 Sai số 16 5865,426 366,589 Tổng cộng 19 5911,364 CV (%) Giá trị F Giá trị P 0,042 102,79 Bảng 4.19: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 30 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Nghiệm thức 1942,972 647,657 Sai số 16 20936,541 1308,534 Tổng cộng 19 22879,513 CV (%) Giá trị F Giá trị P 0,495 49,47 Bảng 4.20: Chiều cao gia tăng tương đối (%) 60 NSKC Nguồn biến động Độ tự Tổng bình Trung bình phương bình phương Nghiệm thức 660,975 220,325 Sai số 16 48306,066 3019,129 Tổng cộng 19 48967,041 CV (%) 49,35 Giá trị F 0,073 Giá trị P ... nghiệp Khóa 32-2010 Trường Đại học Cần Thơ Nghiên cứu ? ?Đánh giá hiệu số môi trường lên nhân cụm mô sẹo dừa Sáp? ?? nhằm mục tiêu xác định mơi trường thích hợp để nhân mô sẹo dừa Sáp Chuyên ngành Công... trọng! Lâm Ngọc Tú TÓM LƯỢC Nghiên cứu ? ?Đánh giá hiệu số môi trường lên nhân cụm mô sẹo dừa Sáp? ?? nhằm mục tiêu xác định mơi trường thích hợp để nhân mô sẹo dừa Sáp thông qua việc quan sát tiêu chiều... 14 mg/l BA mg/l NAA + mg/l BA cho hiệu cao lên sinh trưởng mô sẹo dừa Sáp Môi trường Y3 bổ sung nước dừa 25ml/l có hiệu lên biến đổi cấu trúc mô sẹo dừa Sáp, mô sẹo có dạng chặt, màu xanh có phát