Nghiên cứu đặc điểm kiểu nhân của bệnh nhân nghi mắc hội chứng Down

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN  HOÀNG THỊ THANH MỘC NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM KIỂU NHÂN CỦA BỆNH NHÂN NGHI MẮC HỘI CHỨNG DOWN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – Năm 2016 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN  HOÀNG THỊ THANH MỘC NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM KIỂU NHÂN CỦA BỆNH NHÂN NGHI MẮC HỘI CHỨNG DOWN Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 60 42 01 21 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS Nguyễn Thị Hồng Vân Hà Nội- Năm 2016 LỜI CẢM ƠN Đề tài luận văn đƣợc thực Khoa Di Truyền Sinh học Phân tử bệnh viện Nhi Trung Ƣơng Đầu tiên xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS.TS Nguyễn Thị Hồng Vân, trƣởng môn Di truyền học, Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Cơ hết lịng quan tâm, hƣớng dẫn, bảo tận tình cho em suốt trình nghiên cứu vừa qua Mỗi lúc gặp khó khăn, ln động viên, giúp đỡ em tìm cách giải hợp lý Sự giúp đỡ hƣớng dẫn nhiệt tình giúp em hồn thành đƣợcluận văn tốt nghiệp lần Tôi xin đƣợc cảm ơn đồng nghiệp khoa Di truyền Sinh học Phân tử – Bệnh viện Nhi Trung Ƣơng.Các anh chịvà bạn bè đồng nghiệp nhiệt tình giúp đỡ thời gian thực đề tài nghiên cứu Tơi xin cảm ơn thầy cô giáo giảng dạy trinh học tập Ban lãnh đạo Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên tạo điều kiện tốt để tơi thực tốt việc nghiên cứu Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới bố mẹ, gia đình bạn bè giúp đỡ, ủng hộ suốt thời gian qua Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày …… tháng …… năm 2016 Học viên HOÀNG THỊ THANH MỘC MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC KÍ HIỆU, TỪ VIẾT TẮT .4 DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hội chứng Down 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Tỷ lệ mắc hội chứng Down 1.1.3 Các dạng Down thƣờng gặp 11 1.2 Lịch sử nghiên cứu hội chứng Down 13 1.3 Nguyên nhân hình thành hội chứng Down .16 1.3.1 Do tuổi bố mẹ cao 16 1.3.2 Do di truyền từ bố mẹ có biểu rối loạn NST, đặc biệt mang NST chuyển đoạn cân 17 1.3.3 1.4 Các yếu tố liên quan đến hội chứng Down 18 Cơ chế hình thành hội chứng Down 18 1.4.1 Không phân li cặp NST 21 trình giảm phân tạo giao tử .18 1.4.2 Khơng phân li cặp NST 21 q trình nguyên phân hợp tử 19 1.4.3 Bố mẹ ngƣời mang NST chuyển đoạn hòa nhập tâm .20 1.4.4 Bố mẹ mang NST chuyển đoạn 22 1.4.5 Bố mẹ mang NST 21 tâm cân cánh dài i(21q) 23 1.4.6 Các gen liên quan đến hội chứng Down .23 1.5 Nghiên cứu NST .24 1.6 Tình hình nghiên cứu hội chứng Down giới Việt Nam 27 1.6.1 Tình hình nghiên cứu hội chứng Down giới 27 1.6.2 Tình hình nghiên cứu hội chứng Down Việt Nam .29 CHƢƠNG – ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Đối tƣợng 30 2.2 Hóa chất trang thiết bị 30 2.2.1 Hoá chất 30 2.2.2 Dụng cụ thiết bị 31 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 31 2.3.1 Quy trình lấy mẫu máu ngoại vi 31 2.3.2 Nuôi cấy tế bào máu ngoại vi .32 2.3.3 Phƣơng pháp làm tiêu bản, nhuộm băng NST lập NST đồ 34 2.4 Đạo đức nghiên cứu 36 CHƢƠNG – KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 38 3.1 Nghiên cứu phát dạng hội chứng Down 38 3.2 Phân bố vể tuổi giới trẻ Down 45 3.3 Tỷ lệ sinh mắc Down theo tuổi mẹ 48 3.4 Quan hệ số lƣợng mắc hội chứng Down với số thứ tự gia đình 50 KẾT LUẬN .52 KIẾN NGHỊ 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 DANH MỤC KÍ HIỆU, TỪ VIẾT TẮT Chữ viết tắt G Nghĩa tiếng Anh Nghĩa Tiếng Việt Giemsa Giemsa NST ROBs Nhiễm sắc thể Robertsonian translocations Trisomy 21 Thể tam nhiễm 21 WHO World Health Organization PHA Phytohemagglutinin FISH Chuyển đoạn hòa nhập tâm Tổ chức Y tế giới Fluorescent in situ Hybridization Phƣơng pháp lai huỳnh quang chỗ DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Mối tƣơng quan tuổi mẹ với tỷ lệ mắc Down hệ sau .10 Bảng 1.2 Bảng tỷ lệ mắc hội chứng Down số nƣớc vùng lãnh thổ 11 Bảng 1.3 Một số dị tật kết hợp người mắc hội chứng Down 15 Bảng 1.4 Quá trình tạo giao tử hợp tử ngƣời bố (mẹ) mang NST chuyển đoạn t(14q;21q) với ngƣời mẹ (bố) bình thƣờng 21 Bảng 1.5 Một số nghiên cứu hội chứng Down quốc gia giới [15] 27 Bảng 1.6 Các kiểu thể ba nhiễm 21 kết hợp bất thƣờng khác [83] 28 Bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng nuôi cấy máu ngoại vi .32 Bảng 2.2 Các dung dịch sử dụng nhuộm băng G 34 Bảng 3.1 Số lƣợng bệnh nhân mắc Down theo biểu lâm sàng 38 Bảng 3.2 Tỷ lệ hội chứng Down năm gần 39 Bảng 3.3 Số lƣợng dạng Down 43 Bảng 3.4 Tỷ lệ dạng Down chuyển đoạn 44 Bảng 3.5 Quan hệ tuổi mẹ với nguy khơng phân ly giảm phân[48].48 DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Nhiễm sắc thể đồ, mang nhiễm sắc thể 21 (mũi tên) ngƣời mắc hội chứng Down Hình 1.2 Bác sĩ John Langdon Down (1828-1896) Hình 1.3 Sự hình thành hội chứng Down thể khảm[78] 12 Hình 1.4 Sự hình thành NST chuyển đoạn từ NST 21 NST 14 13 Hình 1.5 Một số đặc điểm bên trẻ mắc hội chứng Down .15 Hình 1.6 Cơ chế hình thành Down giảm phân bất thƣờng hình thành giao tử 19 Hình 1.7 Cơ chế hình thành Down nguyên phân hợp tử .20 Hình 1.8 Các dạng hợp tử dạng Down chuyển đoạn [84] 21 Hình 1.9 Cơ chế hình thành chuyển đoạn lặp đoạn NST 21[5] .23 Hình 1.10 Cơ chế hình thành NST 21 nhánh dài[5] 23 Hình 1.11 Năm gen liên quan đến kiểu hình tam nhiễm 21 .24 Hình 2.1 Trang thiết bị nuôi cấy máu ngoại vi 33 Hình 2.2 Qui trình nhuộm băng G 35 Hình 3.1 Tỷ lệ phát hội chứng Down tổng số bệnh nhân nghi mắc Down 38 Hình 3.2 Số lƣợng bệnh nhân mắc Down nhóm phân loại khác 39 Hình 3.3 Nhiễm sắc thể đồ hội chứng Down 40 Hình 3.4 Nhiễm sắc thể đồ hội chứng Down mang chuyển đoạn Roberson .40 Hình 3.5 Nhiễm sắc thể đồ hội chứng Down mang chuyển đoạn t(21;21) 41 Hình 3.6 Nhiễm sắc thể đồ hội chứng Down mang chuyển đoạn t(21;22) 42 Hình 3.7 Nhiễm sắc thể đồ hội chứng Down kèm chuyển đoạn t(1;6) 43 Hình 3.8 Tỷ lệ dạng Down 44 Hình 3.9 Phân bố tỷ lệ mắc Down theo nhóm tuổi 46 Hình 3.10 Phân bố tỷ lệ mắc Down theo giới tính 47 Hình 3.11 Đƣờng cong tuổi mẹ cho thấy gia tăng tỷ lệ phần trăm đẻ bị Down với tuổi mẹ ngày cao[48] 48 Hình 3.12 Phân bố tỷ lệ đẻ mắc hội chứng Down theo nhóm tuổi mẹ49 Hình 3.13 Tỷ lệ mắc hội chứng Down theo số thứ tự gia đình 51 ĐẶT VẤN ĐỀ Hội chứng Down có tần số cao hội chứng rối loạn nhiễm sắc thể (NST) Theo công bố Tổ chức Y tế giới (WHO) vào năm 2016, tần số mắc hội chứng Down 1/1000 đến 1/1100 trẻ sơ sinh đẻ sống[65], có biểu đặc trƣng hình thái chậm phát triển trí tuệ Ngay từ kỷ XV, tranh đƣợc vẽ để mô tả đứa trẻ mắc hội chứng Down.Tuổi thọ ngƣời mắc hội chứng Down lên đến 60 tuổi, ngoại trừ số ca có dị tật tim mạch trầm trọng (chiếm từ 10% đến 20% tổng số ca) Hội chứng Down gây chậm phát triển tinh thần thể chất cho ngƣời mắc Chỉ số IQ trung bình thấp, từ 25-75, chiều cao khoảng trung bình 150cm[48].Đến chƣa có biện pháp điều trị đặc hiệu bệnh di truyền nói chung hội chứng Down nói riêng, vấn đề sàng lọc nguy mắc đƣợc đặt lên hàng đầu Nguyên nhân gây hội chứng Down đƣợc khẳng định có liên quan chặt chẽ đến tuổi bố mẹ.Đặc biệt, tuổi mẹ cao đóng vai trị việc sinh mắc hội chứng Down Mặt khác số cơng trình nghiên cứu công bố phát trƣờng hợp trẻ mắc hội chứng Down có tính chất di truyền từ bố mẹ, kiểu hình hồn tồn bình thƣờng nhƣng nhiễm sắc thể có mang NST chuyển đoạn tƣơng hỗ NST 21 với NST khác nhóm D nhóm G Nguy sinh đứa bị hội chứng Down tùy thuộc vào ngƣời bố ngƣời mẹcó mang NST chuyển đoạn tùy thuộc vào kiểu chuyển đoạn NST Cho đến nhà khoa học lĩnh vực Di truyền học tiếp tục tập trung nghiên cứu nhiều hội chứng Down Trong q trình chẩn đốn, việc cung cấp thông tin kiểu nhân (karyotype) bệnh nhân nghi mắc hội chứng Down có giá trị lớn việc xác định xác, đồng thời giúp bác sĩ lâm sàng định hƣớng điều trị phù hợp bệnh nhân Do đó, chúng tơi tiến hành đề tài “Nghiên cứu đặc điểm kiểu nhân bệnh nghi mắc Down “ với hai mục tiêu: Phát dạng hội chứng Down mẫu nghiên cứu lập công thức nhiễm sắc thể Trong trình hình thành giao tử tạo kiểu giao tử khác tùy theo kiểu chuyển đoạn (Hình 1.8)[34] Hình 1.8 Các dạng hợp tử dạng Down chuyển đoạn[84] Bảng 1.4 Quá trình tạo giao tử hợp tử người bố (mẹ) mang NST chuyển đoạn t(14q;21q) với người mẹ (bố) bình thường 21 Bố mẹ mang NST chuyển Thụ Giao tử đoạn 14,t(14;21),21 tinh Hợp tử Kiểu hình +(14,21) 14,21 +14,21 14,14,21,21 t(14,21) +14,21 14,t(14;21),21 t(14;21),21 +14,21 14,t(14;21),21,21 14 +14,21 14,14,21 Bình thƣờng Ngƣời lành mang NST chuyển đoạn Bệnh Down chuyển đoạn Đơn nhiễm 21: chết phôi thai Tam 14,t(14;21) +14,21 14,14t(14;21),21 nhiễm 14:thƣờng chết phôi thai 21 +14,21 14,21,21 Đơn nhiễm 14: chết phôi thai Tam nhiễm kép 14,t(14;21),21 +14,21 14,14t(14;21),21,21 14,21: chết phôi thai Đơn nhiễm kép +14,21 14,21 14,21: chết phôi thai 1.4.4 Bố mẹ mang NST chuyển đoạn Chuyển đoạn (tandem translocation) hợp NST hay gặp chuyển đoạn NST tâm đầu Ở đứt gãy xảy nhánh dài NST 21 gần đầu mút đứt nhánh dài NST 21 khác gần vị trí phần tâm Nhánh dài NST 21 nối với đầu xa NST 21 khác tạo nên tƣợng chuyển đoạn lặp (21/21) Bố mẹ mang NST chuyển đoạn lặp đoạn có 2n=45 kiểu hình bình thƣờng.Q trình tạo giao tử có giao tử mang NSTchuyển đoạn lặp đoạn 22 kết hợp với giao tử bình thƣờng có NST 21 tạo nên hợp tử có chứa NST 21 chuyển đoạn lặp (tam nhiễm phần) biểu hội chứng Down Hình 1.9 Cơ chế hình thành chuyển đoạn lặp đoạn NST 21[5] 1.4.5 Bố mẹ mang NST 21 tâm cân cánh dài i(21q) NST 21 tâm cân phát sinh sai sót q trình phân chia phần tâm giai đoạn kỳ sau lần phân chia thứ hai trình giảm phân tạo giao tử kỳ sau trình nguyên phân hợp tử.Ở phần tâm bị đứt theo chiều ngang thay cho chiều dọc nhƣ bình thƣờng Nhƣ tạo nên hai NSTbất thƣờng tâm cân: i(21q) i(21p).Thông thƣờng NST 21 tâm cân i(21p)bị chu kỳ phân bào Trong trình thụ tinh, giao tử chứa NST 21 tâm cân i(21q) kết hợp với giao tử bình thƣờng chứa NST 21 tạo nên hợp tử chứa NST 21 tâm cân i(21q) biểu thành hội chứng Down Hình 1.10 Cơ chế hình thành NST 21 nhánh dài[5] 1.4.6 Các gen liên quan đến hội chứng Down Trong năm gần đây,bằng phƣơng pháp lai huỳnh quang chỗ (FISH) kết hợp với kỹ thuật di truyền phân tử, nhà di truyền học xác định đƣợc gen có liên quan chắn đến dấu hiệu lâm sàng hội chứng Down đƣợc định vị vùng nhánh dài (q) NST 21 Các gen bao gồm: 23 - SOD-1 (ở vị trí 21q22.1) mã hóa cho enzym superoxide dismutase 1, tham gia vào q trình chết theo chƣơng trình có liên quan đến bệnh xơ cứng teo bên (ALS, amyotrophic lateral sclerosis) Là enzym superoxide dismutase thể, enzym SOD-1 liên kết ion với đồng kẽm để phá hủy gốc superoxide tự thể - alpha-A-Cristallin (ở vị trí 21q22.3) protein cấu trúc hịa tan nƣớc, có cấu trúc giống với protein sốc nhiệt nhỏ alpha-A-Cristallin có chức ngăn chặn kết tủa protein bị biến tính tăng cƣờng sức chống chịu tế bào với stress - Gart(ở vị trí 21q21.1) đƣợc biểu mức phá hủy trình tổng hợp sửa chữa DNA - ets-2 (ở vị trí 21q22.2) biểu nhiều nhiều gây dị tật xƣơng - pfkl (ở vị trí 21q22.4) enzym điều hịa chủ chốt q tình phân giải glucose thể Hình 1.11 Năm gen liên quan đến kiểu hình tam nhiễm 21 1.5 Nghiên cứu NST “Nhiễm sắc thể” (chromosome) từ có gốc Hy Lạp, kết hợp hai từ “chroma” (color) “soma” (body), để mơ tả tính chất bắt màu mạnh với thuốc nhuộm đặc biệt Schleiden Virchow hai số nhà khoa học nhận thấy cấu trúc nhân tế bào mà sau đƣợc xác nhận nhiễm sắc thể (đƣợc đặt tên Flemming) từ năm 1980 Trong thời gian này, Boveri mô tả cấu trúc nhƣ thể mang vật chất di truyền[25] Ngày 26 tháng năm 1956, Tjio Levan công bố kết nghiên cứu tạp chí Hereditas, tạp chí 24 thuộc vùng Scandinavi, nhiễm sắc thể ngƣời có 46 (chứ khơng phải 48 nhƣ Painter công bố vào năm 1923)[25, 76].Chỉ vài năm sau công bố Tjio Levan, biến đổi số lƣợng nhiễm sắc thể lần lƣợt đƣợc tìm Đó hội chứng Down (Lejeune cs, 1959 [45]), hội chứng Turner (Ford cs, 1959 [22]) Klinefelter (Jacob cs, 1959 [35]) Mẫu bệnh phẩm sử dụng cho phân tích nhiễm sắc thể đồ thời điểm mẫu máu ngoại vi Ngoại trừ số bệnh bạch cầu cấp, máu nuôi cấy mơi trƣờng sản xuất có nguyên phân Năm 1960, Nowell phát chất gây nguyên phân đầu tiên: phytohaemagglutinin (PHA) Nowell sử dụng PHA để kết dính hồng cầu nhằm thu đƣợc mơi trƣờng chứa bạch cầu Sau ngun phân đƣợc quan sát mơi trƣờng bạch cầu Ngƣời ta tìm thấy PHA gây “phản ứng blastoid” tế bào lympho T nơi mà tế bào nhỏ, hoàn toàn khác biệt với dạng blastoid lớn phân chia cho số lƣợng nhỏ hệ Các chất gây nguyên phân khác đƣợc phân lập để kích thích tế bào T hoặc/và tế bào B phân chia, nhƣng PHA chất đƣợc lựa chọn nhiều phịng thí nghiệm Ngƣời ta chứng minh 72 nuôi cấy sau bổ sung PHA làm tối ƣu môi trƣờng lympho sử dụng phân tích di truyền tế bào Các chế phẩm cố định mơi trƣờng kích thích cho thấy tƣơng đối cụm metaphase Các nhiễm sắc thể có hình chữ V, bao quanh mặt phẳng xích đạo với cánh trải rộng Sau thêm colcemid, alkaloid để phá vỡ thoi vô sắc, tế bào bƣớc vào nguyên phân tiến triển qua kỳ giữa, kết số phân bào tăng Sự ngƣng tụ NST xảy suốt kỳ đầu tiếp tục trình tiếp xúc với colcemid, kéo dài lúc ủ, kết ngƣng tụ NST đa bội số trƣờng hợp tế bào trải qua chu trình tế bào nhƣng khơng phân chia Vì việc sử dụng colcemid cho NST thằng, xếp ngẫu nhiên Mặc dù thêm colcemid cải thiện hình thái NST, nhƣng NST kỳ cịn đơng khơng đƣợc sử dụng để phân tích Năm 1952, Hus tìm thay đổi ủ tế bào dung dịch nhƣợc trƣơng trƣớc cố định làm cho tế bào trƣơng lên tạo NST dàn trải tốt Hungerford DiBerardino (1958) chứng minh KCl hòa tan H2O dung dịch nhƣợc trƣơng hữu ích, KCl 0.075 M lựa chọn để xử lý nhƣợc trƣơng tất phòng thí nghiệm 25 Việc nghiên cứu phân tích nhiễm sắc thể thực phát triển kể từ cuối năm 1960 kỹ thuật nhuộm băng khác lần lƣợt đƣợc đời sử dụng rộng rãi Kỹ thuật nhuộm băng Q đƣợc mô tả Caspersson cộng (1969)[17] Tiêu NST đƣợc nhuộm dung dịch Quinacrin dihydroclorid 0,5% Quinacrin mustard 0,05% quan sát dƣới kính hiển vi huỳnh quang thấy băng sáng băng tối xen kẽ NST Số lƣợng, kích thƣớc vị trí băng đặc trƣng cho tùng NST.Băng Q không ứng dụng cho việc xác định NST mà đƣợc ứng dụng nghiên cứu tính đa hình NST số 3, số 4, NST tâm đầu nhƣ NST Y Mặt khác phƣơng pháp nhuộm băng Q dùng để phát nguồn gốc NST bố mẹ trƣờng hợp tam nhiễm tam nhiễm tùng phần[27] Kỹ thuật nhuộm băng G đƣợc mô tả Seabright(1971) Tiêu NST đƣợc cho vào dung dịch enzym (trypsin) với nồng độ thời gian khác nhau, sau nhuộm giemsa, quan sát kính hiển vi quang học Phƣơng pháp nhuộm băng G cho phép xác định đƣợc vùng NST, rối loạn NST: tam nhiễm,chuyển đoạn, đứt đoạn, tam nhiễm tùng phần[69] Kỹ thuật nhuộm băng C: Arrighi Hsu(1971) mô tả phƣơng pháp tiêu NST đƣợc xử lý dung dịch muối nhiệt độ cao, sau nhuộm giemsa quan sát dƣới kính hiển vi quang học Phƣơng pháp nhuộm băng C cho phép xác định đƣợc phần tâm động NST, phần dị nhiễm sắc nhánh dài NST Y, vùng eo thắt thứ hai nhánh dài NST số 1, số số 16 kề với phần tâm[27] Phƣơng pháp lai chỗ (Fluorescence in situ hybridization-FISH) đƣợc mô tả Elder (1980) Burk(1985) Phƣơng pháp đƣợc sử dụng mẫu dị có gắn chất huỳnh quang thực tiêu NST sau phân hủy ARN protein Tiêu đƣợc quan sát dƣới kính hiển vi huỳnh quang Phƣơng pháp lai chỗ cho phép xác định biến đổi nhỏ phạm vi gen, xác định khuếch đại gen,và sở để giải thích biến đổi NST nhƣ chuyển đoạn, đoạn, thể tam nhiễm [10, 40, 82] 26 1.6 Tình hình nghiên cứu hội chứng Down giới Việt Nam 1.6.1 Tình hình nghiên cứu hội chứng Down giới Hội chứng Down hội chứng rối loạn NST đƣợc nghiên cứu từ lâu giới Đã có nhiều tác giả từ quốc gia khác cơng bố tình hình mắc hội chứng Down quốc gia Năm 2016 Fayra Belmokhtar cộng tổng hợp số kết nghiên cứu chínhvề tỷ lệ dạng bất thƣờng NST khác liên quan đến hội chứng Down(Bảng 1.5) Bảng 1.5 Một số nghiên cứu hội chứng Down quốc gia giới [15] Nƣớc Tổng số Angeria[13] 22 Ai Cập [21] 712 Ma Rốc[37] 852 Tunisia[18] 500 Libya[80] 150 Oman[8] 680 UAE[59] 141 Kuwait[9] 1024 Jordan[12] 80 Thổ Nhĩ Kỳ 1103 Số Số lƣợng Số lƣợng Số lƣợng lƣợngDown Down chuyển Down thể Down khác (%) đoạn (%) khảm (%) (%) 20 1 (91,0) (4.5) (4.5) 684 22 (96,1) (3,1) (0,8) 820 27 (96,2) (3,1) (0,6) 456 20 24 (91,2) (4,0) (4,8) 144 1 (96,0) (2,67) (0,67) (0,67) 640 20 19 (94,1) (2,94) (2,79) (0,15) 138 1 (97,9) (0,7) (0,7) (0,7) 985 24 (96,2) (2,3) (0,9) (0,6) 74 (92,5) (2,5) (3,8) (1,3) 1020 28 28 78 27 Tổng Nƣớc số [20] Trung Quốc[83] 247818 Ấn Độ [81] 2410 Ấn Độ [52] 1572 Anh xứ Wales [60] Đan Mạch [85] 5737 987 Brazil[77] 644 Mexico[24] 510 Australia[73] 635 Số Số lƣợng Số lƣợng Số lƣợng lƣợngDown Down chuyển Down thể Down khác (%) đoạn (%) khảm (%) (%) (92,5) (2,5) (2,5) (2,4) 6799 323 103 11 (95,32) (4,53) (1,44) (0,15) 2207 98 98 (91,6) (4,1) (4,1) (0,3) 1400 111 29 32 (89,1) (7,1) (1,8) (2,0) 5411 220 66 40 (94,4) (3,8) (1,2) (0,7) 932 29 26 (94,4) (2,9) (2,6) 598 26 20 (92,9) (4,0) (3,1) 445 15 43 (87,3) (18,1) (8,4) (1,4) 596 26 13 (93,9) (4,1) (2,0) Một nghiên cứu nghiên Zhao W cộng 247818 bệnh nhân Trung Quốc, phát 7133 trƣờng hợp có NST tam nhiễm 21 Ngoài dạng Down hay gặp, tác giả bắt gặp 11 ca mắc hội chứng Down kèm với thay đổi NST khác nhƣ Bảng 1.6[83] Bảng 1.6 Các kiểu thể ba nhiễm 21 kết hợp bất thường khác [83] Kiểu gen Số lƣợng Tỷ lệ % 47,XY,der(21;21)(q10;q10),+mar 0,01 48,XX,+21,+mar 0,01 48,XXX,+21 0,01 28 48,XXY,+21 0,06 48,XYY,+21 0,03 48,XX,+21,+mar/47,XX,+21 0,01 48,XYY,+21/47,XY,+21 0,01 Tổng 11 1.6.2 Tình hình nghiên cứu hội chứng Down Việt Nam Trong năm gần đây, Việt Nam nhà di truyền học lâm sàng có báo cáo nghiên cứu mặt dịch tễ học, đặc điểm lâm sàng di truyền học trẻ mắc hội chứng Down, nhƣ bƣớc đầu tìm hiểu nguyên nhân nguy sinh bị bệnh Down[7] Từ năm 1972 đến 1976 số tác giả Đặng Phƣơng Kiệt, Bùi Đức Phong, Bạch Quốc Tuyên) nghiên cứu thấy tần số mắc hội chứng Down 0,015% đến 0,24%.Nguyễn Thị Phƣợng cộng (1990-1993) phân tích 100 bệnh nhân cho thấy 88% thể tam nhiễm 21 thuần, 5,9% thể chuyển đoạn 5,9% thể khảm [3] Năm 1999 Tạ Anh Tuấn nghiên cứu phân tích NST 113 bệnh nhân phát thấy: 89,4 % thể tam nhiễm thuần, 4,2% thể chuyển đoạn, 6,4% thể khảm.Tuổi mẹ 35 tuổi mang thai chiếm tỷ lệ 27,3%[6].Năm 2001 Nguyễn Thúy Hồng nhận xét tuổi mẹ 35 nguy sinh bị Down tăng lên lần tuổi mẹ 40 nguy sinh bị Down tăng lên lần[4].Năm 2003 Nguyễn Văn Rực đề tài “Nghiên cứu đặc điểm karyotype , kiểu hình trẻ down karyotype bố mẹ” 105 trẻ nghi ngờ mắc hội chứng Down, tác giả phát 100 trẻ có biểu rối loạn NST chiếm tỷ lệ 95,2% Tỷ lệ dạng Down tìm thấy 91% thuần, 6% thểkhảm 3% chuyển đoạn Tỷ lệvề giới nam 67%, nữ 33% [5] Năm 2003 Bùi Võ Minh Hoàng- Đại học Y Dƣợc thành phố Hồ Chí Minh lần ứng dụng Việt Nam kỹ thuật FISH việc xác định bất thƣờng NST trƣớc sinh[1].Năm 2004 Hoàng Thu Lan ứng dụng kỹ thuật FISH chẩn đoán trƣớc sinh hội chứng Down[2] 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Võ Minh Hoàng (2003), Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật lai chỗ huỳnh quang (FISH) để phát nhanh số bất thường nhiễm sắc thể chẩn đoán trước sinh, Luận văn thạc sỹ Y học, Đại học Y dƣợc Thành phố Hồ Chí Minh, Thành phố Hồ Chí Minh Hồng Thu Lan (2004), Hồn chỉnh kỹ thuật lai chỗ huỳnh quang bước dầu ứng dụng chẩn đoán trước sinh hội chứng Down, Luận văn thạc sỹ Y học Đại học Y Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Thị Phƣợng and Lê Minh Hƣơng (1996), "Tìm hiểu nguyên nhân 100 trƣờng hợp bệnh nhân mắc hội chứng Down BVBMTSS từ 1990-1993’", Di truyền học ứng dụng 4, 27-31 Nguyễn Thúy Hồng (2001), Tìm hiểu yếu tố nguy sinh bị hội chứng Down, Luận văn tốt nghiệp bác sỹ, Đại học Y Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Văn Rực (2003), Nghiên cứu đặc điểm karyotype, kiểu hình trẻ Down karyotype bố mẹ, Luận án Tiến sĩ Y học Đại học Y Hà Nội, Hà Nội Tạ Anh Tuấn (1999), Góp phần nghiên cứu chẩn đốn tìm hiểu ngun nhân hội chứng Down trẻ em, Luận án Thạc sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội, Hà Nội Trần Đức Phấn (2015), Hội chứng Down : sàng lọc, chẩn đoán trước sinh tư vấn di truyền, Báo cáo hội thảo quốc tế sử dụng acid folic biện pháp phòng ngừa dị tật bẩm sinh Đại học Y Hà Nội, Hà Nội Al Harasi S M (2010), Down Syndrome in Oman: Etiology, Prevalence and Potential Risk Factors A Cytogenetic, Molecular Genetic and Epidemiological Study, Thesis PhD , Charité University Hospital , Berlin, Germany Al-Awadi S A., Farag T I., Teebi A S., Naguib K K., El-Khalifa M Y and Marafie M J (1991), "Cytogenetic profile of Down syndrome in Kuwait: A decade of experience", The Journal Of The Egyptian Public Health Association 16(suppl), 259–269 10 Alberts B., Bray D., Lewis J., Raff M., Roberts K and Watson J D (1992), Biologie Moleculaire de la cellule 2nd Edition., Flammarion MedecineSciences, 11 Alfarawati S., Fragouli E., Colls P and Wells D (2012), "Embryos of robertsonian translocation carriers exhibit a mitotic interchromosomal effect that enhances genetic instability during early development", PloS Genet 8, 18 54 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Amayreh W., Al Qa’qa’ K., Al Hawamdeh A and Khashashneh I (2012), "Clinical and Cytogenetic Pro le of Down Syndrome at King Hussein Medical Centre", Journal of the Royal Medical Services 19, 14-18 Amoura M (2012), "80.000 children with Down syndrome, in Algeria", Santé‑Mag 4, 16 Antonarakis S E., Lyle R., Dermitzakis E T., Reymond A and Deutsch S (2004), "Chromosome 21 and down syndrome: from genomics to pathophysiology", Nat Rev Genet 5, 725-738 Belmokhtar F., Belmokhtar R and Kerfouf A (2016), "Cytogenetic Study of Down Syndrome In Algeria: Report and Review", Genetic Syndromes & Gene Therapy 7(1), 1-6 Carothers A D., Hecht C A and Hook E B (1999), "International variation in reported livebirth prevalence rates of Down syndrome, adjusted for maternal age", J Med Genet 36, 386-393 Casperson L , Zech E , Modest J., Foley G E., Wagh U and Simonson E (1969), "DNA binding fluorochromes for the study of the organization of the metaphase nucleus", Exp Cell Res 58, 141-152 Chaabouni H., Smaoui N., Maazoul F., Ben Jemaa L and M'Rad R (1999), "Epidemiologic and genetic study of trisomy 21 in Tunisia", La Tunisie Médicale 77(8-9), 407-414 De-Michelena M I (1993), "Paternal age as a risk factor Down syndrome", Am.J.Med Genet 45(6), 679-682 Demirhan O., Tanrıverdi N., Suleymanova D and Cetinel N (2015), "Cytogenetic profiles of 1213 children with Down syndrome in South Region of Turkey", J Mol Genet Med 9, 157-160 El‑Gilany A H., Yahia S., Shoker M and El‑Dahtory F (2011), "Cytogenetic and comorbidity profile of Down syndrome in Mansoura University Children’s Hospital, Egypt", Indian J Hum Genet 17, 157-163 Ford C E., Jones K W., Polani P E., De Almeida J C and Briggs J H (1959), "A sex-chromosome anomaly in a case of gonadal dysgenesis (Turner’s syndrome)", Lancet 1, 711-713 Gardner R., Sutherland G and Shaffer L (2012), Chromosome Abnormalities and genetic Counseling, Fourth edition, Oxford, New York Garduño‑Zarazúa L M., Giammatteo Alois L , Kofman‑Epstein S and Cervantes Peredo A B (2013), "Prevalence of mosaicism for trisomy 21 and cytogenetic variant analysis in patients with clinical diagnosis of Down syndrome: A 24‑year review (1986‑2010) at the Servicio de Genética, Hospital General de México “Dr Eduardo Liceaga”", Bol Med Hosp Infant Mex 70, 29-34 Gartler S M (2006), "The chromosome number in humans: a brief history", Nature Review 7, 655-660 German J (1998), "Cytogenetics aspects of human disease in the Harrison’s principles of internal medicine 14 ed.", 395-403 55 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 Hirchhorn K (1973), "Chromosome identification", Annual review of medicine 24, 67-74 Hirschhorn K (1993), "Chromosome identification", Annual review of medicine, 24, 67-74 Hook E B and Cross D K (1985), "Cigarette smoking and Down syndrome", Am J Hum Genet 37, 1216-1224 Hook E B (1995), "Paternal age and Down syndrome in Brish Columbia", Epidemiology 6, 640-641 Hook E B., Cross P K and Mutton D E (1999), "Female predominance (low sex ratio) in 47,+21 mosaics", Am J Med Genet A 84, 316-319 Huang T., Watt H C and Wald N J (1997), "The effect of difference in the distribution of maternal age in England and Wales on the performance of prenatal screening for Down’s syndrome", Prenat.Diagn 17(7), 615-621 Hulten M A., Jonasson J., Nordgren A and Iwarsson E (2010), "Germinal and Somatic Trisomy 21 Mosaicism: How Common is it, What are the Implications for Individual Carriers and How Does it Come About? ", CurrGenomics 11, 409-419 Jackson-Cook C (2011), "Constitutional and acquired autosomal aneuploidy", Clin Lab Med 31, 481-511 Jacobs P A and Strong J A (1959), " A case of human intersexuality having a possible XXY sex-determining mechanism", Nature 183, 302-303 Janerich D T and Bracken M B (1986), "Epidemiology of trisomy 21 : a review and theoretical analysis", J.Chronic Dis 39, 1079-1093 Jaouad I C., C Deqaqi S., Sbiti A., Natiq A., F Elkerch and Sefiani A (2010), "Cytogenetic and epidemiological profiles of Down syndrome in a Moroccan population: a report of 852 cases", Singapore Medicine Journal 51(2), 133-136 Jeffrey A.K (1997), "Chorionic villus sampling", Prenatal diagnosis & reproductive genetics Mosby, 145-150 Jyothy A., Rao G N., Kuman K S., Rao V B., Uma Devi B and Reddy P P (2002), "Translocation Down syndrome", Indian J Med Sci 56(5), 225229 Kaplan J C and Delpech M (1989), Biologie moleculaire et medecine, Flammarion Medecine- Sciences, Kline S J., Stein Z., Susser M and Warburton M (1980), "Environmental influences on early reproductive loss in a current New York city study", Human embryonic and fetal death.New York Academic Press, 83-109 Korenberg J D., Erickson J D and Corder J F (1990), "Congenital malformations and intrauterine growth retardation: Apopulation study", Pediatries 82(1), 83-90 Korenberg J R (1900), "Molecular definition of a region of chromosome 21 that cause feature of the chromosome phenotyp", Am.J Hum Genet 47, 236246 56 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 Lakshminarayana P (1990), "Translocation Down’s syndrome", Indian J Pediatr 57(2), 265-271 Lejeune J., Gautier M and Turpin R (1959), "Etude des chromosomes somatiques de neuf enfant mongoliens", Compt Rend 248, 1721–1722 Lenman O and Forssman H (1960), "Klinefeter’s syndrome and Mongolism in the same person", Acta Paediantriaen 49, 536-539 Levine H (1971), "Group(21,22) chrommosome anomalies", Clinical cytogenetics, 369-434 Liang C , David Y Z and John N E (2013), Molecular Genetic Pathology, 2nd edtion Chapter 2: Clinical Cytogenetics: Principles, Springer, United States of America Lim H J (2002), "Amniotic fluid interphase fluorescence in situ hybridization (FISH) for ditection of aneuploidy; Experiences in 130 prenatal cases", J Korean Med.Sci 17, 89-92 Loane M., Morris J K., Addor M C., Arriola L., Budd J., Doray B , Garne E., Gatt M., Haeusler M., Khoshnood B., Klungsøyr Melve K., LatosBielenska A., McDonnell B., Mullaney C., O'Mahony M., QueisserWahrendorf A., Rankin J., Rissmann A., Rounding C., Salvador J., Tucker D., Wellesley D., Yevtushok L and Dolk H (2013), "Twenty-year trends in the prevalence of Down syndrome and other trisomies in Europe: impact of maternal age and prenatal screening", Eur J Hum Genet 21, 27-33 Mai C T., Kucik J E., Isenburg J., Feldkamp M L., Marengo L K., Bugenske E M., Phoebe G T., Jodi M J., Adolfo C., Russel R., Alverson C J and Russell S K (2013), "Selected birth defects data from populationbased birth defects surveillance programs in the United States, 2006 to 2010: featuring trisomy conditions", Birth Defects Res A Clin Mol Teratol 97, 709715 Mandava S., Koppaka N., Bhatia V and Das B R (2010), "Cytogenetic analysis of 1572 cases of Down syndrome: a report of double aneuploidy and novel findings 47,XY, t(14;21)(q13;q22.3)mat,+21 and 45,XX,t(14;21) in an Indian population", Genet Test Mol Biomarkers 14, 499-504 Mayreh W., Al Qa’qa’ K., Al Hawamdeh A and Khashashneh I (2012), "Clinical and cytogenetic profile of Down syndrome at King Hussein Medical Centre", J R Med Ser 19, 14-18 McIntosh G C., Olshan A F and Baird P A (1995), "Paternal age and the risk of birth defects in offspring", Epidemiology 6, 283-288 Micki L.C (1997), "Amniocentesis", Prenatal diagnosis & reproductive genetics, Mosby Mosby, 136-144 Mikkelsen M (1972), "The effect of maternal age on the incidence of Down’s syndrome", Humangenetik 16, 141-146 Morris J K., Alberman E., Mutton D and Jacobs P (2012), "Cytogenetic and epidemiological findings in Down syndrome: England and Wales 1989– 2009", Am J Med Genet A 158A, 1151–1157 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 Munsi A S., Hussain M., Rima R., Biswas R., Mahmud S and Sayeed A (2014), "Pattern of congenital heart diseases among clinically diagnosed Down’s syndrome children", North Int Med Coll J 6, 18-20 Murthy S K., Malhotra A K., Mani S., Shara M E., Al-Rowaished E E., Naveed S., Alkhayat A I and Alali M T (2007), "Incidence of Down syndrome in Dubai, UAE", Med Princ Pract 16, 25-28 Mutton D., Alberman E and Hook E B (1996), "Cytogenetic and epidemiological findings in Down syndrome, England and Wales 1989 to 1993 National Down Syndrome Cytogenetic Register and the Association of Clinical Cytogeneticists", Journal of Medical Genetics 33, 387-394 Nazer J., Hubner M E., Cifuentes L., Ramirez R., Catalan J and Ruiz G (1991), "Increase of Down syndrome and its possible relation with increased maternal age", Rev Med Chil 119(4), 465-471 Niebuhr E (1974), "Down’s syndrome: the possibility of a pathogenetics segment on chromosome", Humangenetik 21, O'Connor C (2008), "Trisomy 21 Causes Down Syndrome", Nature Education 1(1), 42 O'Nuallain S., Flanagan O., Raffat I., Avalos G and Dineen B (2007), "The prevalence of Down syndrome in County Galway", Ir Med J 100, 329-331 Organization World Health (2016), Genes and chromosomal diseases, World Health Organization, United States of America Papavassiliou P., Charalsawadi C., Rafferty K and Jackson-Cook C (2015), "Mosaicism for trisomy 21: a review", Am J Med Genet A 167A, 2639 Patterson D (1994), "La trisomie 21", La genetique humanie Edition Francaices Sientific American, Polani P.E Briggs J.H., Ford C.E., Clarke C.M., Berg J.M (1960), "A Mongol child with 46 chromosomes", The Lancet 1, 721 Seabringt M (1971), "A rapid banding technique for human chromosomes", The Lancet 2, 971 Shaffer L G., Slovak M L and Campbell L J (2009), An International system for Human Cytogenetic Nomenclature, Karger, Basel, Thụy Sĩ Sotonica M., Mackic-Djurovic M., Hasic S., Kiseljakovic E., Jadric R and Slavka I (2016), "Association of Parental Age and the Type of Down Syndrome on the Territory of Bosnia and Herzegovina", Medical Archives 70(2), Spathas D H (1994), "Prenatal detection of trisomy 21 in uncultured amniocytes by fluorescence in situ hybridization: a prospective study", Prenatal Diagn 14(11), 49-54 Staples A J., Sutherland G R., Haan E A and Clisby S (1991), "Epidemiology of Down syndrome in South Australia, 1960-89", The American Journal of Human Genetics 49, 1014-1024 58 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 Stene T (1970), "Detection of higher recurrence risk for age dependent chromosome abnormalities with an application to trisomy G (Down’s syndrome)", Hum.Hered 20, 112-122 Suzanne B C., David A and Whiteman H (1992), "Birth effect and genetic disorders", Pediatrics Ed 2nd, 161-165 Tjio J H and Levan A (1956), "The chromosome number of man", Hereditas 42, 1-6 Trevisan P., Moraes F N , Mattos V F., Graziadio C , Rosa R F and Paskulin G A (2014), "Cytogenetic profile of patients with Down syndrome in southern Brazil", Sao Paulo Med J 132, 253-254 Turnpenny P D and Ellard S (2005), Emery's Elements of Medical Genetics, 12th edition, Elservier Churchill Livingstone, New York Valdehi J., Kalol K R and Kiran K (2002), "Prenatal dectection of aneuploidies using fluorescence in situ hybridization: a Preliminary experience in an Indian set up", J Biosci 27(2), 155-163 Verma I C., Mathews A R., Faquih A., el-Zouki A A., Malik G R and Mohammed F (1990), "Cytogenetic analysis of Down syndrome in Libya", Indian Journal of Pediatrics 57(2), 245-248 Verma I C., Mathew S., Elango R and Shukla A (1991), "Cytogenetic studies in Down syndrome", Indian Pediatrics 28, 991-996 Verma R S (1989), "Human chromosome- Manual of basis techniques", Pergamon Press, 152-159 Zhao W., Chen F., Wu M., Jiang S., Wu B., Luo H., Wen J., Hu C and Yu S (2015), "Postnatal Identification of Trisomy 21: An Overview of 7,133 Postnatal Trisomy 21Cases Identified in a Diagnostic Reference Laboratory in China", PLoS ONE 10(7), 109-115 Zhao W W., Wu M., Chen F., Jiang S., Su H., Liang J., Deng C., Hu C and Yu S (2015), "Robertsonian Translocations: An Overview of 872 Robertsonian Translocations Identified in a Diagnostic Laboratory in China", PloS ONE 10(5), 102-108 Zhu J L., Hasle H., Correa A., Schendel D., Friedman J M., Olsen J and Rasmussen S A (2013), "Survival among people with Down syndrome: a nationwide population-based study in Denmark", Genet Med 15, 64-69 59